Rous肉瘤病毒引起鸡胚内脏病变的组织化学观察

一、序言 Rous和Murphy等曾将Rous肉瘤组织及上清液接种至鸡胚胚膜及胚内,引起肝,心,胃及胸腔壁长瘤及肝脏出血。以后Keogh报导Rous肉瘤活细胞于接种至鸡胚尿囊绒毛膜(CAM)后引起肝及肺产生大小瘤块;Okar-Blom及Karnofsky等分别将病毒注入胚膜均能引起胚胎肝脏出血;Duran-Reynals指出Rous病毒引起的鸡的出血病变率较成鸡为高,并认为引起出血的原因是血管内皮细胞遭受破坏和在以后出现血     

转化生长因子β1及其受体和Smad2、Smad4蛋白在横纹肌肉瘤中的表达

转化生长因子—β1(transforming growth factor—β1，YGFβ1)是一种对各种细胞具有刺激或抑制作用的多功能细胞生长因子，其信号通路中某一成分缺失，抗增殖作用丧失而可诱发上皮性肿瘤。而在横纹肌肉瘤中，TGFβ1及其受体(TGFBR)的过表达或异常表达可能促进肿瘤的发展和演进。尚不清TGFβ1受体的下游分子Smads在横纹肌肉     

蛋白激酶和病毒的转化作用

具有急性转化作用的逆转录病毒野生型逆转录病毒仅有微弱的转化作用,它们通过特有的基因gag,env和pol编码相应的蛋白质。具有急性转化作用的逆转录病毒从细胞中获得了额外的基因或其一部分,即癌基因,后者的突变或异常的表达即导致细胞转化。众所周知,有些癌基因编码蛋白激酶,然而,这并非转化基因的一个基本特征,因为,ras、myc和sis病毒癌基因编码的是其它类型的转化蛋白质。癌基因编码的蛋白激酶彼此间相差甚远,例如,     

含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的辛德毕斯病毒的制备与鉴定

目的 制备含有增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因的辛德毕斯病毒,并对其进行鉴定.方法 采用融合PCR技术将报告基因EGFP融合到辛德毕斯病毒XJ-160感染性克隆pBR-XJ160的结构基因编码框后,并在报告基因前面添加亚基因启动子SP6,通过反向遗传学技术拯救得到EGFP标记的辛德毕斯病毒.结果 成功拯救并获得了EGFP标记的XJ-160病毒,该重组病毒具有良好的荧光表达特性和遗传稳定性.结论 EGFP标记的辛德毕斯病毒可用于观测病毒的侵染轨迹,为进一步研究辛德毕斯病毒嗜性、生物学功能,以及感染机制奠定了基础.     

含有异源性肉瘤成分的恶性叶状肿瘤

正1临床资料本例读片资料由四川大学华西医院病理科提供,通讯读片编号B7-7。患者女性,46岁,发现右乳包块5年余,自觉包块长大伴疼痛2个月。临床查体:右乳内下象限扪及一质硬界清包块,形态不规则,伴压痛。包块活检病理诊断考虑"恶性肿瘤",遂行右乳单纯切除术、右腋窝Ⅰ/Ⅱ水平淋巴结清扫术。眼观:带梭形皮瓣及乳头的乳腺组织1个,大小21 cm×19 cm×2.5 cm。乳头直径1.5 cm,皮瓣面积16.5 cm×5     

人类膀胱癌和大肠癌含有活化的ras p21蛋白

等均系原癌基因ras家族的成员。它们的编码产物是几种结构域大体相同,分子量均为2 000道尔顿的蛋白质,合称为P21S。研究发现这些蛋白质为正常的细胞分化和细胞增殖过程所必需。当任何一上述原癌基因在其蛋白编码区域发生了点突变而使正常的P21蛋白质不能形成时,原癌基因就转变成为癌基因,细胞就向恶性方向转化。最近,有人运用聚合酶涟反应(PCR)技术结合位点特异的寡聚核苷酸探针杂交方法分     

病毒孔蛋白的基本结构和功能

病毒孔蛋白（ viroporins）是由病毒编码的小分子量的疏水性蛋白,参与了病毒生命周期的不同阶段,对病毒的复制至关重要。文章主要对甲型流感病毒基质蛋白2（M2）、人类免疫缺陷病毒1型病毒蛋白U （Vpu）、丙型肝炎病毒蛋白P7、轮状病毒非结构蛋白4（NSP4）、严重急性呼吸系统综合征冠状病毒的结构蛋白（ORF?3a）和中东呼吸综合征冠状病毒小包膜蛋白E,对这几种核糖核酸病毒的病毒孔蛋白基本结构和功能方面进行总结,可以为病毒孔蛋白的基础研究以及相关抗病毒药物的筛选提供参考。     

重组杆状病毒表达的EIAV Env蛋白与含有env基因重组痘苗病毒的联合免疫

目的：构建新型的马传染性贫血病毒(EIAV)的候选疫苗：方法：利用BAC—To—BAC杆状病毒表达系统，将中国马传贫驴白细胞弱毒疫苗(EIAV DLV)及其亲本株(EIAV LN)env基因导入到杆状病毒基因组中。转染昆虫细胞后，得到的重组病毒用SDS—PAGE和Western blot检测表达产物。以本实验室构建的含有EIAV env基因的重组痘苗病毒，单独或与重组杆状病毒表达的EIAV Env蛋白联合免疫小鼠。结果：构建的重组杆状病毒能正确表达全长Env蛋白。与单独免疫组相比，联合免疫组免疫应答显著增强，其中中和抗体的滴度提高5～9倍。结论：含有EIAV env基因的重组痘苗病毒与Env蛋白抗原联合免疫，能够诱导高滴度的中和抗体。     

乙型肝炎病毒X蛋白和肝细胞癌

乙型肝炎病毒Ｘ蛋白和肝细胞癌方志正，黄仕和ＣｌａｕｓＨ．Ｓｃｈｒｏｄｅｒ只有几种病毒与自然宿主的癌症有关，这些病毒分为４个家族：含ＲＮＡ的逆转录病毒，疱疹病毒，乳头瘤病毒和含ＤＮＡ的肝炎病毒。在后３个家族里，肝炎病毒致癌性最强［１］。已经确定了乙型肝...     

诺如病毒表达衣壳蛋白单克隆抗体的制备、鉴定和初步应用

目的:建立能稳定分泌抗诺如病毒(Norovirus)N蛋白的单克隆抗体(mAb)细胞株, 制备抗诺如病毒核衣壳蛋白的mAb, 为诺如病毒的早期快速检测及致病机制的研究提供实验材料.方法:用E.coli表达的GⅡ组广州株NVgz01(DQ369797)Norovirus-N蛋白免疫BALB/c小鼠, 通过PEG使小鼠脾细胞和Sp2/0细胞融合, 使用HAT选择性培养基培养融合细胞, 用间接ELISA和Western blot测定mAb的效价、免疫球蛋白亚型和mAb的特异性, 并将各mAb之间进行配对.结果:通过细胞融合和克隆化, 共筛选出4株分泌抗Norovirus-N蛋白抗体的杂交瘤细胞株N2C3、 N7C2、 N4B1、 N8A9.间接ELISA和Western blot检测结果表明, 这4株mAb都可以与E.coli表达的GⅡ组广州株Norovirus-N蛋白产生特异性反应, 并且能与天然粪便标本中的GⅡ组Norovirus产生特异性反应.配对结果显示N2C3和N7C2之间配对, 对表达蛋白和天然病毒都具有较强的检测灵敏度.结论:获得了诺如病毒GⅡ组特异性mAb, 为制备免疫诊断试剂盒及致病机制的研究奠定了基础.     

转导、转染和转化

在分子细胞生物学研究中,涉及转导、转染和转化的工作很多,涉及转导、转染和转化的实验技术应用得很广泛.但在一些来稿和论文中,往往发现有混淆转导、转染和转化概念与用法的现象.现将三者的正确概念和表述分列于下,以供参考.     

病毒、免疫学和心脏

心脏的病毒感染大约以柯萨奇组为最常见。和心肌炎及心包炎一样,它们可引起胸膜痛、无菌性脑膜炎和睾丸炎。Burch等在55例慢性瓣膜病人中发现3例瓣膜中有柯萨奇病毒抗原;提示此病毒可侵袭心内膜,但病毒和瓣膜病间关系不明。Nichols等曾发现,在心肌梗塞患者中有近期柯萨奇B感染     

病毒、染色体和肿瘤

一、引言染色体异常在肿瘤发生发展过程有何意义?至今仍不很清楚。但是,大多数癌细胞都有染色体畸变。这个现象早已成为众所周知的事实。许多试验证明,自然环境中物理、化学和生物因素都可以引起染色体损伤,而这些损伤又可以在癌的演进过程中得到发展。这三类环境致突变-致癌物对染色体的损伤都     

横纹肌肉瘤中凋亡抑制蛋白c-IAP1、c-IAP2和survivin的表达及意义

目的探讨横纹肌肉瘤(RMS)中凋亡抑制蛋白c-IAP1、c-IAP2和survivin表达与临床病理特点的关系.方法采用免疫组织化学技术(S-P法)和图像分析技术检测43例横纹肌肉瘤及15例正常横纹肌组织中c-IAP1、c-IAP2和survivin表达水平,并结合临床病理特征进行分析.结果 c-IAP1和c-IAP2在RMS中均有表达,RMS中c-IAP1和c-IAP2表达水平高于正常横纹肌组织(P<0.05).survivin在86%(37/43)的RMS中表达,且表达水平高于正常横纹肌组织(P<0.05).c-IAP1、c-IAP2和survivin在胚胎性横纹肌肉瘤(ERMS)和腺泡状横纹肌肉瘤(ARMS)中的表达水平差异无显著性( P＞0.05),但c-IAP2和survivin的表达水平在不同分化程度的RMS之间差异有显著性(P<0.05).有复发/转移的RMS与无复发/转移的RMS相比,c-IAP1、c-IAP2和survivin表达较高 (P<0.05).结论 c-IAPs和survivin在RMS中的表达水平增加;c-IAP2和survivin的表达与横纹肌肉瘤细胞分化有关.c-IAP1、c-IAP2和survivin的高表达可能作为横纹肌肉瘤病人预后不良的标志.     

前列腺肉瘤的病理诊断、治疗和预后

目的：探讨前列腺肉瘤诊断、治疗及预后诸因素。方法：对４ 例前列腺肉瘤进行随访,并再次进行常规切片ＨＥ 染色和采用ＬＳＡＢ法对ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ＣＫ、ａｃｔｉｎ（ＨＨＦ３５）、ｄｅｓｍｉｎ、ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ、Ｓ１００ 、ＣＤ３４ 、α１ＡＴ、α１ＡＣＴ、ｌｙｓｏｚｙｍｅ、ＰＳＡ 和ＰＡＰ等１２ 种抗体进行标记观察。结果：平滑肌肉瘤１ 例,随访７ 年至今健在;ＭＦＨ１ 例,死于并发呼吸系感染;腺泡状横纹肌肉瘤１ 例,生存不到２ 年;多形性横纹肌肉瘤１ 例,生存２ 年５ 个月。免疫组化在诊断和鉴别诊断上有重大意义。结论：ＨＥ 染色结合免疫组化染色可确诊该瘤。其预后与多种因素有关,中老年人的预后相对较好。联合根治性手术、放疗和化疗效果较好。     

p16、Rb和cyclin D1蛋白在横纹肌肉瘤中的表达及其意义

目的：探讨细胞周期相关蛋白表达异常与横纹肌肉瘤（RMS）的关系。方法：应用S－P免疫组化方法观察p16,Rb和cyclinD1蛋白在RMS中的表达状态。结果：p16,Rb和cyclinD1蛋白表达阳性率分别为55．3％,61．7％和51．1％,在胚胎性横纹肌肉瘤（ERMS）,p16和Rb蛋白表达阳性率为75．0％（21／28）和67．9％（19／28）,明显高于在腺泡状横纹肌肉瘤（ARMS）中的表达（P＜0．05）,p16蛋白阳性率在I,Ⅱ级横纹肌肉瘤分别为75．0％和73．3％,高于Ⅲ级横纹肌肉瘤（45．0％）;p16蛋白阴性及cyclinD1蛋白过表达组,局部浸润,复发或转移发生率高于p16蛋白阳性及cyclinD1蛋白阴性组;11／47例（23．4％）出现两种以上蛋白表达异常。结论：P16,Rb和cyclinD1蛋白异常可能与部分横纹肌肉瘤发生发展有关,且横纹肌肉瘤的发生可能涉及两种以上基因异常。     

兔脂肪干细胞在含有转化因子和转铁蛋白培养基中向软骨细胞的分化

背景：成软骨的种子细胞的选择是软骨组织工程研究中的关键因素。 目的：观察脂肪干细胞在含有转化因子和转铁蛋白诱导条件下向软骨细胞分化的能力。 方法：取新西兰大白兔颈背部脂肪组织,机械分离及酶消化法获得脂肪干细胞,显微镜下观察细胞黏附及生长情况;加入含有转化因子β1和转铁蛋白的诱导培养基培养2周后以免疫组化方法检测Ⅱ型胶原的表达。 结果与结论：从兔脂肪组织中分离出的干细胞原代培养时24 h贴壁,96 h后达80%融合;于软骨诱导培养基内向软骨诱导7 d后形成软骨结节,14 d后Ⅱ型胶原免疫组化阳性。结果初步表明兔脂肪干细胞经诱导后可以向软骨细胞分化。     

白斑综合症病毒极早期蛋白IE3的原核表达、纯化和鉴定

目的:构建对虾白斑综合症的极早期基因IE3的原核表达载体,制备纯化重组蛋白IE3。方法:以感染白斑综合症病毒的对虾心脏组织为模板,PCR法扩增极早期基因IE3基因的编码序列,并将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-2中,构建重组质粒pGEX-4T-2-IE3。质粒经双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coli BL21,IPTG诱导表达GST-IE3融合蛋白,并利用SDS-PAGE和Western blot对表达的蛋白进行鉴定。结果:PCR产物大小及其双酶切鉴定均证明所克隆的基因是IE3,DNA序列测定进一步证实与GenBank报道的序列完全一致。成功构建了重组原核表达载体pGEX-4T-2-IE3,并在大肠杆菌中高效表达出相对分子质量(Mr)约33000的具有可溶性的融合蛋白,且Western blot证实确为目的蛋白。结论:成功构建了重组表达载体pGEX-4T-2-IE3,并表达出重组蛋白GST-3。为进一步研究对虾白斑综合症的防治提供了平台。     

病毒性肝炎患者血清脂质过氧化物的检测分析

病毒性肝炎患者血清脂质过氧化物的检测分析李跃旗辛绍杰陈黎明王业东为了解病毒性肝炎患者血清脂质过氧化物（ＭＤＡ）的意义，我们用日立７１５０全自动生化分析仪同时测定３０例肝病患者疾病高峰前期及高峰期血清及１０例正常人血清ＭＤＡ，结果显示，病毒性肝炎患者血...