金标免疫渗滤法诊断试剂盒诊断血吸虫病的价值研究

目的　评价金标免疫渗滤法诊断试剂盒（DIGFA-kit）用于血吸虫病血清流行病学调查的价值。方法　采用DIGFA与ELISA单盲平行检测各期血吸虫病病人血清、非流行区人群血清、疫区人群血清和血吸虫病已控制地区人群血清共2304份。结果　DIGFA检测血吸虫抗体的敏感性为96.8%，对非流行区健康人群的特异性为100%；该法检测疫区居民血清508份，抗体阳性检出率为35.6%，在Kato法粪检阳性的81人中，其中抗体阳性79人，阳性符合率为97.5%；检测血吸虫病已控制地区人群血清，抗体阳性率为4.6%；根据DIGFA的敏感性和对非流行区人群的特异性，计算其Youdens指数为0.926。上述各项结果与ELISA比较，差异无显著性（P>0.05）。结论　DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性，且方法简便、快速，胶体金标记物制备容易，试剂稳定，运送方便，在现场和临床诊断更具有优越性。     

金标免疫渗滤法诊断试剂盒诊断血吸虫病的价值研究

目的：评价金标免疫渗滤法诊断试剂盒（DIGFA－kit)用于血吸虫病血清流行病学调查的价值。方法：采用DIGFA与ELISA单盲平行检测各期血吸虫病病人血清，非流行区人群血清，疫区人群血清和血吸虫病已控制地区人群血清共2304份。结果：DIGFA检测血吸虫抗体的敏感性为96．8％，对非流行区健康人群的特异性为100％，该法检测疫区居民血清508份，抗体阳性检出率为35．6％，在Kato法粪检阳性的81人中，其中抗体阳性79人，阳性符合率为97．5％；检测血吸虫病已控制地区人群血清，抗体阳性率为4．6％，根据DIGFA的敏感性和对非流行区人群的特异性，计算其Youden's指数为0．926，上述各项结果与ELISA比较，差异无显著性（P＞0．05），结论：DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性，且方法简便，快速，胶体金标记物制备容易，试剂稳定，运送方便，在现场和临床诊断更具有优越性。     

血吸虫病不同流行程度流行区IHA法阳性诊断阈值的研究

目的 探讨日本血吸虫病不同流行程度流行区IHA法的阳性诊断阈值。方法 选择江西省鄱阳湖区湖沼型血吸虫病流行区2个县（余干和星子）共55个自然村作为研究现场,对5岁以上常住居民采用病原学方法（Kato?Katz法+尼龙绢集卵孵化法）和血清学方法（IHA法）进行平行检测;检测结果采用相关分析和ROC曲线等方法分析,计算不同流行程度流行区IHA抗体水平阳性临界值。结果 血吸虫病流行区人群粪检阳性率与人群IHA血吸虫病特异性抗体水平分布趋势一致（r = 0.588, P ＜ 0.05）,与IHA阳性人群抗体水平无相关性（r = 0.221,P ＞ 0.05）;流行区2008-2011年连续4年血吸虫粪检阴性人群的IHA阳性抗体水平呈逐年下降趋势,年间差异有统计学意义（F = 3.650,P ＜ 0.05）,2008-2011年中任意1年血吸虫粪检阳性人群的IHA阳性抗体水平在4年内均维持较高水平且年间差异无统计学意义（F = 2.461,P ＞ 0.05）。流行村人群粪检阳性率< 1%、1%～5%和> 5%时,对应IHA的阳性诊断阈值分别为1∶80、1∶20和1∶10时,可提高IHA检测结果的特异性。结论 不同程度流行区采用IHA筛查血吸虫病或选择化疗对象时,可考虑选择不同的IHA阳性诊断阈值。     

抗SEA鸡卵黄抗体ELISA用于大山区血吸虫病诊断的研究

目的评价抗SEA鸡卵黄抗体(anti-SEAIgY)ELISA用于大山区血吸虫病诊断的效果。方法对大山区血吸虫病流行区506位居民进行粪检,同时用anti-SEAIgY-ELISA(以IgY作为捕捉抗体,以酶标NP28-5B为检测抗体)和血吸虫抗体ELISA检测试剂盒(SEA-ELISA)对其血清进行检测,评价anti-SEAIgY-ELISA的敏感性。实验设非流行区200份血清作对照以确定方法的特异性。结果 anti-SEAIgY-ELISA和SEA-ELISA与粪检的阳性符合率分别为92.68%(152/164)和89.02%(146/164),特异性分别为99.00%(198/200)和95.00%(190/200),差异均无统计学意义(P均0.05);在粪虫卵孵化阴性人群,anti-SEAIgY-ELISA和SEA-ELISA阳性率分别为31.00%(106/342)和83.63%(286/342),差异有统计学意义(P0.05)。结论 anti-SEAIgY ELISA可用于大山区血吸虫病诊断。     

日本血吸虫抗独特型抗体NP30抗体检测法在云南大山区应用效果的评价

目的评价日本血吸虫抗独特型抗体NP30抗体检测法在云南大山区血吸虫病流行现场的应用效果.方法对云南大山区血吸虫病流行区的506位居民进行粪检,同时用NP30抗体检测法和血吸虫抗体ELISA检测试剂盒(SEA-ELISA)分别对其血清进行检测,评价NP30抗体检测法的敏感性;同时检测非流行区的100份血清确定其特异性.结果 NP30抗体检测法和SEA-ELISA法的粪检阳性符合率分别为87.80%(144/164)和84.76%(139/164);两者的特异性分别为96.00%(96/100)和94.00%(94/100),差异均无显著性(P均＞0.05),但在粪孵阴性人群血清样本中,NP30抗体检测法和SEA-ELISA法的检出率分别为44.15%(151/342)和70.47%(241/342),差异有显著性(P＜0.05).结论 NP30抗体检测法可用于云南大山区血吸虫病筛查.     

鄱阳湖区血吸虫病人免疫状态研究Ι血吸虫病人特异性同种型抗体特征分析

目的了解鄱阳湖区血吸虫病人特异性同种型抗体反应水平及特征。方法以可溶性虫卵抗原(SEA)和成虫抗原(AWA)为检测抗原,采用间接ELISA法检测血吸虫病流行区及非流行区人群血清中8种特异性同种型抗体(IgG、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgE、IgM、IgA)水平。结果血吸虫病流行区粪检阳性人群特异性同种型抗体水平显著高于流行区粪检阴性人群和非流行区人群(P均<0.001),流行区粪检阴性人群除SEA和AWA特异性IgG2、IgG4和抗AWA IgE抗体外,其他同种型抗体水平均显著高于非流行区人群(P均<0.05)。流行区粪检阳性人群中,儿童SEA、AWA特异性IgM和SEA IgG1水平显著高于成人,AWA特异性IgG水平则显著低于成人(F=6.136,P=0.014);男性除AWA特异性IgG(F=4.677,P=0.032)和IgG1(F=5.55,P=0.020)显著高于女性外,其他抗体同种型之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。治疗3个月后,SEA抗原特异性IgG1、IgG3、IgG4抗体水平显著下降(P<0.001,P=0.029,P=0.044);治疗12个月后,除SEA特异性IgE、IgM和AWA IgG4、IgM外,其他抗体均显著低于治疗前水平(P均<0.05)。结论血吸虫病流行区粪检阳性人群血吸虫特异性同种型抗体水平显著高于流行区粪检阴性人群和非流行区人群,治疗12个月后,大部分同种型抗体水平显著下降;流行区粪检阴性人群血吸虫特异性抗体水平高于非流行区人群。抗体诊断试剂盒研制应注意阴性参考血清的选择。     

日本血吸虫抗体检测试剂盒(IHA法)的研制与应用

目的 目的 研制日本血吸虫抗体检测试剂盒 （IHA法）。方法 方法 按 《药品生产质量管理规范》 要求, 研究日本血吸虫抗 体检测试剂盒 （IHA法） 组成成份、 制备方法及程序, 并对研制的试剂盒进行诊断效果评价。结果 结果 研制的日本血吸虫抗体 检测试剂盒 （IHA法） 检测慢性血吸虫病患者敏感性为94.49%, 检测健康人群特异性为97.14%, Youden指数为0.92; 与并殖 吸虫和旋毛虫病患者血清交叉反应率分别为15.00%和10.00%。与市售日本裂体吸虫抗体检测试剂盒 （ELISA法） 和日本 血吸虫抗体检测试剂盒 （IHA法） 平行检测流行区居民血吸虫抗体的总体符合率分别为93.06%和92.25%。结论 结论 日本血 吸虫抗体检测试剂盒 （IHA法） 敏感性高、 特异性强, 适合疫区现场血吸虫病筛查, 具有推广应用价值。     

免疫学方法联合检测血吸虫病的初步研究

目的了解血吸虫病血清学检测方法的联合应用的效果,为制定防治对策提供科学依据。方法选择46例慢性血吸虫病患者及42例健康人作为研究对象,采用间接血凝法(IHA)、金标渗滤法(DIGFA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测其抗原和抗体,了解3种方法的敏感性与特异性,以及3种方法不同组合的检出阳性差别。结果IHA抗体检测敏感性为76.09%,特异性为95.24%;DIGFA抗体检测敏感性为69.57%,特异性为97.62%;ELISA循环抗原检测敏感性为32.61%,特异性为92.86%;任意2种方法阳性联合判定总的敏感性为65.22%,特异性为97.62%;3种方法同时阳性联合判定的敏感性为23.91%,特异性为100%。结论血吸虫病血清学检测循环抗原敏感性和特异性较差;任意2种方法联合阳性判定总的敏感性与特异性与单独IHA、DIGFA相似,无实际意义;检测抗体的IHA、DIGFA和检测循环抗原的ELISA3种方法联合阳性判定的敏感性与循环抗原ELISA相似,但特异性高,似与病原学诊断有相仿的意义,可在流行病学调查研究中结合运用。     

日本血吸虫抗体检测试剂盒在鄱阳湖区现场应用分析

目的分析常用的日本血吸虫抗体检测试剂盒在鄱阳湖区日本血吸虫病流行区人群的应用价值。方法在鄱阳湖区3个日本血吸虫病不同流行程度的行政村(新建县曹会村、都昌县井头村和星子县新华村),对5岁以上的常住居民同时采用日本血吸虫感染的病原学(Kato-Katz法和尼龙绢集卵孵化法)检查方法和常用5种抗体检测试剂盒检查人群日本血吸虫感染情况。结果 3个调查点人群的5种常用免疫诊断试剂盒检测的抗体阳性率(33.1%～57.1%)均显著高于粪检阳性率(5.0%-8.2%)(P0.05)。抗体阳性率的年龄分布趋势与粪检结果一致,人群粪检阳性率、抗体阳性率高峰均出现在40～49岁组人群。不同免疫诊断试剂盒的抗体阳性率随着感染度的增加而增高,敏感性为81.2%～94.5%,其中ELISA检测试剂盒敏感性最高;但粪检阴性者中仍有约26.9%～46.1%为抗体阳性。粪检阳性者中,仍有5.5%～18.8%为抗体阴性。结论 5种免疫诊断试剂盒均可用于流行区群体水平的血吸虫病流行病学调查,其中ELISA诊断试剂敏感性最高,且在不同感染度水平间无显著性差异。     

金免疫斑点渗滤法检测日本血吸虫抗体的应用

建立了检测血吸虫病人血清抗体的金免疫斑点渗滤法(DIGFA)。以该法检测107份粪检阳性血吸虫病人血清,阳性率为96.2%。119份健康人血清均为阴性。与常规ELISA对照,符合率达99.1%。显示两法敏感性和特异性相近,但DIGFA操作更为简便快速。     

金标免疫渗滤法(DIGFA)快速检测血吸虫循环抗原的研究

目的　建立一种简便、快速的血吸虫病诊断方法。方法　在已建立的检测血吸虫抗体的ＤＩＧＦＡ基础上,以抗血吸虫重组蛋白ＳＶＬＢＰ多抗为捕捉抗体,金标抗ＳＥＡ多抗为覆盖抗体,建立快速检测病人血清中血吸虫循环抗原的双夹心ＤＩＧＦＡ。结果　用该法检测了急性血吸病人血清３０ 人份和慢性血吸病人血清３８ 人份,其阳性检出率分别为１００ ％ 和５２－６ ％ ;１２０ 人份流行区健康人血清全为阴性;１００ 人份非流行区健康人群血清的阴性符合率为１００％ ,与１０ 例华支睾病人血清无交叉反应;１５ 例肺吸虫病人血清有１ 例阳性,交叉反应率为６－７ ％ ;与双夹心ＥＬＩＳＡ的符合率为９７－４％ ,经χ２ 检验表明两法检测效果无显著性差异。结论　用ＤＩＧＦＡ检测血吸虫循环抗原具有较高的敏感性和特异性,并且方法简便、快速、不需特殊仪器设备,有广阔的应用前景。     

3 种免疫诊断试剂检测人群血清中日本血吸虫抗体的效果比较

目的  评价斑点免疫金渗滤法（DIGFA）、胶体染料法（DDIA）和间接血凝试验（IHA）三种方法在我县不同流行程度、不同流行类型地区中检测人群血清中血吸虫抗体的效果。方法  按照整群抽样的方法,分别在洲滩型传播控制地区的群心村、山丘型传播控制地区的金塔村和传播阻断地区的郎坑村各随机抽取150人作为检测对象,分别用DIGFA、DDIA和IHA检测待检对象血清中血吸虫抗体,并对检测结果进行统计分析。结果   DIGFA、DDIA和IHA 对传播阻断村人群血清均未检出血吸虫抗体;对山丘型传播控制村人群血清血吸虫抗体检测阳性率分别为13.3%（20/150）、2.0%（3/150）和12.0%(18/150);而三种方法组合检测的阳性率提高至19.33%（29/150）,用DIGFA和IHA组合检测的阳性率提高至17.33%(26/150)。对洲滩型传播控制村人群血清血吸虫抗体检测阳性率,DIGFA、DDIA和IHA分别为26.7%（40/150）、9.3%（14/150）和24.7%（37/150）;而三种方法组合检测的阳性率提高至36.0%（54/150）,用DIGFA和IHA组合检测的阳性率提高至34.0%(51/150)。结论  由于铜陵县疫情已达到传播控制,人群感染率和感染度逐年下降,采用多种方法组合检测,可以提高人群血吸虫抗体的检出率。     

IHA和DIGFA诊断血吸虫病可靠性分析

目的分析间接红细胞凝集试验(IHA)和金标免疫法(DIGFA)诊断血吸虫病的可靠性。方法采集经粪便孵化法确诊且未经治疗的血吸虫病患者血清标本46份和健康人血清42份,分别用IHA和DIGFA进行检测,观察2种方法的敏感度和特异度。IHA法每份血清做1∶5、1∶10、1∶20、1∶40共4个滴度。结果46份血吸虫病患者血清检测结果:IHA法1∶5、1∶10、1∶20、1∶40滴度检出率分别为91.30%(42/46)、76.09%(35/46)、65.22%(30/46)、45.65%(21/46),DIGFA法检出率为69.57%(32/46);42份健康人血清检测结果:IHA法1∶5、1∶10、1∶20、1∶40滴度阳性率分别为7.14%(3/42)、4.76%(2/42)、0%(0/42)、0%(0/42),IHA(1∶5)和IHA(1∶10)特异度分别为92.85%、95.24%,DIGFA的特异度为97.62%(41/42)。结论IHA和DIGFA检测血吸虫病患者血清阳性率(敏感度)偏低;用IHA和DIGFA诊断血吸虫病可信度较差;IHA的阳性阈值滴度为1∶5阳性检出率较高。     

Evaluation on the applied value of the dot immunogold filtration assay (DIGFA) for rapid detection of anti-Schistosoma japonicum antibody

The dot immunogold filtration assay (DIGFA) is a rapid technique for the detection of anti-Schistosoma japonicum antibody. Its sensitivity with regard to sera obtained from patients with acute or chronic schistosomiasis was shown to be 100 and 96.9%, respectively. The specificity when using sera of people living in an area non-endemic for schistosomiasis japonica was 100%. Cross-reaction rates for paragonimiasis and clonorchiasis patients were 14.3% and 0%, respectively. Parallel serum tests of 1091 residents from an area endemic for S. japonicum by means of DIGFA, enzyme-linked immunosorbent assay and indirect haemagglutination test resulted in positive rates of 9.3%, 11.5% and 11.0%, respectively. Thus, there was a high level of agreement between the sets of results (P>0.05). In conclusion, DIGFA holds considerable promise for rapid and accurate diagnosis of S. japonicum, as it does not require any specific instruments and can be applied with ease. DIGFA has therefore several advantages over conventional diagnostic approaches and is useful not only for screening and sero-epidemiological surveys in the field, but also in clinical settings.     

双抗体夹心斑点金免疫渗滤法检测血吸虫循环抗原的现场应用

目的 探讨双抗体夹心斑点金免疫渗滤法（S－DIGFA）在现场的应用价值。方法 在原已建立的以抗26kDaGST基因重组蛋白多克隆抗体为捕获抗体兼测示抗体的S－DIGFA的基础上，应用该法检测血吸虫病中度流行区和传播阻断地区人群的血清共1388份，并以双抗体夹心ELISA（S－ELISA）作对照。结果 用S－DIGFA和S－ELISA平行检测血吸虫病中度流行区人群血清300份，阳性检出率分别为15．7％和17．3％；两法检测血吸虫病传播阻断地区人群血清1088份，阳性检出率分别为3．9％和3．7％。结论 S－DIGFA检测循环抗原可在现场扩大和作血清流行病学调查。     

胶体染料试纸条试剂盒检测曼氏血吸虫病的初步研究

目的探索日本血吸虫胶体染料试纸条试剂盒(DDIA)用于检测曼氏血吸虫病的可行性。方法采用日本血吸虫DDIA检测从埃及尼罗河地区曼氏血吸虫病流行区采集的曼氏血吸虫病人血清及当地健康人血清。结果34份曼氏血吸虫病人血清DDIA均呈阳性,14份当地健康者血清均为阴性。与用曼氏血吸虫IHA和ELISA法检测结果相同。结论日本血吸虫DDIA也可用于检测曼氏血吸虫病。     

胶体金免疫层析法快速诊断血吸虫病的研究

目的研发一种血吸虫病快速诊断试剂。方法应用血吸虫病病人和健康人血清测试胶体金免疫层析法(GI-CA)试剂的敏感性、特异性、交叉反应、重现性和稳定性;并与DIGFA及IHA方法比较。结果血吸虫病胶体金免疫层析法(GICA)试剂敏感性和特异性分别为92.5%和95.8%,Youden指数为0883。检测结果与DIGFA及IHA比较三者无统计学意义(P>0.05)。未发现与乙肝病人血清有交叉反应。并具有很好的重现性和稳定性。结论胶体金免疫层析法(GICA)具有试剂敏感、特异和稳定;方法简便、快速和微量的特点,试剂为固态,携带方便,保存期长,适合于血吸虫病流行病学调查及现场应用。     

滴金免疫测定法检测不同人群布鲁氏菌病

目的探讨滴金免疫测定法在不同人群中检测布鲁氏菌感染的应用价值。方法用已建立的布病滴金免疫测定技术检测不同职业和不同感染类型人员的布病抗体,并与布病试管凝集试验作平行检测。结果滴金免疫测定法与试管凝集试验两种方法符合率为99.88%,阳性符合率达到94.25%;且本法对布病发病人群和高滴度血清样本具有更高的检测敏感性;对不同职业人群检测,接触山羊和奶牛职业人群的布鲁氏菌病抗体检出率分别为6.40%和1.32%。结论滴金免疫测定法对布病疫区人群和非疫区重点职业人员开展布病监测具有实用价值,也可用于布病的临床检测和流行病学筛查。     

移民新建镇人群血吸虫抗体水平变化的观察

目的 通过血清学方法观察移民新建镇人群血吸虫抗体水平的变化。 方法 2002-2005年选择长江安徽段血吸虫病流行区退人又退耕的双退点、退人不退耕的单退点和未退人退耕的对照点各1个为试点，采用斑点金免疫渗滤法（DIGFA）与ELISA法纵向平行检测各试点人群血吸虫抗体水平。 结果 双退点DIGFA、ELISA测得的人群血吸虫抗体阳性率分别从2002年的6.63%、7.26%下降到2005年的3.52%和3.71%，差异均有统计学意义（χ²=5.2625，P<0.05；χ²=6.3296，P<0.05）；单退点和对照点人群的血吸虫抗体阳性率无显著变化。ELISA纵向检测3个试点人群血清血吸虫抗体的吸光度（A₄₅₀值）水平，经单因素方差分析，单退点2005年A₄₅₀均值为0.147，较2003年的0.182有显著下降（P<0.01）。双退点、对照点人群的血吸虫抗体均值无显著变化。 结论 移民新建镇人群血吸虫抗体阳性率及抗体水平呈不同程度的下降。