第二代丙型肝炎诊断试剂质量控制参考品的建立

为了更加全面、客观地检测国产丙型肝炎诊断试剂的质量，特别是对用于筛查献血员的诊断试剂进行严格的质量控制，在建立第一代丙型肝炎诊断试剂质控参考品的基础上，用雅培、联合生物技术公司、北京生物制品研究所等国内外试剂对４００份血浆进行检测，选出１９８份血浆，用多种试剂及不同的方法（酶联免疫吸附试验、免疫斑点试验、聚合酶链反应）对其进行了反复的核验，建立了我国第二代丙型肝炎诊断试剂质量控制参考品。用此参产品     

血站抗-HCV试剂参考品的建立及应用

目的 通过建立抗-HCV试剂参考品以用于评价血站使用的抗-HCV批批鉴定试剂.方法 收集自2009年11月～2010年9月北京市红十字血液中心复检报废的抗-HCV阳性及阴性血浆各150份,所有样品均用确证试剂进行检测.根据确证结果挑选组成参考盘的阳性、阴性及精密度参考品,灵敏度参考品是通过用正常阴性血浆将阳性血浆倍比稀释后,挑选合适样品再用确证试剂检测后获得,以上样品组成该室内部抗-HCV参考品.用A,B,C和D四种国产及进口试剂检测该室制备参考品后与国家标准参考品进行比较.结果 该室内部抗-HCV试剂参考品组成包括20份阳性参考品、20份阴性参考品、4份灵敏度参考品、1份精密度参考品.用A,B,C和D四种国产及进口试剂经ELISA检测后与国家参考品比较符合率100％.结论 本套参考品与国家参考品实验符合度高,灵敏度检测结果更适宜本实验室应用,稳定性良好,适合该血站内部使用.     

第二代丙型肝炎诊断试剂质量控制参考品的建立

为了更加全面、客观地检测国产丙型肝炎诊断试剂的质量，特别是对用于筛查献血员的诊断试剂进行严格的质量控制，在建立第一代丙型肝炎诊断试剂质控参考品的基础上，用雅培、联合生物技术公司、北京生物制品研究所等国内外试剂对４００份血浆进行检测，选出１９８份血浆，用多种试剂及不同的方法（酶联免疫吸附试验、免疫斑点试验、聚合酶链反应）对其进行了反复的核验，建立了我国第二代丙型肝炎诊断试剂质量控制参考品。用此参考品对国产试剂进行了检定并制定了相应的检定标准，此套参考品及检定标准已获卫生部批准。     

HIV抗体诊断试剂的评价及选用策略

目的对实验室常用的HIV抗体初筛试剂的质量进行评估,并探讨选用试剂的策略。方法分别用5种HIV抗体ELISA检测试剂和1种HIV抗体快速诊断试剂以44份已知结果样品和100份未知结果样品进行检测,未知样本初筛结果阳性或可疑阳性时用蛋白印迹法（WB）确认。用诊断性实验性能指标评估各试剂的质量性能。结果6种试剂的综合质量性能指标（有效率）均大于97．9％,本观察组国产试剂的质量性能指标已经接近国际先进产品的水平;HIV快速诊断试剂与ELISA试剂相比灵敏度略低。结论国产常用HW抗体检测初筛试剂能基本满足临床实验室要求．但应根据不同的环境和临床状态合理选择最适实验室试剂。     

国内部分厂家的HIV抗体诊断试剂的质量评估

《中国预防与控制艾滋病中长期规划(1998—2010年)》(下简称“中长期规划”)中指出，到2010年把我国艾滋病患者和感染者人数控制在150万人以内。随着艾滋病患者和感染者人数的增多，对正确的诊断提出了更高的要求。在保证检测实验室质量的同时，检测试剂的质量尤为关键。“中长期规划”还指出，到2010年做到艾滋病病毒抗原、免疫和     

某国产与进口HIV诊断试剂检测结果分析

目的对国产第3代HIV抗体双抗原夹心法诊断试剂盒和进口第4代HIV试剂盒的应用效果进行评价。方法采用两种HIV检测试剂盒对献血者血液标本、室间质评标本、卫生部临检中心质控品进行检测,献血者标本经两种试剂检测,结果均为反应性或任一种试剂为反应性即判为初筛反应性,并将标本送HIV确认实验室确认。结果共检测17806份血液标本,国产试剂检出8例反应性,进口试剂检出36例反应性,其中两种试剂均为反应性3例,其中1例为确认阳性,其余为阴性;室间质评标本中2例低值质控品进口试剂出现假阴性。结论该国产第3代HIV抗体双抗原夹心法诊断试剂盒实际应用效果优于进口第4代HIV检测试剂盒。     

HIV抗原抗体诊断试剂在献血者筛查中的应用

采用第3代ELISA试剂盒检测HIV抗体,使输血传播HIV的危险明显减少,然而临床上输血传播HIV仍无法完全避免[1]。为此,国内开始尝试核酸扩增检测技术对献血者筛查,以期发现“窗口期”献血者[2~5],但核酸检测技术难度较高,目前难以推广普及。笔者尝试用进口第4代ELISAHIV抗原抗体试剂筛查献血者,探索其应用的可行性。1材料和方法1.1试剂和仪器HIV抗体诊断试剂盒(ELISA第3代试剂,厦门英科新创科技有限公司);HIV抗原抗体诊断试剂盒(ELISA第4代试剂,荷兰生物梅里埃公司)。TecanGenesis RSP-100加样器,Spectra Classic酶标仪,Colu…     

SERO ALT参考品的应用性能评价

目的 了解SEROALT参考品的瓶间差和不同贮存条件下的稳定性,为实验室提供正确的参考依据。方法 以连续测定多瓶样品结果的变异表示的总不精密度,与用同一样品进行连续测定结果的变异表示的分析不精密度之差,计算瓶间差,对贮存于4℃、-15℃和25℃的低、中、高值参考品的稳定性进行统计分析。结果 低、中、高值参考品的瓶间差分别为4．22％、2.01％、1．21％,高浓度血清的瓶间差比低浓度血清小。参考血清在4℃、-15℃贮存条件下分别可以稳定7和35d,但在25℃保存条件下测定值有下降趋势。结论 实验室在使用SEROALT参考血清时必须严格按照说明书进行复溶操作,避免在室温条件下贮存。     

5种HIV抗体初筛诊断试剂临床使用质量评估

为落实《全国艾滋病检测工作规范》，按照中疾控艾办发[2002]106号文件精神，河南省卫生防疫站艾滋病室参加由中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心组织的2002年人类免疫缺陷病毒(HIV)诊断试剂临床评估工作。本室对河南省各血站、防疫站、医院等单位使用较多的5个厂家的HIV抗体诊断试剂抽检进行了临床质量评估。     

病原宏基因组高通量测序技术质量评价参考品的建立

目的 建立医疗机构病原宏基因组高通量测序(mNGS)本地化检测质量评价所需参考品。方法 10种微生物按1∶10梯度稀释3个浓度水平后,分别与临床样本相近的人源细胞浓度混合。人源细胞按1∶10梯度稀释3个浓度水平后,分别与低浓度微生物混合。对参考品冻融稳定性进行研究。结果 D1系列参考品包含：人源细胞为10⁵cells/mL,微生物约为10⁵～10³CFU/mL的D1-1～D1-3以及不含微生物的D0;微生物约为10³CFU/mL,人源细胞为10⁵～10³cells/mL的D1-3、D1-2(10)和D1-1(100)。D2系列参考品与D1系列设置相同。对参考品进行检测(以D1系列为例)：D1-1～D1-3各检测1次,参考品中微生物均检出、其他微生物未检出;D1-2重复检测3次,各微生物检出序列数的变异系数为18%～49%;D1-1～D1-3以及D1-3、D1-2(10)和D1-1(100)两组参考品中各微生物检出的序列数的线性相关系数|r|为0.86～0....     

创伤弧菌核酸检测试剂国家参考品的建立

目的 建立创伤弧菌核酸检测试剂国家参考品并制定质量标准,用于该类试剂的质量评价。方法 收集培养多种创伤弧菌及其他弧菌病原体,经菌落鉴定、16s rRNA测序分析及实时荧光定量PCR试剂检测后筛选出18份样本,稀释、分装后组成创伤弧菌核酸检测试剂国家参考品。邀请不同的实验室对参考品进行协作标定,并对参考品进行均匀性和稳定性考察。结果 建立的国家参考品,包括8份阳性参考品P1～P8、10份阴性参考品N1～N10、1份重复性参考品R和1份检测限参考品L;L使用菌落计数法测定浓度为1×10⁸CFU/mL。4家实验室参与了国家参考品的协作标定,并根据结果制定质量标准为阳性符合率8/8,阴性符合率10/10,检出限要求至少为1×10³CFU/mL及以上阳性,重复性要求检测10次均为阳性,且Ct值或定量值变异系数不大于5.0%。国家参考品均匀性检测的Ct值变异系数均不高于5%,符合要求;在2～8℃冷藏条件、室温放置7天,均未影响参考品稳定性。结论 成功建立了创伤弧菌核酸检测试剂国家参考品,可用于企业试剂研发的质量控制及评价。     

河流弧菌核酸检测试剂国家参考品的建立

目的 建立河流弧菌核酸检测试剂国家参考品并制定质量标准。方法 收集并筛选河流弧菌核酸阳性和阴性临床分离株样本,建立河流弧菌核酸检测试剂国家参考品。使用不同试剂对参考品进行协作标定,并对参考品稳定性和均匀性进行考核。结果 河流弧菌核酸检测试剂国家参考品由20份样本组成,包括8份阳性参考品P1～P8、10份阴性参考品N1～N10、1份检测限参考品L和1份重复性参考品R,L经菌落计数法测定浓度为1×108CFU/mL。国家参考品的质量标准为阳性符合率8/8,阴性符合率10/10,检测限要求1∶104稀释或更高浓度时应均为河流弧菌阳性,重复性要求对稀释后的两个浓度水平的Ct值的变异系数（CV,%）均不大于5.0%。经过随机抽样检测,参考品均匀性符合要求,在2～8℃冷藏条件、室温放置7天均未影响参考品稳定性。结论 本研究研制了河流弧菌核酸检测试剂国家参考品,并制定了其质量标准,可用于相关定性检测试剂的质量评价。     

体外诊断试剂的质量管理

血液诊断试剂是保证血液质量,防止疾病传播的关键因素之一。因此,为了加强血站内部全面质量管理,保证医疗用血的安全性,把好体外诊断试剂的质量关非常重要。     

HIV抗体诊断试剂特异性样品库的建立

目的 建立评价HIV抗体诊断试剂特异性的样品库。方法 从不同地区收集献血者样品990份,采用HIV抗体检测试剂和HIV抗原抗体联合检测试剂进行筛选,对结果不一致样品采用HIV抗体确认试剂和HIV核酸检测试剂进行检测。结果 筛选出985份样品组成样品库,各试剂检测样品库的特异性为97．77％～99．90％,其“δ”为-1．774～-4.690,且两者具有较好的相关性。结论 该样品库样品能够反映试剂特异性的差异,可用于对试剂特异性的分析。     

5种HIV抗体初筛诊断试剂临床使用质量评估

为落实《全国艾滋病检测工作规范》,按照中疾控艾办发[2 0 0 2 ]1 0 6号文件精神,河南省卫生防疫站艾滋病室参加由中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心组织的2 0 0 2年人类免疫缺陷病毒(HIV)诊断试剂临床评估工作。本室对河南省各血站、防疫站、医院等单位使用较多的5个厂家的HIV抗体诊断试剂抽检进行了临床质量评估。一、材料和方法1 .样品的组成　已知样品1 0 0份,其中5 0份由中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心提供,另外5 0份由本室提供,其中阳性样品1 5份,阳性样品均经过免疫印迹法(westernblot,WB)确认。1 0 0份…     

不同国产人血尿素氮诊断试剂的性能评估

目的 评估3种国产人血尿素氮诊断试剂的性能.方法 评价的性能指标包括精密度、线性范围、抗干扰性、稳定性及检测结果相关性.结果 3种国产试剂检测结果批内、批间变异系数均小于5%,批间差的相对偏差均符合厂商声明;试剂在各自的线性范围内线性良好;血红蛋白浓度小于或等于0.5 mg/mL,游离胆红素小于或等于200 mg/L,结合胆红素小于或等于400 mg/L,乳糜福尔马肼浊度(FTU)达到10 000时,对3种尿素氮检测试剂均无显著干扰;各系统检测结果具有良好相关性(r2>0.99).结论 3种国产尿素氮诊断试剂精密度、线性范围、抗干扰性、稳定性均符合临床使用要求,与进口原装试剂相关性较好.     

国产人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂质量评价

目的 对不同原理的人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体诊断试剂盒的质量评价。方法 3745份特殊人群血样，各种试剂盒同时测定，对检测结果不一致的样品经HIV抗体免疫印迹法试剂盒确证，比较各试剂盒的检测敏感性；用亲和层折纯化的HIV gp4l抗体，测定各不同试剂盒的最低检出量；用10份系列稀释的阳性血清测定试剂盒的综合检测能力。结果 国产间接法抗HIV诊断试剂检测敏感性较第一代同类试剂提高约2—8倍；双抗原夹心法诊断试剂较间接法其敏感性有显著提高，最低检出量提高了4—32倍。结论 国产抗HIV诊断试剂的质量已有了显著提高，尤其是双抗原夹心法诊断试剂，其质量已达到国际先进试剂的水平。     

人类免疫缺陷病毒抗体酶联免疫诊断试剂的质量评价

目的 评价市场流通中HIV抗体酶联免疫诊断试剂的质量。方法 从使用单位抽取20家试剂，用国家参考品、确证为阳性的样品和阴性样品对其进行检测和分析。结果 20家试剂均符合200107批国家参考品的质量要求，对76份确证为阳性样品的检出率为100．0％，16家试剂对88份阴性样品的检出率为100．0％，3家试剂为98．9％，1家试剂为97．7％。结论 我国HIV抗体诊断试剂的灵敏度较高，但某些试剂的特异性仍需提高。     

血浆循环肿瘤DNA基因突变检测国家参考品的应用评价

目的 评价血浆循环肿瘤DNA(ctDNA)KRAS/NRAS/EGFR/BRAF/MET基因突变检测国家参考品.方法 对87支国家参考品进行血浆游离DNA提取,文库构建,对文库进行高通量测序,测序后的序列比对到参考基因序列上,通过生物信息软件分析,识别携带基因突变的肿瘤DNA序列,获得相关基因突变信息.结果 试剂盒检测...