不同染色方法对精子形态学评估的影响

目的:探讨Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法对精子形态学评估的异同性及相关性。方法:对80例标本分别涂片两张,利用Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法分别进行染色,并记录同一标本不同染色方法其正常精子百分率、头部缺陷精子百分率、颈部和中段缺陷精子百分率、尾部缺陷精子百分率、畸形精子形态指数(TZI)、精子畸形指数(SDI)等。结果:Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中,正常形态率、各种类型的缺陷率(头部、颈部与中段、尾部)、畸形精子指数、精子畸形指数等均无统计学意义(P>0.05)。结论:Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中具有较为一致的结果;改良巴氏染色法虽经典,但过于繁琐;在病人多且急需出具精子形态学检验报告的情况下,可以考虑使用Diff-Quik染色法作为精子形态评估染色方法。     

瑞氏-姬姆萨与巴氏染色法对精子形态染色效果比较

目的 比较瑞氏-姬姆萨染色法和巴氏染色法对精子形态染色的效果,寻找可替代巴氏染色法的简单、有效的精子形态染色方法.方法 随机选取21份精液标本,每份标本同时采用瑞氏姬姆萨染色法和巴氏染色法对精液涂片进行染色,分析两种染色方法的结果.结果 两种染色方法对精子形态的评估结果无显著性差异(P>0.05);且对正常形态精子和异常形态精子的评估分别具有正相关性,r值为0.984、0.986(P均<0.01).结论 瑞氏-姬姆萨染色法是一种简单有效的精子形态染色方法,可替代巴氏染色法.     

不同染色法对精子顶体染色效果及适用性的比较

目的:通过比较瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、Diff-Quik法及吉-姆萨染色法对精子顶体染色的效果,寻找有效、更易于判读精子顶体的染色方法.方法:100份精液标本同时采用瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、Diff-Quik法及吉-姆萨染色法对精液涂片进行染色,分析四种染色方法的结果.结果:四种染色方法对Ⅰ型、Ⅳ型精子顶体的评估结果无显著性差异(P＞0.05);改良巴氏染色法相对其他三种染色法对精子顶体染色效果稳定.结论:改良巴氏染色法相对其他三种染色法在精子顶体完整率的判读上具有染色效果稳定的优势,且染液价格经济,适于精子顶体完整率的判读.     

三种精子染色法的染色效果比较

目的评价一种新的精子染色方法BASO（改良Diff-Quik）法在精子顶体检测中的应用。方法收集60例不育症男性精液,用BASO法、改良巴氏法和瑞姬氏混合染色法,同时进行染色,比较其固定和染色时间均数,并分析其精子顶体不完整率检测的差异。结果BASO法固定和染色约需7min,明显短于改良巴氏法和瑞姬氏混合染色法,而精子顶体不完整率检测的差异无显著性。结论BASO法操作步骤简单省时,可用于临床精子标本的染色,分析精子形态及精子顶体完整性。     

精子形态分析在男性不育诊断中的临床应用

目的探讨精子形态染色技术在男性不育诊断中的临床应用。方法已生育健康男性精液标本对照组40例、不孕组男性患者精液200例,精液经处理后涂片,用WHO推荐的改良巴氏染色法对精子进行形态染色,计数正常及异常形态精子,并计算精子正常形态的百分率和多重精子缺陷指数。结果对照组精液标本中精子正常形态率为40.85%,不孕组精子正常形态率为10.53%,显著低于对照组,两组相比有极显著性差异（P〈0.01）。结论精子形态染色在临床男性不育的诊断中占有重要地位。精子形态学染色对男性不育患者的诊治有很大帮助,有助于临床为不孕患者选择助孕方式,为有不良孕产史夫妇查找病因,作为临床诊治的依据。     

介绍一种精液涂片染色新方法

建立精液固定、快速染色新方法。经试验配制5mmol/L戊二醛磷酸缓冲液固定液固定精液涂片,经快速血球染液染色与巴氏、H—E、瑞—吉氏染色法对31例(其中不液化 7例、液化不良 8例)精液涂片固定后,脱膜率分别为:6％(2/31)、29％(19/31)、39％(12/31)、49％(15/31)。与巴民染色法对精子形态分析结果比较,异常精子百分率分别为:21％、23％,经统计学处理配对t检验无显著性差异(P>0.05)。该法操作简便,固定良好,染色迅速,精子着色清晰易辨,精细胞、不成熟精细胞和白细胞易区分,适合精液常规中精子形态的检测。     

精子形态学分析中染色方法的比较

目的：评价改良巴氏染色法、瑞-吉染色法和考马斯亮蓝染色法对形态正常精子率和顶体完整率检测结果影响。方法：分别采用改良巴氏染色法、瑞-吉染色法和考马斯亮蓝染色法对55例男性不育症患者精液涂片染色,计算形态正常精子率和顶体完整率。结果：①3种染色方法检测的形态正常精子率两两比较,差异均无显著性(P>0.05),瑞-吉染色法评价颈部和中段缺陷精子率及尾部缺陷精子率显著低于改良巴氏染色法和考马斯亮蓝染色法（P<0.05）。②3种染色方法检测的Ⅰ型、Ⅳ型顶体完整率两两比较,差异均无显著性 (P>0.05),改良巴氏染色法检测的Ⅱ型和Ⅲ型顶体完整率明显高于考马斯亮蓝染色法和瑞-吉染色法（P<0.05）。③3种染色方法检测的形态正常精子率间均呈显著正相关关系(r=0.535、P<0.01, r=0.601、P<0.01,r=0.329、P<0.05)。3种染色方法检测的顶体完整率间均呈显著正相关关系（r=0.604,P<0.01, r=0.682、P<0.01, r=0.446、P<0.01）。结论：3种染色方法均可作为检测人精子形态和顶体完整率实用方法,其中改良巴氏染色法更适于精子形态学分析,瑞-吉染色法更适于顶体完整率判读。     

S180肉瘤细胞腹水涂片的三种染色方法比较

目的比较3种不同的染色方法，选择既简单又能客观反映S180肉瘤细胞特征的染色方法。方法使用HE染色法、巴氏染色法及快速染色法对S180肉瘤细胞腹水涂片进行观察。结果快速染色法操作简便；细胞结构最大限度保持原状；细胞质、细胞核、核仁之问色差较大，易于区别，能够最大限度反应细胞原有特征。结论在观察S180肉瘤细胞腹水涂片时，用快速染色法优于HE染色法和巴氏染色法。     

2种方法处理精液液化异常的比较分析

目的:比较机械混匀法和菠萝蛋白酶消化法处理液化异常精液的质量。方法:选取60份经常规分析证实为精液液化异常标本,标本量均≥1.5 ml,每份标本均分为3组:A组即对照组,未经任何处理;B组,采用机械混匀法处理;C组,采用菠萝蛋白酶消化法处理。首先应用西班牙人类精液分析微机辅助智能系统分别对3组样本的精子浓度、精子活力等参数进行检测;同时采用伊红染色法检测精子存活率;改良巴氏染色法分析精子正常形态率。结果:3组精子浓度和存活率差异均无统计学意义(P>0.05);B组和C组精液液化时间均比A组明显缩短,精子活力也显著高于A组(P<0.01);B组精子正常形态率明显低于A组与C组(P<0.01);C组精液液化时间明显短于B组(P<0.01)。结论:菠萝蛋白酶消化法比机械混匀法更适于处理精液液化异常,可明显缩短精液常规分析时间,降低精液黏度,避免取样误差,提高检测的准确性。     

改良痰结核分枝杆菌L型涂片检测方法的建立和应用

目的建立一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分枝杆菌L型的涂片染色检测方法。方法对常规的抗酸染色法进行方法学改良,以特异性基因扩增诊断法为标准,分析评价改良方法的灵敏度、特异性和总有效检出率等统计学指标;分别采用本改良抗酸染色法(以下简称本改良法)、常规抗酸染色法和改良IK抗酸染色法检测468例临床标本,对三种方法的阳性检出率进行统计学比较。结果本改良法阳性检出率与特异性基因扩增诊断法、改良IK抗酸染色法比较均无明显差异(χ2=0.25,P=0.6171;U=0.155,P=0.4404),但明显高于常规抗酸染色法(U=3.713,P<0.0010);本改良法灵敏度、特异性和总有效检出率与改良IK抗酸染色法相似,但高于常规抗酸染色法。同时,本改良法所需时间少于改良IK抗酸染色法(5minvs24h)。结论成功建立了一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分支杆菌L型的涂片染色检测方法,适合临床推广应用。     

巴氏染色法在精子顶体研究中的应用

目的应用巴氏染色方法对临床上精子顶体区是否正常进行区分。方法分别对该研究所门诊111例精子标本进行巴氏染色后，每例标本在显微镜油镜下记数200个精子，观察顶体区。结果111例标本中，5例为无顶体圆头精子，23例为小顶体区精子，83例顸体区正常精子。结论巴氏染色法在临床上可对精子顸体区是否正常作出准确的判断。     

两种精子优选法对精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率的影响

目的：评价Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法对人精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率影响。方法：收集12例男性不育症患者精液样本,分别采用Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法(简称上游法)进行精子优选,应用伊红-Y染色分析优选前后精子活率和尾部低渗肿胀率,应用改良巴氏染色法分析优选前后精子形态。结果：①Percoll法和上游法优选后精子活率和尾部低渗肿胀率均明显高于优选前（P<0.01）,两种优选法间比较精子活率和尾部低渗肿胀率差异均无显著性（P>0.05）。Percoll法和上游法优选后B-G型精子尾部低渗肿胀率均明显高于优选前（P<0.01）,两种优选法间比较B-G型精子尾部低渗肿胀率差异均无显著性（P>0.05）。②Percoll密度梯度离心法和上游法优选后形态正常精子百分率均明显高于优选前（P<0.05）,上游法优选后形态正常精子百分率明显高于Percoll法优选后形态正常精子百分率（P<0.05）。上游法优选后锥型头、无定型头和颈/中段缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前（P<0.05）;Percoll法优选后锥型头、无定型头和尾部缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前（P<0.05）;上游法优选后无定型头、颈/中段缺陷和尾部缺陷形态异常精子百分率明显低于Percoll优选后（P<0.05）。结论：Percoll法和上游法优选后精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率较优选前明显改善, 此两种优选法均可广泛应用于生殖医学,其中上游法优于Percoll法。     

精液白细胞与精子形态学参数的关系

目的：探讨精液白细胞与精子形态学参数之间关系。 方法：对278例不育患者采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析,采用精液白细胞计数法检测精液白细胞,采用改良巴氏染色法分析精子顶体形态。结果：白细胞精子症组形态正常精子率和顶体完整率均低于非白细胞精子症组（P<0.05）;形态正常精子率与精液白细胞浓度呈负相关关系（r=-0.243,P<0.01）;顶体完整率与精液白细胞浓度亦呈显著负相关关系（ r=-0.248,P<0.01）。结论：精液白细胞增多可能影响精子的形态和顶体的完整。     

一种改良瑞氏-姬姆萨染色液的染色效果评价

目的本文通过对干燥血片或骨髓涂片的细胞进行3种染色法对比,旨在说明以BaSO厂家生产瑞氏-姬姆萨染色液第一液替代传统瑞氏-姬姆萨染色第一液的染色法染色,效果良好,且快速方便,值得推广。方法分别用3种染色法对干燥血片或骨髓涂片进行染色,然后对着色细胞的胞浆、浆中颗粒、核染色质的着色效果及染色时间进行对比。结果传统瑞氏法对胞浆颗粒着色强,但对胞核着色差,染色时间较长,且往往把片子染成偏酸或偏碱;传统瑞氏-姬姆萨染色液染出的细胞颜色偏红,不利于幼稚细胞的鉴别;而以改良BaSO替代液染色法染出来的效果,无论胞浆、浆中颗粒、核染色质着色都能达到满意的效果。结论以BaSO改良瑞-姬染色法的染色效果好,且染色时间短,染液易得到,值得推广。     

精子动态与形态学关系及其临床应用价值

目的探讨精子动态与形态学的关系及其临床应用价值。方法采用计算机辅助精子分析(CASA)系统对290例男性不育患者进行精液常规分析,同时用Diff-Quik快速染色方法对精子进行形态染色,采用严格标准进行精子形态分类,计数正常及异常形态精子,并计算正常形态精子的百分率。结果精子活力正常者(a级≥25%或a+b级≥50%为标准)108例,占37.2%,精子正常形态率(43±14)%。精子活力低下者182例,占62.8%,精子正常形态率(19.2±0.9)%。2组相比差异有统计学意义(P<0.01)。精子形态正常组195例,占67.2%,异常组95例,占32.8%。精子形态正常组与异常组在曲线速度(VCL)、直线速度(VSL)、平均移动角度(MAD)、直线性(LIN)、前向性(STR)差别显著。结论精子动态和形态异常相伴产生,精液常规与精子形态学分析相结合,有助于提高男性不育症的诊断率及为不孕患者选择合适的助孕方式。     

Efficacy of a modified ultrafast Papanicolaou (UFP) stain for breast aspirates

Rapid assessment of fine needle aspiration smears has become popular. The goal is minimal time required and fastest turn around time for test results in breast aspirates. In the present study, fine needle aspiration smears from 100 cases of breast lump were stained by modified ultrafast Papanicolaou stain which consisted of the following changes from ultrafast Papanicolaou stain: (i) Use of Gill 's haematoxylin instead of Richard Allan haematoxylin, (ii) omission of orange G from cytostain. Wet fixed smears subjeted to May-Gruenwald and Giemsa stain and an air dried smear subjected to modified ultrafast Papanicolaou stain were compared. Smears stained by modified stain showed transparent cells with crisp nuclear features in a blood free background. Total time required in this staining was 130 seconds. Out of 100, diagnosis was inadequate in 5 cases. In 95 cases cytological diagnosis was as follows: 60 benign, 27 ductal malignancy and 8 of inflammatory lesions. There was 100% agreement in cytologic diagnosis offered on smears stained by May-Gruenwald and Giemsa and modified ultrafast Papanicolaou stain.     

男性不育患者精子形态与精中性α-葡糖苷酶和精浆弹性硬蛋白酶关系的研究

目的研究男性不育患者精子形态与精中性α-葡糖苷酶和精浆弹性硬蛋白酶的关系。方法466例男性不育患者分别根据年龄和精子正常形态百分率分成5组和8组,采用Diff-Quik染色法、酶法和酶联免疫吸附试验（ELISA）分别进行精子形态、精中性α-葡糖苷酶和精浆弹性硬蛋白酶的检测。结果各年龄组的正常形态精子百分率和精浆弹性硬蛋白酶浓度差异无统计学意义（P〉0．05）,精中性旷葡糖苷酶的活性在41-50岁年龄段显著降低,其他年龄段精中性α-葡糖苷酶的活性差异无统计学意义（P〉0．05）。在精子正常形态百分率不同的8组中,年龄差异不具统计学意义,精浆弹性硬蛋白酶浓度差异无统计学意义（P〉0．05）,精子正常形态百分率大于7．1％的5组精中性α-葡糖苷酶的活性差异无统计学意义,其余三组精中性α-葡糖苷酶的活性与各组精中性α-葡糖苷酶的活性差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论精子正常形态百分率不受年龄和精浆弹性硬蛋白酶浓度影响,而随着精中性α-葡糖苷酶的活性降低而降低,精中性α-葡糖苷酶活性的显著降低可能是导致精子形态畸形的独立因素。     

人睾丸中各级生精细胞的鉴定

目的:建立人睾丸生精细胞鉴定方法.方法:用机械法离散人睾丸细胞,涂片,用Diff-Quik法染色显示细胞形态.在Hoffman光学镜头下根据细胞形态进行活细胞分类,选取各类细胞分别涂片,行17号染色体着丝粒探针化学显色原位杂交和c-kit抗原表达免疫细胞化学染色.结果:在配置Hoffman镜头的倒置显微镜下人睾丸圆形细胞主要可分为4群:支持细胞(Sertoli)细胞,粗线期初级精母细胞,精原细胞,圆形精子细胞.原位杂交结果为:Sertoli细胞、粗线期初级精母细胞、精原细胞均显示2个着丝粒信号,圆形精子细胞及精子显示单个着丝粒信号.抗c-kit抗体免疫化学染色显示:粗线期初级精母细胞、精原细胞反应呈阳性,Sertoli细胞、圆形精子细胞、精子反应呈阴性.结论:人睾丸各类细胞在活体形态、染色形态、染色体倍性、抗原表达上均有各自显著的特征,其中据Hoffman成像形态区分各级生精细胞是在活体状态下一种简便有效的鉴别人生精细胞的方法.