拉曼光谱技术在鉴别瑞氏-姬姆萨染色的肿瘤细胞与正常细胞中的应用

为探究利用显微共聚焦拉曼光谱仪辨别经瑞氏-姬姆萨染色后的肿瘤细胞与正常细胞的可行性。应用拉曼光谱技术在532 nm波长激光下分别检测经瑞氏-姬姆萨染色技术染色的肿瘤细胞与正常细胞,对比6种肿瘤细胞、正常细胞和瑞氏-姬姆萨染料的拉曼光谱特征峰值,正常细胞和肿瘤细胞在208～215 cm~(-1)、278～285 cm~(-1)、336～341 cm~(-1)峰位均有拉曼特征峰。发现6种肿瘤细胞的拉曼光谱峰值和瑞氏-姬姆萨染料的拉曼信号峰值均相同。经分析认为,检测到的均为各种染料的拉曼信号而非6种肿瘤细胞的拉曼信号。因此,无法用显微共聚焦拉曼光谱仪区分经瑞氏-姬姆萨染色后的肿瘤细胞与正常细胞。     

精子DNA微波Feulgen染色及意义

目的，提高精子染色质量，增强染色效果。方法：参考Ｆｅｕｌｇｅｎ染色方法，采用ＹＷＹ７８１型医用微波仪。结论：精液涂片染色后精子形态清晰，核染成紫红色，尾染成淡绿色，精子正面呈卵圆形，侧面呈锥体形，核染色强度由前向后渐增，其它细胞清晰可见。结果：通过其高频率的电磁波，在其热效应、化学效应和生物效应作用下，使染色时间明显缩短，方法简便快速，且能获得良好的染色结果，与传统Ｗｒｉｇｈｔ染色法比较，染色更加清晰，结果突出，能使精子、白细胞及生精细胞一并染色一并观察     

骨髓活检塑料半薄切片的染色

半薄切片的操作过程及方法简单 ,尤其适用于骨髓活体检查 ,切片中的各系统细胞形态接近于涂片形态。因ＨＥ染色不能完全显示骨髓中的一些特殊成分 ,故导致分辨率不够理想。作者针对这一问题建立一种适用于作骨髓半薄切片的染色方法。1　配制方法1 1　染色液的配制　 (1)苏木精、姬姆萨　根据Ｈａｒｒｉｓ苏木精和Ｇｉｅｍｓａ染液的配制方法。 (2 )酸性品红溶液　 1 2 %浓度。1 2　染色方法及步骤　 (1)将骨髓塑料半薄切片 (2 μｍ)附贴于载玻片上在加热板上使充分干燥。 (2 )Ｈａｒｒｉｓ苏木精染色 5ｍｉｎ ,自来水或蒸馏水冲洗。 (3)Ｇｉ…     

动物成骨细胞骨髓培养法的建立和鉴定

为评价改进的成骨细胞骨髓培养法,我们采用密度梯度离心新西兰大白鼠(SD)股骨骨髓中的单个核细胞,分散在含30%马血清的RPMI1640培养液中,按5×105/cm3细胞数量接种于96孔培养板内,置于含5%CO2、37℃饱和湿度培养箱中培养,每3d换培养液1次.细胞鉴定方法用活细胞形态学观察、瑞氏-姬姆萨染色和碱性磷酸酶(ALP)染色,为避免ALP的假阳性率,在破坏细胞内ALP后又作对照染色.结果显示从第5d开始,在倒置显微镜下可见培养细胞从原来的圆形逐渐变成多角形、梭形或鳞形,瑞氏-姬姆萨染色显示成骨细胞的特征性表现,ALP染色阳性在"2+”～"3+”之间,破坏ALP后对照染色阴性.提示,含30%马血清的RPMI1640培养液在体外能把骨髓的单个核细胞培养成为成骨细胞,同时,改进后的成骨细胞骨髓培养法具有培养时间短、污染机会少、工作效率高的优点.     

术中印片快速病理检查常用染色方法的应用比较

手术中快速病理诊断对临床手术方案的制定起重要的指导作用.细胞印片技术具有简单、快速的优点,可辅助甚至部分代替冷冻切片诊断,起到提高准确率和加快诊断速度的作用,目前已经被许多医院视为常规的术中诊断技术与冰冻切片同时进行.细胞印片染色最常用的染色方法包括HE染色、瑞-姬姆萨染色、甲苯胺蓝染色法等.染色方法的不同直接影响细胞印片的质量,并影响其在诊断中的应用价值.本文结合实际工作经验,对以上3种术中印片染色方法进行比较,并评价各种染色方法的优缺点.     

精液中生精细胞5种染色方法的探讨与评价

对脱落于精液中的生精细胞，用瑞－吉染色法可使细胞核着色清晰度好；用伊红－瑞－吉染色法能区别死亡和活的精子，并使精子顶体着色清晰；用苯胺黑－伊红－吉染色法精子核染成红色，精子鞭毛不着色；用煌绿－瑞－吉染色法，成熟精子着色浅，不成熟精子头部着紫红色；过氧化物酶－瑞－吉混合染色，中性白细胞核呈紫红色，胞浆呈浅绿色。５种染色方法中瑞－吉法对生精细胞染色效果最好，可视精液检查的不同要求选用不同方法。     

两种小鼠生精细胞染色体制备方法的探讨与评价

目的:比较改良的体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法制作小鼠生精细胞减数分裂中期染色体标本的优劣.方法:选用8～12周龄雄性Balb/c小鼠,分别采用改良的体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法进行减数分裂中期染色体制备,并用Giemsa染色.光镜下观察小鼠生精细胞减数分裂不同阶段分裂相细胞染色体形态并计数,...     

基因Cdca2敲除对小鼠精子发生和生育力无明显影响

目的 探究睾丸高表达细胞分裂周期相关蛋白2基因(Cdca2)在小鼠精子发生和生育力中的生理功能。方法 通过Q-PCR和Western blot检测Cdca2在小鼠不同组织部位的表达情况;利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和Cre-loxP介导的重组系统构建Cdca2组织特异性敲除的小鼠品系;通过苏木精-伊红(HE)染色和形态学分析了解小鼠CDCA2缺失对精子发生的各个阶段生精细胞形态的影响;通过精子全自动检测分析系统检测小鼠CDCA2缺失对精子活率及运动参数的影响;通过生育力测试实验检测CDCA2缺失对雄性小鼠生育能力的影响。结果 Cdca2是一个睾丸高表达的基因;利用CRISPR/Cas9技术和生殖系统特异性Cre的工具鼠,成功获得了Cdca2生殖细胞特异性敲除的小鼠;小鼠CDCA2缺失对精子发生中各阶段生精细胞、精子运动参数及雄性生育能力的影响改变无统计学意义。结论 基因Cdca2对于小鼠精子发生和雄性生育力的维持可能是非必需的。     

对比研究不同种抗生素对小鼠生精细胞的影响

目的为了对比研究不同种抗生素对小鼠生精细胞数量、活性和凋亡率的影响。方法用林可霉素(4.989 m L/kg)、阿莫西林(62.5 mg/kg)、头孢克肟(4740.8 mg/kg)、氧氟沙星(1175.55 mg/kg)4种不同种抗生素,作用于60日龄小鼠,取睾丸做石蜡切片、HE染色;用血球计数板细胞计数法进行精子数量计算,用TUNEL法检测细胞凋亡的变化,并进行统计学分析。结果阿莫西林、头孢曲松、氧氟沙星这3种抗生素对小鼠生精细胞数量、活性和凋亡率影响较对照组而言差异无显著性,而林可霉素对小鼠生精细胞数量减少、活性减低和凋亡率增加的影响较对照组差异有统计学意义(P0.05)。结论发现4种抗生素中林可霉素对小鼠生精细胞数量、活性和凋亡率有影响。     

一种利用吖啶橙染色快速鉴定重力密度梯度沉降法中生精细胞类型的方法

目的建立一种重力梯度沉降法分离粗线期精母细胞,圆形及长形精子细胞的快速精确的镜检方法。方法利用重力密度梯度沉降法分离,将收集到的每管细胞分别放入96孔板中,每孔加入一定浓度的吖啶橙染液,于荧光显微镜下观察。结果通过分析对应荧光通道下3种生精细胞的细胞核/细胞质染色结果,可快速精确的分辨出粗线期精母细胞,圆形及长形精子细胞。结论建立了一种在重力密度梯度沉降法分离生精细胞过程中快速镜检检测粗线期精母细胞,圆形及长形精子细胞的方法。