戒烟对吸烟大鼠气道上皮细胞核因子κB、基质金属蛋白酶9及金属蛋白酶组织抑制物1表达的影响

目的 通过研究吸烟及戒烟大鼠气道上皮细胞核因子κB(NF-κB)、细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)及细胞金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)mRNA及蛋白质的表达水平,探讨吸烟及戒烟对慢性阻塞性肺疾病气道炎症和气道重塑的影响.方法 雄性Wistar大鼠24只,随机分为对照组、吸烟组和戒烟组,每组8只.分别采用原位杂交和免疫组织化学的方法检测各组大鼠气道上皮细胞中NF-κB、MMP-9及TIMP-1 mRNA及蛋白的表达水平.结果 ①与对照组(0.29±0.06,0.29±0.06)相比,吸烟组(0.45±0.04,0.41±0.03)、戒烟组(0.40±0.05,0.37±0.03)NF-κB mRNA和蛋白表达水平均增高(P值均＜0.05);与吸烟组相比,戒烟组NF-κB mRNA和蛋白表达水平降低(P值均＜0.05).②与对照组(0.30±0.06,0.30±0.06)相比,吸烟组(0.52±0.03,0.51±0.07)、戒烟组(0.38±0.03,0.33±0.02)MMP-9 mRNA和蛋白表达水平均增高(P值均＜0.05);与吸烟组相比,戒烟组MMP-9mRNA和蛋白表达水平均降低(P值均＜0.05).③与对照组(0.26±0.04,0.26±0.04)相比,吸烟组(0.49±0.05,0.37±0.03)、戒烟组(0.42±0.04,0.35±0.03)TIMP-1 mRNA和蛋白表达水平均增高(P值均＜0.05);与吸烟组相比,戒烟组TIMP-1 mRNA和蛋白表达水平降低(P值均＜0.05).④与对照组(1.00±0.02,1.00±0.02)相比,吸烟组(1.07±0.14,l.37±0.19)MMP-9/TIMP-1 mRNA和蛋白表达值大于1(P值均＜0.05),而戒烟组(0.92±0.13,0.94±0.10)MMP-9/TIMP-1 mRNA和蛋白表达值小于1(P值均＜0.05).⑤各组NF-κB和MMP-9的mRNA及蛋白的表达呈正相关(r值分别为0.87和0.66,P值均＜0.05).结论 吸烟大鼠气道上皮细胞NF-κB、MMP-9和TIMP-1 m-RNA及蛋白的表达水平升高,并且MMP-9/TIMP-1大于1,戒烟后NF-κB、MMP-9和TIMP-1的表达有所下降,且MMP-9/TIMP-1小于1,提示吸烟可以引起气道上皮的炎症和重塑,戒烟可以减轻气道炎症和重塑.     

戒烟对吸烟致敏大鼠气道5-脂氧合酶及其mRNA表达的影响

目的 通过研究戒烟对吸烟致敏大鼠气道5-脂氧合酶（5-LO）及其mRNA表达的影响,探讨吸烟及戒烟对支气管哮喘（简称哮喘）气道炎症的影响,为吸烟哮喘患者戒烟及治疗提供依据.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组、致敏组、吸烟组及戒烟组,每组10只.后3组应用卵白蛋白（OVA）致敏并长期（8周）吸入激发,制备哮喘模型;在激发第3周开始,将吸烟致敏组及戒烟致敏组大鼠置于自制熏箱内进行被动吸烟,吸烟时间为20周,戒烟时间为10周.采用免疫组织化学及原位杂交法检测各组大鼠气道5-LO蛋白及其mRNA的表达.结果 ①吸烟组气道5-LO蛋白的表达（32.58±2.78）及戒烟组气道5-LO蛋白的表达（26.36±2.34）明显高于致敏组（21.65±2.12）和对照组（15.38±1.68）,差异有统计学意义（P值均＜0.01）;戒烟组较吸烟组表达降低,差异有统计学意义（P＜0.01）;致敏组高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）.②吸烟组气道5-LO mRNA的表达（34.68±2.90）及戒烟组气道5-LO mRNA的表达（27.16±2.38）均高于致敏组（23.55±2.28）和对照组（15.78±1.72）,差异有统计学意义（P值均＜0.01）;戒烟组较吸烟组表达降低,差异有统计学意义（P＜0.01）;致敏组高于对照组,差异有统计学意义（P ＜0.01）.结论 吸烟可使致敏大鼠气道5-LO及mRNA表达增多,加重气道炎症.戒烟后其表达均有所下降,提示戒烟可减轻气道炎症,是防止哮喘发作的有效措施.     

被动吸烟对致敏大鼠气道5-脂氧合酶及其mRNA表达的影响

目的 通过研究吸烟对致敏大鼠气道5-脂氧合酶及其mRNA表达的影响,探讨吸烟对支气管哮喘(简称哮喘)气道炎症的影响,从而为临床上治疗吸烟哮喘提出实验依据.方法 雄性Wistar 大鼠30只,随机分为对照组、致敏组和吸烟致敏组.每组10只.后两组应用卵白蛋白致敏并长期(8周)吸人激发,制备哮喘模型;在激发第3周开始,将吸烟致敏组大鼠置于自制熏箱内进行被动吸烟.采用免疫组织化学及原位杂交法检测各组大鼠气道5-脂氧合酶蛋白及其mRNA的表达.结果 ①吸烟致敏组气道5-脂氧合酶蛋白的表达(32.58±2.78)明显高于致敏组(21.65±2.12)和对照组(15.38±1.68),差异有统计学意义(P值均＜0.01);致敏组高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);②吸烟致敏组气道5-脂氧合酶mRNA的表达(34.68±2.90)高于致敏组(23.55±2.28)和对照组(15.78±1.72),差异有统计学意义(P值均＜0.01);致敏组高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 吸烟可使致敏大鼠气道5-脂氧合酶及其mRNA表达增多,加重气道炎症.     

慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1及基质金属蛋白酶-9与细胞黏附因子表达的关系

目的 研究COPD患者肺组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、细胞黏附因子-1(ICAM-1)蛋白和mRNA的分布和表达,探讨其与气流阻塞的关系及吸烟对其影响.方法 取39例因肺癌行肺叶切除的癌旁肺组织标本,其中不吸烟不伴COPD组(A组)9例、吸烟不伴COPD组(B组)11例、吸烟伴COPD组(C组)19例.用免疫组化和逆转录聚合酶链反应方法检测TIMP-1、MMP-9、ICAM-1的蛋白和mRNA表达,并进行相关性分析.结果 MMP-9表达于肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞、血管平滑肌细胞、肺泡巨噬细胞、间质细胞,C组MMP-9免疫组化阳性细胞数(54.0±15.0)明显高于A组和B组(1.2±0.7和1.4±0.8);TIMP-1蛋白表达的主要部位为肺泡巨噬细胞、肺泡上皮细胞、毛细血管内皮细胞、血管平滑肌细胞,C组弱表达,A组和B组无表达;ICAM-1主要表达于肺泡上皮细胞,C组ICAM-1免疫组化阳性细胞数(52.1±13.4)明显高于A组和B组(2.1±1.1和4.5±2.4).C组MMP-9、TIMP-1、ICAM-1的mRNA平均吸光度值(0.71±0.16、0.47±0.10、0.62±0.15)明显高于A组(0.17±0.05、0.20±0.06、0.37±0.11)和B组(0.20±0.08、0.26±0.08、0.44±0.12).C组肺组织TIMP-1、MMP-9与ICAM-1的mRNA表达水平呈直线正相关,MMP-9与ICAM-1蛋白表达水平呈显著正相关.MMP-9和ICAM-1的mRNA及蛋白表达水平、TIMP-1的mRNA表达水平与FEV1占预计值%、FEV1/FVC占预计值%均呈显著负相关.结论 TIMP-1、MMP-9和ICAM-1在促进炎性细胞迁移进入细胞外基底膜及气道上皮细胞,导致肺组织破坏和重塑,引起及加重COPD患者的气流阻塞中起着重要作用.     

烟雾暴露时间及吸入量对大鼠肺血管形态的影响

目的 探讨不同吸烟时间及吸烟量大鼠肺血管管壁结构的变化,以及基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)对肺血管结构改变的影响.方法 雄性Wistar大鼠40只随机分为5组:正常对照组、短期大量吸烟组、长期少量吸烟组、长期大量吸烟组和长期大量吸烟后戒烟组(简称戒烟组),建立大鼠被动吸烟模型.分别测量各组大鼠肺血管管壁厚度与血管外径的比值(MT%)及管壁面积与血管总面积的比值(MA%);原位杂交法检测大鼠肺血管MMP-9 mRNA的表达,并分析其相关性.结果 ①与正常对照组相比.短期大量吸烟组、长期少量吸烟组和长期大量吸烟组大鼠肺血管MT%和MA%测最值均增加(P值均＜0.05),以长期大量吸烟组最为显著;戒烟组MT%较各吸烟组降低(P值均＜0.05),而MA%仅与长期大量吸烟组有显著性差异(P＜0.05).②与正常对照组相比,短期大量吸烟组、长期少量吸烟组、长期大量吸烟组大鼠肺血管MMP-9 mRNA表达均增多(P值均＜0.05);戒烟组较各吸烟组减少(P值均＜0.05).③大鼠肺血管MMP-9 mRNA的表达与MT%和MA%呈正相关(r值分别为0.667、0.619.P值均＜0.05).结论 吸烟可引起大鼠肺血管形态学改变,肺血管平滑肌细胞MMP-9表达增多参与吸烟所致的肺血管重塑.     

香烟烟雾对大鼠脑血管内皮细胞超微结构及内皮素1表达的影响

目的研究吸烟对大鼠脑血管内皮细胞超微结构及其内皮素1的影响。方法用免疫组织化学方法分别检测正常对照组、长期大量吸烟组、长期小量吸烟组、短期大量吸烟组及戒烟组大鼠脑血管内皮素1的表达;运用Westen-blotting法对以上各组脑内皮素1特异性受体进行定量分析。同时电镜观察其脑血管内皮细胞超微结构的变化。结果吸烟大鼠各组内皮素1及脑内皮素1特异性受体表达均明显高于正常对照组(P<0.01),长期大量吸烟组明显高于其他各吸烟组,戒烟组明显低于短期大量吸烟组。吸烟可致脑血管内皮细胞超微结构变化,并可见凋亡细胞,长期大量吸烟组较其他各吸烟组改变明显。结论吸烟可引起脑血管内皮细胞损伤,使内皮素1表达上调。戒烟可使上述改变明显恢复。内皮细胞损伤、内皮素1表达上调在吸烟对脑损伤中起重要作用,是吸烟引起脑血栓的重要途径之一。     

不同吸烟时间大鼠气道上皮细胞4-羟基壬烯醛和转化生长因子β1表达的研究

目的研究不同吸烟时间对大鼠气道上皮细胞4-羟基壬烯醛（4-hydroxynonenal,4-HNE）和转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）表达的影响,探讨吸烟所致慢性气道炎症性疾病中氧化应激和气道重塑的关系。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、短期吸烟组和长期吸烟组,每组10只。采用免疫组织化学法半定量检测各组支气管上皮细胞4-HNE和TGF-β1的表达。结果短期吸烟组（0.204±0.017）和长期吸烟组（0.264±0.022）4-HNE表达均较对照组（0.174±0.017）增高（P值均〈0.05）,长期吸烟组较短期吸烟组表达升高（P〈0.05）。短期吸烟组（0.199±0.021）和长期吸烟组（0.247±0.025）TGF-β1表达均较对照组（0.175±0.018）增高（P值均〈0.05）,长期吸烟组较短期吸烟组表达升高（P〈0.05）。TGF-β1和4-HNE表达水平呈正相关（r=0.935,P〈0.01）。结论吸烟可以引起大鼠气道上皮细胞4-HNE和TGF-β1的表达水平升高,二者表达水平呈正相关,且随吸烟时间的增加表达水平增加。     

吸烟对致敏大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及其抑制剂1表达的影响

目的 通过观察吸烟对致敏大鼠肺组织基质相关因子基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metallopmteinase-1,TIMP-1)表达的影响,探讨吸烟在支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑中的作用.方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、致敏组和吸烟致敏组,每组8只.后两组用卵白蛋白(OVA)致敏并长期(8周)吸人激发,制备哮喘模型,在激发第3周开始,吸烟致敏组大鼠置于自制熏箱内进行被动吸烟.采用免疫组织化学法检测大鼠气道上皮细胞MMP-9、TIMP-1的蛋白表达,同时测量支气管壁的厚度,并用逆转录-聚合酶链反应法检测各组肺组织的MMP-9 mRNA、TIMP-1 mRNA含量.结果 ①吸烟致敏组气道壁厚度[(23.28±2.38)μm2/μm]明显高于致敏组[(20.06±2.94)/μm2/μm]和对照组[(11.64±2.42)μm2/μm](P值均＜0.05),致敏组高于对照组(P＜0.05),②吸烟致敏组肺组织中MMP-9 mRNA表达(0.49±0.02)和气道上皮细胞MMP-9蛋白含量(32.78±2.60)均明显高于致敏组(0.41±0.04,23.05±2.11)和对照组(0.23±0.03,15.88±1.69)(P值均＜0.01),致敏组高于对照组(P值均＜0.01),③吸烟致敏组肺组织中TIMP-1mRNA表达(0.53±0.02)和气道上皮细胞TIMP-1蛋白含量(34.54±2.90)均高于致敏组(0.37±0.05,21.25±2.28)和对照组(0.235=0.04,15.78±1.97)(P值均＜0.01),致敏组高于对照组(P值均＜0.01);④肺组织MMP-9/TIMP-1 mRNA比值:吸烟致敏组(0.91±0.05)低于致敏组(1.12±0.06)和对照组(1.03±0.09)(P值均＜0.01).致敏组高于对照组(P＜0.01),⑤气道上皮细胞MMP-9/TIMP-1蛋白含量比值:吸烟致敏组(0.94±0.03)低于致敏组(1.09±0.07)和对照组(1.01±0.06)(P＜0.05,P＜0.01),致敏组高于对照组(P＜0.01).结论 吸烟可使致敏大鼠肺组织MMP-9和TIMP-1过度表达,比例失调,加重气道重塑.     

被动吸烟对致敏大鼠气道5-脂氧合酶及其mRNA表达的影响

目的 通过研究吸烟对致敏大鼠气道5-脂氧合酶及其mRNA表达的影响,探讨吸烟对支气管哮喘（简称哮喘）气道炎症的影响,从而为临床上治疗吸烟哮喘提出实验依据.方法 雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、致敏组和吸烟致敏组,每组10只.后两组应用卵白蛋白致敏并长期（8周）吸入激发,制备哮喘模型;在激发第3周开始,将吸烟致敏组大鼠置于自制熏箱内进行被动吸烟.采用免疫组织化学及原位杂交法检测各组大鼠气道5-脂氧合酶蛋白及其mRNA的表达.结果 ①吸烟致敏组气道5-脂氧合酶蛋白的表达（32.58±2.78）明显高于致敏组（21.65±2.12）和对照组（15.38±1.68）,差异有统计学意义（P值均＜0.01）;致敏组高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）;②吸烟致敏组气道5-脂氧合酶mRNA的表达（34.68±2.90）高于致敏组（23.55±2.28）和对照组（15.78±1.72）,差异有统计学意义（P值均＜0.01）;致敏组高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 吸烟可使致敏大鼠气道5-脂氧合酶及其mRNA表达增多,加重气道炎症.     

吸烟鼠脑血管内皮细胞间粘附分子1的表达在动脉粥样硬化形成中的作用

为观察吸烟对大鼠脑血管内皮细胞超微结构、细胞间粘附分子 1表达的影响 ,建立大鼠吸烟动物模型 ,将 75只大鼠随机分为长期大量组、长期小量组、短期大量组、戒烟组和对照组 ,免疫组织化学和原位杂交结合显微图像分析系统检测大鼠脑血管内皮细胞细胞间粘附分子 1的表达 ;电镜观察内皮细胞超微结构的改变。结果发现 ,吸烟大鼠脑血管内皮细胞细胞间粘附分子 1表达增加 (P <0 .0 5 ) ,与吸烟量和时程存在剂量—效应关系 ;内皮细胞超微结构改变显著。戒烟鼠细胞间粘附分子 1表达下调 (P >0 .0 5 ) ,内皮细胞超微结构病理改变明显恢复。结果提示 ,吸烟致脑血管内皮细胞细胞间粘附分子 1表达上调可能是吸烟导致动脉粥样硬化的分子机制之一。     

不同吸烟时间大鼠气道上皮细胞4-羟基壬烯醛和转化生长因子β1表达的研究

目的 研究不同吸烟时间对大鼠气道上皮细胞4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响,探讨吸烟所致慢性气道炎症性疾病中氧化应激和气道重塑的关系.方法 雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、短期...     

核因子κB、细胞间粘附分子1在吸烟大鼠气道上皮细胞中的表达

目的　探讨核因子κB (NF κB)和细胞间粘附分子 1 (ICAM 1 )在吸烟大鼠气道上皮细胞中表达的变化及其在气道炎症形成过程中的作用。方法　Wistar大鼠 39只 ,随机分为不吸烟组、吸烟1个月组、3个月组 ,每组 1 3只。采用免疫组织化学染色和原位杂交技术半定量检测各组NF κB亚单位p65和ICAM 1的表达。结果　 (1 )吸烟 1个月组、3个月组细支气管上皮细胞NF κB核染色阳性细胞百分比为 (63± 4) %、(51± 5) % ,与不吸烟组 [(2 7± 5) % ]比较 ,差异有显著性 (P分别 <0 .0 1 ) ;(2 )吸烟 1个月组、3个月组主、细支气管气道上皮细胞ICAM 1mRNA的表达为 0 .645± 0 .0 38、0 .747±0 0 4 1、0 .688± 0 .0 62、0 .80 9± 0 .0 2 3 ,与不吸烟组 (0 .52 6± 0 .0 2 3、0 .635± 0 .0 4 4 )比较差异有显著性 (P分别 <0 .0 1 ) ;而且 3个月组与 1个月组比较差异也有显著性 (P分别 <0 .0 5、0 .0 1 ) ;(3)吸烟 1个月组、3个月组主、细支气管气道上皮细胞ICAM 1蛋白表达为 0 .73± 0 .0 4、0 .94± 0 .0 5、0 .77± 0 .0 4、0 .99± 0 .0 3 ,与不吸烟组 (0 .57± 0 .0 4、0 .83± 0 .0 4 )比较 ,差异也有显著性 (P分别 <0 .0 1 ) ;而且 3个月组与 1个月组比较差异也有显著性 (P分别 <0 .0 5) ;(4)各组细支气管上皮     

吸烟对致敏大鼠气道组蛋白去乙酰化酶2及血清中白介素8表达的影响

目的 通过研究吸烟对致敏大鼠气道组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylasese2,HDAC2)及血清中自介素8(interleukin-8,IL-8)表达的影响,探讨吸烟支气管哮喘(简称哮喘)气道炎症的特点.方法 雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、致敏组和吸烟致敏组,每组10只.后两组应用卵白...     

烟雾暴露对大鼠肺血管细胞间黏附分子-1和基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的 观察不同烟雾暴露量及断烟对大鼠肺血管形态、炎症和重塑的影响.方法 8周龄清洁级雄性Wistar大鼠32只,随机数字表法分为对照组、烟雾1组、烟雾2组和断烟组,每组8只.建立大鼠被动吸烟模型.分别测量各组大鼠肺血管管肇厚度占血管外径的百分率(WT%)及管壁面积占血管总面积的百分率(WA%);免疫组织化学染色检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在肺血管壁的表达,原位杂交法检测ICAM-1及MMP-9 mRNA在肺血管壁的表达,并分析各指标的相关性.结果 烟雾1组和烟雾2组肺血管的WT%[(15.3±2.1)%、(18.0 ±2.0)%]、WA%[(41±7)%、(50±7)%]均明显高于断烟组[(11.0±1.3)%、(35±5)%]和对照组[(10.4±2.0)%、(30±4)%],差异均有统计学意义(q值为4.93～11.16,P<0.05);烟雾1组和烟雾2组肺血管ICAM-1蛋白表达的阳性单位比值[(12.9±2.3)、(19.2±2.3)]及mRNA表达[(10.3±2.2)、(18.3±2.4)]均明显高于断烟组[(7.9±3.2)、(6.2±3.0)]和对照组[(4.7±2.3)、(2.7±1.7)],差异均有统计学意义(q值为3.28～15.76,P<0.05);烟雾1组和烟雾2组肺血管MMP-9蛋白表达的阳性单位比值[(16.1±2.8)、(22.5±3.5)]及mRNA表达[(12.5±1.8)、(20.0±3.1)]均明显高于断烟组[(12.0±2.8)、(7.0±3.4)]和对照组[(7.8±3.0)、(3.2±2.8)],差异均有统计学意义(q值为3.19～14.22,P<0.05);肺血管ICAM-1和MMP-9 mRNA表达与WT%和WA%均呈显著正相关(r值为0.619～0.703,P<0.05).结论 烟雾暴露可导致大鼠肺血管管壁增厚,上调肺血管细胞ICAM-1、MMP-9的表达,介导肺血管炎症及重塑,参与肺动脉高压的发生.戒烟后上述肺血管损害有所改善.