人γ干扰索的纯化及理化性质的研究

用美洲商陆(PWM)或中国商陆在人脾脏淋巴细胞中诱生γ干扰素(IFN-γ)。PWM诱生的IFN-γ经用可控孔径玻璃(CPG)珠吸附后,以含乙二醇的PBS洗脱进行部分纯化,比活性可达10~6RU/mg蛋白。采用国产微孔玻璃(MPG)代替CPG纯化IFN-γ得到相似的纯化效果。回收的CPG和MPG均可再生重复使用。玻璃珠纯化的样品经过抗小牛血清抗体一Sepharose4B(ACS)柱层析进一步纯化至比活性10~7RU/mg蛋白,回收率为78％。PWM或中国商陆诱生的IFN抗病毒活性经pH 2.0或56℃加热处理后几乎全被破坏并可被抗HuIFN-γ的单克隆抗体中和,确证是HuIFN-γ。用Bio-Gel P-200层析法测得PWM诱生的HuIFN-γ分子量主峰在40000～45700范围,小峰在25700左右。中国商陆诱生的HuIFN-γ分子量在45700～49000范围。     

P物质对刀豆素A和美洲商陆诱导小鼠脾细胞产生γ干扰素的调节作用

本实验研究了不同浓度(10~(-11) ～10~(-5) mol/L)P物质(SP)在体外对刀豆素A(ConA)和美洲商陆(PWM)诱导小鼠脾细胞产生γ干扰素(IFN-γ)的影响。结果显示,10~(-11)～10~(-6)mol/L SP对10μg/mlPwM诱生IFN-γ没有影响。用5、2.5及1.25μg/ml ConA或PWM诱生时,10~(-9) ～10~(-5) mol/L SP可增高IFN-γ效价,10~(-7) ～10~(-5)mol/L SP作用更明显。单独加SP而不加诱生剂,未检测到IFN-γ.先加入10~(-9) ～10~(-6) mol/L SP 6h后,再加ConA诱生的IFN-γ效价,略高于同时加入10~(-9) ～10~(-6)mol/L SP时ConA诱生的IFN-γ效价。先加入10~(-5)mol/L SP,IFN-γ效价并不比同时加10~(-5) mol/L SP时增高,反而有降低的趋势.在先加入SP时,10~(-8)mol/L SP即表现出明显的增高IFN-γ效价的作用,而同时加SP,则在10~(-7)mol/L才有明显作用。     

直序商陆炮制品毒性成分测定

目的：探讨炮制对直序商陆毒性成分的影响。方法：采用薄层扫描法测定直序商陆不同炮制饮片中商陆毒素的含量。结果：清蒸品、醋煮品及醋品中商陆毒素的含量仅分别为原药材的１６．;７３％、２１．８８％及４５．８５％。结论：清蒸法和醋煮法为直序商陆炮制的最佳工艺。     

醋商陆饮片的炮制工艺研究

目的 确定醋商陆饮片的最佳炮制工艺。方法 选择炒制温度、炒制时间和加醋量3个因素,采用L₉（3⁴）正交试验设计,以RP-HPLC法测定炮制品中活性成分商陆皂苷甲的量,以小鼠胃肠道试验评价刺激性毒性,通过多指标综合评分法优选醋商陆的炮制工艺。结果 优选出的醋商陆炮制工艺为：加入30%醋拌匀,闷润至醋被吸尽,于120 ℃炒制30 min。结论 优选出的醋商陆炮制工艺稳定可行,重现性好。     

抗病毒免疫核糖核酸诱生γ—干扰素的实验研究

本文在小鼠模型系统中,通过实验证明,抗病毒免疫核糖核酸可以诱生γ-干扰素,并对诱生条件进行研究。     

人参多糖及其皂甙等5种中药提取物促诱生人干扰素的研究

用１００ｍｇ／Ｌ人参多糖，人参皂甙，羧甲基茯苓多糖，云芝糖肽及１０ｍｇ／Ｌ刺五加多糖对人淋巴细胞在ＮＤＶ或ＰＨＡ刺激下所产生的ＩＦＮ－α或ＩＦＮ－γ的效价均比常规诱生组同５～７倍，是理想的干扰素促诱生剂，为上述中药的抗感染，抗肿瘤和免疫调节药交机理从分子水平上提供了实验依据。     

美洲商陆抗病毒蛋白对人神经胶质瘤细胞U251细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察美洲商陆抗病毒蛋白(PAP)对入神经胶质瘤细胞U251细胞增殖和凋亡的影响.方法:采用MTT法检测0、20、40、60、80和100 mg/L PAP处理48 h以及40 mg/L PAP处理24、36、48和72 h对神经胶质瘤细胞U251细胞生长的影响;40 mg/L PAP处理U251细胞36 h后,采...     

免疫核糖核酸诱生γ-干扰素及γ-干扰素激活NK细胞的研究

用L_(929)细胞免疫家兔,用肝脾RNA,致敏BALB/C小鼠。其腹腔渗出细胞(PEC)在体外与特异抗原孵育后能产生γ-干扰素。γ-干扰素处理大颗粒淋巴细胞(LGL)能显著增强其NK细胞活性。本文还对免疫核糖核酸诱生γ-干扰素以及γ-干扰素激活NK细胞的动态进行了探讨。     

人扁桃体淋巴细胞诱生免疫干扰素的效用

手术切除的正常儿童扁桃体,经抗生素杀菌后,制成1×10~7分散的细胞悬液,不加或加1～2种诱生剂,单独或混合培养2～3日后,用细胞病变抑制法检测上清液中的干扰素效价及干扰素类型。结果证明人扁桃体细胞单独培养不加任何诱生剂,可自发产生IFN-γ。加中国商陆皂甙(ES)或其单体及美州商陆(PWM)皆可诱生出IFN-γ,后者比前者效价高。以PWM及莨菪硷联合诱生者与单以PWM诱生者效价无差别,但以PWM加短小棒状杆菌(C。P)疫苗或以PWM加刀豆素A(Con-A)诱生者反比单独以PWM诱生者效价低。人扁桃体混合淋巴细胞培养,加或不加中国商陆皂甙或PWM均可诱生IFN-γ,但加PWM诱生的效价略高。文内讨论了上列各法诱生IFN-γ效价差异的可能原因。     

82例中老年人α干扰素诱生能力的观察

检测82例中老年人的α干扰素诱生能力,并以26例44岁以下的健康者为对照,其中5例并检测了血浆中的干扰素效价。结果:血浆中无论中老年人或对照者均未检出干扰素效价。45岁以上的中老年人干扰素诱生能力明显减低,可能为易患肿瘤及感染症的基础。肿瘤或(及)化疗病人以及严重感染的病人,干扰素诱生能力减低最明显,此时应用干扰素或其他增加干扰素诱生能力药物,可能有益。     

肝癌患者用生物免疫制剂后单核细胞及枯否细胞体外抗人肝癌细胞效应

15例肝癌患者施行外科治疗,12例兼用卡介苗、混合菌苗及干扰素,3例不用免疫治疗为对照。分离患者血单核细胞(MC)与淋巴细胞(LC)及肝枯否细胞(KC),以人肝癌细胞株为靶细胞(TC)。结果:①首次用免疫制剂7d后,MC对TC抑增殖作用及杀伤作用明显高于用药前,3次用药后MC抑TC效应提高至84％,对照组的仍为45％;②首次用药后7d,KC对TC的抑增殖率和杀伤率分别较对照组高0.5倍和1倍;③用免疫制剂后,血T细胞总数及Th数持续升高,T_s则显著下降。研究表明三联免疫制剂可有效地增强患者抗肝癌细胞的免疫功能。     

伯氏疟原虫免疫抑制因子对小鼠T淋巴细胞的作用

观察了伯氏疟原虫的免疫抑制因子对小鼠Ｔ淋巴细胞亚群的作用。结果，注射免疫抑制因子小鼠牌细胞中的ＣＤ４Ｔ细胞阳性百分数明显下降，ＣＤ６Ｔ细胞则明显升高，ＣＤ４／ＣＤ８Ｔ细胞幽会显著降低；注射因子对小鼠皮肤抗ＤＮＣＢ的ＤＴＨ反应也明显下降。提示：免疫抑制在子具有诱导、激活ＣＤ８Ｔ细胞活性的功能，使其数目增多，同时造成ＣＤ４Ｔ细胞百分数相对下降，通过抑制ＤＴＨ反应耐影响细胞免疫功能。     

养血补气液诱生小鼠γ-干扰素的作用及在细胞上的抗病毒能力

通过对养血补气液对小鼠脾淋巴细胞诱生干扰素效果以及在Hela细胞和人胚肺二倍体细胞上的抗病毒作用的研究,结果表明不同浓度的药物所诱生干扰素的滴度与对照组比较,均有极显著性差异(P<0.01);不同浓度的药物在Hela细胞、人胚肺二倍体细胞上的抗病毒能力与对照组比较,均有显著性差异(P<0.01)。     

酵母多糖对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响

目的研究酵母多糖对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响,为研发酵母多糖相关产品提供实验依据。方法通过环磷腺苷制造免疫功能低下的小鼠模型,给予酵母多糖11d后观察小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数、血清溶血素滴度和迟发型变态反应强度变化。结果酵母多糖组小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数、血清溶血素滴度和迟发型变态反应强度均较模型对照组显著提高,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论酵母多糖可以显著提高小鼠的免疫功能,可作为提高免疫力的添加剂应用于日常的生活生产中。     

免疫制剂对肝癌患者枯否细胞和单核细胞体外抑制肝癌细胞增殖的影响

取8例人肝癌标本,经分离和培养后获得大量高纯度的枯否细胞(KC)和未贴壁的非肝细胞(NNPCO。从13例肝癌患者血中分离出单核细胞(MC)。以卡介苗(BCG)、短小棒状杆菌(CP)、混合菌苗(MBv)、千扰素(IFN)单用或、2～3种合用,分别处理以上3种效应细胞后,体外检测其对人肝癌细胞SMMC-7721增殖抑制作用的影响。结果显示:①肝癌患者的KC、NNPC和MC对肝癌细胞的增殖仍有明显抑制作用,三者的作用效果相近;②单用免疫制剂中,以BCG提高3种效应细胞的抑瘤作用最明显;③免疫制剂配伍应用较单用效果好,尤以IFN MBV BCG作用最强,分别使MC和KG的抑瘤效应提高了125％和101％。本实验为肝癌患者选用免疫制剂提供了依据。     

免疫制剂对肝癌大鼠单核巨噬细胞抑人肝癌细胞增殖作用的影响

以ＥＤＮ诱发大鼠实验性肝癌，同时连续１２周分别腹腔注射干扰素α－２ｂ，卡介苗，济南假单胞菌苗和ＩＦＮ和ＢＣＧ二者联用，对照组给予生理盐水。在诱癌过程第８，１２，１６周从同只大鼠体内分离出高纯度的腹腔巨噬细胞，血单核细胞，肺巨噬细胞和脾巨噬细胞，并分别与人肝癌细胞联合培养，采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定免疫制剂在４种效应细胞抑人肝癌细胞增殖作用的影响。     

黄芪桂枝五物汤中总皂苷对小鼠部分免疫功能的影响

目的：探讨黄芪桂枝五物汤中总皂苷对机体免疫功能的影响,从而为相关产品开发和临床应用提供实验依据。方法取40只小鼠,随机分为皂苷组1（低剂量）,皂苷组2（中等剂量）和皂苷组3（高剂量）以及正常对照组,每组10只 。 总皂苷组每天灌服0．2ml 浓度为5,10,20mg／ml 的总皂苷溶液,正常对照组每天灌服0．2ml 生理盐水,10d 后处死,取样测定小鼠各项免疫指标。①检测小鼠巨噬细胞吞噬功能;②小鼠后足迟发型超敏反应强度;③血凝法测定小鼠血清中溶血素含量;④对脾脏和胸腺称重计算脾脏指数和胸腺指数。结果皂苷各组小鼠巨噬细胞吞噬率和吞噬指数明显低于对照组（P ＜0．01）;皂苷各组小鼠左右后足重量差与对照组小鼠相比,有明显降低（P＜0．01）;皂苷各组小鼠抗体积数低于对照组（P＜0．05）;皂苷各组小鼠脾脏指数和胸腺指数均较对照组小鼠有明显降低（P＜0．01）。结论黄芪桂枝五物汤中总皂苷可以显著降低机体的部分固有免疫功能、细胞免疫功能和体液免疫功能。     

免疫制剂对大鼠肝枯否细胞数量和面积的影响

给大鼠以干扰素（ＩＦＮ－Ａ），卡介苗（ＢＣＧ）或两者联用，以墨汁吞噬实验和溶菌酶免疫组织化学法显示肝枯否细胞（ＫＣ），以图象分析系统测定ＫＣ的数量和面积；同时进行外周血非特异性酸性酯酶（ＡＮＡＥ）阳性淋巴细胞计数。结果显示：ＩＦＮ－Ａ、ＢＣＧ或两者联用后，使溶菌酶阳性和吞噬墨汁的ＫＣ数增多，尤以肝小叶周边带为显著；ＫＣ面积明显增大；外周血ＡＮＡＥ阳性淋巴细胞增多，尤以“弥散型”淋巴细胞增多较显著。上述作用中ＢＣＧ较ＩＦＮＡ明显，尤以两者联用的效果最强。是免疫制剂增强ＫＣ抗肝癌细胞作用有关的细胞学机制。