P53、P21WAFI、MDM2及BAX在食管鳞癌中的表达和相关性分析

目的：检测P53、MDM2、P21^WAFI、BAX在食管鳞癌中的表达,探讨它们与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。方法：采用免疫组化检测食管鳞癌、正常食管粘膜和不典型增生组织中上述基因蛋白的表达。结果：各指标在上述组织中的表达有显著性差异。MDM2在淋巴结转移组中的阳性表达率为80％,未转移组中为35．7％,两者之间有显著性差异。随着食管鳞癌组织学分级的增高,P53、MDM2的表达逐渐增高,P21^WAFI、BAX的表达逐渐降低。结论：P53、P21、MDM2、BAX多个基因的异常在食管癌的发生、发展过程中共同发挥作用;MDM2过表达与肿瘤的侵袭性和转移有关。P53、P21^WAFI、MDM2在食管鳞癌中的表达无相关性,P53与BAX的表达呈负相关。     

C-myc与肺鳞癌中miRNA-21表达的关系

目的:检测肺鳞癌组织中miRNA-21和癌基因C-myc的表达,探讨两者的相关性及其临床意义.方法:采用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)和免疫印迹检测25例肺鳞癌组织及其相应癌旁正常组织中miRNA-21及C-myc蛋白的表达水平,分析两者与临床病理指标的关系.结果:肺鳞癌组织中miRNA-21的表达及C-myc的表达均高于癌旁正常组织,在低分化肺鳞癌组织中的表达水平与高分化肺鳞癌组织相比,差异无统计学意义.miRNA-21及C-myc在转移癌组织中表达水平显著高于非转移癌组织.肺鳞癌组织中miRNA-21表达量与C-myc阳性表达存在正相关.结论:miRNA-21和C-myc在肺鳞癌中表达上调,可能与肺癌的发生与演进相关.     

凝血酶受体-1在肺癌组织中的表达及其与转移的关系

目的研究凝血酶受体（PAR）-1在肺癌组织中的表达及其与肺癌侵袭、转移的关系。方法免疫组织化学sP法、形态学计量及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺癌原发灶和转移灶组织（36例液氮冻存肺癌组织、80例石蜡包埋肺癌组织）中PAR-1的表达。结果具有侵袭和转移部位的癌巢、脉管内癌栓、癌周围的肺泡上皮不典型增生灶及支气管腺导管上皮不典型增生灶均呈现较强的阳性反应。肺癌组织PAR-1蛋白表达阳性率为73．8％（59／80例）;转移组85．7％（48／56）与非转移组45,8％（11／24）之间差异有统计学意义（P〈0．05）。转移和非转移（P〈0．05）、原发灶和转移灶（P〈0．05）、肿瘤组织和肺组织（P〈0．01）各组之间PAR．1蛋白含量差异有统计学意义;而肿瘤大小、组织学类型和组织学分化各组间差异无统计学意义（P〉0．05）。肺癌组织PAR．1mRNA表达阳性率63．9％（23／36例）;转移组78．3％（18／23例）与非转移组38．5％（5／13）之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PAR-1过度表达与肺癌的转移表型、组织发生及恶性表型有关;PAR-1可能是肺癌转移过程中发挥重要作用的因素之一。     

用基因芯片研究人肺癌转移相关基因

目的 自制肿瘤转移相关基因芯片研究人肺癌高、低转移细胞系PG和PAa间以及肺癌、淋巴结转移癌与正常肺组织间的基因表达谱差异，筛选与肺癌转移相关的特异基因。方法 提取2种肺癌细胞系、人肺癌、淋巴结转移癌及周围正常肺组织的mRNA后逆转录标记cDNA探针，与自制的含399个肿瘤转移相关基因的微阵列膜杂交，QuantArray软件分析杂交信号强度获得差异表达基因。结果 正常肺组织与肺原发癌的基因表达谱有显著差异。淋巴结转移癌组织与PG高转移细胞系表达基因行聚类分析，共同表达且最具统计学意义的基因有64个，包括上调基因27个，下调基因37个。结论 多基因参与肺癌的转移过程，肺转移癌与高转移细胞系共同差异表达的基因可能与肺癌的高转移特性密切相关。     

实验性肺鳞癌中不同亚型蛋白激酶C表达的研究

目的：研究不同亚型蛋白激酶C在肺鳞癌组织中的表达，以探讨它们在甲基胆蒽(MCA)诱发的实验性肺鳞癌发生发展中可能的作用。方法： 用肺叶支气管内灌注甲基胆蒽碘油溶液诱发Wistar大鼠肺癌的方法建立大鼠肺鳞癌动物模型，以免疫组化方法研究PKC α、δ、ε、ξ在肺鳞癌中的表达。结果：用本方法诱发的肺部肿瘤均为肺鳞癌，诱癌率达77.8%。大鼠肺鳞癌组织中PKC α表达明显高于癌旁肺组织及正常大鼠肺组织(分别为24.08%±2.93%，5.00%±2.10%，1.96%±0.29%，P＜0.05)，在癌旁肺组织PKC α表达也明显高于正常肺组织(5.00%±2.10%/1.96%±0.29，P＜0.05)。与此相反，在肺鳞癌组织中鲜见PKC δ表达，癌旁肺组织中PKC δ表达明显低于正常肺组织(分别为47.96±6.60/63.44±6.41，P＜0.05)。在正常肺组织及肺鳞癌组织中均未见PKC ε、ξ表达。结论： 诱癌过程中肺鳞癌组织PKC α表达的异常增高提示致癌剂可能通过活化PKC α介导的多个环节的信号转导而参与了肺鳞癌的发生、发展。     

胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3在肺鳞癌的表达及预后分析

目的 探讨胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IMP3)在肺鳞癌中的表达及评价预后的意义.方法 应用免疫组化染色,检测92例肺鳞癌及癌旁组织中IMP3蛋白的表达,结合临床病理学指标及总生存期进行统计学分析.结果 肺鳞癌组织中IMP3阳性表达率明显高于癌旁正常组织(x2=70.145,P＜0.01),IMP3蛋白在肺鳞癌中的表达与组织分化程度低、有转移以及病理分期高密切相关(x2分别为9.811、11.926和7.136,P＜0.01);癌组织中IMP3蛋白的表达与患者术后总生存期呈负相关(Log-rank=23.889,P＜0.01),IMP3阳性表达是预后的独立风险因素(风险比:0.436,95％置信区间:0.247 ～0.768,P＜0.01).结论 IMP3表达的肺鳞癌预后较差,可作为新的肺鳞癌标记物.     

烟雾对组蛋白去乙酰化酶2在COPD大鼠肺组织中表达的影响

 摘要 目的 比较接触烟雾不同时间后慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)大鼠肺组织之间及与正常大鼠肺组织中组蛋白去乙酰化酶2（histone deacetylase 2,HDAC2）表达的差异,探讨烟雾对组蛋白去乙酰化酶2在COPD大鼠肺组织中表达的影响。 方法 在自制密闭有机玻璃箱内让大鼠吸入香烟烟雾,实验组根据烟熏和COPD形成时间不同分为4组,每组10只大鼠;对照组为正常大鼠10只。免疫组织化学法和原位杂交法分别测定HDAC2的蛋白和mRNA在肺组织中的表达。 结果 实验各组HDAC2蛋白质和mRNA的A值均低于对照组（p<0.05）,实验组各组间比较p值也均小于0.05,差异有统计学意义。结论 HDAC2在实验组COPD大鼠肺组织中的表达低于正常对照组,而且随着接触烟雾时间延长呈下降趋势。     

β-catenin及c-Myc蛋白表达与口腔鳞状细胞癌相关性研究

目的 探讨β-catenin和c-Myc在原发性口腔鳞癌(OSCC)中的表达及意义.方法 用免疫组化法检测口腔鳞癌及癌旁正常组织中3-catenin和c-Myc的表达.结果 β-catenin在口腔鳞癌、相应癌旁正常组织中异常表达率分别为56.92％、15.38％,两组之间差异具有统计学意义(P =0.006),β-catenin异常表达增多与肿瘤大小(P=0.003)、局部的淋巴结转移密切相关(P=0.017).在口腔鳞癌、相应癌旁正常组织中c-Myc的阳性表达率为64.62％,7.69％,两组之间差异具有统计学意义(P=0).β-catenin在胞质的表达与c-Myc的表达呈正相关(rs =0.237,P=0.049).结论 c-Myc在口腔鳞癌中过表达,作为原癌基因促进肿瘤发生;β-catenin胞浆异常表达可能与口腔鳞癌的侵袭转移有关.     

肺腺癌中miRNA34a和c-myc的表达及意义

目的检测肺腺癌组织中miRNA34a,癌基因c-myc的表达,探讨两者之间的关系及意义。方法采用qRT-PCR法检测mRNA miRNA34a,Western blot、免疫组化法检测c-myc蛋白在正常肺组织、癌旁肺组织、肺腺癌以及转移癌组织中的表达。结果(1)miRNA34a在肺腺癌组织中呈低表达,低于癌旁和正常肺组织(P0.01),高于转移癌组织(P0.01)。c-myc在肺腺癌组织中呈高表达,高于癌旁和正常肺组织(P0.01),低于转移癌组织(P0.01)。miRNA34a及c-myc在癌旁组织和正常肺组织之间的表达差异有统计学意义(P0.05)。(2)病理类型:miRNA34a及c-myc在低分化和高分化肺腺癌之间的表达差异均无统计学意义(P0.05)。两者在转移癌与非转移肺腺癌组织中的表达差异有统计学意义(P0.05)。(3)预后分析:cmyc阳性组的肺腺癌患者生存率低于阴性组(P0.05),miRNA34a低表达组患者的生存时间明显低于高表达组,差异有统计学意义(P0.01)。结论肺腺癌组织中miRNA34a的表达与c-myc蛋白表达呈负相关。c-myc高表达miRNA34a低表达提示患者预后不良。     

乳化异氟醚预处理对肺缺血再灌注损伤后核转录因子κB表达的影响

目的:研究乳化异氟醚(EI)预处理对大鼠肺缺血再灌注肺损伤的保护机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、脂肪乳组和EI组。除对照组外,其余3组均参照改良的Eppinger方法建立大鼠肺缺血再灌注损伤模型,脂肪乳组和EI组在建模前分别作脂肪乳和EI预处理。评价各组大鼠肺组织病理形态变化;测定肺组织髓过氧化物酸(MPO)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)水平;免疫组织化学和免疫印迹检测各组大鼠肺组织中核转录因子κB(NF-出)的表达。结果:肺缺血再灌注2 h后,模型组肺组织MPO、TNF-α含量升高,高于对照组及乳化异氟醚组,有统计学意义;模型组NF-κB表达量较高,与脂肪乳组无差异,但与其余2组差异均具有统计学意义;EI组与对照组比较,差异无统计学意义。结论:乳化异氟醚预处理可减轻肺缺血再灌注损伤,其机制可能是通过抑制NF-κB信号通路发挥作用。     

与骨肉瘤预后相关的基因研究进展

骨肉瘤肺转移是临床患者死亡的主要原因,近年来对骨肉瘤预后相关基因的发现、研究增进了人们对骨肉瘤转移机制的认识,对于骨肉瘤的个体化治疗和患者预后有一定的指导意义,本文就几个与骨肉瘤预后相关的热点基因进行综述。     

非小细胞肺癌组织SOX4基因突变分析

目的研究不同病理类型和病理分期的非小细胞肺癌组织中SOX4基因序列突变情况,探讨SOX4基因在肺癌发生过程中的作用。方法PCR扩增肺癌及癌旁组织SOX4基因HMG-box,并对经单链构象多态性分析有差异的20例病例进行测序。DNA及氨基酸序列比较利用Clustal和DNAStar软件。结果90例肺癌组织标本中,有18例发生碱基突变。其中,鳞癌有7例,腺癌5例,腺鳞癌混合型6例,对照的癌旁组织中未检测出突变。临床Ⅱ、Ⅲ期的突变率明显高于Ⅰ期。结论SOX4基因突变与肺癌肿瘤的病理类型无关,但与其病理分期有很大关系,提示SOX4基因突变可能与肺癌的发展和转移有某种关系,为探索SOX基因突变与人类肿瘤发生之间的关系提供了分子依据。     

非小细胞肺癌胸水细胞块ALK融合基因检测分析

目的：探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)胸水细胞块在间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合基因检测中的临床价值。方法：采用突变扩增系统PCR(ARMS-PCR)法检测215例NSCLC细胞块和404例NSCLC组织块中ALK基因的三类融合类型,并检测细胞块同时送检组织块的患者74例的一致性。结果：细胞块ALK基因融合阳性26例,阳性率12.09%(26/215);组织块ALK基因融合阳性25例,阳性率6.19%(25/404);74例有组织块对照的细胞块ALK融合基因结果一致性有67例,一致率达90.54%(67/74),其中细胞块ALK融合基因的阳性率14.86%(11/74),组织块阳性率18.92%(14/74)。结论：NSCLC胸水细胞块ALK融合基因的阳性率略高于组织块;有恶性胸水的NSCLC患者原发灶组织发生ALK融合基因阳性的概率较高。     

非小细胞肺癌胸水细胞块ROS1融合基因检测分析

目的：探讨非小细胞肺癌胸水细胞块在ROS1(c-ros oncogene 1,receptor tyrosine kinase)融合基因突变检测中的临床价值。方法：采用ARMS-PCR法检测215例非小细胞肺癌胸水细胞块和404例非小细胞肺癌组织块中ROS1基因融合的四种类型,并检测细胞块同时送检组织块的患者74例的一致性。结果：细胞块ROS1融合基因阳性7例,阳性率3.26%(7/215);组织块ROS1融合基因阳性8例,阳性率1.98%(8/404);74例有组织块对照的细胞块ROS1融合基因结果一致性有71例,一致率达95.95%(71/74),其中细胞块ROS1融合基因的阳性率2.70%(2/74),组织块阳性率6.76%(5/74)。结论：非小细胞肺癌胸水细胞块ROS1融合基因的阳性率略高于组织块;有恶性胸水的非小细胞肺癌患者原发灶组织发生ROS1融合基因阳性的概率较高。     

KRAS gene mutations in lung cancer: Particulars established and issues unresolved

Lung cancer, like other cancers, is considered to develop through the accumulation of genetic alterations. Mutation of the KRAS gene is one of the most important events in carcinogenesis of the lung. The KRAS gene, belonging to the RAS gene family, encodes a membrane‐bound 21‐kd guanosine triphosphate (GTP)‐binding protein. Single point mutations in this protein result in continuous activation to transmit excessive signals, promoting a variety of biological events. In lung cancers, the mutations concentrate at codon 12 and mostly affect adenocarcinomas (ADCs). They also affect atypical adenomatous hyperplasia, the precursor of ADCs. Therefore, mutation of the KRAS gene is suggested to confer a growth advantage to airway epithelial cells enabling them to expand clonally early in the development of ADCs. The mutation is also a reliable marker of an unfavorable response to certain molecular‐targeting therapies. Furthermore, patients with ADCs affected by mutations have been reported to exhibit a significantly higher risk of postoperative disease recurrence. Thus, the significance of KRAS gene mutations has been investigated extensively. However, not all the details emerged. In this review, particulars that have been established are introduced, and important issues remaining to be resolved are discussed, with special reference to carcinogenesis of the lung.     

bax基因在小细胞肺癌中的表达及意义

为了研究促凋亡基因bax在小细胞肺癌（SCLC）中的表达和意义,我们采用免疫细胞化学法检测了30例SCLC中的bax基因的表达情况。结果表明,阳性率达70％（21／30）,12例慢性支气管炎的阳性率为16．7％（2／12）,两组比较差异显著（P＜0．01）。另外发现,bax基因的表达与组织亚型无关,提示bax基因在SCLC中的较高表达可能与SCLC细胞的瞩亡有一定的关系。     

非小细胞肺癌中RET融合基因的研究进展

存在于1%~2%的非小细胞肺癌患者中的RET融合基因具有鲜明的临床病理学特征,且RET抑制剂对其治疗有效,提示RET融合基因已成为该类患者个体化分子靶向治疗的新靶点。本文将对RET融合基因的特点及其在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者中的表达和治疗的研究进展进行阐述。     

Correlation between EGFR gene mutation pattern and Akt phosphorylation in pulmonary adenocarcinomas

The detection of gene mutation of epithelial growth factor receptor (EGFR) is important to predict the therapeutic effect of gefitinib. Recently, it was reported that examination of the activation of the downstream protein of EGFR is useful in the same way as the EGFR mutation. Therefore the purpose of the present paper was to determine whether activation of Akt and Erk, which are downstream proteins, and the EGFR gene mutation pattern was correlated. A total of 130 pulmonary adenocarcinomas were studied for the gene mutations of EGFR in exon 19 and 21, and the phosphorylation of Akt and Erk was investigated by immunostaining. The EGFR mutation was detected in 32%, the positivity of p-Akt was 51%, and the rate of p-Erk was 27%. The EGFR mutation-positive cases were the minority in p-Akt-negative cases, and the p-Akt expression was significantly associated with the mutation of EGFR (P=0.0014). In addition, there was a significant correlation between the L858R mutation and the expression of p-Akt (P=0.040). It is suggested that the activation of Akt is dependent on EGFR mutation pattern.     

肺癌患者PTEN基因启动子高甲基化的检测

目的 探讨肺癌患者组织、外周血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)启动子异常基因化状况及其在肺癌诊断中的价值.方法 用甲基化特异性PCR方法检测组织、血浆及BALF中的PTEN基因启动子区CpG岛甲基化.结果 45例肺癌患者中,PTEN基因启动子异常甲基化率组织为26.67%(12/45)、血浆为15.56%(7/45),BALF为22.22%(10/45);而非肺癌组织、正常对照血浆、非肺癌患者BALF中未检出甲基化;血浆、BALF中甲基化改变与肿瘤组织甲基化状况显著相关(P<0.01).结论 血浆、BALF中PTEN基因异常甲基化改变的检测在肺癌的早期特异诊断等方面有一定的价值.