血管内皮素和血管紧张素Ⅱ释放的相互关系

为探讨血管内皮素(ET)和血管紧张素Ⅱ(AⅡ)释放的相互关系,本工作用放射免疫方法测定离体灌流大鼠主动脉的ET和AⅡ的释放,发现EF或AⅡ呈剂量依赖地促进主动脉条释放AⅡ或EF。缺氧可显著地促进ET和AⅡ的释放,而ET或AⅡ抗血清明显地抑制缺氧所致的AⅡ或ET的释放。临床观察发现血管紧张素转换酶抑制剂—巯甲丙脯酸治疗原发性高血压,有效地降低病人血浆ET水平。结果提示:血管AⅡ和ET的释放间存在着相互促进的正反馈关系。     

AngⅡ的胞内信号转导径路

血管紧张素Ⅱ有促进细胞生长、增殖的作用。该作用主要由血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体介导。研究揭示其受体后的信号转导存在两种主要径路，即ＭＡＰＫｓ径路和ＪＡＫ－ＳＴＡＴ径路。ＡｎｇⅡ激活ＭＡＰＫｓ可能通过活化Ｒａｓ途径和ＰＫＣ径路；Ｓｒｃ家族可能参与了ＡｎｇⅡ激活ＪＡＫ－ＳＴＡＴ径路     

不同年龄大鼠心血管组织中血管紧张素Ⅱ含量的变化

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ,AngⅡ)在不同年龄大鼠心肌和主动脉及血液组织中含量的变化,以及AngⅡ含量在大鼠心肌、主动脉组织中的差异性.方法 随机抽取1月龄组大鼠12只作为幼年组、6月龄组大鼠12只为青年组和24月龄组大鼠12只为老年组,通过放射免疫分析法测定AngⅡ的含量.用SPSS10.0对实验数据进行统计学分析.结果 1月龄组、6月龄组和24月龄组血液中AngⅡ含量相比逐渐升高(P<0.05);1月龄组与6月龄组和24月龄组心肌中AngⅡ含量相比逐渐降低(P<0.05);1月龄组与6月龄组和24月龄组主动脉中AngⅡ含量相比逐渐降低,与心肌呈现同样变化(P<0.05).1月龄组大鼠心肌中AngⅡ含量比1月龄组大鼠主动脉中AngⅡ含量高(P<0.05);6月龄组大鼠心肌中AngⅡ含量比6月龄组大鼠主动脉中AngⅡ含量高(P<0.05);24月龄组大鼠心肌中AngⅡ含量也比24月龄组大鼠主动脉AngⅡ含量高(P<0.05).结论 各月龄组大鼠心肌AngⅡ含量比主动脉组织中AngⅡ含量高;大鼠AngⅡ含量随年龄的增长其在心肌和主动脉组织中逐步降低,而血液中AngⅡ含量却是逐渐升高然后降低.     

内皮素和血管紧张素Ⅱ对大鼠血管平滑肌细胞分裂的促进作用

血管平滑肌细胞(SMC)的增生、肥厚是高血压的一个重要致病因素,但其机制尚不清楚。本工作选用自发性高血压大鼠(SHR)和其对照大鼠(WKY)培养的SMC,以细胞计数和[~3H]-Thymidine参入为指标,观察到内皮素(ET)和血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)以剂量依赖方式刺激SMC的增殖和细胞内DNA合成,但其效应在SHR SMC更明显;心钠素(ANF)可显著抑制上述效应。SHR SMC对ET和ANGⅡ促分裂作用的反应性增强以及ANF对其抑制效应提示,ET和ANGⅡ的促血管壁增生作用在高血压的发生发展中起着重要作用,ANF可能具有机体内源性抗高血压因子的作用,抑制和缓解高血压的发生发展。     

胡椒碱抑制AngⅡ诱导大鼠气道平滑肌细胞增殖和迁移

目的探究胡椒碱对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖和迁移的影响。方法用改良组织块和胰蛋白酶消化联合培养原代细胞ASMCs。MTT检测AngⅡ及其受体拮抗剂losartan对细胞增殖活性的影响。AngⅡ和不同浓度胡椒碱作用ASMCs后,MTT、流式细胞术和Transwell分别检测细胞增殖、细胞周期以及细胞迁移;ERK1/2抑制剂PD98059和losartan干预后,Western blot检测cyclin D1、MMP-9、p-ERK1/2、ERK1/2和β-actin等蛋白表达。结果 AngⅡ(10~(-8)、10~(-7)、10~(-6)和10~(-5)mol/L)作用24 h后,可浓度依赖性地促进ASMCs增殖(P0.05),其中10~(-7)mol/L AngⅡ促进效果最为显著;losartan处理则抑制AngⅡ诱导的ASMCs增殖(P0.05)。10~(-7)mol/L AngⅡ处理组ASMCs增殖活性、S期细胞分布比例、细胞迁移数目和蛋白质(cyclin D1、MMP-9和p-ERK1/2)表达均明显增加(P0.05);而胡椒碱(10、25、50和100μmol/L)处理可浓度依赖性地减轻AngⅡ诱导的上述效应。并且,PD98059和losartan亦能阻断AngⅡ对ASMCs p-ERK1/2、cyclin D1和MMP-9的上调作用。结论胡椒碱能通过ERK1/2通路抑制AngⅡ诱导的大鼠ASMCs增殖和迁移。     

AngⅡ在脑缺血大鼠大脑皮质中的表达及依达拉奉对其干预的影响

目的:研究大鼠局灶性脑缺血后AngⅡ在脑组织中的表达变化规律及应用自由基清除剂-依达拉奉干预治疗对脑组织中AngⅡ表达的影响,探讨脑缺血后脑内AngⅡ表达的生物学作用及依达拉奉对缺血性脑损伤的保护作用。方法:采用微创开颅法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,分为正常对照组、假手术组、脑缺血组和药物干预组。应用免疫组织化学及尼氏染色方法分别观察脑缺血后和依达拉奉干预后AngⅡ在脑内的表达和神经元的变化。结果:在缺血半暗区可见大量AngⅡ阳性细胞,以缺血后1周数目最多,且免疫阳性反应最强,与对照组相比有显著性差异(P<0.05);尼氏染色显示,缺血半暗区可见大量变性坏死神经元,其中以1周组数量最多,与对照组相比有统计学意义(P<0.05);经依达拉奉干预后半暗区AngⅡ阳性细胞数量、光密度值及变性坏死神经元数量明显减少,与对照组比较有统计学差异,以治疗后3 d最为显著(P<0.01)。结论:①大鼠局灶性脑缺血后缺血半暗区AngⅡ表达增强,可能与缺血后神经元的病理变化有一定联系;②脑损伤后,依达拉奉可能通过抑制AngⅡ的表达而减少神经元的坏死,发挥脑保护作用。     

Ang—Ⅱ对血缺氧性心肌胶原代谢的影响

目的：探讨缺血缺氧性心肌损伤过程中血管紧张素－Ⅱ（Ａｎｇ－Ⅱ）与心肌胶原代谢的关系。方法：是丙基肾上腺素（ＩＳＰ）注射大鼠、造成心肌缺血缺氧和心肌坏死模型,检测血清内ＧＯＴ、ＣＫ、ＬＤＨ、ＨＢＤＨ（羟丁酸脱氢酶）的活性,并检测心肌组织内血管紧张素－Ⅰ转换酶（ＡＣＥ）、血管紧张素－Ⅱ（Ａｎｇ－Ⅱ）和心肌胶原含量变化,观察细胞外间质效应细胞增殖情况。结果：注射ＩＳＰ后,血清ＧＯＴ、ＣＫ、ＬＤＨ、ＨＢＤ     

PKCζ与Raf在AngⅡ引起的大鼠血管平滑肌细胞ERK1／2活化中的作用水

目的：研究血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）肥大的信号转导途径中PKCζ与Raf的作用关系。方法：[^3H]-亮氨酸掺入反映VSMC蛋白质合成；Western blotting检测ERK1／2和PKCζ表达；免疫共沉淀实验检测信号分子间的相互作用。结果：AngⅡ刺激可引起VSMC[^3H]-亮氨酸掺入显著增加，PKC非特异性抑制剂和PKCζ假底物抑制剂（PS—PKCζ）均明显抑制AngⅡ引起的作用。PS—PKCζ预处理使AngⅡ刺激VSMC的ERK1／2磷酸化水平明显降低。转染dominant negative Raf（Raf S621A）质粒的VSMC中的PKCζ磷酸化水平与转染野生型Raf质粒无明显差异。AngⅡ刺激使Ras与Raf结合增加，但PKCζ抑制剂不影响AngⅡ引起的Raf与Ras的结合。转染Raf S621A抑制Raf活化后，AngⅡ引起的ERK1／2磷酸化水平降低。结论：在VSMC中，PKCζ亚型参与AngⅡ诱导的VSMC蛋白合成，但PKCζ可能通过非依赖Raf的途径激活ERK1／2。     

慢性冬眠心肌组织中血管紧张素Ⅱ受体表达的变化

目的：探讨慢性冬眠心肌(CHM)组织中血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)和2型受体(AT2R)的变化及意义。方法：10只中国家猪(乳猪)，随机分为实验组(n=6)和假手术组(n=4)，以免疫组化染色法检测CHM组织中AT1．R和AT2R在细胞上的表达及含量的变化：结果：(1)假手术组心肌(Sham)、实验组正常心肌(normal myocardium，NM)及冬眠心肌(CHM)中，AT1R均表达于心肌细胞和血管平滑肌细胞上；AT2R在Sham及NM中仅表达于心肌细胞上，而在CHM中除心肌细胞外，血管平滑肌细胞上亦表达AT2R。(2)Sham与NM中血管紧张素受体含量无差别，CHM中AT1R的含量降低，AT2R的含量升高。结论：冬眠心肌中AT1R含量的降低及AT1R蛋白含量的升高和AT2R在血管平滑肌中的冉表达，可能参与了CHM形成和进展过程。     

ACE2基因敲除小鼠止血带休克后肾组织ACE/AngⅡ表达的变化及其与肾损伤的关系

 目的： 通过观察血管紧张素转换酶2(ACE2)基因敲除(KO)小鼠止血带休克(TS)后肾组织血管紧张素转化酶/血管紧张素Ⅱ（ACE/AngⅡ）的表达及损伤程度的变化,探讨ACE2在休克后急性肾损伤中的作用。方法： 小鼠双下肢用止血带结扎缺血2 h、松带后再灌注4 h复制TS模型。将雄性6月龄野生型（WT）C57BL/6小鼠和相同背景的ACE2 KO小鼠各12只分为4组,即WT组、WT+TS组、KO组和KO+TS组,每组6只。Western blotting测肾组织ACE蛋白的表达;ELISA法测定肾组织AngⅡ表达;利用化学比色方法测定肾组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、血尿素氮（BUN）和血清肌酐（Cr）含量。结果： 与WT小鼠相比,WT+TS小鼠肾组织ACE/AngⅡ表达明显增加,出现肾组织氧化应激损伤和功能改变;与WT小鼠相比,KO小鼠肾组织ACE/AngⅡ表达增加,但未见明显的氧化应激损伤和功能变化;与WT+TS小鼠相比,KO+TS小鼠肾ACE/AngⅡ表达进一步增加,肾组织氧化应激和肾功能损伤明显加重。结论： ACE2基因缺失可能通过增加ACE/AngⅡ表达加重止血带休克肾的氧化应激损伤,针对ACE2靶f点的药物有可能成为防治止血带休克时急性肾损伤的策略之一。     

蛋白酪氨酸激酶与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）受体信号转导

血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）受体虽然缺乏内源性蛋白酷氨酸激酶活性,但它却细胞内信号转导的磷脂酶Ｃ－磷酸肌醇途径、酶蛋白受体－Ｒａｓ途径和ＪＡＫ／ＳＴＡＴ途径中多种信号分子,及其受体本身和粘着斑激酶等分子的酷氨酸磷酸化密切相关。蛋白酷迄酸磷酸化是细胞转导生长与分化信号的重要机制。本文叙述血管平滑肌细胞和心脏细胞在ＡｎｇⅡ受体各信号转导途径中的蛋白酷氨酸磷酸化现象。     

血浆血管紧张素Ⅱ、钠、钾浓度及血容量与肾性高血压发生发展的关系

本研究采用Goldblatt氏高血压动物模型方法,对六只犬的右肾动脉施行了不完全性狭窄并应用放射免疫测定法,测定了实验动物手术前后血浆血管紧张素Ⅱ的变化。研究结果表明,术后犬血浆中血管紧张素Ⅱ增加并伴有动脉血压升高。因此,血管紧张素Ⅱ可被认为是肾性高血压发生的始动因素。由于左肾的代偿作用所有动物均无血浆钠、钾和血容量改变。     

HO通过减少ROS生成抑制AngⅡ的致血管平滑肌细胞增殖肥大

目的:观察血红素加氧酶（HO）在AngⅡ致血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和肥大中的作用并探讨其可能机制。方法:（1)免疫印迹法测定平滑肌细胞HO-1蛋白表达水平;（2）β-液体闪烁记数仪测定［3H］-TdR和［3H］-亮氨酸掺入量;（3)乙酰乙酸双氯荧光素（DCFH-DA）法测定平滑肌细胞内活性氧（ROS）水平。结果:（1) Hemin组HO-1蛋白表达水平与对照组和AngⅡ组相比均明显升高（P<0.01）。（2）AngⅡ使血管平滑肌细胞［3H］-TdR和［3H］-亮氨酸掺入量较对照组分别升高20.7％和18.0％（P<0.01）,而给予HO底物Hemin则抑制了［3H］-TdR和［3H］-亮氨酸掺入量的增加, 给予HO的抑制剂ZnPPIX则可以促进AngⅡ所致的［3H］-TdR、［3H］-亮氨酸掺入量的增加。(3) AngⅡ组ROS水平明显高于对照组（P<0.01）;Hemin组ROS水平较AngⅡ组降低了62.7％,而ZnPPIX组高于AngⅡ组39.5％。结论:HO可抑制AngⅡ所导致的VSMCs的增殖和肥大,其机制可能与减少细胞内ROS生成有关。     

卡托普利对自发性高血压大鼠血压和心肌血管组织ATⅡ、ET、NE和DA的影响

本实验在自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）观察了卡托普利对血压，心肌和主动脉组织ＡＴⅡ，ＥＴ，ＤＡ，ＮＥ的影响。结果表明，ＳＨＲ心肌、主动脉组织ＡＴⅡ、ＥＴ含量显著增加，而ＤＡ、ＮＥ含量则呈消耗性减少。卡托普利治疗能降低ＳＨＲ，心肌、主动脉ＡＴⅡ、ＥＴ含量，增加ＤＡ、ＮＥ含量，同时显著降低大鼠血压。提示卡托普利的降压作用机制可能与抑制心肌、血管组织ＡＴⅡ、ＥＴ、ＮＥ和ＤＡ的生成和释放有关。     

NO和AngⅡ对大鼠心室重构影响的实验研究

目的:探讨压力超负荷心肌肥大反应过程中心肌内分泌因子活动及相互间的作用。方法:利用腹主动脉缩窄性高血压大鼠模型,以平均动脉压(MAP)、心系数(LVW/BW)及心肌体积密度(VV)、表面积密度(SV)、比表面(S/V)及平均自由程(λ)等体视学参数作为指标,观察一氧化氮(NO)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在压力超负荷高血压和心肌肥大反应过程中的作用及其相互关系。结果:腹主动脉缩窄的大鼠,其MAP、LVW/BW明显增高,心肌横断面积及平均直径明显增大,VV、SV、S/V及λ等与对照组相比均有显着性差异;NO前体L-Arg和AngⅡAT1受体拮抗剂Los能明显阻断腹主动脉缩窄大鼠的MAP、LVW/BW的增高效应,心肌横断面积、平均直径及VV、SV等明显变小,S/V及λ则增大;用NOS抑制剂L-NAME处理的腹主动脉缩窄大鼠,其MAP、LVW/BW值则进一步增高,心肌横断面积、平均直径及VV、SV等参数持续加大,而S/V及λ则变小。结论:NO和AngⅡ参与了腹主动脉缩窄后的高血压和心肌肥大反应。NO的降血压、抑制心肌肥大作用可能是通过降低AngⅡ的浓度来实现的。     

TGF—β1和AngⅡ的相互作用在心肌纤维化中的意义

心肌纤维化(MF)是高血压左室重构的主要表现之一,TGF-β1和AngⅡ是这一过程中的重要生物活性因子,AngⅡ通过血管紧张素Ⅱ-1型(ATi)受体对TGF-β1合成和释放的刺激,增加TGF-β1的表达和促进纤维的发生;TGF-β1也上调Ⅰ型、Ⅲ型胶原合成并抑制胶原酶的释放;两者相互作用,共同促进MF的发生.多种药物可对TGF-β1的表达产生抑制,AT1受体拮抗剂、血管紧张素转换酶抑制剂和TGF-β拮抗剂在降低TG-β1表达和减轻MF方面显示良好作用.     

血管紧张素Ⅱ水平在肝脏疾病介入治疗前后的变化

为监测血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AT-Ⅱ)水平在肝脏疾病介入治疗前,后的变化,及评价AT－Ⅱ作为介入治疗疗效判定指标的可靠性,本文对56例肝硬变门脉高压伴顽固性腹水,经颈静脉肝内门腔静脉分流术（TIPS）患者,采用RIA进行术前,术中及术后血AT－Ⅱ水平检测,燕与33例原发性肝癌行肝动脉栓塞（TAE）患者治疗前,后的空腹外周静脉,门静脉肝固有动脉血AT－Ⅱ水平进行了比较,结果提示：TIPS术前的门列脉血AT－II水平为最高,其次是肝静脉,外周静脉,TAE组的外周静脉及肝固有动脉（P＜0．01）,肝硬变门脉高压顽固性腹水患者TIPS术前AT－Ⅱ水平较高,尤其TIPS术中肝内门静脉穿刺所取血样AT－Ⅱ水平最高;而术后的AT－Ⅱ水平则明显降低,这可能是行TIPS术后这些患者腹水消失的原因之一。Ⅱ