IL－6与心血管疾病关系的初步研究

应用ＭＴＴ比色法检测了２０例病毒性心肌炎（ＭＣ）、２０例扩张型心肌病（ＤＣＭ）、２０例急性心肌梗塞（ＡＭＩ）及１５例肥厚型心肌病（ＨＣＭ）患者血清白细胞介素６（ＩＬ－６）的活性，并与２０例正常对照组（ＮＣ）比较，结果发现ＭＣ、ＤＣＭ及ＡＭＩ病人ＩＬ－６水平明显高于ＮＣ组（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１）．表明ＩＬ－６与ＭＣ、ＤＣＭ及ＡＭＩ的病理过程有关。     

扩张型心肌病IL—6及IL—1活性的初步研究

应用ＭＴＴ比色法及ＣｏｎＡ活化小鼠胸腺细胞增殖法检测了３０例扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者及２０例正常人（ＮＣ）的血清血细胞介素６（ＩＬ－６）、白细胞介素１（ＩＬ－１）的活性，结果发现ＤＣＭ患者ＩＬ－６及ＩＬ－１活性均明显高于ＮＣ组。提示：ＩＬ－６及ＩＬ－１功能紊乱参与了ＤＣＭ的病理过程。     

扩张型心肌病可溶性IL－2R、NK活性和T细胞亚群的检测

应用单克隆与多克隆双抗体夹心法检测２０例扩张型心肌病（ＤＣＭ）及２０例正常人（ＮＣ）的血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ），同时测定了外周血自然杀伤细胞（ＮＫ）活性和Ｔ淋巴细胞亚群，结果发现ＤＣＭ患者ｓＩＬ－２Ｒ明显高于ＮＣ组（Ｐ＜０．００１），而ＮＫ活性明显低于ＮＣ组（Ｐ＜０．００１），ＤＣＭ患者Ｔ细胞亚群与ＮＣ组比较，ＣＤ８降低（Ｐ＜０．０１），而ＣＤ４／ＣＤ８比值升高（Ｐ＜０．０５）。提示细胞免疫功能紊乱参与ＤＣＭ的病理过程。     

白血病患者骨髓移植后血清中IL－6变化的初步观察

采用白细胞介素－６（ＩＬ－６）依赖细胞（Ｂ９细胞）增殖ＭＴＴ比色分析，研究了５例自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）患者血清中ＩＬ－６的活性。处于完全缓解期的急性粒细胞性白血病（ＡＭＬ）患者血清中ＩＬ－６活性显著地高于正常成人组（Ｐ＜０．００１）。ＢＭＴ０ｄ时，ＩＬ－６活性显著地高于ＢＭＴ前水平（Ｐ＜０．００１）；ＢＭＴ后第９～１０ｄ时，ＩＬ－６活性明显地高于ＢＭＴ前和ＢＭＴ０ｄ（Ｐ＜０．００５），高于ＢＭＴ后２１ｄ（Ｐ＜０．００１）和３５ｄ（Ｐ＜０．００１）。ＢＭＴ后２１ｄ时，ＩＬ－６活性略高ＢＭＴ前水平（Ｐ＜０．０２），但ＢＭＴ后第３５ｄ时，ＩＬ－６活性与ＢＭＴ前无显著差别（Ｐ＞０．０５）。结果提示：ＩＬ－６活性直接反应了ＡＢＭＴ后骨髓损伤程度，可以作为ＢＭＴ后骨髓造血功能恢复的指标。     

IL—6与心血管疾病关系的初步研究

应用ＭＴＴ比色法检测了２０例病毒性心肌炎（ＭＣ）、２０例扩张型心肌病（ＤＣＭ）、２０例急性心肌梗塞（ＡＭＩ）及１５例肥厚型心肌病（ＨＣＭ）患者血清白细胞介素６（ＩＬ－６）的活性，并与２０例正常对照组（ＮＣ）比较，结果发现ＭＣ、ＤＣＭ及ＡＭＩ病人ＩＬ－６水平明显高于ＮＣ组，表明ＩＬ－６与ＭＣ、ＤＣＭ及ＡＭＩ的病理过程有关。     

rIL－2逆转扩张型心肌病NK细胞活性的研究

本文检测了扩张型心肌病（ＤＣＭ）、冠心病（ＣＨＤ）和正常人（ＮＣ）的自然杀伤细胞（ＮＫ）数目及活性。结果发现ＤＣＭ患者ＮＫ数目与ＣＨＤ及ＮＣ组比较无统计学差异（Ｐ＞０．０５），而ＮＫ活性低于其它二组（Ｐ＜０．００１）。经重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）温育ＮＫ后，ＮＫ活性明显升高（Ｐ＜０．００１），同时ＮＫ活性与ＤＣＭ病情严重程度有关，提示ＮＫ在ＤＣＭ发病中有意义，并可作为判断ＤＣＭ病情严重程度的指标。     

IL—2对神经元NMDAR1m RNA表达和细胞内钙浓度的影响

Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体和细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的变化与神经元的兴奋性关系密切。本文报道以大鼠大脑皮层神经元为研究对象，通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交并以Ｆｕｒａ－２作为Ｃａ２＋荧光指示剂，观察了外源性白细胞介素－２（ＩＬ－２）对ＮＭＤＡ受体１型亚单位（ＮＭＤＡＲ１）ｍＲＮＡ表达量及［Ｃａ２＋］ｉ的影响。结果显示：不同浓度的ＩＬ－２（１～２００Ｕ／ｍｌ）作用于原代培养的胚胎大鼠大脑皮层神经元６小时后其ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡ表达量明显增加，并与ＩＬ－２浓度呈正相关关系。当其浓度为２５～２００Ｕ／ｍｌ时，ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡ表达量增加４４．３％～２１９．７％（Ｐ＜０．０５）。ＩＬ－２（１～２００Ｕ／ｍｌ）与新生大鼠大脑皮层神经元共同孵育５～１０分钟后，［Ｃａ２＋］ｉ增加２７．１％～９４．２％（Ｐ＜０．０５）。钙通道阻断剂ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ可完全阻断ＩＬ－２引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，而ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＭＫ－８０１无此作用。本文结果提示：外源性ＩＬ－２具有兴奋性神经调质样作用，可能参与或介导了神经兴奋毒性作用和惊厥性疾病的发生与发展过程。     

慢性肾炎患者sIL－2R水平、IL－2活性及mIL－2R表达的观察

本文应用ＥＬＩＳＡ法检测了４０例慢性肾小球肾炎血清可溶性白细胞介素２受体水平，同时对患者外周血单个核细胞膜白细胞介素２受体表达及白细胞介素２活性进行观察。结果患者ｓＩＬ－２Ｒ水平为６３４．８±１４２．９ｕ／ｍｌ，高于正常人２９５．０±１６５．７ｕ／ｍｌ，Ｐ＜０．００１；ｍＩＬ－２Ｒ阳性率为２５．６±４．３％，低于正常人４５．５±５．２％，Ｐ＜０．００１；ＩＬ－２活性为２．８５±１．６１ｕ／ｍｌ，低于正常人７．０６±４．５３ｕ／ｍｌ，Ｐ＜０．００１。并且ｓＩＬ－２Ｒ与ＢＵＮ呈正相关，ｒ＝０．４７０，Ｐ＜０．０２。提示慢性肾小球肾炎患者细胞免疫功能降低，且与肾功能损伤程度有关。     

rIL—2逆转扩张型心肌病NK细胞活性的研究

本文检测了扩张型心肌病（ＤＣＭ）、冠心病（ＣＨＤ）和正常人（ＮＣ）的自然杀伤细胞（ＮＫ）数目及活性。结果发现ＤＣＭ患者ＮＫ数目与ＣＨＤ及ＮＣ组比较无统计学差异（Ｐ＞０．０５），而ＮＫ活性低于其它二组（Ｐ＜０．００１）。经重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）温育ＮＫ后，ＮＫ活性明显升高（Ｐ＜０．００１），同时ＮＫ活性与ＤＣＭ病情严重程度有关，提示ＮＫ和ＤＣＭ发病中有意义，并可作为判断ＤＣＭ病情严重程度的指     

IL—10对外周血单个核细胞体外产生IL—2及IFN—γ的调节作用

为探讨Ｔｈ１与Ｔｈ２两类细胞因子间相互调节，研究了ｒｈＩＬ－１０对ＰＨＡ体外诱导人ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ的影响。结果表明，１０ｎｇ／ｍｌＩＬ－１０明显抑制ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ（Ｐ＜０．０２及Ｐ＜０．０１）。在加入兔抗人ＩＬ－１０抗体的ＰＢＭＣ体外培养体系中，在５μｇ／ｍｌ浓度时，ＩＬ－２产生可明显增加（Ｐ＜０．０５），随着抗体浓度增加，ＩＬ－２呈剂量依赖性增加（ｒ＝０．９６２，Ｐ＜０．０１），ＩＦＮ－γ产生亦增加，但差异不明显。本研究表明ＩＬ－１０抑制活化人ＰＢＭＣ体外产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ，而抗人ＩＬ－１０抗体则表现出增强作用。ＩＬ－１０介导Ｔｈ１与Ｔｈ２两类辅助性Ｔ细胞间的相互调节，选择机体对抗原的免疫应答类型，从而对临床疾患的防治有一定指导意义。     

扩张型心肌病细胞因子及糖皮质激素受体的研究

检测 30例扩张型心肌病 (DCM )外周血白细胞介素 1(IL 1)、白细胞介素 6 (IL 6 )及肿瘤坏死因子 (TNF α )的水平 ,并同时测定白细胞糖皮质激素受体 (GR )的水平 ,结果发现DCM患者的IL 1、IL 6及TNF α明显高于对照组 (P <0 0 1) ,而GR明显低于对照组 (P <0 0 1) ,表明DCM存在细胞因子及GR异常 ,并对其意义进行了分析。     

Lower levels of the host protective IL-10 in DCM—a feature of autoimmune pathogenesis?

Objectives: To investigate whether cytokine patterns differ with respect to heart failure (HF) etiology, and to study how cytokine concentrations relate to hemodynamic alterations.

Methods: Plasma levels of interleukin-6 (IL-6), interleukin-10 (IL-10), tumor necrosis factor alpha (TNF-α) and high sensitive-CRP (hs-CRP) were analysed with enzyme-linked-immunosorbent serologic assay and turbidimetry in 45 healthy subjects and 89 patients with HF, of whom 65 were diagnosed with dilated cardiomyopathy (DCM) and 24 had ischemic heart disease (IHD).

Results: IL-6, IL-10 and hs-CRP were significantly higher in patients with HF as compared to healthy controls. The IL-10 was significantly lower in patients with DCM as compared to IHD, also when adjusting for clinical variables. Diastolic filling pressure correlated with IL-6, IL-10 and hs-CRP while heart rate (HR) correlated with IL-6 and TNF-α.

Conclusions: Proinflammatory cytokines are elevated in patients with HF and display a positive correlation with filling pressures and HR. Most significant, the regulatory and protective cytokine IL-10 was much lower in patients with DCM as compared to IHD, indicating a differentiation in cytokine patterns with respect to HF etiology.     

不同阶段应用抗L3T4单抗干预治疗对心肌病小鼠细胞因子的影响

目的： 研究不同阶段应用抗L3T4单抗对心肌病小鼠Th1/Th2亚群及血清和心肌组织中细胞因子的影响，探讨抗L3T4单抗治疗自身免疫性心肌病的机制。方法: 用含有人线粒体ADP/ATP载体肽的免疫液免疫近交系BALB/c小鼠建立类扩张型心肌病模型（心肌病组）；以不含肽免疫液免疫小鼠作为对照组；在用ADP/ATP载体肽免疫小鼠的前1 d连续3 d以400 μg抗L3T4单抗免疫小鼠获得早期治疗组；心肌病组小鼠于第4个月初始连续3 d给予抗L3T4单抗治疗获得中期治疗组，单抗使用方法同早期治疗组。运用3色荧光标记流式细胞术检测小鼠脾脏中Th1/Th2的百分含量；以ELISA法检测其血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α水平；实时荧光定量PCR法检测其心肌细胞因子基因表达。 结果: 早期治疗组Th1及Th2亚群明显低于心肌病组；中期治疗组Th1相关细胞因子水平高于心肌病组，Th2水平介于心肌病组和早期治疗组之间。早期治疗组IFN-γ和IL-6与对照组相近，IL-2和TNF-α均高于对照组和心肌病组，IL-4介于前两组之间且与它们均有显著差异；中期治疗组IFN-γ和IL-2水平介于对照组和心肌病组之间，IL-6和IL-4明显低于心肌病组。 结论: 不同阶段应用抗L3T4单抗能够阻断或减轻系统性和局部细胞因子的生成，早期治疗较中期治疗对细胞因子的抑制作用更显著。     

五种免疫相关性心血管疾病的免疫学研究

对扩张型心肌病、风湿性心脏病，原发性高血压，冠心病及肥厚型心肌病进行外周血清可溶性白细胞介素２受体，Ｔ淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞活性的检测，并与健康对照组比较，结果显示：ＤＣＭ组，ＲＨＤ组及ＥＨＴ组的ｓＩＬ－２Ｒ明显高于ＮＣ组，而ＤＣＭ、ＲＨＤ风湿活动组的ＮＫ活性低于ＮＣ组，ＥＨＴ组ＮＫ活性高于ＮＣ组。     

Cytokine production and antibodies against heat shock protein 60 in cardiomyopathies of different origins.

OBJECTIVE: There is growing evidence that proinflammatory cytokines play an important role in a variety of cardiac pathophysiological conditions. The purpose of this study was to determine the circulating tumour necrosis factor (TNF) and interleukin-6 (IL-6) levels in patients with dilated cardiomyopathy (DCM) (n = 40) or ischaemic heart disease (IHD) (n = 38) in comparison with the corresponding data from patients with hypertrophic cardiomyopathy (HCM) (n = 10) or valvular aorta stenosis (AS) (n = 10) and from healthy blood donors (n = 20). METHODS: To investigate the possible sources of cytokines, the in vitro cytokine-inducing capacity of the patients' peripheral blood leucocytes was also measured. The TNF and IL-6 expression levels in the myocardium were investigated from biopsy specimens. The study of the immunological background of the cardiomyopathies was supplemented with screening of anti-heat shock protein 60 (Hsp60) antibodies in the sera of the patients. RESULTS: Elevated levels of circulating TNF (25-150 U/ml) and IL-6 (50-500 pg/ml) were found in 85% of the patients in the DCM and IHD groups, whereas only the IL-6 level was elevated (125-500 pg/ml) in the HCM patients. The in vitro TNF-alpha production was higher than in the normal controls only in the DCM group. The ventricular tissue of the DCM patients expressed TNF-alpha and IL-6. In vitro experiments were performed to examine the production of TNF and IL-6 by cultured rat cardiac myocytes (H9C2) under hypoxic conditions. Even a short hypoxic treatment resulted in cytokine production between 4 and 72 h following reoxygenization. Considerable amounts of anti-Hsp60 antibodies were found in 80% of the IHD patients and in 65% of the DCM patients. The in vitro cytokine production of leucocytes and the frequency of anti-Hsp60 positivity in patients with HCM or AS was not significantly different from those in the normal blood donors. CONCLUSIONS: These results demonstrate that TNF-alpha and IL-6 are of pathophysiological importance in some but not all types of cardiomyopathies, and the sources of cytokine production may differ. The mechanism of the development of primary DCM is still unknown; the high in vitro production of proinflammatory cytokines in the leucocytes of patients with DCM, the presence of TNF and IL-6 in their cardiac tissue and the high prevalence of anti-Hsp60 antibodies in their sera suggest a strong immunological background in the pathophysiology of the disease.     

DIZE对糖尿病心肌病大鼠心功能的保护作用

目的:观察研究血管紧张素转换酶2(ACE2)激动剂重氮氨苯脒乙酰甘氨酸盐(DIZE)对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心功能的保护作用。方法:30只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、DCM组和DIZE处理组(DIZE组),每组10只。DCM组与DIZE组一次性腹腔注射链脲佐菌素65 mg/kg,建立糖尿病模型,12周后经超声检查选出符合糖尿病心肌病的大鼠模型,分别给予DIZE 15 mg·kg~(-1)·d~(-1)或等体积生理盐水,皮下泵入给药4周处理。第16周末行超声检测心功能后麻醉处死大鼠。通过HE染色和Masson染色观察大鼠心肌组织形态学变化,Wsetern blot、ELISA和免疫组化等方法观察ACE2、血管紧张素(Ang)Ⅱ、Ang-(1-7)、白细胞介素(IL)-1、IL-6和结缔组织生长因子(CTGF)等指标的变化。结果:DIZE显著提高了糖尿病大鼠心肌中ACE2的表达,DIZE组较DCM组心肌组织中胶原含量明显降低,IL-1和IL-6蛋白表达水平明显下降,心功能得到明显改善(P0.05)。结论:ACE2内源性激动剂DIZE显著提高了ACE2的水平,降低了炎症水平,从而对DCM大鼠心功能起到保护作用。     

己酮可可碱对扩张型心肌病大鼠心室重构和心功能的影响

目的： 探讨己酮可可碱（PTX）对扩张型心肌病（DCM）大鼠心室重构和心功能的影响。方法: 制备DCM模型，随机分为PTX组（n=10）和DCM组（n=10），同时设正常对照组（n=10）。PTX组给予PTX 25 mg·kg^-1·d^-1, ip，其它2组给予生理盐水ip，共30 d。用ELISA法检测血浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和IL-10的水平，Masson染色和免疫组化染色评估心肌纤维化情况，并采用彩色超声心动图评估心脏的结构和功能。结果: PTX组血浆TNF-α和IL-6的水平显著低于DCM组（P<0.01和P<0.05），但高于正常对照组（P<0.01）；而IL-10高于DCM组和正常对照组（P<0.05和P<0.01）。PTX组心肌纤维化程度较DCM组明显减轻，Ⅰ/Ⅲ型胶原比值降至正常对照组水平。PTX组左室舒张末期内径低于DCM组（P<0.05），而左室射血分数显著高于DCM组（P<0.01）。结论: PTX对DCM大鼠血浆中细胞因子的表达有明显作用，并可延缓心室重构，改进心功能。