Effect of Allicin in antagonizing mice’s bladder cancer in vitro and in vivo

Objective To explore anti-tumor effect and mechanism of Allicin in treating murine bladder tumor.Methods: To observe Allicin’s effect on MBT-2 tumor cells in vitro, 100 ⧎g/ml Allicin was added to the tumor cell culture, and the morphology of tumor cells was observed by phase contrast microscope 6 hrs later. The direct effects of Allicin on tumor cell growth in vitro in the MTT Assay was also evaluated. To determine anti-tumor effect of Allicin in vivo, C3H/He mice were randomly grouped prior to initiation of experiment. The mice received 1 × 10⁵ MBT-2 cells administered subcutaneously into the right posterior flank on the Day 0 the experiment started. Allicin was injected at the site near tumor transplantation on the Day 1. The mice were examined for tumor development and the tumors were measured in two dimensions with calipers twice a week. On Day 21 the tumors were resected and examined pathologically to see the immune response.Results: The observation of morphology of MBT-2 cells in vitro and MTT assay indicated that Allicin has apparent direct cytotoxicity to bladder cancer cells. In high dosage group, a marked delay was shown in the appearance and growth of tumors after subcutaneously injection when compared with the control group (P< 0.01). Histology studies suggested that there were more macrophages, lymphocytes and fibroblasts at the peri-tumor region than the control group.Conclusion: Allicin has a marked tumor inhibitory effect on bladder tumor. This effect could possibly be related to direct cytotoxicity and activation of immune response. It could as possibly prove to be an effective intravesical treatment agent for superficial bladder cancer. The project was sponsored by the Scientific Research Foundation for the Returned Overseas Chinese Personnels, State Education Ministry (Grant No. 247)     

B7.1转基因肿瘤疫苗与大蒜素联合治疗膀胱癌的初步研究

目的初步估计大蒜素与B7.1转基因肿瘤疫苗对膀胱肿瘤的联合抗肿瘤效果.方法采用脂质体将B7.1基因导入鼠膀胱肿瘤(MBT-2)细胞.B7.1分子的表达经免疫荧光染色而测得.利用混合淋巴细胞培养MTT法,观察MBT-2-B7.1细胞刺激脾淋巴细胞的增殖作用.用MTT法测定了大蒜素对肿瘤细胞体外生长的影响.通过动物实验测定该肿瘤疫苗与大蒜素对膀胱肿瘤的联合治疗效果.结果转染了B7.1基因的肿瘤细胞能有效地刺激脾淋巴细胞增殖.当与大蒜素联合应用时,明显延迟了肿瘤的发生,并有效抑制了肿瘤的生长.结论大蒜素与转基因肿瘤疫苗治疗相结合能显著增强抗肿瘤效果.     

中西医结合治疗膀胱肿瘤的基础研究

目的：探讨转基因肿瘤疫苗与大蒜素联合治疗膀胱肿瘤的效果与机理.方法：脂质体转染法将B7.1基因导入鼠膀胱肿瘤（MBT-2）细胞.免疫荧光染色测定B7.1分子的表达.混合淋巴细胞培养MTT法和LDH释放法观察对免疫系统的影响.MTT法测定大蒜素对肿瘤细胞生长的影响.动物实验测定联合治疗效果.结果：B7.1转基因肿瘤疫苗能有效刺激淋巴细胞增殖.与大蒜素能产生协同抗癌效果.这种协同抗癌效果与淋巴细胞的特异性杀伤活性有关.结论：转基因肿瘤疫苗与大蒜素合用有更好的抗肿瘤效果.     

散结抗瘤方体内和体外抑瘤作用的实验研究

目的 探讨散结抗瘤方体内和体外抗肿瘤的可能机制。方法体内实验：对荷瘤小鼠（SRS-82瘤株）用散结抗瘤方煎剂灌胃,计算抑瘤率,电镜下观察肿瘤细胞形态,并提取肿瘤细胞DNA做琼脂糖凝胶电泳。体外实验：传代培养SRS-82细胞,用散结抗瘤方含药血清干预细胞后,检测活细胞数、细胞凋亡率、Bcl-2蛋白MMP-2mRNA的表达强度。结果与空白对照组比较,散结抗瘤方组瘤重显著减轻,电镜下可见肿瘤细胞出现凋亡特征性改变;细胞活力明显降低．细胞凋亡率明显升高,细胞Bcl-2蛋白的表达强度降低。结论散结抗瘤方在体内有明显的抑瘤作用。在体外对肿瘤细胞也有明显的抑制增殖作用。该方抑瘤作用可能与其诱导肿瘤细胞凋亡密切相关,机制可能与下调抑制凋亡基因Bcl-2的表达有关。散结抗瘤方对肿瘤细胞MMP-2的表达没有影响。     

天南星抗肿瘤的初步研究

目的观察天南星的抗肿瘤作用。方法体内实验:建立小鼠H22肝癌皮下移植模型,灌胃给予天南星粉,2次/d,监测小鼠体质量,检测肿瘤体积、质量以及免疫器官指数,评价天南星对肿瘤生长的影响;体外实验:采用MTT法测定天南星水煎液对lewis肺癌细胞生长的影响。结果体内试验:在本实验剂量下(100g/L),与对照组比较,天南星灌胃可使肿瘤生长减慢,抑瘤率为34.7%,给药期间不影响小鼠生长状态,胸腺指数和肝脏指数略微降低,脾脏指数升高;体外实验:天南星水煎液在实验剂量下对lewis肺癌细胞生长无影响。结论天南星有抗肿瘤作用,其抗肿瘤作用不是直接细胞毒作用。     

环氧合酶-2抑制剂美洛昔康对人膀胱癌T24细胞体内外生长的影响

目的:探讨选择性环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂美洛昔康对膀胱癌T24细胞生长的体内外抑制作用.方法:RT-PCR检测人膀胱癌T24细胞株COX-2 mRNA表达,应用四唑氮蓝还原法研究选择性COX-2抑制剂美洛昔康对膀胱癌细胞T24生长的体外抑制作用.观察美洛昔康对裸鼠T24细胞移植瘤生长的体内抑制作用.结果:膀胱癌细胞株124中检测出了COX-2的表达,美洛昔康体外抑制膀胱癌细胞株T24的增殖呈剂量依赖性,体内抑瘤率达61.2%.各组裸鼠的体内实验中未见明显不良反应.结论:选择性COX-2抑制剂在体内外对膀胱癌T24细胞生长均具有显著的抑制作用,提示其可用于膀胱癌的防治.     

灯盏花素改善肿瘤化疗药物对小鼠lewis肺癌的治疗指数

目的:观察灯盏花素对肿瘤化疗药物治疗效果的影响。方法:MTT法检测灯盏花素体外对阿霉素、环磷酰胺或氟脲嘧啶诱导脾脏细胞凋亡的保护作用;将lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠皮下和肺,采用灯盏花素联合阿霉素、环磷酰胺或氟脲嘧啶治疗小鼠,观察肿瘤大小、外周血细胞数、骨髓细胞数、脾细胞凋亡、及小鼠存活时间。结果:灯盏花素体外对阿霉素、环磷酰胺或氟脲嘧啶诱导的脾脏细胞凋亡有保护作用。在体研究,治疗组均有比未治疗组不同比例的肿瘤生长减慢,单独化疗导致骨髓细胞和外周血细胞数减少、脾细胞凋亡增加。实验结束时,与单一药物治疗相比,灯盏花素联合化疗均能显著延长小鼠存活时间。单独化疗虽比未治疗组小鼠存活时间稍长,但无统计学差异。结论:单独化疗对伴随肿瘤转移的荷瘤小鼠生命延长无实际意义,灯盏花素能改善肿瘤化疗药物的治疗指数。     

基于生物大数据库分析并验证附子去甲乌药碱抗肿瘤潜在作用机制

目的?以附子主要活性成分之一去甲乌药碱为代表,探究附子治疗肿瘤的作用及其可能的机制。方法?利用预测分析工具BATMAN-TCM及多种生物数据库预测去甲乌药碱调控肿瘤发生发展的可能机制;并通过体内外实验进行效应及机制的验证。结果?数据库分析显示,去甲乌药碱可能直接调控肿瘤细胞增殖、凋亡,或通过影响心脏功能而间接影响肿瘤发生发展;动物实验表明,去甲乌药碱可显著减小结肠癌皮下移植瘤的体积（P<0.05）,促进瘤组织中肿瘤细胞的凋亡,并能显著提高结肠癌模型裸鼠体内心钠肽（ANP）水平（P<0.01）,但细胞实验发现去甲乌药碱对肿瘤细胞无直接杀伤作用。结论?附子主要活性成分之一去甲乌药碱可抑制结肠癌皮下移植瘤的生长,诱导其凋亡,从而发挥抗肿瘤作用,其机制可能与促进心脏肽类激素ANP的释放有关,可为中医临床使用附子治疗恶性肿瘤提供一定的理论依据,但附子的毒性与抗肿瘤的关系还有待进一步研究。      

青蒿素增敏复方抑制肿瘤细胞增殖及延缓荷瘤裸鼠移植肿瘤生长的研究

[目的]提高青蒿素抗肿瘤效率,阐明青蒿素增敏复方的抑瘤增敏机理.[方法]采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定各药物对人肝癌细胞株HepG2细胞的生长抑制率;经皮下接种HepG2细胞进行荷瘤裸鼠造模,测定给药15 d后瘤体质量,计算抑瘤率.[结果]青蒿琥酯配伍马来酸二乙酯、巯基琥珀酸和氨基三唑后,肿瘤细胞的生长抑制率较相同浓度的青蒿琥酯单方高43.84%,抑瘤率较青蒿琥酯单方提高近3倍.HepG2细胞中抗氧化剂含量及抗氧化酶活性测定结果表明,空白组的测定值均高于单方组和复方组,而复方组的测定值低于单方组.[结论]青蒿素增敏复方可能通过降低抗氧化剂含量及抑制抗氧化酶活性发挥抗肿瘤增敏作用.     

重组hIFN-α-2b-BCG抗肿瘤效应的体外研究

目的:了解重组hIFN-α-2b-BCG (rBCG) 体外抗肿瘤的作用效果和作用机制。方法:体外共培养后,透射电镜观察不同时间点rBCG对人膀胱肿瘤EJ细胞的影响。吖啶橙染色观察各组肿瘤细胞形态。MTT法检测rBCG对肿瘤细胞生长抑制率。ELISA检测rBCG作用后淋巴细胞分泌Th1型细胞因子水平。LDH释放试验检测rBCG激活的淋巴细胞对肿瘤细胞杀伤效应。结果:BCG和rBCG作用后的肿瘤细胞在透射电镜下和吖啶橙染色后均有显著变化。MTT显示rBCG的生长抑制率显著高于BCG和BCG+IFN组。rBCG对淋巴细胞分泌Th1型细胞因子有影响,同时rBCG激活的淋巴细胞对膀胱肿瘤细胞的杀伤作用。结论:重组BCG在体外有优于BCG的免疫调节特性、抗肿瘤作用和直接细胞毒作用。     

松树皮原花青素的抗肿瘤作用研究

目的对松树皮原花青素的体内外抗肿瘤作用进行研究。方法采用MTT比色法观察松树皮原花青素体外对多种人肿瘤细胞株的抑制作用,采用小鼠移植性肿瘤模型考察了松树皮原花青素对小鼠S180肉瘤和EAC腹水癌的抑制作用。结果松树皮原花青素对多种人肿瘤细胞均有较强的抑制作用,最高抑制率达60%左右;松树皮原花青素200 mg/kg的剂量能显著抑制小鼠S180肉瘤的生长,抑瘤率达42.3%,但其对EAC腹水癌小鼠的生存时间无明显影响。结论松树皮原花青素体内外均有一定的抗肿瘤作用。      

苦参碱对小鼠H22细胞抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察苦参碱在体内和体外的抗肿瘤作用.方法:MTT法检测苦参碱对小鼠腹水瘤细胞H22的体外杀伤作用;Annexin V-FITC/PI双标记法检测苦参碱对体外培养的H22细胞的诱导凋亡作用;在BALB/C小鼠H22移植瘤模型上观察苦参碱的体内抑瘤活性,透射电镜观察苦参碱治疗后荷瘤小鼠肝癌细胞的超微结构改变;免疫组化法检测荷瘤小鼠肝癌组织中Bcl-2、Bax蛋白表达.结果:苦参碱在体外能够明显抑制H22细胞的生长和增殖,并可诱导细胞凋亡;对小鼠肿瘤生长也有明显抑制作用,高、低浓度组抑瘤率分别为60.71%和62.53%;用药组小鼠肿瘤组织中,电镜下可见较为典型的细胞凋亡的形态学改变;肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达增强,与荷瘤对照组相比有显著性差异(P＜0.01).结论:苦参碱在体内外对H22肿瘤细胞生长均有抑制作用,同时可促进肿瘤细胞表达Bax蛋白,抑制Bcl-2表达,诱导肿瘤细胞凋亡.     

复方马钱子的抗肿瘤作用探讨

目的探讨复方马钱子的抗肿瘤作用。方法采用小鼠H22肝癌皮下移植肿瘤模型,通过检测原位肿瘤、免疫器官指数及Na+、K+、Cl-、葡萄糖含量,评价复方马钱子的毒性及抗肿瘤作用。采用MTT法检测复方马钱子对淋巴细胞和HCT-116癌细胞增殖的影响。结果复方马钱子在实验剂量下,与模型对照组比较,治疗组的肿瘤生长减慢,荷瘤小鼠免疫器官指数降低,血清中K+、Cl-、葡萄糖含量显著增加,Na+浓度不受影响。体外实验表明,复方马钱子对HCT-116癌细胞有一定的抑制作用,但对淋巴细胞增殖无影响。结论复方马钱子有一定的抗肿瘤作用,可调节体内电解质、葡萄糖含量使趋于正常。     

肿瘤细胞体外耐药与体内化疗疗效关系的实验研究

目的通过动物实验探讨恶性肿瘤体内化疗的疗效与肿瘤细胞体外药物敏感性预测的关系。方法采用浓度梯度递增法制备小鼠淋巴瘤EIA耐药细胞系EIA／美法仑,四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测其在体外对美法仑的耐药指数。利用单一剂量化疗药物治愈荷瘤小鼠的动物模型,将等量EIA／美法仑和EIA细胞分别接种在野生型C57BL／6小鼠皮下,接种后12d,荷EIA／美法仑肿瘤小鼠和荷EIA肿瘤小鼠分别再随机分为美法仑治疗组和对照组,每组各5只。美法仑治疗组荷瘤小鼠腹腔内单次注射7．5mg／kg的美法仑,对照组荷瘤小鼠腹腔内注射等量生理盐水。随后观察各组荷瘤小鼠肿瘤结节直径的变化。结果EIA／美法仑耐药细胞和EIA细胞形态上肉眼无明显区别,EIA／美法仑细胞可在含5μg／ml美法仑的培养基中长期存活,其对美法仑的耐药指数为2．87。动物体内实验发现7．5mg／kg美法仑不仅能使荷EIA肿瘤小鼠的肿瘤结节消退,而且也能使荷EIA／美法仑肿瘤小鼠的肿瘤治愈。结论恶性肿瘤体内化疗的疗效与肿瘤细胞在体外是否对该化疗药物耐药无关,在体外对美法仑耐药的肿瘤细胞对美法仑的体内治疗仍敏感。     

姜黄素-聚维酮固体分散体的抗肿瘤作用 及其对血管形成的影响

目的：观察姜黄素-聚维酮固体分散体新剂型（Cur-K30）的体内外抗肿瘤作用及其对肿瘤血管形成的影响。方法：应用MTT法测定Cur-K30体外对多种肿瘤细胞的抑制作用;观察Cur-K30不同剂量［50,100,200 mg/(kg·d)］口服给药对小鼠荷瘤模型的抑瘤作用;应用免疫组织化学方法检测瘤组织的微血管密度（CD34）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达,并应用Imageproplus免疫组织化学软件定量分析。结果：Cur-K30抑制多种肿瘤细胞的增殖,其48 h的IC50为6.6～12.12 μg/mL;200 mg/(kg·d) Cur-K30灌胃对小鼠肝癌H22移植瘤、小鼠黑色素瘤B16移植瘤和裸鼠SW480的抑制率分别为43.2%,53.1%, 59.8%,抑瘤率高于同剂量姜黄素（Cur）混悬液灌胃组,差别均具有统计学意义(P<0.01);200 mg/(kg·d) Cur-K30组的瘤组织中CD34和VEGF的表达较对照组明显下调（P<0.01）。结论：Cur-K30具有明显的体内抗肿瘤作用,其对裸鼠人癌细胞SW480移植瘤的抑制作用显著。Cur-K30的抗肿瘤作用可能与其下调瘤组织中VEGF的表达及抑制肿瘤血管生成有关。     

Oncolytic herpes simplex virus vectors for the treatment of human breast cancer

Background Oncolytic herpes simplex virus (HSV) vectors can be used for cancer therapy as direct cytotoxic agents, inducers of anti-tumor immune responses, and as expressers of anti-cancer genes. In this study, the efficacy of HSV vectors, G47△ and NV1023 were examined for the treatment of the human breast cancer.Methods Human breast cancer MDA-MB-435 cells were cultured or implanted subcutaneously in BALB/c nude mice. The cells or tumors were inoculated with G47△ or NV1023, and cell killing or inhibition of tumor growth determined. Both viruses contained the LaeZ gene and expression in infected cells was detected with X-gal histoehemistry.Results G47△ and NV1023 were highly eytotoxie to MDA-MB-435 cells in vitro at very low multiplicities of infection. X-gal staining of infected tumor cells in vitro and in vivo illustrated the replication and spread of both viruses. G47△ and NV1023 inoculation inhibited tumor growth and prolonged mouse survival. Both vectors behaved similarly.Conclusions Oncolytic HSV vectors, G47△ and NV1023, were extremely effective at killing human breast cancer cells in vitro and in tumor xenografts in vivo. This novel form of cancer therapy warrants further investigation and consideration of clinical application.     

三氧化二砷联合全反式维甲酸对小鼠肝癌细胞H22及移植瘤的抑制作用

目的探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)联合全反式维甲酸(all trans retinoic acid,ATRA)在体内和体外对小鼠肝癌H22细胞的抑制作用.方法建立小鼠肝癌H22移植瘤模型,观察As2O3联合ATRA的体内抑瘤作用;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)方法测定As2O3联合ATRA在体外对小鼠肝癌H22细胞株的生长抑制作用.结果 As2O3联合ATRA在体外能明显抑制H22细胞的生长和增殖,抑制率为52.24%;在体内对H22小鼠的肿瘤体积、重量均有明显的抑制作用,抑制率分别为66.25%、62.07%.结论 As2O3和ATRA在体内和体外对H22肿瘤细胞的生长均有抑制作用,联合应用作用加强,有协同作用.     

蒿甲醚对胰腺肿瘤细胞的抑制作用

目的观察蒿甲醚(ART)在体外对人胰腺癌SW-1990细胞的杀伤作用和对细胞增殖和凋亡的影响,以及在体内对荷瘤裸鼠移植瘤的抑制作用。方法采用MTT法检测ART对SW-1990细胞的杀伤作用;采用流式细胞仪检测ART对SW-1990细胞周期和凋亡的影响。建立人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,通过测量裸鼠体质量、移植瘤瘤径和瘤质量,计算肿瘤体积和抑瘤率,观察ART在体内的抗肿瘤活性。结果MTT结果显示,ART对SW-1990细胞的杀伤作用与时间-剂量呈正相关(P<0.05);流式细胞仪检测显示,ART使SW-1990细胞阻滞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡;荷瘤裸鼠体内实验显示,中、高剂量的ART(4、8 mg)对裸鼠移植瘤的生长抑制效果显著(P<0.05),抑瘤率分别为48.10%和53.51%。结论ART在体外及荷瘤裸鼠体内对SW-1990细胞有明显的抑制作用;其抑制作用与阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡有关。     

MTT法指导分离壁虎抗肿瘤活性成分的实验研究

目的 采用四氮唑盐（MTT）法指导壁虎抗肿瘤活性成分的分离,寻找壁虎抗肿瘤活性单体化合物,并初步观察其抗肿瘤作用.方法 常规培养人肝癌Bel-7402细胞、人肺癌Bel-95C细胞,在倒置显微镜下观察细胞形态及数量,采用MTT法检测多批次壁虎活性成分提取物对体外培养的肿瘤细胞株的生长抑制作用,计算肿瘤抑制率.结果 经过11批次重复药筛实验,逐步分梯次指导分离纯化,得到壁虎抗肿瘤活性单体化合物＂守宫咪唑衍生物＂.该化合物可明显抑制人肝癌Bel-7402细胞的生长,用药后前3d的抑瘤率分别为71.24%,91.37%,94.45%,在显微镜下发现肿瘤细胞变圆、体积变小.结论 用MTT法结合倒置显微镜观察细胞状态,指导中药壁虎抗肿瘤活性成分的提取分离,得到抗肿瘤作用明显的壁虎单体化合物.     

五种中药提取物抗肿瘤作用的研究

目的：探讨五种中药（黄芪、枸杞子、女贞子、内苁蓉、蒲公英）单味提取物的抗肿瘤作用。方法：采用MTT法，观察五种中草药对肝癌细胞、大肠癌Lovo细胞体外增殖的抑制作用。通过小鼠腋下接种S180肿瘤细胞，观察五种中草药对实体瘤重的影响。结果：五种中草药在体外对肝癌细胞、大肠癌Lovo细胞的增殖有明显的抑制作用。在体内，对肿瘤细胞有明显的抑制作用。结论：五种中苹药对肿瘤细胞的体外体内增殖有明显抑制作用，提示对肿瘤的治疗可能有一定的应用价值。