Th17淋巴细胞在哮喘小鼠气道炎症中的初步研究

目的:初步探索Th17细胞及其分泌的炎症介质在哮喘小鼠气道炎症中的作用机制。方法:20只小鼠随机均分为哮喘组和正常对照组。哮喘组用卵白蛋白(OVA)致敏与激发建立小鼠哮喘模型。正常对照组致敏与激发均以生理盐水代替。HE染色观察小鼠气道及肺组织病理变化;光学显微镜下观察小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ及IL-17的含量,流式细胞技术(FCM)检测小鼠外周血Th1、Th2及Th17淋巴细胞占CD4+T淋巴细胞百分率情况。结果:哮喘组小鼠BALF中细胞总数和中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞百分率均显著高于对照组(P<0.05),BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13及IL-17的水平显著增高(P<0.05),而IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05),外周血Th2、Th17细胞明显增高(P<0.05),而Th1细胞无明显变化。结论:Th17细胞及其分泌的炎症介质可促进中性粒细胞及嗜酸性粒细胞在气道内聚集,加重哮喘气道炎症,可能与哮喘气道重塑密切相关。     

支气管哮喘患者外周血Th17 与Th9 细胞的变化及临床意义

目的:探讨Th17、Th9 细胞水平在支气管哮喘患者中的表达及其临床意义。方法:选取67 例哮喘患者为研究对象,30 例健康体检者为对照组,根据全球哮喘防治倡议(GINA)将哮喘患者分为间歇与轻度持续组20 例,中度持续组25 例和重度持续组22 例。收集患者临床资料,完成哮喘控制测试(ACT)评分、肺功能和呼出气一氧化氮(FeNO)值测定,流式细胞仪检测外周血PBMC 中CD3+ CD8- IL-17+ 、CD3+ CD8- IL-9+细胞水平。结果:与健康对照组相比,哮喘患者Th17、Th9 细胞水平均明显升高(P<0.05);中重度哮喘患者Th17 及Th9 细胞水平显著高于间歇与轻度哮喘组(P<0.05),而间歇与轻度哮喘组患者与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。哮喘患者外周血Th17 及Th9 细胞的表达均与FeNO 值正相关(r 值依次为0.501、0.438;P<0.05),与ACT 评分、肺功能FEV1、FEV1/ FVC 及PEF 负相关(r 值依次为-0.441、-0.362;-0.307、-0.377;-0.419、-0.411;-0.428、-0.24;P<0.05),同时Th17 与Th9 细胞在哮喘患者外周血中的表达率正相关(r 值为0.443,P<0.05)。结论:Th17、Th9 细胞在哮喘患者中高表达,具有协同致炎作用,且与症状严重程度相关,提示Th17 及Th9 细胞对哮喘患者病情评估有潜在的参考价值。     

骨髓间充质干细胞对重症哮喘患儿外周血Th17/Treg的免疫调节作用

 目的：探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）在体外对重度哮喘患儿外周血辅助性T细胞17（Th17）和CD4+ CD25+ 调节性T细胞（Treg）的免疫调节作用。方法：体外分离、培养和鉴定MSCs。MSCs经丝裂霉素处理后按不同比例（1∶1、1∶2、1∶10和1∶20）与哮喘患儿外周血T淋巴细胞（TLC）直接接触共培养,检测各组MSCs 对TLC的增殖调节作用。选取上述1∶2比例共培养体系和单独TLC培养体系,ELISA法分别检测Th17的效应分子白细胞介素17（IL-17）和Treg效应分子转化生长因子β（TGF-β）水平,qRT-PCR法检测转录因子维甲酸相关孤儿核受体（RORC）及叉头框蛋白3（Foxp3）mRNA表达水平。结果：MSCs可显著抑制重度哮喘患儿TLC增殖,且随着MSCs数量的增加,抑制作用增强。MSCs+TLC共培养组Th17转录因子RORC mRNA和效应因子IL-17表达较TLC组下降,同时TGF-β表达增高,而Treg细胞调控基因Foxp3 mRNA表达无明显改变。结论：MSCs在体外可能通过抑制Th17分化及IL-17的分泌,同时上调TGF-β的表达,进而有效改善哮喘患儿的Th17/Treg失衡状态。     

哮喘患儿外周血IL—2,IL—10与NO水平及其关系研究

采用双抗夹心ＥＬＩＳＡ技术检测了２８例哮喘患儿血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）在植物血凝素（ＰＨＡ）刺激下产生ＩＬ－１０水平，同时检测了ＮＯ和ＩＬ－２水平。结果：①急性发作期哮喘患儿血浆及ＰＢＭＣ在ＰＨＡ刺激下产生ＩＬ－１０水平均比正常儿童显著降低（Ｐ＜０．０１），在哮喘缓解期虽均有所恢复，但仍低于正常儿童（Ｐ＜０．０５）；②ＮＯ水平在急性发作期患儿明显升高（Ｐ＜０．０５），而在缓解期恢复正常（Ｐ＞０．０５）；③急性发作期哮喘患儿在ＰＨＡ刺激下ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２水平明显升高（Ｐ＜０．０１），但在缓解期恢复正常（Ｐ＞０．０５）；④急性发作期哮喘患儿在ＰＨＡ刺激下ＰＢＭＣ产生ＩＬ－１０水平与ＩＬ－２呈显著负相关（ｒ＝－０．５０４，Ｐ＜０．０１），而与血浆ＮＯ水平相关不显著（ｒ＝－０．３１９，Ｐ＞０．０５）。提示：哮喘发作时ＩＬ－１０分泌及释放减少，ＮＯ和ＩＬ－２水平升高，导致或加重气道慢性炎症反应，引起气道高反应性而诱发或加重哮喘。     

多索茶碱联合布地奈德治疗对支气管哮喘患者肺功能、外周血Th1、Th2与Th17细胞水平的影响

目的探究多索茶碱联合布地奈德治疗对支气管哮喘患者肺功能、外周血Th1、Th2与Th17细胞水平的影响。方法 2016年7月至2018年2月我院呼吸内科收治的120例支气管哮喘患者以随机数字表格法分为实验组和对照组,各60例。对照组给予布地奈德混悬液吸入治疗,实验组在此基础上加服多索茶碱片。记录所有患者主要症状消失时间,治疗前、治疗3个月后测试用力肺活量(FVC)、最大吸气后用力快速呼气1秒呼气容积(FEV1)及呼气峰流速(PEF),并检测外周血Th1、Th2、Th17细胞表达及其血清对应的细胞因子干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-4及IL-17水平。结果与对照组相比,实验组患者喘息、咳嗽、气短、肺内哮鸣音消失时间显著缩短(P <0.05)。两组治疗后FVC、FEV1、PEF均较治疗前明显升高,但实验组FVC、FEV1、PEF较对照组升高更显著(P <0. 05)。两组治疗后Th1、Th1/Th2水平均较治疗前明显升高,Th2、Th17水平较治疗前明显下降,但实验组Th1、Th1/Th2升高幅度及Th2、Th17下降幅度较对照组更显著(P<0.05)。两组治疗后血清IFN-γ水平较治疗前明显升高,IL-4、IL-17水平较治疗前明显下降,但实验组IFN-γ升高幅度及IL-4、IL-17下降幅度较对照组更显著(P<0.05)。结论多索茶碱联合布地奈德治疗可有效改善支气管哮喘患者机体炎症反应及免疫机制失衡,继而改善临床症状和肺功能。     

支气管哮喘与Th1/Th2/Th17的相关性分析

支气管哮喘是一种涉及多种临床症状,例如咳嗽、气喘、呼吸困难等常见的呼吸系统疾病,其发病率之高严重威胁着人类的健康.哮喘的发病与遗传和环境都有着密切的联系,因其发病机制十分复杂至今尚未明了.众多的细胞及其细胞因子均参与了哮喘的发病过程,其中辅助性T细胞(Thelper,Th)及其亚群(Th1、Th2和Th17)已被证实与支气管哮喘的发生有着十分密切的关系.     

支气管哮喘患儿急性发作期血清IL—1β和IL—4水平的检测

支气管哮喘是以嗜酸性粒细胞为主的多种炎性细胞在气道内浸润,并伴有气道上皮细胞脱落及气道高反应性为特征的慢性炎症疾病。我们测定了哮喘患者外周血IL-1β和IL-4的水平,并探讨了它们与哮喘发病的关系。1 材料和方法1.1 研究对象哮喘急性发作期患儿37例,诊断标准按1993年全国儿科哮喘协作组制定的标准诊断。其中男19例,女18例,年龄2～12岁。正常对照组20例,为门诊健康体检入托儿童,无过敏性疾病及哮喘家族史,2个月内未用过激素和组织胺类药。其中男11例,女9例,年龄4～12岁。1.2 方法IL-1β和IL-4检测试剂盒购自上海森…     

支气管哮喘患儿治疗前后外周血Th1／Th2相关细胞因子的临床分析

目的：探讨支气管哮喘患儿治疗前后外周血Th1／Th2相关细胞因子水平的变化及临床意义。方法i应用放射免疫分析和酶联法对31例支气管哮喘患儿进行了外周血中Th1型细胞因子（IL-2、IFN-1）和Th2型细胞因子IL-4、IL-10浓度,并与35名正常人组作比较。结果i支气管哮喘患儿在治疗前血清IL-2、IFN-^y水平均非常显著地低于正常儿组（P〈0．01）,而血清IL4、IL-10水平又非常显著地高于正常儿组（P〈0．01）。经治疗1个月后则与正常儿组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：支气管哮喘患儿存在Th1／Th2细胞免疫失衡。Th1免疫功能低下。IFN-1下调可能是参与哮喘发病机制的重要原因,对哮喘有负向调节作用。哮喘患儿存在Th2细胞免疫功能亢进,以IL-4、IL-10为代表的Th2免疫功能在儿童哮喘的发病中发挥正性促炎作用。     

54例哮喘患儿急性发作期与缓解期甲襞微循环改变

<正> 我们于1988～1990年期间,对住院的54例哮喘患儿的甲襞微循环作了急性发作期与缓解期的动态观察,现报告如下: 对象、方法与结果按照儿童哮喘的诊断标准确诊为支气管哮喘的住院患儿共54例,男25例,女29例。年龄最小3岁,最大12岁,平均8岁。     

哮喘-慢性阻塞性肺疾病患者外周血Treg/Th17失衡的研究

为探究哮喘-慢性阻塞性肺疾病(asthma-chronic obstructive pulmonary disease overlap,ACO)患者外周血 Treg/Th17失衡对疾病的诊断价值,收集于阜阳市第二人民医院就诊的ACO患者52例(ACO组),哮喘急性发作期患者34例(哮喘组),慢性阻塞性肺疾病(chron...     

Th17细胞与支气管哮喘关系的研究进展

Th17细胞是新近研究发现的一类CD4＋T细胞亚群,多方面研究表明其与许多自身免疫性疾病和促炎症反应的发生与发展密切相关,也有大量研究表明Th17与Th2、Th1及Treg细胞共同参与哮喘发病。Th17／IL-17不仅介导哮喘中性粒细胞性气道炎症,也调节嗜酸粒细胞和巨噬细胞性等炎症,与特应性体质的发生、气道高反应性和气道黏液的分泌均密切相关。本文就Th17细胞在支气管哮喘疾病中的作用进行综述。     

小儿支气管哮喘外周血白细胞糖皮质激素受体的初步研究

小儿支气管哮喘外周血白细胞糖皮质激素受体的初步研究上海第二军医大学长征医院（上海２００００３）徐通王永午苏渊周翊须倩刘志民自１９７７年Ｌｉｐｐｍａｎ报道人外周血白细胞存在糖皮质激素受体（ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ＧＲ）以来，ＧＲ...     

强直性脊柱炎患者外周血中Th17细胞水平研究

目的建立流式细胞术检测外周血Th17的方法,并探讨强直性脊柱炎患者外周血Th17变化的意义。方法采用四色流式细胞术检测16例AS患者(AS组)和16例健康志愿者(对照组)外周血Th17细胞比例。结果用流式细胞仪结合不同荧光素标记的CD3、CD8、CD45和IL-17A单克隆抗体可准确检测外周血中Th17细胞的数量。对照组中Th17的检测结果分别为(1.58±1.09)%;AS患者组中分别为(3.06±2.24)%,AS患者外周血中Th17细胞显著高于对照组(P=0.004)。结论患者外周血中Th17细胞数量与对照组比较显著升高,该种细胞可能参与了AS的发生和发展。     

哮喘患儿外周血淋巴细胞Fas及FasL的表达

近几年的研究证实哮喘发作时气道内有大量淋巴细胞和嗜酸粒细胞增殖和活化。已有研究表明Ｆａｓ抗原 (ＣＤ95 )及其配体 (ＦａｓＬ )介导的细胞凋亡参与了嗜酸粒细胞的增殖和清除[1] 。而有关ＣＤ95与哮喘患者淋巴细胞的关系报道较少。本研究通过观察哮喘患儿淋巴细胞表面ＣＤ95、ＦａｓＬ、ＣＤ3、ＣＤ4和ＣＤ8表达的变化 ,探讨ＣＤ95和ＦａｓＬ在哮喘中的作用。1　对象和方法1 1　对象　依据 1998年全国儿科哮喘协作组制定的标准选择哮喘患儿[2 ] 。发作组 18例 ,男 11例 ,女 7例 ,年龄 3～ 11岁 ,平均 7 2岁 ;缓解组 17例 ,男 11例 ,女 6…     

危重哮喘患儿17例护理对策探讨

目的 探讨哮喘危重状态患儿的临床特点及护理对策.方法 回顾性分析我院自2008年1月～2010年6月间25例哮喘危重状态患儿的临床资料及护理方法.结果 25例患儿的症状均在24h之内得到缓解,并于14d内出院.结论 正确而及时的治疗、高质量的护理是哮喘危重状态患儿病情得以缓解并康复的关键.     

支气管哮喘患儿外周血B细胞和T细胞及其亚群的研究

目的 :探讨了支气管哮喘患儿外周血B细胞和T淋巴细胞及其亚群的变化。方法 :应用单克隆技术测定了 38例支气管哮喘患儿外周血B细胞和T淋巴细胞亚群的水平并以 30名正常健康人作比较。结果 :支气管哮喘患儿外周血B细胞数显著地高于正常人组 (P <0 .0 1 )CD3 、CD4、CD4/CD8显著地低于正常人 (P <0 .0 1 )。结论 :支气管哮喘是一种自身免疫调节异常的疾病     

哮喘患儿外周血巨噬细胞M1 / M2 极化状态研究

目的:体外培养哮喘患儿外周血巨噬细胞,并从细胞的表型和功能方面观察巨噬细胞M1/ M2 极化状态的变化,从而探讨巨噬细胞在哮喘发病中的作用。方法:选取50 例健康对照者与50 例哮喘患儿,收集哮喘患儿及健康对照组的血液,分离纯化得到巨噬细胞,体外给予10 ng/ ml GM-CSF 的血清培养液培养,并在第7 天,收集细胞及上清,运用流式细胞技术检测巨噬细胞表型表达,ELISA 方法检测细胞上清IL-10、IL-12 含量变化,检测巨噬细胞吞噬外来性抗原及刺激淋巴细胞分化的能力。结果:与健康对照组相比,哮喘患儿外周血巨噬细胞表面表达的共刺激分子CD64、CD11c、CD40 明显降低,CD206、CD14 及CD23 明显升高(P 均<0.05);患儿巨噬细胞分泌的IL-10 明显降低(P<0.05),IL鄄12 与对照组相比无显著变化(P>0.05);外周血巨噬细胞吞噬能力明显降低(P<0.05);将患儿巨噬细胞与T 淋巴细胞共培养,IL-4 含量明显升高,IFN含量明显降低(P 均<0.05)。结论:相比于健康对照组,哮喘患儿外周血巨噬细胞呈现M2 型,提示巨噬细胞与哮喘疾病具有很大的相关性。     

哮喘患者外周血DC参与Th2型偏移

体外诱导和扩增树突状细胞(DC)并从形态学、细胞超微结构、特异性表面标志、分泌的细胞因子和混合淋巴细胞反应等五方面予以鉴定并研究其在哮喘中的生物学功能。采用正常人外周血单个核细胞(PBMC)经贴壁去除悬浮细胞,加入细胞因子(IL-4、GM-CSF)培养7 d后,LPS刺激其成熟。通过形态学观察、特异性表面标志、分泌细胞因子IL-12的能力及混合淋巴细胞反应予以鉴定,ELISA法检测DC分泌的细胞因子IL-12以及与自身T细胞反应后,流式细胞术检测T细胞分泌的胞内细胞因子IL-4和IFN-γ水平。结果显示正常人外周血诱导的DC具有典型的树突状突起和超微结构,高表达特异性表面标志物CD1a和CD83,分泌细胞因子IL-12以及很强的促进T细胞增殖功能。DC诱导培养第8天,哮喘组DC分泌的IL-12水平低于正常对照组,差异有显著性意义(P<0.01);混合培养第7天,哮喘组IFN-γ水平低于正常对照组(P<0.05),而IL-4和IL-4/IFN-γ比值均高于正常对照组,有显著性差异(P<0.01)。因而PBMC经细胞因子的序贯培养,可获得高纯度、功能性的DC,且该DC能通过调节IL-12的分泌在哮喘发病机制中发挥重要作用,为DC在肿瘤免疫、感染免疫、抗移植排斥等方面的研究奠定了基础。     

扁蒴藤素对支气管哮喘患儿Th17 / Treg 失衡的影响及意义

目的:探讨扁蒴藤素对支气管哮喘患儿Th17/ Treg 体外培养细胞的影响及意义,从而探讨免疫因素在支气管哮喘治疗中的机理。方法:提取支气管哮喘患儿外周血单个核细胞,并在体外给予扁蒴藤素干预,流式细胞术检测Th17 及Treg 比例,ELISA 方法检测细胞培养上清液中IL-17 及TGF-β含量变化,实时定量PCR 检测ROR-T 及Foxp3 含量。结果:扁蒴藤素干预组与对照组相比,CD4+ IL-17+ T 细胞(即Th17 细胞)表达量显著降低,CD4+ CD25+ Foxp3+ T 细胞(即Treg 细胞)表达量显著升高,各组均存在统计学意义(P<0.05);与对照组相比,IL-17 含量显著降低,TGF-β含量显著升高,各组均存在统计学意义(P<0.05);与对照组相比,ROR T 含量显著降低,Foxp3 含量显著升高,各组均存在统计学意义(P<0.05)。结论:扁蒴藤素干预可较大程度缓解体外培养Th17/ Treg 细胞失衡,提示该药物可能通过影响免疫平衡来调节哮喘的发生发展,为扁蒴藤素在临床治疗哮喘的应用提供了理论支持。     

哮喘患儿应用便携式肺功能仪自主监测通气功能的初步研究

目的 分析哮喘患儿应用便携式肺功能仪监测通气功能指标的准确度、日常自主监测的可行性及其影响因素,为探索哮喘患儿进行慢病个体化管理奠定基础。方法 选择在首都医科大学附属北京儿童医院过敏反应科确诊的53例哮喘患儿,其中男性41例（77.4%）,女性12例（22.6%）;年龄5～14岁,平均年龄8.34岁。应用便携式肺功能设备（呼吸家A1型,简称A1）测定肺通气功能,获得用力呼气肺活量占预计值的百分比（FVC%pred）、第1秒用力呼气容积占预计值的百分比（FEV1%pred）、第1秒用力呼气容积占用力肺活量百分比（FEV1/FVC）、最大呼气流量占预计值的百分比（PEF%pred）、最大呼气中期流量占预计值的百分比（MMEF%pred）、用力呼出25%、50%、75%肺活量时的瞬间流量占预计值的百分比（FEF25%pred、FEF50%pred、FEF75%pred）共8项参数;与同日在肺功能检查室经压差传感器肺功能仪（Jaeger-Masterscreen型,简称MS）测定常规肺通气所得的上述参数结果进行一致性比较,获得A1测定肺通气功能的准确度。对以上患儿启用初始哮喘控制治疗,其中27...