小鼠c—kit^＋Sca—1^＋和c—kit^＋Sca—1^—l细胞代表不同分化阶段…

为深入研究造血干细胞的生物功能，根据表面标志，采用流式细胞仪分离和富集了小鼠骨髓中两类不同特征的ＨＳＣ亚群ｃ－ｋｉｔ＾＋Ｓｃａ－１＾＋和ｃ－ｋｉｔ＾＋Ｓｃａ－１＾－细胞。体外集落培养表明ｃ－ｋｉｔ＾＋Ｓｃａ－＾＋细胞对ＩＬ－３ＧＭ－ＣＳＦ单独刺激无反应，而ｃ－ｋｉｔ＾＋Ｓｃａ－１＾－细胞则可形成大小不等的细胞集落。     

骨髓增生异常综合征CD34^＋细胞对不同生长因子的反应性研究

目的：更准确地研究造血生长因子对骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）造血干、祖细胞的影响及临床治疗效果。方法：利用吸附单克隆抗体的免疫磁珠分离系统分离纯化ＭＤＳ患者ＣＤ３４＋细胞，在体外半固体培养体系中，研究ＭＤＳＣＤ３４＋细胞对粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、白细胞介素３（ＩＬ－３）、红细胞生成素（Ｅｐｏ）、干细胞因子（ＳＣＦ）单独及联合应用的反应。结果：ＭＤＳＣＤ３４＋细胞在增殖分化过程中存在一定程度缺陷，单独应用生长因子不能有效地改善其缺陷，ＳＣＦ与ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－３、Ｅｐｏ等生长因子的联合应用可提高一部分患者造血祖细胞的集落形成能力，但在ＭＤＳ高危组，部分患者在正常集落形成能力改善的同时，白血病细胞集落也有不同程度的增长。结论：治疗ＭＤＳ患者须合理地联合应用造血生长因子。     

造血生长因子对脐血CD34^＋细胞的体外扩增作用

为探讨造血生长因子不同组合方式对脐血ＣＤ３４＋细胞的扩增作用、扩增细胞性能改变及合理的扩增时机，利用吸附单克隆抗体——磁珠分离系统分选出９５％～９９％纯度的脐血ＣＤ３４＋细胞，在体外液体培养体系中，经重组人干细胞因子（ｒｈＳＣＦ）、白细胞介素（ＩＬ）３、ＩＬ－６、粒－巨噬细胞集落刺激因子、粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）和红细胞生成素（Ｅｐｏ）的不同组合扩增１～３周。结果表明，脐血ＣＤ３４＋细胞具有良好的扩增效应，细胞总数、集落形成细胞（ＣＦＣｓ）和ＣＤ３４＋细胞可分别扩增５００．０±８２．５倍、９４．０±２８．６倍和２４．０±３．８倍；ＳＣＦ是扩增最重要的生长因子，ＳＣＦ＋ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋Ｇ－ＣＳＦ＋Ｅｐｏ组合的扩增效率最高；ＣＦＣｓ和ＣＤ３４＋细胞在１～２周维持在较高水平，以后即快速衰减；此外，扩增也加速了细胞的分化，至第３周时９３％ＣＦＣｓ为ＣＦＵ－ＧＭ，极少部分形成ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＥＭＭ。因此，合理组合生长因子，把握适宜扩增时机，将有助于扩增细胞在质和量上满足移植和基因治疗等的要求。     

单个CD_（34）~＋CD_（38）~＋和CD_（34）~＋CD_（38）~－

为深入探讨细胞亚群的不均一性及单个细胞的增殖分化特性，利用ＦＡＣＳＶａｎｔａｇｅ自动细胞分选系统（ＡＣＤＵ）分选出单个亚群细胞：和，在９６孔扳无血清培养体系中，经ＳＣＦ、ＩＬ－３、ＩＬ－６、ＧＭ－ＣＳＦ、Ｇ－ＣＳＦ和Ｅｐｏ．刺激，１４～１８天后扩增形成原代集落。单个细胞形成原代集落的比例为３８．Ｏ％±９．０％，集落组成细胞趋于分化成熟，再接种培养，仅８．５％±２．５％可形成次级集落，且绝大部分为粉巨噬系细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）。５４．０％±１２．Ｏ％的单个细胞可形成原代集落，组成细胞形态均一，大多为原始幼稚细胞，７５．０％±１１．０％的原代集落再接种可形成次级集落，且产率高达２８０．Ｏ±２１．５／原代集落，并可向红、粒、巨噬、巨核等系分化。表明细胞群的不均一性，其亚群显示造血祖细胞性能，而细胞的性能则接近于造血干细胞。     

人胎盘无细胞是悬液对骨髓造血干／祖细胞的体外扩增作用

为了探讨人胎盘无细胞悬液对骨髓造血干／祖细胞的体外扩增作用及与已知的几种细胞因子进行比较,用人胎盘无细胞悬液及ＩＬ－３,ＧＭ－ＣＳＦ,ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＦＰＯ作为刺激因子,并应用甲基纤维素半固体培养体 对骨髓ＧＭ－ＣＦＵ,ＧＭ－ＧＥＭＭ和ＢＦＵ－Ｅ进行了培养和比较,研究结果表明,人胎盘无细胞悬液对骨髓ＣＦＵ－ＧＭ,ＣＦＵ－ＧＥＭＭ和ＢＦＵ－Ｅ体外扩增最适蛋白浓度是２００－３００μｇ／Ｌ,人胎盘无细胞悬液作刺激因子对骨髓血干／祖细胞的体外扩增效果优于单独ＩＬ－３,单独ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＥＰＯ组。结论提示,人胎盘无细胞悬液可能含有多种细胞因子,用人胎盘无细胞悬液作扩增剂体外扩增骨髓造血干／祖细胞细胸具有有效而价廉的特点。     

G—CSF对化疗后外周血干细胞动员作用的影响

通过对１１例急性白血病患单独化疗与化疗后加用粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）的对比，动态观察了Ｇ－ＣＳＦ对外周血造血干细胞（ＰＢＳＣ）的动员作用。发现化疗后加用Ｇ－ＣＳＦ比单用化疗的粒－巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）增加５．１倍，红系式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）增加４．５倍。Ｇ－ＣＳＦ还可使ＣＦＵ＞１００／ｍｌ和ＢＦＵ－Ｅ＞２００／ｍｌ的持续时间延长；化疗后ＣＦＵ－ＧＭ的最高值提早出现，而     

脐血造血祖细胞培养及细胞周期的研究

应用造血祖细胞体外培养和流式细胞术（ＦＣＭ），观察了脐血中粒－单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）和红系爆式集落（ＢＦＵ－Ｅ）的数量和特性，并对其细胞增殖周期和成人骨髓及外周血做比较。结果显示，脐血中含丰富的ＣＦＵ－ＧＭ和ＢＦＵ－Ｅ，其数量低于骨髓而超过外周血水平；脐血ＢＦＵ－Ｅ对红细胞生成素和爆，式促进活素表现出更高的敏感性；脐血Ｓ期、Ｇ＿２＋Ｍ期及Ｓ＋Ｇ＿２Ｍ期细胞数均明显低于骨髓，虽略高于外周血各期细胞数，但差别无显著性意义。     

IL—6基因转染的骨髓基质细胞系对骨髓移植小鼠造血功能恢复？…

目的：探讨白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转染的骨髓基质细胞系ＱＸＭＳＣ１ＩＬ－６对骨髓移植后造血功能的重建作用。方法：将骨髓造血细胞和骨髓基质细胞系一起经尾静脉注射给同系小鼠，建立骨髓移植（ＢＭＴ）模型。小鼠的造血功能用脾结节（ＣＦＵ－Ｓ）、粒－单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）、红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ）测定及外周血各项血液学指标来确定。结果：ＷＸＭＳＣ１ＩＬ－６转基因骨髓基质细胞可明显增强ＢＭ     

单个CD34^＋CD38^＋和CD34^＋CD38^—l细胞的增殖与分化性能

为深入探讨ＣＤ３４＾＋细胞亚群的不均一性及单个细胞的增殖分化特性，利用ＦＡＣＳ Ｖａｎｔａｇｅ自动细胞分选系统（ＡＣＤＵ）分选出单个ＣＤ３４＾＋亚群细胞：ＣＤ３４＾＋ＣＤ３８＾＋和ＣＤ３４＾＋ＣＤ３８＾－，在９６孔板无血清培养体系中，经ＳＣＦ、ＩＬ－３、ＩＬ－６、ＧＭ－ＣＳＦ、Ｇ－ＣＳＦ和Ｅｐｏ刺激，１４－１８天后扩增形成原代集藩。单个ＣＤ３４＾＋ＣＤ３８＾＋细胞形成原代集落的比例为３８．０％±９     

脐血造血干／祖细胞集落产率的研究

对３１例脐血及３１例正常成人骨髓细胞进行体外培养，分别检测其ＣＦＵ－ＧＭ，ＢＦＵ－Ｅ，巨核细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｍｅｇ），粒、红、巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＥＭ），粒、红、巨噬、巨核细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＥＭＭ）及初始造血祖细胞——粘附于基质的原始细胞集落形成单位（ｓＣＦＵ－Ｂｌ），对比分析其造血细胞的层次结构。发现脐血晚期祖细胞含量接近骨髓，早期祖细胞含量则高于骨髓。经推算２１天时ｓＣＦＵ－Ｂｌ含量可达骨髓的１０倍左右。提示脐血长期重建造血的能力优于骨髓，一份脐血重建成人造血理论上是可能的。     

G－CSF对化疗后外周血干细胞动员作用的影响

通过对１１例急性白血病患者单独化疗与化疗后加用粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）的对比，动态观察了Ｇ－ＣＳＦ对外周血造血干细胞（ＰＢＳＣ）的动员作用。发现化疗后加用Ｇ－ＣＳＦ比单用化疗的粒－巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）增加５．１倍，红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）增加４．５倍。Ｇ－ＣＳＦ还可使ＣＦＵ－ＧＭ＞１００／ｍｌ和ＢＦＵ－Ｅ＞２００／ｍｌ的持续时间延长；化疗后ＣＦＵ－ＧＭ的最高值提早出现，而不影响ＢＦＵ－Ｅ／ＣＦＵ－ＧＭ比值。结果表明，化疗后加用Ｇ－ＣＳＦ可明显提高ＰＢＳＣ的收集效率，Ｇ－ＣＳＦ是一种有效的ＰＢＳＣ动员剂。     

脐血CD_(34)~ CD_(19)~－细胞与体外培养集落的相关性分析

用两种单克隆抗体（单抗）标记脐血造血祖细胞表面抗原（ＨＰＣＡ，ＣＤ＿（３４））用流式细胞仪分析，并比较两种单抗标记的细胞与体外培养的粒单细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ），红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）和混合集落形成单位的相关性，结果表明脐血有核细胞中，抗ＨＰＣＡ－２－ＦＩＴＣ阳性的细胞占１．０５１０．７２％，Ｔｕｋ３（纯抗体）阳性细胞占２．０６±１．２５％，差别显著（Ｐ＜０．０５），每μｌ脐血两种单抗标记的细胞分别为９６．５６±５６．６４和２３１．４０±１６３．９３（Ｐ＜０．０５），变异系数依次为５８．４７％和６８．４３％。尽管抗ＨＰＣＡ－２－ＦＩＴＣ阳性细胞与阳性细胞数量呈显著正相关，但前者与ＣＦＵ－ＧＭ，ＢＦＵ－Ｅ，ＣＦＵ－Ｍｉｘ以及ＣＦＵｓ（ＣＦＵ－ＧＭ＋ＢＦＵ－Ｅ＋ＣＦＵ－Ｍｉｘ）均呈正相关，而后者仅与ＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵｓ呈正相关。研究结果提示在检测造血祖细胞时，用抗ＨＰＣＡ－２－ＦＩＴＣ代替可降低假阳性，获得较好的细胞与ＣＦＵ间的线性关系。     

FLT3配基—FL研究进展

ＦＬＴ３配基（ＦＬ）是一种新近发现的与造血调控密切相关的细胞因子。在体外单独ＦＬ对造血的调控作用有限，但ＦＬ可与ＩＬ－３，Ｇ－ＣＳＦ，ＣＳＦ－１，ＧＭ－ＣＳＦ，ＳＣＦ及ＩＬ－６协同促进骨髓及脐血ＣＤ３４＾＋细胞形成粒－巨噬细胞集落，粒细胞集落或巨噬细胞集落；可与ＳＣＦ，ＩＬ－７或ＩＬ－１１协同促进Ｂ淋巴祖细胞的增殖与分化。ＦＬ有望用作造血干祖细胞体外扩增的辅助因子，在临床上用作造血细胞动员剂、免疫     

不同造血生长因子对脐血有核细胞体外扩增作用的实验研究

目的：探讨造血生长因子不同组合方式对脐血有核细胞的扩增作用以及脐血扩增后Ｔ淋巴细胞和ＨＬＡ－ＡＢ、ＤＲ阳性细胞变化情况。方法：在脐血有核细胞体外培养体系中分别加入不同组合的细胞因子，观察细胞数、ＣＤ３４＋细胞、ＣＦＵ－ＧＭ、Ｔ４（ＣＤ４＋ＣＤ８－ＣＤ３＋）细胞、Ｔ８（ＣＤ４－ＣＤ８＋ＣＤ３＋）细胞以及ＨＬＡ－ＡＢ、ＤＲ阳性细胞的变化。结果：脐血有核细胞在体外液体培养体系中，经重组人干细胞因子（ｒｈＳＣＦ）、白细胞介素（ＩＬ）－３、ＩＬ－６、粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）、粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和红细胞生成素（Ｅｐｏ）的作用下扩增效果最佳。结论：脐血有核细胞在各种造血生长因子的协同作用下可以在体外扩增。脐血扩增后Ｔ４、Ｔ８细胞减少，可能会降低脐血移植急性ＧＶＨＤ发生，但ＨＬＡ－ＡＢ和ＨＬＡ－ＤＲ阳性细胞数急剧上升，增加了免疫排斥的可能性。     

用PCR技术评价微量残留白血病细胞体外净化的效果

应用系列稀释法ＰＣＲ技术检测含５％携带ＰＣＲγ基因重排的ＣＣＲＦ－ＣＥＭ株细胞的模拟缓解期白血病骨髓的微量残留白血病细胞，敏感性为１０＾－＾５－１０＾－＾６水平。经ＶＰＬ加ＡＤＭ，Ｖｐ１６，ＶＣＲ联合体外净化１小时，结果显示有３个对数级的杀伤作用。用体外克隆形成培养法观察该联合方案对急性期白血病患者白病祖细胞集落，（ＣＦＵ－Ｌ）及正常骨髓造血干细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）的抑制作用，ＣＦＵ－ＧＭ存活率     

紫外线照射对恶性肿瘤患者粒—单造血祖细胞集落形成和细胞活？…

目的 研究短波紫外线照射对恶性肿瘤患者粒－单造血祖细胞集落形成和细胞活力的影响。方法 应用０．５０、１００,３００、４００,８００ｍＪ／ｃｍ＾２的ＵＶＣ照射应用干细胞生长因子动员后白细胞外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）,观察７ｄ后粒－单系造血祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）以及于ＵＶＣ照射后１,３,５,７ｄ观察细胞活力。结果 ５０,１００,２００,４００,８００ｍＪ／ｃｍ＾２ＵＶＣ照射后ＣＦＵ－ＧＭ集落个     

造血因子对骨髓增生异常综合征患者c-kit受体的调控作用

ｃ ｋｉｔ原癌基因是干细胞生长因子 (ＳＣＦ)的受体基因 ,ｃ ｋｉｔ受体 (ＣＤ1 1 7)与其配体结合对造血干 祖细胞起支持作用 ,并发挥调节造血的作用[1 ] 。国外报道 ,正常骨髓单个核细胞ｃ ｋｉｔ受体表达率为 (4.0± 1.8) % [2 ] 。我们曾报道正常骨髓单个核细胞ＣＤ1 1 7表达率为 (3.0 4± 1.49) % ,并发现骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)患者骨髓单个核细胞ｃ ｋｉｔ受体表达异常[3] ,这一异常是否与造血因子调控有关目前尚无报道。我们研究了ＳＣＦ、白细胞介素 3(ＩＬ 3)及红细胞生成素 (Ｅｐｏ)对ＭＤＳ患者骨髓单个核细胞ｃ ｋｉｔ受…     

纤维连结蛋白,粘附抗原和造血祖细胞

纤维连结蛋白（ＦＮ）是广泛存在于多种细胞表面、基质及血浆中的一种糖蛋白，在细胞粘附、迁移、分化及成熟中的作用已有较多研究。但ＦＮ与髓系祖细胞分化成熟的关系研究尚少。除ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ皆能和ＦＮ分子中ＲＧＤ短肽相结合外，最近发现，原始造血祖细胞（ＬＴＢＭＣ－ＩＣ）多向造血祖细胞（ＣＦＵ－ＭＩＸ）、ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－ＧＭ还能和ＦＮ分子肝素结合片段中的“ＣＳ１”多肽结合     

caspase 3在细胞因子调节急性白血病细胞凋亡中的变化

目的 研究ｃａｓｐａｓｅ３在粒细胞集落刺激因子（Ｃ－ＣＳＦ）和粒巨洚细胞集落因子（ＧＭ－ＣＳＦ）调节白血病细胞系ＮＢ４细胞凋亡过程中的变化及其意义。方法 利用细胞这、流式细胞仪分析及ＤＮＡ片段化比率测定,检测Ｇ－ＣＳＦ及ＤＭ－ＣＳＦ对ＮＢ４细胞凋亡的影响,应用荧光分光光度法检测ｃａｓｐａｓｅ３活性变化,并利用ＡＥ－ＤＥＶＤ－ＣＲＯ进行ｃａｓｐａｓｅ３抑制试验。结果 Ｇ－ＣＳＦ能诱导ＮＢ４细胞凋亡,     

小鼠骨髓细胞体外扩增及其造血重建的研究

目的：观察干细胞因子（ＳＣＦ）与白细胞介素（ＩＬ）－１或ＩＬ－３联合对经５氟尿嘧啶（５ＦＵ）处理的骨髓细胞的体外扩增作用和体外扩增细胞移植的小鼠造血恢复能力。方法：在含有细胞因子的液体培养体系中培养５ＦＵ处理的骨髓细胞，观察粒－巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）和高增殖潜能集落形成细胞（ＨＰＰ－ＣＦＣ）数量的增加以及移植扩增细胞的小鼠外周血细胞恢复。结果：单用ＳＣＦ无扩增作用，但ＳＣＦ与ＩＬ－１或ＩＬ－３联合时，与对照组相比较ＣＦＵ－ＧＭ分别增加３３．７±１８．１倍和１８．１±６．３倍。ＨＰＰ－ＣＦＣ分别扩增１７．８±１０．５倍和１２．７±９．１倍。移植体外扩增细胞组与对照组比较，外周血细胞恢复时间缩短１～３天，并且生存率也显著提高。结论：在液体培养体系中ＳＣＦ与ＩＬ－１或ＩＬ－３联合对造血细胞扩增有协同作用，并且体外扩增后的骨髓细胞能加速移植受体的早期造血重建。