转染 p53基因对肺腺癌细胞株裸鼠 移植瘤生长的影响

目的：探讨转染野生型 p53（ wt-p53）和突变型 p53（ mt-p53）基因对人肺腺癌细胞株 GLC-82裸鼠移植瘤生长的影响。方法：采用脂质体介导法,分别将 wt-p53和 mt-p53基因导入人肺腺癌细胞株 GLC-82,在裸鼠体内、体外实验中检测转导细胞的生长状况和裸鼠致瘤性。结果：转染 mt-p53 基因的细胞株 G418筛选的细胞集落数、 3H-TDR掺入实验、软琼脂平皿细胞集落数,以及裸鼠瘤组织重量和体积均高于对照组（ P<0.01）,而转染 wt p53基因的细胞株均显著低于对照组（ P< 0.01）,表明导入 wt p53基因的细胞株瘤细胞生长速度明显低于对照组细胞株和导入 mt p53基因的细胞株,即导入 mt p53基因的细胞株瘤细胞生长速度最快,而导入 wt p53基因的细胞株瘤细胞生长速度最慢。结论： wt p53基因能有效抑制人肺腺癌细胞生长; mt p53基因则可以明显地促进瘤细胞生长。     

细胞内钙在内皮素-1促肺腺癌细胞SPC-A 1生长中的作用

目的：探讨细胞内钙离子（[Ca^2＋]i）在内皮素-1（endothelin-1,ET-1）促肺腺癌细胞SPC-A1生长中的作用及其机制。方法：采用RT-PCR法检测肺腺癌细胞SPC-A1中ET-1及内皮素受体（endothelinreceptor,ETR）的mRNA表达,蛋白印迹法检测SPC-A1细胞中ET-1及ETR的蛋白表达,MTT法检测细胞生长,Fura-2/AM荧光技术检测[Ca^2＋]i。结果：肺腺癌细胞SPC-A1上有ET-1及内皮素受体A（ETAR）及受体B（ETBR）的mRNA及蛋白表达;ET-1（10^-15～10^-8mol/L）具有促进SPC-A1细胞增殖作用,也促进其[Ca^2＋]i浓度升高,作用均呈浓度依赖性;ET-1（10^-10mol/L）促SPC-A1细胞增殖及[Ca^2＋]i浓度升高作用均可被ETAR拮抗剂BQ123（10^-7mol/L）阻断（P〈0.05）,但不受ETBR拮抗剂BQ788（10^-7mol/L）影响（P〉0.05）;去除细胞外Ca^2＋及电压依赖型Ca^2＋通道阻滞剂硝苯地平（1μmol/L）在阻断ET-1升高[Ca^2＋]i浓度作用的同时也抑制ET-1诱导的肺腺癌细胞增殖。结论：ET-1通过ETAR促SPC-A1细胞生长及增加[Ca^2＋]i,细胞外Ca^2＋通过电压依赖型钙离子通道开放内流是ET-1增加[Ca^2＋]i及促肺腺癌细胞SPC-A1增殖的主要机制。     

低氧环境下甲酰肽受体1 拮抗剂Boc2 对人肺腺癌细胞恶性生物学行为的影响

目的：探讨低氧环境下甲酰肽受体1（formyl peptide receptor 1,FPR1）的拮抗剂Boc2 对人肺腺癌细胞迁移、侵袭、增殖及成瘤能力的影响。方法：采用Western blotting 检测低氧诱导下人肺腺癌细胞A549 中低氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α）和FPR1 蛋白的表达情况。以FPR1 拮抗剂Boc2 体外处理低氧诱导的A549 细胞,按照随机数字表法分为3 组：对照组（常氧条件下培养）、低氧组和低氧+Boc2 处理组。细胞划痕实验、Transwell 细胞侵袭实验及MTT法分别用于检测各组细胞的迁移、侵袭和增殖能力。接种A549 细胞制备裸鼠移植瘤模型,同上分3 组,4 周后处死裸鼠,分析各组间裸鼠移植瘤体积、质量、成瘤率以及迁移相关蛋白E-钙黏素（E-cadherin,E-cad）和侵袭相关蛋白MMP-9 表达量的差异性。结果：低氧诱导能促进A549 细胞FPR1 蛋白的表达,且呈时间依赖性（P<0.05）。与对照组相比,低氧组细胞的迁移、侵袭及增殖能力均显著增强（P<0.01）,而相对低氧组,Boc2 处理能显著抑制A549 细胞的迁移、侵袭和增殖能力（P<0.05）。低氧组裸鼠成瘤率为100.0%（15/15）,对照组为60.0%（9/15）,低氧+Boc2 处理组裸鼠成瘤率为73.3%（11/15）;低氧组裸鼠移植瘤体积、质量均显著高于对照组（均P<0.01）;而相对低氧组,低氧+Boc2 处理组裸鼠肿瘤体积、质量均有显著降低（均P<0.01）。低氧组E-cad 及MMP-9 蛋白表达量显著高于对照组（P<0.01）,而与低氧组相比Boc2 处理能显著降低E-cad 及MMP-9 蛋白表达量（P<0.05）。结论：FPR1 拮抗剂Boc2 能显著抑制低氧诱导的人肺腺癌细胞A549 的迁移、侵袭、增殖及成瘤能力,表明FPR1 在人肺腺癌的发生发展过程中扮演着重要角色,并有可能成为人肺腺癌治疗的潜在靶点。     

罗格列酮逆转丝裂霉素对人胃癌 SGC7901／VCR祼鼠移植瘤耐药作用的研究

目的：探讨 PPARγ激动剂罗格列酮（ ROS ）逆转人胃癌 SGC7901／VCR 细胞裸鼠移植瘤对丝裂霉素（ MMC）的耐药作用及其可能机制。方法建立人胃癌SGC7901／VCR细胞裸鼠移植瘤模型,将48只裸鼠随机分为6组：空白对照组（生理盐水0．2 ml）、MMC组（ MMC 2．5 mg／kg）、ROS组（ ROS 100 mg／kg）、MMC＋ROS中剂量组（ MMC 2．5 mg／kg＋ROS 50 mg／kg）、MMC＋ROS高剂量组（MMC 2．5 mg／kg＋ROS 100 mg／kg）、MMC＋CSA组（MMC 2．5 mg／kg＋CSA 50 mg／kg）。每组8只裸鼠;用药40天后,观察各组裸鼠体重和移植瘤体积变化,计算抑瘤率,绘制移植瘤的生长曲线;Western-blot法检测P-gp和MGr1-Ag蛋白的表达。结果空白对照组、MMC组移植瘤瘤体积和抑瘤率差异无显著性,ROS组、MMC＋ROS中剂量组、MMC＋ROS高剂量组组、MMC＋CSA组与空白对照组、MMC组比较,移植瘤瘤体积和抑瘤率差异有显著性。空白对照组、MMC组中P-gp、MGr1-Ag蛋白表达最强,ROS组、MMC＋ROS中剂量组、MMC＋ROS大剂量组、MMC＋CSA组与空白对照组和MMC组P-gp、MGr1-Ag蛋白表达比较有统计学意义（ P＜0．05）,MMC＋ROS大剂量组、MMC＋CSA组中其表达最弱,组间差异无统计学意义（P＞0．05）。结论罗格列酮可抑制人胃癌SGC7901／VCR细胞祼鼠移植瘤瘤体生长,罗格列酮可下调人胃癌SGC7901／VCR细胞裸鼠移植瘤组织中P-gp和MGr1-Ag蛋白的表达。罗格列酮可部分逆转人胃癌SGC7901／VCR细胞祼鼠移植瘤对丝裂霉素的耐药性。     

5-氮杂-2′-脱氧胞苷对人肺腺癌裸鼠种植瘤的抑制作用及组织因子途径抑制物2基因甲基化状态和表达的影响

目的：探讨去甲基化药物5?氮杂?2′?脱氧胞苷（5?Aza?CdR）对人肺腺癌裸鼠种植瘤生长的抑制作用,以及对种植瘤组织中组织因子途径抑制物2（ TFPI?2）基因甲基化状态和表达的影响。方法建立人肺腺癌A549细胞裸鼠种植瘤模型,按5?Aza?CdR不同剂量分为对照组（未注射5?Aza?CdR）和实验组,其中实验组分为0．5 mg／kg组、1 mg／kg组和2 mg／kg组。比较各组裸鼠种植瘤生长的变化。采用甲基化特异性聚合酶链反应、实时定量荧光聚合酶链反应和Western blot检测5?Aza?CdR对裸鼠种植瘤组织TFPI?2基因甲基化状态、mRNA和蛋白表达的影响。结果用药28 d后处死裸鼠时,0．5 mg／kg组、1 mg／kg组、2 mg／kg组和对照组荷瘤裸鼠体重分别为（26．80±0．18）g、（26．67±0．28）g、（26．50±0．26）g和（27．12±0．38）g,差异无统计学意义（P＞0．05）。0．5 mg／kg组、1 mg／kg组、2 mg／kg组和对照组皮下种植瘤体积分别为（400．67±2．68）mm3、（285．71±2．91）mm3、（230．44±3．15）mm3和（709．22±2．87）mm3,差异有统计学意义（P＜0．05）。对照组TFPI?2基因呈完全甲基化状态,0．5 mg／kg组和1 mg／kg组呈不完全甲基化状态,2 mg／kg组呈非甲基化状态。0．5 mg／kg组、1 mg／kg组、2 mg／kg组和对照组TFPI?2 mRNA的相对表达水平分别为1．67±0．07、3．40±0．24、5．55±0．61和1．00±0．00,差异有统计学意义（ P＜0．05）。0．5 mg／kg组、1 mg／kg组、2 mg／kg组和对照组TFPI?2蛋白表达的相对水平分别为0．36±0．01、0．64±0．02、0．81±0．20和0．18±0．02,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论5?Aza?CdR能抑制人肺腺癌裸鼠种植瘤的生长,诱导种植瘤细胞TFPI?2基因的表达,其机制可能为5?Aza?CdR通过去甲基化作用使甲基化的TFPI?2基因重新表达,从而抑制人肺腺癌A549细胞的生长和增殖。     

不同给药方式下三氧化二砷对T细胞淋巴瘤EL4细胞体内及体外抑制作用

背景与目的：体外实验证明,三氧化二砷（arsenictrioxide,As2O3）单药可抑制多种恶性淋巴瘤细胞的增殖,并呈时间依赖性和浓度依赖性。临床研究也提示,As2O3单药治疗多种病理亚型淋巴瘤有效。但目前As2O3的剂量、具体用法仍未确定。本实验研究不同给药方式As2O3对鼠源性T细胞淋巴瘤EIA细胞体内外的抗瘤作用,旨在了解As2O3不同给药方法对T细胞淋巴瘤疗效及不良反应。方法：MTT法检测8种浓度As2O3对EL4细胞的抑制作用,流式细胞仪分析、AnnexinV—FITC／PI双标记检测细胞凋亡,电镜观察凋亡形态变化。建立EIA细胞裸鼠移植瘤模型,观察不同方案腹腔注射As2O3对EIA裸鼠移植瘤的抑制作用及裸鼠的耐受情况。结果：与对照组相比,不同浓度As2O3对EL4细胞均存在直接抑制作用（P〈0．05）,作用72h时的IC50为1．28μmol／L。体内实验显示,4mg·（kg·d）^-1×7d与2mg·（kg·d）^-1×14d给药对裸鼠移植瘤的抑制作用相近,抑瘤率分别为58．8％和55．6％（P〈0．351）。移植瘤组织凋亡细胞增多并可见凋亡小体生成。毒性表现主要为急性肝损害的病理学变化。结论：As20,体外可抑制EIA细胞增殖并可以诱导细胞凋亡,在总剂量相同的情况下,4mg·（kg·d）^-1×7d与2mg·（kg·d）^-1×14d的给药方式对裸鼠移植瘤生长的抑制作用近似。     

脾源性酪氨酸激酶Syk的抗肿瘤作用

目的探讨脾源性酪氨酸激酶（spleen tyrosine kinase,Syk）的体内外抗肿瘤作用。方法经脂质体介导将全长Syk cDNA转入Syk阴性表达的高侵袭性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,应用MTT法、Transwell小室法分别检测SykcDNA体外抗肿瘤细胞增殖及侵袭迁移作用;采用BABL／c（nu／nu）裸鼠皮下移植瘤模型,检测转染及未转染肿瘤细胞的成瘤及肺转移情况。结果转染全长Syk cDNA的MDA—MB-231细胞与转染空载体及未转染MDA—MB-231细胞相比,体外增殖情况未见明显改变,而侵袭及迁移实验中的穿膜细胞数（总迁移细胞数／5HPF）却均明显减少（P〈0．05）;同样,接种不同肿瘤细胞的裸鼠皮下移植瘤成瘤情况未见明显差异,但接种转染组肿瘤细胞的肺转移率却显著低于未转染组及空载体转染组（P〈0．05）。结论Syk通过改变乳腺肿瘤细胞的侵袭迁移能力参与其抗瘤作用。     

siRNA沉默FAM83A基因表达对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:研究FAM83A基因对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及肿瘤生长的影响。方法:运用qRT-PCR法检测非小细胞肺癌细胞H1299中FAM83A的表达;将blank组（未作任何处理）、si-control组（转染si-control）、si-FAM83A组（转染si-FAM83A）用脂质体法转染至H1299细胞;Western blot检测细胞中FAM83A、p16、p21、MMP-2、MMP-9的蛋白表达;MTT法检测细胞的增殖;Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭;裸鼠成瘤实验检测肿瘤的生长。结果:沉默FAM83A后,H1299细胞的增殖、迁移和侵袭能力均得到显著下调,并且p16、p21的蛋白表达明显上调,MMP-2、MMP-9的蛋白表达明显下调。最重要的是,沉默FAM83A后的异种移植裸鼠体内的肿瘤生长能力得到明显抑制。结论:沉默FAM83A可抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制裸鼠体内肿瘤的生长。     

RNAi沉默CXCR6基因对肺癌A549细胞增殖、体外侵袭力和裸鼠成瘤能力的影响

目的：探讨RNAi沉默CXC型趋化因子受体6（CXCR6）基因对A549细胞增殖、体外侵袭力和裸鼠成瘤能力的影响。方法 MTT法和Transwell小室模型检测稳定沉默CXCR6基因的A549细胞增殖和细胞侵袭迁移能力。将稳定沉默CXCR6的A549细胞与正常A549细胞分别皮下接种裸鼠，观察接种后肿瘤生长情况。结果稳定沉默CXCR6基因的A549细胞与正常A549细胞相比，前者增殖速率下降（P﹤0.05），平均增殖抑制率为30.70%；前者的体外侵袭力也降低（P﹤0.05），平均侵袭抑制率为74.93%，平均迁移抑制率为70.19%。裸鼠体内实验显示，稳定沉默CXCR6基因的A549细胞与正常A549细胞相比，其裸鼠体内成瘤能力降低（P﹤0.05），瘤体重量下降了62.5%。结论 RNAi沉默CXCR6基因，可以抑制A549细胞的增殖、体外侵袭力和成瘤能力。     

左卡尼汀联合表柔比星对GLC-82细胞增殖及凋亡影响机制的探讨

目的:研究左卡尼汀与表柔比星(EPI)联合应用对肺腺癌GLC-82细胞增殖及细胞凋亡的影响。方法:MTT比色法检测肺腺癌GLC-82细胞增殖的变化情况。流式细胞仪检测GLC-82细胞周期和凋亡情况。蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bcl-xl和Bax蛋白的表达。结果:与空白对照组比,单给药左卡尼汀(20μg/mL)24h后,细胞的促进生长率为37.56%,F=46.287,P=0.001;48h后为33.33%,F=41.638,P=0.001。EPI联合不同浓度的左卡尼汀后,减弱了EPI对GLC-82细胞生长的抑制作用,联合给药24和48h后,对GLC-82细胞毒作用的减弱较明显,减少率分别为12.14%(F=20.527,P=0.002)和18.52%(F=27.269,P=0.001),差异有统计学意义。左卡尼汀上调Bcl-2和Bcl-xl的蛋白表达,Bax蛋白表达无明显变化;联合给药后Bcl-2和Bcl-xl的蛋白表达明显增加。结论:左卡尼汀与EPI联合应用对肺腺癌GLC-82细胞的增殖有一定影响,其作用机制可能使G0/G1期细胞比例增加,促进细胞的有些分裂,并通过上调Bcl-2和Bck-xl蛋白的表达减弱EPI的诱导凋亡作用。     

乳腺浸润性微乳头状癌中CD44^＋／CD24^-／low和CD24^＋表型细胞的研究

目的研究乳腺浸润性微乳头状癌（invasive micropapillary carcinoma,IMPC）的干细胞表型,从干细胞和上皮间质转化（epithelial—mesenchymal transition,EMT）角度探讨IMPC高侵袭、高转移恶性生物学行为的原因。方法选取术前未经放化疗治疗患者的IMPC82例和乳腺非特殊型浸润性导管癌（invasive ductal carcinoma not otherwise specified,IDC—NOS）80例石蜡包埋组织标本切片,通过免疫组织化学双染技术检测两组肿瘤组织中CD44^＋／CD24^-/low（CD24^-）和CD24^＋的表达、定位和分布情况,并分析其与各临床病理学特征之间的关系。定量资料采用Student’s t检验,定性资料采用Mann-Whitney U检验、Kruskal—Waliis检验、x^2检验或校正x^2检验。两组之间相关性采用Spearman＇s秩相关分析。结果（1）IMPC组肿瘤细胞的CD44^＋／CD24^-/low阳性表达率（48．8％,40／82例）,明显高于IDC—NOS组（31．3％,25／80例）（x^2=5．180,P=0．023）。（2）53．7％（44／82例）的IMPC微细间质组织内见单个散在的CD44^＋／CD24^-/low肿瘤细胞,且该细胞免疫组织化学染色Vimentin及α—SMA阳性,E—Cadherin阴性。IDC—NOS间质内罕见CD44^＋／CD24^-/low肿瘤细胞。（3）IMPC微乳头结构中CD44^＋／CD24^-/low与间质内的CD44^＋／CD24^-/low阳性表达细胞呈明显正相关（r=0．516,P〈0．001）,并且IMPC微乳头结构及间质中CD44^＋／CD24^-/low阳性表达在有无淋巴管侵犯和有无淋巴结外软组织浸润方面的差异均有统计学意义（P〈0．050）,即有淋巴管侵犯及淋巴结外软组织浸润者CD44^＋／CD24^-/low阳性表达率较高。（4）IMPC组中CD24^＋细胞阳性表达率79．3％（65／82例）,明显高于IDC-NOS组（60．0％,48／80例）（x^2=7．126,P=0．008）,且IMPC中淋巴结转移阳性组CD24的表达高于阴性组,差异有统计学意义（x^2=8．834,P=0．003）。结论IMPC肿瘤细胞中干细胞     

悬浮培养GLC-82肺肿瘤细胞积聚体与蛋白激酶FAK、AKT、ERK和SRC活化的关系

背景与目的:蛋白激酶FAK部分介导肿瘤细胞在悬浮培养下细胞积聚体的形成,从而阻止细胞发生凋亡和促进细胞增殖,但是参与细胞积聚体形成的FAK下游通路尚不清楚。本研究旨在研究蛋白激酶FAK及其可能的下游分子ERK、AKT和SRC活化在悬浮状态肺癌GLC-82细胞积聚中的作用。方法:用polyHEMA悬浮培养观察肺正常细胞HBE和肿瘤细胞GLC-82积聚体形态;细胞凋亡用DNA琼脂糖凝胶电泳检测梯状DNA分析;细胞转化能力用软琼脂糖集落形成实验分析;磷酸化蛋白激酶水平用免疫印迹实验检测;RNA干扰实验降低FAK蛋白水平的表达。结果:GLC-82肺腺癌细胞在polyHEMA悬浮状态下能够存活和形成积聚体,肺正常细胞HBE在polyHEMA悬浮状态下发生凋亡和不形成积聚体。磷酸化FAK、ERK、AKT和SRC的水平和GLC-82积聚体有关。沉默FAK蛋白的表达,能够部分地阻断肿瘤细胞积聚体的形成,降低磷酸化ERK和AKT水平,以及降低软琼脂集落形成能力。FAKRNA干扰前后的GLC-82细胞软琼脂集落形成率分别为(12.2±1.1)%和(3.6±0.7)%(P=0.001)。结论:GLC-82肺癌细胞积聚体的形成部分由FAK信号通路介导,ERK和AKT是FAK的下游通路蛋白。     

不同分子亚型浸润性乳腺癌中p53基因及Ki-67抗原的表达及意义

目的探讨p53基因及Ki-67抗原在不同分子亚型浸润性乳腺癌中的表达及意义。方法采用免疫组化法检测275例浸润性乳腺癌组织中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人表皮生长因子受体2（HER-2）、p53基因及Ki-67抗原的表达水平。结果p53在激素受体阳性组（175例）、HER-2受体阳性组（60例）、三阴性乳腺癌组（40例）中的表达率分别为29．7％,55．0％和75．0％,三组间差异有统计学意义（χ^2=32．924,P〈0．05）,以三阴性组表达最高。Ki-67在激素受体阳性组、HER-2受体阳性组、三阴性乳腺癌组中的表达率分别为74．3％,95．0％和95．0％,三组间差异有统计学意义（χ^2=18．355,P〈0．05）,以三阴性组和HER2阳性组表达最高。p53基因和Ki-67抗原的表达阳性率在有腋窝淋巴结转移的乳腺癌组中高于无腋窝淋巴结转移组,差异有统计学意义（χ^2=5．257,P〈0．05;χ^2=12．664,P〈0．05）。结论在乳腺癌的分子亚型中联合检测p53基因及Ki-67抗原可以作为乳腺癌发生、发展的评价指标,更有助于指导其临床治疗和判断预后。     

pT1期肺腺癌组织TK1与PCNA和Ki-67表达临床意义对比分析

目的：对比研究增殖指标胸苷激酶1（eytosolic thymidine kinas1,TK1）和增殖细胞核抗原（proliferation cellnu—clear antigen,PCNA）与Ki-67在病理分期T1（pT1）期肺腺癌组织中表达及其临床意义。方法：选取南京军区南京总医院1997—02—01—2007—12—31手术治疗并具有完整病理资料和随访结果的pT1期肺腺癌患者80例,应用免疫组织化学En Vision法检测80例肺腺癌以及20例正常肺组织中TK1、Ki-67及PCNA的表达,对比分析3项标志表达与肺腺癌临床病理特征和预后的相关性。结果：pT1期肺腺癌与正常肺组织中TK1表达率-为15．0％和95．0％,＋为33．8％和5．0％,＋＋为38．8％和0,＋＋＋为12．5％和0,差异有统计学意义,P〈0．001;Ki-67表达率-为46．3％和85．O％,＋为40．0％和15．0％,＋＋为8．7％和0,＋＋＋为5．O％和0,差异有统计学意义,P=0．002;PCNA表达率与正常肺组织差异无统计学意义,P=0．507。TK1表达与淋巴结转移（P=0．009）、临床病理分期（P=0．004）及肿瘤浸润程度（P〈0．001）相关,Ki-67和PCNA表达与上述临床病理特征均无相关性。TK1不同表达组别的5年生存率除-（91．7％）与＋（81．1％）组之间以及＋＋（38．7％）与＋＋＋（50．0％）组之间差异无统计学意义外,其余各表达组别间差异均有统计学意义,而不同PCNA及Ki-67表达组别间的预后差异无统计学意义。Cox模型多因素预后分析显示,TK1表达、淋巴结转移及临床病理分期是独立预后因素。结论：pT1期肺腺癌中,TK1是一项比Ki-67及PCNA更可靠的增殖指标,可作为评估这类肺腺癌侵袭性及预后的参考指标。     

VEGF与Ki-67在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的：探讨甲状腺乳头状癌组织中VEGF、Ki-67蛋白表达与其临床病理的关系。方法：应用免疫组化SP法,对55例甲状腺乳头状癌组织中VEGF、Ki-67蛋白进行检测。结果：甲状腺乳头状癌组VEGF蛋白阳性表达率为52.7%（29/55）,Ki-67增殖指数为（11.07±3.84）%。VEGF蛋白的阳性率、Ki-67增殖指数随着肿瘤分化程度降低、淋巴结转移、被膜的侵犯逐渐增加。结论：VEGF、Ki-67蛋白表达异常可能在甲状腺乳头状癌发生或发展中起一定作用。VEGF、Ki-67蛋白的联合检测对甲状腺乳头状癌的早期诊断、预后的判断及对制定合理治疗方案有重要的临床应用价值。     

肝癌细胞系Huh-7中CD133阳性细胞亚群的分离及其特性的研究

目的：研究CD133在人肝癌细胞系Huh-7中的表达,初步探讨肝癌中CD133阳性细胞亚群的干细胞特性。方法：流式细胞荧光激活分选技术纯化肝癌细胞系Huh-7中CD133肿瘤细胞,体外培养并观察其增殖、体内成瘤及分化能力。结果i流式细胞仪检测肝癌细胞系Huh-7中有62．3％的细胞CD133呈阳性表达,流式细胞荧光激活分选的CD133肿瘤细胞在无血清培养基中第3、5、7d的吸光度（OD值）分别为0．310、0．362、0．564,均高于相同条件下未分选细胞和CD133阴性细胞;CD133阳性细胞亚群成瘤能力明显强于阴性细胞亚群;CD133阳性细胞亚群在培养体系中的比例逐日下降,至培养的第8天,由第1天的92．3％下降至61．4％。结论：肝癌细胞系Huh-7中CD133阳性细胞亚群比其它细胞亚群具有较强增殖、成瘤和分化能力,是具有肝癌干细胞特性的细胞亚群。     

Slp2反义真核表达载体的构建及功能研究

背景与目的 肺癌相关基因的研究一直是研究的热门课题，S1p2基因是通过cDNA微阵列技术筛选出的肺癌差异表达基因之一，本研究旨在对S1p2基因在肺癌细胞系中的表达及其功能进行初步研究。方法 提取肺癌细胞系A549、GLC-82、NCI-H446、NCI-H460的细胞总RNA，用RT-PCR方法检测肺癌细胞系中S1p2基因mRNA水平的表达；构建S1p2反义基因，通过离子脂质体将克隆的S1p2反义基因导入肺癌细胞系GLC-82、NCI-H446、NCI-H460，用半定量RT-PCR检测转染目的基因对肺癌细胞系S1p2表达的影响；通过四唑盐比色法绘制细胞生长曲线以及流式细胞分析、软琼脂细胞克隆形成试验，观测转染S1p2反义基因对肺癌细胞系GLC-82、NCI-H446、NCI-H460生长速度、细胞周期以及细胞增殖能力的影响。结果 在4个肺癌细胞系中，S1p2基因均为阳性表达；转染S1p2反义基因后的肺癌细胞系GLC-82、NCI-H446、NCI-H460的细胞生长速度明显减慢；在流式细胞分析直方图上表现为G2期的细胞增多，并曾在转染目的基因的NCI-H446细胞流式直方图中观察到了位于G0／G1期左侧的“亚Gt峰”的出现；转染S1p2反义基因后肺癌细胞系的软琼脂培养细胞克隆形成率明显低于未转染细胞。结论 S1p2基因与肺癌细胞的生长、增殖力密切相关，有必要进行深入研究和探讨。     

人肝癌细胞系中 CD90+细胞的生物学特性

目的筛选肝癌细胞系中CD90（Thy-1）阳性表达的细胞,初步探讨CD90^＋细胞亚群的干细胞特性。方法利用流式细胞分选术筛选5种肝癌细胞株（HepG2、SMMC-7721、Bel-7404、Bel-7403及SK-Hep-1）中CD90（Thy-1）阳性表达的细胞,以平板克隆形成实验观察其增殖能力,CCK-8法观察CD90^＋细胞的增殖能力和顺铂对CD90^＋细胞的抑制率。结果肝癌细胞株Sk-Hep-1中有66．02％的细胞CD90呈阳性表达。平板克隆形成实验显示CD90^＋细胞克隆形成率为（18．60±2．95）％,显著高于CD90^-细胞及未分选细胞,差异有统计学意义（P〈0．05）。体外实验显示培养4d后CD90^＋细胞的增殖较CD90^-及未分选细胞明显加快;CD90^＋细胞在相同浓度的顺铂作用下其抑制率较CD90^-细胞和未分选细胞明显降低,三者的抑制率分别为14．8％、29．7％和24．0％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论肝癌细胞中的CD90^＋细胞是具有肿瘤干细胞特性的细胞亚群,CD90可能是肝癌干细胞候选的分子标志物。     

EMP INDUCES APOPTOSIS IN HUMAN LUNG CARCINOMA CELL LINE GLC-82

The possibility of health risks resulting from exposure to electric and magnetic fields provides a strong motivation to determine how such fields interact with cells. The short, intense electromagnetic pulse (EMP) produced by high-altitude nuclear explosions may radiate over many hundreds of miles. Basically, EMP consists of a pulse of radio-frequency waves with a nearly instantaneous rise in the electric and magnetic fields and a subsequent decline in the fields. EMP radiation may be repre…