SLE患者外周血中CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞水平分析

目的分析系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中调节性T细胞(Treg)表达情况,初步探讨其在SLE患者细胞免疫失调中的意义。方法采用流式细胞术检测50例SLE患者和31例健康人对照组外周血中CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞百分率,并分析其与CD4+CD25+和CD4+CD25high细胞的相关性,以及各种Treg细胞与SLE患者及SLE疾病活动性指数(SLEDAI)的相关性。结果 SLE活动期外周血CD4+CD25high细胞百分数为(11.65±5.53)%,显著高于SLE稳定期的(8.52±3.15)%和健康人对照组的(6.85±1.63)%,F=23.287,P<0.01。SLE患者Treg细胞与CD4+CD25high和CD4+CD25+细胞百分数均呈正相关(r分别为0.819,0.711,P均<0.05),SLEDAI与CD4+CD25+CD127low/-、CD4+CD25+、CD4+CD25high细胞水平呈正相关(r分别为0.410,0.394,0.348,P均<0.05)。结论 SLE活动期外周血中Treg细胞表达增加,且与SLEDAI相关,SLE患者免疫异常可能与Treg细胞的异常水平有关。     

类风湿性关节炎患者外周血CD3~+ CD(16、56)~+ NK T细胞百分率的变化及意义

目的探讨CD3+CD(16、56)+自然杀伤(NK)T细胞在类风湿性关节炎(RA)患者外周血中的变化及意义。方法采用流式细胞术检测RA患者(病情活动组和病情稳定组)及健康人(对照组)外周血淋巴细胞中CD3+CD(16、56)+细胞的比例及CD3+CD(16、56)+淋巴细胞CD69的表达百分率。结果 RA病情活动组外周血CD3+CD(16、56)+NK T细胞的比例及NK T细胞CD69的表达百分率明显低于RA病情稳定组及健康对照组(P均<0.01);RA病情稳定组NK T细胞的比例及NK T细胞CD69的表达百分率与健康对照组差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 RA患者外周血中CD3+CD(16、56)+NK T细胞比例减少及活性受抑制可能参与了RA的发病过程,且可能与RA的病情活动性相关。     

CD4+CD25+调节性T细胞及TGF-β1与系统性红斑狼疮病情活动性关系的研究

目的 检测系统性红斑狼疮患者(SLE)外周血CD4+CD25+调节性T细胞、转化生长因子-β1(TGF-β1)浓度,探讨其与疾病活动性的关系.方法 选择SLE患者76例,根据患者病情程度分为3组,其中稳定组17例,活动组33例,肾病组26例.同期选择24例健康体检者作为正常对照.采用流式细胞仪检测SLE患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞群比率,用ELISA法检测血清中TGF-β1浓度.观察CD4+CD25+T细胞群、TGF-β1浓度与SLE患者疾病活动程度的关系.结果 ①活动期SLE患者外周血CD4+ CD25 +调节性T细胞群比率、TGF-β1浓度显著低于稳定期及正常对照组(P<0.01),疾病稳定期与正常对照组结果差异无统计学意义.②SLE并发肾病组外周血CD4+CD25+调节性T细胞群比例、TGF-β1浓度显著低于非肾病组(P<0.05).结论 SLE患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞群比率、TGF-β1浓度与SLE活动性关系密切,可能是导致疾病发生和病情发展的关键环节之一.     

银屑病患者外周血CD3^＋CD（16＋56）^＋NK T细胞和CD3^＋CD4^-CD8^-双阴性T细胞显著减少

目的分析银屑病患者外周血中CD3^＋CD（16＋56）＋自然杀伤T细胞（NK T）和CD3^＋CD4^-CD8^-双阴性（DN）T细胞的变化。方法应用三色流式细胞术分析结合CD45/侧向散射信号（SSC）和CD3/SSC设门分析外周血淋巴细胞亚群并应用Flow Count（荧光球进行绝对计数。结果银屑病组NK T细胞的比例3.58%±2.09%,显著低于健康对照组7.73%±5.8%（P〈0.01）;银屑病组NK T细胞绝对数（72.68±51.18）细胞/mm^3也显著低于健康对照（193.15±160.09）细胞/mm^3（P〈0.01）。银屑病组DN T细胞绝对数（78.92±58.67）细胞/mm^3同样显著低于健康对照组（148.33±118.00）细胞/mm^3（P〈0.01）;而其比例在两组间差异无统计学意义。银屑病组总T细胞（1 254.73±411.73）细胞/mm^3和抑制性T细胞（Ts）（465.23±212.65）细胞/mm^3均分别显著低于健康对照组[T：（1 721.72±712.45）细胞/mm^3;Ts：（800.23±581.79）细胞/mm^3],P值均〈0.01,银屑病组CD4/CD8比值显著升高（P〈0.05）。结论银屑病患者外周血NK T细胞和DN T细胞显著减低。我们推测这两类细胞的异常减低与银屑病患者体内免疫调节功能失衡有关。     

系统性红斑狼疮患者外周血中CD_4~+、CD_(25)~+T细胞的变化及其与疾病活动性的关系

目的:观察活动性和缓解期系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血中的CD4+、CD25+T细胞(调节性T细胞)的变化及其与疾病活动性的关系,并探讨其意义。方法:选择门诊及住院SLE患者30例(其中活动性10例),健康体检者10例,分为活动性SLE组、非活动性SLE组和对照组。分离外周血单个核细胞,应用流式细胞仪检测CD4+、CD25+T细胞。活动性SLE组给予免疫抑制剂治疗,病情稳定后再次检测CD4+、CD25+T细胞。结果:活动性SLE组CD4+、CD25+T细胞较对照组和非活动性SLE组明显减少。活动性SLE组经治疗后病情缓解,外周血中CD4+、CD25+T细胞较治疗前升高。CD4+、CD25+T细胞百分率与狼疮活动指数呈显著负相关。结论:CD4+、CD25+T细胞减少与SLE的活动有关,活动性SLE经治疗病情缓解后外周血中CD4+、CD25+T细胞升高。     

肾移植患者外周血中的CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞

背景:越来越多的实验在分析免疫耐受标志,以期能够更好地辅助患者进行移植后免疫抑制治疗。目的:分析肾移植后患者外周血中CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞在肾移植免疫耐受中的作用。方法:采集62例肾移植后患者(急性排斥反应组22例,移植稳定组40例)及20例健康对照者的外周抗凝血,经免疫染色,应用流式细胞仪分析CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞所占CD4+T细胞百分含量,同时采用ELISA方法检测患者血清中白细胞介素2和白细胞介素10的质量浓度。结果与结论:移植稳定组中CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞所占CD4+T细胞百分含量显著高于健康对照组和急性反应排斥组(P<0.01);CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞百分含量与白细胞介素2呈显著负相关(P<0.05),与白细胞介素10呈显著正相关(P<0.01)。提示CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞在肾移植后免疫耐受的机制中发挥了一定作用。     

原因不明反复自然流产患者外周血TLR2、TLR4表达及CD4+ CD25+ Treg细胞的变化

目的探讨原因不明反复自然流产(URSA)患者外周血TLR2、TLR4的表达及CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞变化的关系。方法用实时荧光定量PCR及流式细胞术检测35例URSA患者、24例妊娠孕妇外周血单个核细胞(PBMC)中TLR2、TLR4mRNA及其蛋白质的表达;流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的比例,并分析表达TLR2、TLR4蛋白与CD4+CD25+Treg细胞的相关性。结果 URSA组PBMC中TLR2、TLR4 mRNA分别为0.52±0.04、3.26±1.37;表达TLR2、TLR4蛋白的PBMC比例分别为(32.36±4.18)%、(41.29±3.67)%;与妊娠对照组相比,URSA组外周血TLR4 mRNA及表达TLR4蛋白的PBMC比例差异显著(t分别为19.84和21.85,P均<0.05);URSA组CD4+CD25+Treg细胞的比例为(2.75±0.62)%,显著低于妊娠对照组的(5.17±0.65)%,差异有统计学意义(t=48.40,P<0.01);URSA患者表达TLR4蛋白的PBMC与CD4+CD25+Treg细胞的比例降低呈显著相关(r=0.724,P<0.05)。结论 URSA患者外周血中低表达的CD4+CD25+Treg细胞、高表达的TLR4可能参与了URSA的发生。     

恶性肿瘤患者腹水及外周血中CD4+CD25+CD127low调节性T细胞表达及其意义

目的:探讨恶性肿瘤患者腹水及外周血中CD4+CD25+CD127low调节性T细胞水平及其临床意义.方法:以36名恶性肿瘤伴腹水患者、38名恶性肿瘤患者以及15名健康人为研究对象,以三色流式分析法对CD4+CD25+CD127low调节性T细胞进行分析.结果:恶性肿瘤伴腹水组患者腹腔积液及外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞占CD4+T细胞比例为(8.328±1.012)%、(8.317±1.041)%,明显高于健康对照组(6.027±0.854)%和恶性肿瘤组(7.182±1.501)%,差异有显著性(P<0.01);恶性肿瘤组外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞占CD4+T细胞比例明显高于健康对照组,差异有显著性(P<0.01);恶性肿瘤伴腹水患者腹腔积液与外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞占CD4+T细胞比例无统计学差异(P>0.05).结论:恶性肿瘤患者腹水及外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞升高,可促进肿瘤的进一步恶化,其机制可能是抑制肿瘤的免疫.     

溃疡性结肠炎患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞的表达

目的:探讨溃疡性结肠炎(ulcerative coitis,UC)患者外周血CD4+CD25+ Foxp3+T细胞的表达及意义.方法:采用流式细胞术检测UC患者22例及健康对照组20例外周血CD4+ CD25+ Foxp3+在T淋巴细胞的单独或联合表达比例.结果:UC患者外周血T淋巴细胞表达CD4+的比例为(34.76±5.40)%,与健康对照组的(33.23±11.38)%比较无差异(P>0.05);CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例为(8.27±1.46)%,显著低于健康对照组的(11.4±2.17)%(P<0.05);CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞比例为(0.87±0.25)%,显著低于健康对照组的(1.55±0.55)%(P<0.05).结论:UC患者CD4+CD25+T细胞及CD4+CD25+Foxp3+T细胞明显减少,可能打破了自身免疫耐受,发生了针对肠道抗原的自身免疫反应,参与了UC的发病.     

CD39+和CD73+调节性T细胞与原发性胆汁性胆管炎肝脏损伤的相关性研究

目的分析原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC)患者腺苷代谢通路相关分子的变化及其与PBC炎性损伤的关系。方法连续选择2016年10月-2017年10月在太仓市第一人民医院和常熟市第二人民医院就诊的PBC患者49例和体检健康者36例。流式细胞术分析外周血腺苷代谢通路关键分子CD39和CD73在CD4+T细胞和Foxp3+调节性T细胞(Treg)中的表达情况,高效液相色谱串联质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)分析患者血清三磷酸腺苷(ATP)水平。分析以上指标的统计学差异及其与肝脏炎性损伤指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)和Mayo评分之间的相关性。结果 PBC组CD4+CD39+T细胞占CD4+T细胞比例[(5.28±1.92)%]较对照组[(11.01±3.19)%]显著降低(t=10.25,P0.01),CD4+CD25+Foxp3+CD39+T细胞(CD39+Treg)在Foxp3+Treg中所占比例[(23.75±9.48)%]同样显著低于对照组[(54.68±5.18)%],差异有统计学意义(t=13.79,P0.01)。PBC组和对照组CD4+CD73+T细胞在CD4+T细胞中的占比和CD4+CD25+Foxp3+CD73+T细胞在Foxp3+Treg中的占比差异无统计学意义(t值分别为2.235和1.083,P0.05)。PBC组血清ATP水平[(200.28±79.41)μg/L]明显高于对照组[(89.20±33.76)μg/L],差异有统计学意义(t=8.367,P0.01)。PBC组CD39+Treg占Treg比例与ATP、GGT和Mayo评分水平呈负相关关系(r值分别为-0.413、-0.378和-0.382,P值分别为0.003、0.007和0.007)。结论 CD39+Treg在PBC患者中比例显著降低,可能通过降低ATP的分解导致炎性损伤加剧。CD73+Treg在PBC患者中未见明显变化。     

颅脑损伤开颅手术患者颅内压变化与CD8+CD28-调节性T细胞的关系

目的 探讨颅脑损伤开颅手术患者颅内压变化与CD8+CD28-调节性T细胞（Treg）的关系。 方法 以56例颅脑损伤开颅手术患者作为观察组（A组）,以38例急性大面积脑梗死进行开颅去骨瓣减压的患者作为阳性对照（B组）,并以40例健康志愿者作为阴性对照（C组）;比较以上3组外周血及脑脊液内CD8+CD28-Treg及其细胞因子白介素10（IL-10）及转化生长因子β1（TGF-β1）的百分含量,并监测A组在不同时间点颅内压、CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1的变化,并分析其相关性。 结果 A组术前CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1均不同程度低于B及C组（P<0.05）,但B组与C组差异无统计学意义（P>0.05）。随着病情的推演,A组患者颅内压逐渐降至正常,而外周血及脑脊液内CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1均逐渐回升。相关性分析显示颅内压与CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1均呈显著负相关。 结论 CD8+CD28-Treg及其细胞因子降低是颅脑损伤的重要免疫学现象,且与颅内压升高存在密切关系。       

术前CD8+CD28-T细胞含量在预测肾癌患者术后复发中的作用

目的探索术前CD8+CD28-调节性T细胞（Treg）含量在预测肾细胞癌（RCC）患者术后复发的效能。方法术前检测33例接受肾癌根治术的RCC患者外周血CD8+CD28-Treg含量,术后进行为期60个月的随访,观察CD8+CD28-Treg与复发的关系,并与术前中性粒/淋巴细胞比值（NLR）进行对照。结果共有9例患者出现复发,占27.27%,平均复发时间均数为术后24个月;复发患者的CD8+CD28-Treg及NLR数值均大于非复发组（P=0.034、0.041）。受试者工作曲线分析显示CD8+CD28-Treg及NLR均与RCC存在显著相关性,曲线下面积分别为0.819及0.703（P=0.004及0.021）,且当CD8+CD28-Treg为8.21%时,其预测复发的敏感度为92.6%,特异度为90.5%,显著高于NLR。结论术前CD8+CD28-Treg在预测RCC患者术后复发具有较理想的准确度,对于术前该细胞百分含量高于8.21%的患者需在术后2年内加强随访。      

特发性血小板减少性紫癜患者外周血CD1d(hi)CD5+CD19+调节性B细胞的变化及意义

摘要:目的：研究特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者外周血中调节性B细胞（regulatory B cells, Breg）亚群和相关细胞因子的变化及其相关性,探讨Breg在ITP发病机制中的作用。 方法：选择30例ITP患者,分离外周血单个核细胞（PBMC）,用流式细胞术（FCM）检测CD19⁺B、CD5⁺CD19⁺B、CD1d^(hi)CD5⁺CD19⁺B细胞亚群的比例变化;用ELISA法测定PBMC培养液上清中白细胞介素-10（IL-10）及转化生长因子-β1（TGF-β1）水平,与同期选择的健康人对照组比较。 结果：与对照组相比,ITP患者外周血中CD19⁺B、CD5⁺CD19⁺B细胞亚群的比例均升高,而CD1d^(hi)CD5⁺CD19⁺ Breg的比例降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。ITP患者PBMC培养液上清IL-10、TGF-β1的水平低于健康人对照组（P＜0.05）。患者Breg的比例与IL-10表达水平呈正相关（r=0.717,P＜0.05）,而与TGF-β1水平无相关性（r=0.073,P>0.05）。 结论：CD1d^(hi)CD5⁺CD19⁺ Breg及相关细胞因子IL-10的下调可能参与ITP的免疫调节紊乱机制。     

CD8 ＋ T淋巴细胞在急性脑梗死后肺炎发病中的作用

目的采用实验室检测结合临床评估手段,探索CD8^＋ T淋巴细胞在急性脑梗死后肺炎发病中的作用。 方法收集2014年12至2016年12月在同济大学附属上海东方医院神经内科和东南大学医学院附属江阴市人民医院神经内科住院治疗的急性脑梗死患者60例为研究对象。在脑梗死发病48 h内收集患者静脉血,分离外周血单核细胞,检测细胞表面CD107a,细胞内干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）。依据入组后住院期间是否发生肺炎将60例病例分为发生肺炎组和未发生肺炎组,采用t检验比较肺炎组混合病毒多肽干预及未干预患者、未发生肺炎组混合病毒多肽干预及未干预患者四者之间的外周血单核细胞层细胞表面CD107a脱颗粒、细胞内IFN-γ和TNF-α表达的差异。 结果在混合病毒多肽刺激CD8^＋ T淋巴细胞后,肺炎组细胞表面CD107a^＋表达低于未发生肺炎组［（10.6±3.7）% vs （15.6±4.3）%）］,细胞内IFN-γ^＋表达低于非肺炎组［（15.3±4.3）% vs （20.0±5.1）%］,TNF-α^＋表达低于未发生肺炎组［（15.1±4.4）% vs （19.3±4.7）%］,差异均具有统计学意义（t=3.192,P=0.004;t=4.127,P<0.001;t=3.621,P<0.001）;在未经混合病毒多肽刺激时,肺炎组细胞内IFN-γ^＋表达低于非肺炎组［（3.0±1.2）% vs （3.6±1.7）%）］,TNF-α^＋表达低于未发生肺炎组［（3.3±1.4）% vs （4.1±2.1）%］,差异也具有统计学意义（t=3.734,P<0.001;t=3.189,P=0.004）。 结论CD8^＋ T淋巴细胞的细胞毒性作用抑制可能是急性脑梗死患者发生肺炎的重要机制之一。     

CD39+CD73+B细胞亚群在原发性胆汁性胆管炎患者中的变化及其临床价值分析

目的:分析原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者外周血CD39^+CD73^+B细胞亚群在B细胞中所占比例的变化,及其与PBC的临床指标间的关系。方法:收集江苏苏州吴江区和常熟地区PBC患者60例,健康人对照者40例,以流式细胞术分析所有研究对象外周血CD39^+CD73^+B细胞在B细胞中的比例,多重微珠流式荧光法定量分析PBC患者抗线粒体抗体M2(AMA-M2)水平,全自动生化分析仪检测肝功能各项指标。统计分析CD39^+CD73^+B细胞比例的组间差异及其与自身抗体和肝脏酶指标之间的关系。结果:PBC患者CD39^+CD73^+B细胞的比例较对照组显著降低[55.6%(44.9%,60.5%)vs 73.0%(69.8%,74.9%),P<0.001]。PBC组CD39^+CD73^+B细胞比例与AMA-M2呈明显的负相关关系(r=-0.349,P=0.027)。抗糖蛋白210抗体(anti-GP210)阳性患者CD39^+CD73^+B细胞比例较anti-GP210阴性患者明显降低[44.6%(38.2%,49.9%)vs 58.7%(49.8%,63.8%),P<0.001],抗核蛋体100抗体(anti-SP100)阳性和阴性患者间CD39^+CD73^+B细胞比例差异无统计学意义[58.6%(47.9%,62.7%)vs 51.6%(44.7%,60.4%),P=0.292]。结论:PBC患者外周血CD39^+CD73^+B细胞比例显著降低,且与特异性自身抗体存在显著相关性,提示该群B细胞在PBC发病过程中可能发挥重要作用。     

外周血miRNA-150与CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞在儿童免疫性血小板减少症中的变化及意义

目的探讨外周血miRNA-150与CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg细胞在儿童免疫性血小板减少症（ITP）中变化及意义。 方法选取南通大学附属妇幼保健院在2017年3月至2020年9月接受诊治的ITP患儿93例,其中新诊断ITP患儿（病程＜3个月）56例,持续性ITP患儿（病程3~12个月）37例。另选取本院同期健康体检儿童50例作为对照组。采用实时荧光定量PCR反应测定外周血miRNA-150表达,采用流式细胞术测定CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg细胞表达。 结果ITP患儿外周血miRNA-150表达高于对照组,且CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg细胞表达率低于对照组（P＜0.05）。持续性ITP组外周血miRNA-150表达高于新诊断ITP组,而CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg细胞表达率低于新诊断ITP组（P＜0.05）。全反应（CR）组外周血miRNA-150表达低于反应（R）组和无效（NR）组,且R组低于NR组（P＜0.05）。CR组CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg细胞表达率高于R组和NR组,且R组高于NR组（P＜0.05）。外周血miRNA-150对ITP诊断敏感度和特异度分别为78.18%和60.53%;CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg细胞表达对ITP诊断敏感度和特异度分别为83.63%和71.05%。miRNA-150与PLT呈负相关（r=-0.738）,而CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg细胞与PLT呈正相关（r=0.796）。 结论外周血miRNA-150在ITP患儿中高表达,而CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg细胞在ITP患儿中低表达,且外周血miRNA-150和CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg细胞表达与疗效密切相关。     

鼻咽癌患者外周血CD4+CD25high Treg 细胞在肿瘤进展中的变化

目的 观察分析鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)在肿瘤进展中的变化与意义.方法 用流式细胞仪检测52例NPC患者、8例鼻咽黏膜慢性炎(nasopharyngitis,NPi)患者、7例头颈部其...