消症散结、扶正活络方药对5/6肾切除大鼠肾结缔组织生长因子蛋白及其mRNA表达的影响

目的:探讨消症散结、扶正活络方药对5/6肾切除大鼠肾结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白及其mRNA的影响.方法:采用5/6肾切除肾小球硬化动物模型.将大鼠随机分为8组,正常组、假手术组、模型组、苯那普利组、尿毒清组和消症散结、扶正活络方药大、中、小剂量组.实验结束观察肾组织病理改变,应用免疫组织化学方法和原位杂交法检测肾组织CTGF及其mRNA的表达.结果:正常组及假手术组肾小球系膜细胞、肾小管上皮细胞、肾间质细胞胞浆中有少量CTGF及mRNA黄色颗粒状阳性反应物,模型组上述部位的CTGF及其mRNA在细胞浆黄色颗粒状反应物强阳性表达,消症散结、扶正活络方药组CTGF及其mRNA表达较模型组黄色颗粒状阳性反应物显著减少,有统计学意义(P＜0.01).结论:消症散结、扶正活络方药通过抑制CTGF蛋白及其mRNA的过度表达而减缓肾纤维化病程进展.     

复方鳖甲软肝方对单侧输尿管结扎大鼠肾组织MMP-9/TIMP-1表达的影响

目的探讨基质金属蛋白酶9/基质金属蛋白酶组织抑制剂(1MMP-9/TIMP-1)在肾间质纤维化中的表达情况及其复方鳖甲软肝方的调节作用。方法采用单侧输尿管结扎(UUO)动物模型。将大鼠随机分为7组,正常组、假手术组、模型组、苯那普利组和复方鳖甲软肝方低、中、高剂量组。术后4周处死大鼠,观察肾组织病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾组织MMP-9/TIMP-1的表达。结果模型组肾组织表现为纤维化病理改变,正常组及假手术组肾小管上皮细胞、肾间质细胞胞浆有轻度MMP-9/TIMP-1表达;模型组MMP-9表达明显减少而TIMP-1则呈强阳性表达。复方鳖甲软肝方小、中、大剂量组与模型组比MMP-9强阳性表达(P!0.05),TIMP-1的表达较模型组明显减少(P!0.05)。结论复方鳖甲软肝方可通过对肾组织MMP-9/TIMP-1平衡的调节而发挥抗纤维化的作用。     

复方鳖甲软肝方防治大鼠肾间质纤维化作用机理的实验研究

目的:采用单侧输尿管结扎（UUO）肾间质纤维化模型,探讨复方鳖甲软肝方对肾间质纤维化大鼠血生化及肾组织病理形态学的影响。方法:将大鼠随机分为7组,正常组、假手术组、模型组、苯那普利组和复方鳖甲软肝方低、中、高剂量组。UUO术后4周处死大鼠,并应用HE、六胺银染色及Mallory染色,观察肾组织病理学改变。结果:模型组肾小管结构严重破坏,管腔塌陷,上皮细胞大量坏死;有些部位肾小管和间质的结构基本消失,间质中出现弥漫性细胞增殖,并广泛间质纤维化。复片鳖甲软肝方组和苯那普利组纤维化病理改变明显减轻,其中以复片鳖甲软肝方中剂量组作用明显。结论:复方鳖甲软肝方可减少炎细胞的浸润、减轻肾小管的损伤,进而延缓肾间质纤维化的病程进展。     

复方鳖甲软肝方防治大鼠肾间质纤维化作用机理的实验研究

目的：采用单侧输尿管结扎（UUO）肾间质纤维化模型，探讨复方鳖甲软肝方对肾间质纤维化大鼠血生化及肾组织病理形态学的影响。方法：将大鼠随机分为7组，正常组、假手术组、模型组、苯那普利组和复方鳖甲软肝方低、中、高剂量组。UUO术后4周处死大鼠，并应用HE、六胺银染色及Mallory染色，观察肾组织病理学改变。结果：模型组肾小管结构严重破坏，管腔塌陷，上皮细胞大量坏死；有些部位肾小管和间质的结构基本消失，间质中出现弥漫性细胞增殖，并广泛间质纤维化。复片鳖甲软肝方组和苯那普利组纤维化病理改变明显减轻，其中以复片鳖甲软肝方中剂量组作用明显。结论：复方鳖甲软肝方可减少炎细胞的浸润、减轻肾小管的损伤，进而延缓肾间质纤维化的病程进展。     

排毒保肾丸对肾纤维化大鼠肾组织TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的观察排毒保肾丸对5/6肾切除大鼠肾纤维化的影响并探讨其可能作用机制。方法将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、排毒保肾丸组、尿毒清颗粒组,每组10只。除正常组、假手术组外,其余各组大鼠均采用5/6肾切除方法建立肾纤维化模型。排毒保肾丸组和尿毒清颗粒组分别予排毒保肾丸1.0 g/(kg·d)和尿毒清颗粒3.33 g/(kg·d)灌胃,正常组、假手术组、模型组予2 ml生理盐水灌胃,每日1次。各组均灌胃4周后处死大鼠,取残肾组织行HE、PAS、PASM、Masson染色病理观察,检测肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad7蛋白及其mRNA的表达水平。结果病理结果显示,模型组大鼠局灶节段性肾小球缺血性皱缩,较多炎性细胞浸润伴轻至中度纤维化;与模型组比较,排毒保肾丸组残肾组织病变程度减轻。与正常组、假手术组比较,模型组大鼠TGF-β1蛋白及其mRNA、Smad2蛋白及其mRNA表达水平均显著升高,Smad7蛋白及其mRNA表达水平均显著下降(P0.01);与模型组比较,排毒保肾丸组和尿毒清颗粒组TGF-β1蛋白及其mRNA、Smad2蛋白及其mRNA表达水平均显著降低,而Smad7蛋白及其mRNA表达水平均显著升高(P0.01)。结论排毒保肾丸有抗肾纤维化的作用,下调肾组织TGF-β1、Smad2的表达和上调Smad7的表达可能是其作用机制之一。     

海昆肾喜对阿霉素肾病大鼠肾组织内皮素1及其mRNA表达和肾小球系膜细胞增殖的影响

目的 探讨海昆肾喜对阿霉素肾病大鼠内皮素1及其mRNA表达的影响以及对体外培养肾小球系膜细胞增殖的影响.方法 将大鼠随机分为6组、正常组、假手术组、模型组、苯那普利组、海昆肾小剂量组及海昆肾喜大剂量组,10周后采用免疫组织化学及原位杂交方法分析肾组织内皮素1蛋白及mRNA表达情况;以苯那普利为实验对照组,采用MTT比色法测定海昆肾喜对肾小球系膜细胞增殖的影响.结果 模型组大鼠肾组织中内皮素1及mRNA表达强阳性;海昆肾喜大、小剂量组较模型组表达显著减少(P＜0.05或P＜0.01);并且海昆肾喜可以明显抑制肾小球系膜细胞的增殖.结论 海昆肾喜能够减少阿霉素肾病大鼠肾组织中内皮素1及mRNA的表达,抑制肾小球系膜细胞的增殖,从而延缓肾衰竭的的病程进展.     

复方鳖甲软肝片对肝纤维化大鼠肝组织环氧合酶-2表达影响的实验研究

目的：观察复方鳖甲软肝片对肝纤维大鼠肝组织环氧合酶-2（COX-2）表达的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法：采用40%的CCl4皮下注射6周建立大鼠肝纤维化模型,同时以1g/kg·d-1的复方鳖甲软肝片灌胃干预6周,原位杂交检测肝组织COX-2mRNA表达,免疫组化检测肝组织α-SMA、COX-2蛋白表达,放免法检测肝组织匀浆血栓烷B2（TXB2）和6-酮-前列腺素F1α（6-KetoPGF1α）含量。结果：模型组大鼠肝组织α-SMA蛋白、COX-2mRNA和蛋白表达均较正常组明显增强,肝组织TXB2含量及TXB2/6-Keto-PGF1α比值也较正常组显著增高,COX-2与α-SMA表达呈明显正相关;应用复方鳖甲软肝片干预后,大鼠α-SMA蛋白、COX-2mRNA和蛋白表达均明显减少,肝组织TXB2含量及TXB2/6-Keto-PGF1α比值显著下降。结论：COX-2参与CCl4诱导肝纤维化的发病,复方鳖甲软肝片下调肝纤维化大鼠肝组织COX-2表达可是其抗肝纤维化的作用机制之一。     

三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织CTGF蛋白及其mRNA表达的影响

目的:分析阿霉素肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白及其mRNA的变化,研究三七总皂苷对其干预作用及机制。方法:采用单侧肾切除阿霉素肾病模型。将45只大鼠随机分为5组,正常组、假手术组、模型组、苯那普利组和三七总皂苷治疗组。术后10周处死大鼠,观察肾组织病理改变,应用免疫组织化学方法和原位杂交法检测肾组织CTGF及其mRNA的表达。结果:正常组及假手术组肾小球系膜细胞、肾小管上皮细胞以及肾间质细胞胞浆内有少量CTGF蛋白及其mRNA的黄色颗粒状阳性反应物,模型组上述部位的CTGF蛋白及其mRNA呈强阳性表达,三七总皂苷组上述指标表达较模型组显著减少,有统计学差异(P<0.05),与阳性药物组比较差异不显著。结论:三七总皂苷可能通过抑制CTGF蛋白及其mRNA的过度表达而减缓肾纤维化病程进展。     

复方鳖甲软肝片对肝纤维化大鼠肝脏血管紧张素Ⅱ及其受体mRNA表达的影响

目的:研究复方鳖甲软肝片对肝纤维化大鼠肝脏血管紧张素Ⅱ及其受体mRNA表达的影响,探讨其抗肝纤维化作用的机制。方法:雄性SD大鼠30只随机分为正常组、模型组及复方鳖甲软肝片组,每组10只;大鼠每周2次皮下注射40?l43ml/kg,共6周,首次加倍,建立大鼠肝纤维化模型;复方鳖甲软肝片组在造模同时灌服复方鳖甲软肝片1g.kg-1.d-1,正常组和模型组灌服等容量蒸馏水,连续6周;HE和Masson染色光镜观察各组大鼠肝组织的病理改变;全自动生化分析仪检测血清ALT、AST、ALP水平;放免法测定血清HA、LN的含量和血浆AngⅡ的含量;RT-PCR法检测肝组织AngⅡ、AT1R mRNA的表达。结果:模型组大鼠肝组织炎症程度和纤维化程度、血清ALT、AST、ALP、HA、LN和血浆AngⅡ含量、肝组织AngⅡ、AT1R mRNA的表达水平均明显高于正常组(P<0.01),而复方鳖甲软肝片组大鼠肝组织炎症程度和纤维化程度较模型组明显减轻(P<0.01,P<0.05),血清ALT、AST、ALP、HA、LN和血浆AngⅡ含量较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01),肝组织AngⅡ、AT1R mRNA的表达水平较模型组明显下降(P<0.01)。结论:肝脏局部肾素-血管紧张素系统参与CCl4诱导的肝纤维化发生发展,复方鳖甲软肝片能抑制肝纤维大鼠肾素-血管紧张素系统的反应,可能是其抗肝纤维化作用的重要机制之一。     

阿魏酸钠延缓大鼠5/6肾切除慢性肾功能衰竭的实验研究

目的研究阿魏酸钠 (SF)治疗 5/6肾大部切除大鼠慢性肾功能衰竭的作用及机制.方法实验大鼠随机分为假手术组、 5/6肾切除组、阿魏酸钠注射组( 150 mg/kg)、阿魏酸钠灌胃组( 150 mg/kg)和科素亚灌胃组( 20 mg/kg).造模后第 4、 8、 12周,每组随机选取 6只大鼠处死.观察大鼠 24 h尿蛋白定量、血肌酐水平、肾小球硬化、肾间质损害及α-平滑肌肌动蛋白(α- SMA)、增殖细胞核抗原( PCNA)、内皮素 1(ET- 1)的表达.分析各指标间的相关关系.结果 5/6肾切除大鼠血肌酐水平、 24 h尿蛋白、肾小球硬化指数( GSI)、肾小管间质及肾小球系膜区α- SMA表达、间质细胞增殖、 ET- 1表达等较假手术组明显升高( P < 0.05).SF治疗组血肌酐、 24 h尿蛋白水平、肾小球硬化程度、α- SMA、 PCNA表达较 5/6肾切除组明显降低( P < 0.05), ET- 1的表达均较 5/6肾切除组明显减少( P < 0.05).GSI与α- SMA、 PCNA、 ET- 1表达百分数呈正相关;血肌酐水平、 24 h尿蛋白定量与α- SMA、 PCNA、 ET- 1的表达百分数和 GSI呈正相关; ET- 1表达与α- SMA、 PCNA表达呈正相关.结论 SF治疗慢性肾脏疾病的机制可能与降低慢性肾功能衰竭大鼠的血肌酐和尿蛋白水平、抑制残肾肌成纤维细胞生成和间质细胞增殖、抑制残肾 ET- 1的表达、延缓肾小球硬化及肾间质纤维化的进展有关.     

蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化超微结构及CYP2E1表达的影响

目的:观察蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化超微结构及细胞色素P4502E1(CYP2E1)表达的影响。方法:50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、蓝莓原浆预防组(蓝莓组)、复方鳖甲软肝片预防组(复方组)、蓝莓原浆加复方鳖甲软肝片预防组(蓝莓+复方组)。猪血清复制大鼠肝纤维化模型,各预防组在造模同时给予蓝莓原浆或(和)复方鳖甲软肝片灌胃。12周后处死大鼠,观察肝组织超微结构变化,RT-PCR、Western Blot和免疫组织化学法检测大鼠肝组织CYP2E1 mRNA及蛋白质的表达。结果:与模型组比,3个用药组肝纤维化程度明显减轻(P0.05),超微结构病变明显改善,肝组织CYP2E1 mRNA及蛋白质表达无明显差异。结论:蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化有一定的预防作用,对肝细胞超微结构病变有一定的保护作用,对CYP2E1的表达无明显影响。     

FibroScan评价恩替卡韦联合复方鳖甲软肝片治疗乙肝性肝硬化代偿期疗效的Meta分析

目的:用Meta分析的方法评价用FibroScan测量肝脏硬度值评估恩替卡韦联合复方鳖甲软肝片对乙肝性肝硬化代偿期的治疗效果。方法:纳入研究对象是乙肝性肝硬化代偿期的患者,干预措施为对照组口服恩替卡韦治疗,观察组在对照组的基础上服用复方鳖甲软肝片治疗,观测指标为肝脏硬度值的临床试验,使用RevMan 5.3软件对治疗前后肝脏硬度变化值进行Meta分析。结果:在58篇已发表论文中选出符合要求的论文9篇;Meta分析提示,两组患者的性别构成没有统计学意义,在治疗12个月后,与对照组相比,联合治疗组肝脏硬度值下降程度显著优于对照组。结论:复方鳖甲软肝片联合恩替卡韦治疗乙肝性肝硬化代偿期患者比单独应用恩替卡韦能更加确实有效降低肝脏硬度值。     

血清药理学与药代动力学整合模型的复方鳖甲软肝片日服用次数合理性研究

该课题通过体外观察大鼠含药血清对肝星状细胞(HSC-T6)增殖的影响,结合复方鳖甲软肝片中芍药苷的药物代谢动力学模型,研究复方鳖甲软肝片合理的日服用次数。大鼠每日不同次数灌胃给药,分别于给药前及第1次给药后各时间点眼眶后静脉取血,用于测定大鼠含药血清对HSC-T6增殖的影响以及大鼠血浆中芍药苷的血药浓度。综合分析时量和时效关系,制定复方鳖甲软肝片用于慢性肝炎肝纤维化的合理的日服用次数。结果表明,复方鳖甲软肝片含药血清对HSC-T6抑制的效应与芍药苷血药浓度具有良好的相关性,每日给药2次组对HSC-T6抑制的效应动力学曲线下面积(AUC)及药代动力学AUC均高于每日给药1次组和3次组。因此,复方鳖甲软肝片用于慢性肝炎肝纤维化以每日服用2次为佳。     

复方桂枝茯苓丸对脑缺血再灌注损伤大鼠SOD和MDA的影响

目的观察复方桂枝茯苓丸对脑缺血再灌注损伤（CRI）大鼠的治疗作用。方法采用结扎双侧颈总动脉45min后再通法,制备CRI大鼠模型。设假手术组（A组）,模型组（B组）,血塞通对照组（C组）,复方桂枝茯苓丸小剂组（D组,含生药剂量为0．42g／m1）,复方桂枝茯苓丸中剂组（E组,含生药剂量为0．84g／ml）,复方桂枝茯苓丸大剂组（F组,含生药剂量为1．68g/ml）。A、B组均给予0．9％NaCl溶液,C组给予血塞通混悬液,D、E、F组分别给予相应浓度的复方桂枝茯苓丸水煎浓缩液。各组大鼠每日给药剂量均为1ml·100g^-1·d^-1,早晚各灌胃1次,连续给药2周后,检测大鼠血清与脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量。结果复方桂枝茯苓丸大、中、小剂量组能改善脑缺血后大鼠神经功能缺损体征,与模型组比较有显著差异（P〈0．05,P〈0．01）;并能升高大鼠血清与脑组织中SOD活性,同时降低血清与脑组织中MDA含量,与模型组比较有显著差异（P〈0．05,P〈0．01）;不同剂量间以中、大剂量组疗效较为显著,与小剂量组比较,有显著差异（P〈0．05）;同时,与血塞通对照组比较,复方桂枝茯苓丸中、大剂量疗效无显著差异。结论复方桂枝茯苓丸对CRI大鼠有治疗作用。     

中西结合治疗乙型病毒性肝炎肝硬化的临床研究

目的：观察拉米夫定联合复方鳖甲软肝片治疗乙型病毒性肝炎肝硬化的临床疗效。方法：对照组单独使用拉米夫定,并采取相应的保肝对症治疗;试验组同时加用拉米夫定和复方鳖甲软肝片口服,观察治疗前后各项指标变化情况。结果：试验组疗效优于对照组。结论：拉米夫定联合复方鳖甲软肝片治疗乙型病毒性肝炎肝硬化疗效肯定。     

利胆宁心汤治疗胆心综合征疗效分析

目的观察利胆宁心汤治疗胆心综合征的临床疗效。方法将75例胆心综合征患者随机分为两组;对照组37例给予消炎利胆片和复方丹参片治疗,治疗组38例给予利胆宁心汤治疗,疗程2周。结果治疗组总有效率为92.11%,对照组为72.97%;两组总有效率比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论利胆宁心汤治疗胆心综合征临床疗效确切。     

藏药郎庆阿塔对肝纤维化大鼠胶原代谢的影响

目的:观察藏药郎庆阿塔对肝纤维化大鼠胶原代谢的影响。方法:采用复合因素(皮下注射40%CCl4/橄榄油溶液+高脂低蛋白复合饲料喂养+给予5%乙醇饮水)构建大鼠肝纤维化模型,造模6周后,于第7周开始分组给药,设置正常对照组、模型组、阳性药组[复方鳖甲软肝片(0.55 g.kg-1]、郎庆阿塔高、中、低剂量组(按生药量计为11.4,5.7,2.85 g.kg-1),分别ig给药7周。实验末期,取肝组织,HE染色观察肝脏组织的病理学变化,Masson染色观察肝组织内纤维化程度,免疫组化法检测肝组织中金属蛋白酶组织抑制因子I(TIMP-I)的表达水平,荧光定量PCR(RTFQ PCR)法测定药物对肝纤维化大鼠肝组织中I型胶原蛋白(CoL-I)mRNA表达的影响。结果:郎庆阿塔高、中剂量对肝纤维化大鼠肝纤维组织增生、肝组织炎症活动度均有显著的改善作用(P<0.05),免疫组化结果表明,郎庆阿塔能明显降低肝纤维化大鼠肝组织中TIMP-I的表达水平(P<0.01),高剂量组阳性率(4.80±0.92)与模型组(8.60±1.52)相比显著下降;此外,郎庆阿塔还能剂量依赖性地降低CoL-I mRNA表达水平,其中高剂量组与模型组相比较有显著性差异(P<0.01)。结论:郎庆阿塔能明显改善肝纤维组织增生,降低肝组织中TIMP-I和CoL-I mRNA的表达,发挥其抗肝纤维化作用。     

复方神肌再生冲剂对大鼠坐骨神经损伤后生长相关蛋白-43表达的影响

目的观察复方中药对大鼠坐骨神经损伤后神经组织中生长相关蛋白-43（GAP-43）表达的影响。方法 SD大鼠156只,随机分为假手术组、对照组与中药组,后两组切断右侧坐骨神经并缝合。中药组给予复方神肌再生冲剂200mg.kg-1.d-1溶于2ml0.9%NaCl溶液中灌胃,对照组给予0.9%Nacl溶液2ml灌胃,假手术组仅显露右侧坐骨神经,术后不作处理。分别于术后1、3、7、14、21及28天取吻合口远端的神经,采用免疫组化和实时荧光定量PCR方法检测损伤神经组织中GAP-43的表达水平。结果实验组GAP-43蛋白阳性染色光密度值（OD）在术后7、14和21天明显高于对照组（P〈0.05）,术后3、7和14天,实验组坐骨神经中GAP-43 mRNA的表达高于对照组（P〈0.05）。结论复方神肌再生冲剂可增加大鼠坐骨神经损伤后神经组织中GAP-43的表达,从而有利于神经再生。     

清化瘀毒方对酒精性大鼠肝纤维化血清HA、LN、PCⅢ含量及TIMP-1的影响

目的:探讨清化瘀毒方对酒精性大鼠血清肝纤维化指标及组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的作用机制。方法:采用以酒精为主导的复合因素建立酒精性大鼠肝纤维化模型,实验初随机分成正常对照组10只,造模组55只;造模成功后,造模组采用随机分成3组,分别为复方鳖甲软肝片组10只,清化瘀毒方组10只和模型空白组10只;于第20周末次给药后禁食,麻醉后打开腹腔,抽取腹主动脉血并离心检测AST、ALT、HA、LN、PCⅢ及TIMP-1的含量。结果:清化瘀毒方组AST、ALT、HA、LN、PCⅢ含量比模型空白组下降,有统计学意义(P<0.05);血清TIMP-1的表达清化瘀毒方组与模型空白组相比,有统计学意义(P<0.05)。结论:清化瘀毒方能改善肝功能,使血清中的肝纤维化指标下调,降低TIMP-1的蛋白表达升高,具有抗炎保肝、抗肝纤维化作用。     

复方玉芩胶囊治疗非酒精性单纯性脂肪肝临床研究

目的研究复方玉芩胶囊治疗非酒精性单纯性脂肪肝病的临床疗效。方法采用随机平行对照方法,选择非酒精性脂肪肝(肝郁气滞血瘀型)患者70例,平均分成两组。观察组给予复方玉芩胶囊治疗,对照组给予胆宁片治疗。治疗3个月后观察两组临床疗效、中医症候积分、肝脏CT分级、血脂的变化。结果观察组临床总有效率为85.8%,对照组为65.7%(P<0.05);与对照组比较,观察组中医症候积分明显减少(P<0.05),CT分级明显减轻(P<0.05),总胆固醇、三酰甘油明显下降(P<0.05)。结论复方玉芩胶囊治疗非酒精性单纯性脂肪肝疗效确切。