当归多糖诱导L—细胞产生造血生长因子的实验研究

用造血祖细胞体外培养，造血生长因子检测和流式细胞术等方法。研究当归多糖诱导Ｌ－细胞（成纤细胞株）产生造血和在子及其对知细胞姓的调节作用，结果表明，Ｌ－细胞条件培养液对造血祖细胞的体外增殖呈双向调节作用；１０％ＬｃＣＭ能促进骨髓造血细胞进入增殖活跃的Ｓ＋Ｍ／Ｇ２期；经ＡＰ诱导制备的ＬｃＣＭ的有或无外源性造血生长因子存在时均对造血祖细胞的克隆增殖显示较高刺激活性；ＡＰ或ＩＬ－１与造血生长因子间似无协同     

人参总皂甙诱导L—细胞产生造血调节因子的实验研究

为探讨中药人参的重要有效成分人参总皂甙（TotalSaponinsofPanaxGinseng，TSPG）调节造血的可能机制，在体外祖细胞培养中以TSPG诱导（LCCMTSPG）或未经诱导（LSCM）的L—细胞条件培养液替代祖细胞生长因子，观察集落产率的变化，并与TSPG和LcCM共同作用（LcLM＋TSPG）后的集落产率作比较。结果如下：LcCMTSPG作用后的CFU－GM（位—单系祖细胞）、BFU－E（早期红系祖细胞）、CFU－E（晚期红系祖细胞）的集落产率分别为24．8±9．01、61．73±11．26、145．93±17．22，与LcCM组（51．85±10．08、33．95±825、108．66±13．56）相比分别为下降（P＜0．05）、提高（P＜0．01）、提高（P＜0．01）。提示TSPG可诱导L—细胞产生选择性作用于粒—单系的造血抑制因子和作用于红系的生长因子。LCCM＋TSPG作用后CFU－GM、BFU－E、CFU－E集落产率分别为74．25±10．67、42．5±9．32、98±10．81，与LcCM组相比分别为提高（P＜0．05）、提高（P＜0.05）、无变化，提示TSPG可能与LcCM中促进CFU－E、BFU—E生长的因子协同作用。该研究表明TSPG可经影响基质细胞产生造血调节因子或与造血调节因子共同调节血细胞发生。     

当归多糖对人髓系多向造血祖细胞增殖分化的影响及其机理研究

目的 :研究“补血活血”要药当归的主要有效成分 当归多糖 (APS)对人早期血细胞发生的影响及其调控机理。方法 :采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学、核酸探针原位杂交等实验技术。结果 :APS在体外可促进髓系多向造血祖细胞CFU GEMM增殖分化 ;APS诱导制备的骨髓基质细胞、内皮细胞、单核细胞培养上清液富含造血生长因子活性 ;APS可促进骨髓基质细胞、内皮细胞、单核细胞表达GM CSF、IL 3蛋白 ,并对骨髓基质细胞表达GM CSF、IL 3mRNA有上调作用。结论 :APS可能通过促进造血微环境中的基质细胞表达和分泌GM CSF、IL 3等造血生长因子 ,促进人早期造血细胞发生 ,这可能是当归“补血活血”的分子生物学机理之一     

人参总皂甙诱导造血生长因子生成的实验研究

为探讨人参“补气生血”的现代生物学机理，采用造血祖细胞体外培养，造血生长因子生物活性检测等技术，研究人参总皂甙（ＴＳＰＧ）对造血生长因子的诱导生成作用。结果表明，经ＴＳＰＧ诱导分别制备的脾细胞、巨噬细胞、成纤维细胞和骨髓基质细胞的培养上清对髓系造血祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ）的体外集落增殖均有显著刺激作用。ＴＳＰＧ也能促进脾细胞、成纤维细胞和巨噬细胞分泌ＩＬ－６；刺激脾细胞产生     

当归多糖对人粒单系造血祖细胞增殖分化的调控机理研究

目的：研究当归多糖（APS）对人粒单系血细胞发生的影响及其调控的机理。方法：采用造血祖细胞体外培养,造血生长因子生物活性检测,核酸分子原位杂交和免疫细胞化学等实验血液学技术,研究ASP对人粒单系造血祖细胞（CFU－GM）增殖分化的影响。结果：APS在体外能显著刺激CFU－GM的增殖;经APS诱导制备的人胸腺细胞,腺细胞、骨髓基质细胞条件培养液能明显促进CFU－GM增殖,经APS体外刺激后骨髓基质细胞、脾细胞和胸腺细胞的GM－CSF蛋白和mRNA表达水平显著提高。结论：APS可能通过直接或间接途径促进淋巴细胞和造血微环境中的基质细胞合成和分泌GM－CSF或GM－CSF样物质,进而促进粒单系血细胞的发生。     

分枝杆菌多糖对小鼠骨髓造血祖细胞GM—CPU的影响

对分枝杆菌多糖促进小鼠骨髓造血祖细胞形成ＧＭ－ＣＦ的量效关系进行了实验研究。结果表明，给予不同剂量的ＭＰＳ使ＧＭ－ＣＰＵ提高的水平在一定剂量范围内（０．６￣１．０ｍｇ／ｋｇ）随剂量增加而升高，剂量大于１．２ｍｇ／ｋｇ时不再继续升高。共进行３批试验，重复性好（Ｐ〉０．０５），说明ＭＰＳ的升白作用具有一定的量效关系。     

当归多糖对小鼠衰老造血干细胞细胞周期蛋白的调控

目的观察当归多糖(ASP)对小鼠造血干细胞(HSC)细胞周期调控蛋白表达的影响,探讨ASP调控HSC衰老的可能机制。方法 C57BL/6J小鼠随机分为对照组、衰老组、ASP干预对照组和ASP干预衰老组,衰老组采用X线全身均匀照射,建立小鼠HSC衰老模型;ASP干预衰老组在照射期间给予ASP灌胃;对照组和ASP干预对照组分别给予NS和ASP灌胃。免疫磁珠分离HSC,β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色和混合集落培养(CFU-Mix)观察HSC生物学特性变化;流式细胞术分析细胞周期;Western blot检测P16、P21、CDK2、CDK6、CyclinD及CyclinE表达。结果与对照组比较,X线能显著增加衰老对照组HSC SA-β-Gal染色阳性率、G1期比例及P16、P21表达;降低CFU-Mix、S期比例及CDK6、CyclinD和CyclinE表达。与衰老组比较,ASP能显著抑制衰老HSC SA-β-Gal染色阳性率、G1期比例及P16和P21表达的增加;抑制S期比例、CFU-Mix、CDK6、CyclinD及CyclinE表达的减少;而对CDK2表达无影响。结论 ASP可能通过调节P16、P21、CDK6、CyclinD及CyclinE表达延缓小鼠HSC衰老。     

当归多糖对小鼠粒单系血细胞发生的影响

采用造血祖细胞体外培养等技术研究当归多糖(AP)对小鼠粒单系血细胞发生的影响.结果表明:注射AP对正常或骨髓抑制,贫血鼠的粒单系祖细胞(CFU-GM)增殖有明显刺激作用;AP体内、外刺激制备的脾细胞条件培养液,腹腔巨噬细胞培养上清液对CFU-GM增殖具有较高刺激活性;AP体内注射制备的肌条件培养液亦对CFU-GM增殖有较高调控活性;注射AP对骨髓粒单系造血有显著促进作用;并能增高外周血白细胞.提示AP可能通过直接和/或间接途径激活造血微环境中的巨噬细胞、淋巴细胞等,也可刺激肌组织,促进其产生造血调控因子,进而促进多能造血干细胞和CFU-GM增殖分化,这或许是当归"补血"的细胞生物学机理之一.     

人参总皂甙对造血生长因子产生的影响

本文应用造血祖细胞体外培养术和白细胞介素（ＩＬ）生物活性检测术，观察经人参总皂甙（ＴＳＰＧ）刺激的小鼠脾细胞、腹腔巨噬细胞和成纤维细胞培养上清液的集落刺激因子（ＣＳＦ）、ＩＬ－２和ＩＬ－６生物活性。结果表明：ＴＳＰＧ刺激组的ＣＳＦ和ＩＬ－６活性均显著高于对照组，ＴＳＰＧ刺激的脾细胞培养上清液的ＩＬ－２活性明显高于对照组，而ＴＳＰＧ刺激的巨噬细胞和成纤维细胞培养上清液的ＩＬ－２活性与对照组无显著性差     

当归多糖调节骨髓造血微环境治疗再生障碍性贫血的机制

背景：如何改善造血微环境是目前再生障碍性贫血治疗的热点问题。目的：结合GEO测序分析、网络药理学与实验验证当归多糖改善骨髓造血微环境治疗再生障碍性贫血的作用机制。方法：借助GEO数据库获得了再生障碍性贫血相关差异表达基因并进行GO和GSEA分析。结合文献与PubChem、SwissTargetPrediction、PharmMapper数据库获取当归多糖活性成分和靶点。取交集靶点后利用STRING和Cytoscape构建蛋白相互作用网络,并进行GO和KEGG富集分析。构建再生障碍性贫血小鼠模型,利用血细胞分析仪、流式细胞术、ELISA、免疫组化、免疫荧光染色、Western blot方法验证当归多糖对再生障碍性贫血的疗效与作用机制。结果与结论：(1)共筛选出834个差异表达基因,参与细胞发育、造血、髓系细胞分化等生物学过程;(2)检索得到当归多糖相关347个靶点并筛选出77个潜在治疗基因,其中VEGFA、EGLN1、BCL2、干扰素γ、白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素6等血管生成、凋亡及免疫相关因子度值显著;(3)KEGG通路富集分析治疗靶点主要富集在Th17细胞分化、NK相关细...     

人参皂甙诱导骨髓巨噬细胞表达造血生长因子的研究

目的 探讨人参皂甙对巨噬细胞表达造血生长因子的影响。方法 采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学与核酸原位杂交等技术，研究人参总皂甙(TSPG)对大鼠骨髓巨噬细胞(rBMMφ)和人单核细胞株(THP-1)表达造血生长因子的影响。结果 经TSPG(10～50mg／L)诱导制备的rBMMφ和THP-1的培养上清液可显著提高大鼠和人的CF/U-Mix、CFU-GM和CFU-E的集落产率；经PSPG诱导后rBMMφ和THP-1表达EPO、GM-CSF、IL-3、IL-6的蛋白水平有不同程度提高；经TSPG诱导后rBMMφ和THP-1表达EPO、GM—CSF和IL-3的mRNA水平和强度显著提高。结论 TSPG可通过直接和／或间接途径刺激造血诱导微环境的巨噬细胞，从蛋白水平和基因转录水平两级层次上促进造血调控因子(如EPO、GM-CSF、IL-3和IL-6等)的合成和分泌，进而促进造血干／祖细胞的增殖分化，这或许足人参调节血细胞生成的可能途径之一。     

小鼠下颌下腺条件培养上清对造血祖细胞增殖的影响

目的　研究下颌下腺与血细胞发生的关系 ,探讨下颌下腺对造血功能的调节作用。　方法　采用造血祖细胞体外培养及造血生长因子 (HGF)活性检测法。　结果　正常雄性和雌性小鼠下颌下腺组织培养上清(SGCM)对粒单系祖细胞 (CFU - GM)、红系祖细胞 (BFU - E、CFU - E)和巨核系祖细胞 (CFU - Meg)的增殖有明显促进作用 ;正常雄性小鼠 SGCM对 CFU - E和 CFU - Meg的刺激活性明显高于正常雌性小鼠 SGCM。贫血模型雌、雄小鼠的 SGCM能提高 BFU - E、CFU - E的产率 ;雌性贫血模型小鼠的 SGCM亦能提高 CFU - Meg的产率。IL - 3能促进 SGCM对 BFU - E、CFU - E的增殖。　结论　小鼠下颌下腺可能通过分泌造血生长因子样物质促进造血祖细胞增生 ,从而发挥造血调控功能     

人参总皂甙诱导人造血基质细胞表达IL-3的实验研究

目的 研究人参总皂甙(TSPG)对人早期血细胞发生的影响及其机理,进一步探讨人参“补气生血”的现代分子生物学机理。方法 采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子(HGF)生物活性检测、免疫细胞化学、核酸分子原位杂交技术,研究TSPG对造血基质细胞表达白细胞介素-3(IL-3)的影响及其机理。结果 TSPG体外作用能明显促进人早期髓系多向性造血祖细胞(CFu-Mix)的集落形成;经TSPG诱导制备的人骨髓基质细胞(BMSG)、脐静脉内皮细胞株(EcV304)、单核细胞株(THP)条件培养液对CFU-Mix的增殖分化有明显促进作用;经TSPG诱导后BMSC、EcV304、THP细胞内IL-3的蛋白及mRNA表达显著提高。结论 TSPG能促进人早期血细胞的增殖分化,其机理可能与TSPG诱导人造血基质细胞表达IL-3有密切关系。     

碱性成纤维细胞生长因子对胚鼠海马神经前体细胞的增殖和分化作用

为观察碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的神经前体细胞的增殖和分化作用 ,本实验取胚胎 18d大鼠海马神经细胞 ,加入 2 5 ng/ m l碱性成纤维细胞生长因子置无血清培养基中进行培养。于培养第 4d和第 8d,用四唑盐比色法测定细胞活性 ,并用免疫组化方法定性、定量分析神经前体细胞的分裂和分化为神经元及神经胶质细胞的状态。结果显示 ,培养第 4d和第 8d,实验组的 OD值均增高 ,分别是对照组的 1.5倍和 1.8倍。免疫组化细胞分类计数显示 :培养第 4d,实验组神经前体细胞、神经元和少突胶质细胞数均明显增加 ,约是对照组的 2倍 ;但星形胶质细胞数无明显的变化。培养第 8d,实验组四类细胞均增加 ,约是对照组的 1.7倍。本实验提示 ,碱性成纤维细胞生长因子既能促进 E18的神经前体细胞的存活和分裂又能促进其向神经元和神经胶质细胞分化。并提示如拟在体外获得较大量和较高纯度的神经前体细胞 ,E18不是最理想的胚龄 ,需考虑选取胎龄更小的脑组织和加进足量的碱性成纤维细胞生长因子并进行传代培养。     

黑菇多糖对人白血病细胞系U_937的增殖及分化的实验研究

用黑菇多糖体外处理人单核细胞性白血病细胞分化模型Ｕ９３７细胞，结果表明黑菇多糖明显抑制Ｕ９３７细胞体外增殖（ＩＣ５０２８０μｇ／ｍｌ）并诱导细胞向终末方向分化。经黑菇多糖诱导后的Ｕ９３７细胞，细胞形态发生显著变化，细胞膜标志和生化特征趋向成熟。     

黄芪多糖对IL－2／LAK抗肿瘤增强作用的动物实验研究

采用Ｃ５７ＢＬ／６鼠荷其自发产生的黑色素瘤Ｂ＿１６细胞，以生存期为指标，建立了黄茂多糖（ＡＰＳ）增强ＩＬ－２／ＬＡＫ抗肿瘤作用的动物模型，结果表明：ＡＰＳ自身具有一定的抗肿瘤作用，ＡＰＳ（５ｍｇ／ｋｇ）与ＩＬ－２／ＬＡＫ（５×１０￣３Ｕ／ｋｇ、５×１０￣７／ｋｇ）的抗肿瘤作用相似，荷瘤鼠生存期分别为２１．５７±１．８１天和２０．８６±１．８６天（荷瘤对照鼠为１５．７１±０．４９天）；ＡＰＳ对ＩＬ－２／ＬＡＫ的抗肿瘤效应有明显的增强作用，二者在上述剂量下联合应用，荷瘤鼠生存期为２４．８６±２．７３天（Ｐ＜０．０１）。并对荷瘤鼠进行动态细胞免疫功能观察，提示：ＡＰＳ和ＩＬ－２／ＬＡＭ均具有抵抗鼠脾ＮＫ细胞活性，ＩＬ－２产生能力和腹腔Ｍψ吞噬能力下降的作用，ＡＰＳ对ＩＬ－２／ＬＡＫ仍有显著增强效应。     

实验性糖尿病大鼠胸腺的形态学研究

用四氧嘧啶诱导复制的大鼠实验性糖尿病动物模型，在光，电镜下，观察了糖尿病大鼠胸腺的形态学变化。结果表明：糖尿病大鼠胸皮质明显就薄，皮质淋巴细胞大量减少，细胞分裂盯计数显著降低。细胞退化。明上皮细胞呈明显的退行性变，其胞质内张力细丝束和溶酶体样致密颗粒明显增多，出现空泡化，自噬体及较多的含颗粒状物质的囊泡。