儿童结核病的实验室诊断

结核病已经出现了几千年而结核病的致病菌一直到1882年才被德国的科学家柯霍氏发现。在此期间结核病在全球蔓延，造成了无数人的死亡；即使在结核分枝杆菌被发现后的100多年里也有2亿多人死于结核病，迄今全球有1／3（约20亿）的人受到结核菌的感染，每年约1000万新发病例，每年约300万人死于结核病。     

加倍关注结核病的实验室诊断

结核病已经出现了几千年而结核病的致病菌一直到1882年才被德国的科学家柯霍氏发现。在此期间结核病在全球蔓延，造成了无数人的死亡；即使在结核分枝杆菌被发现后的100多年里也有2亿多人死于结核病，迄今全球有1／3（约20亿）的人受到结核菌的感染，每年约1000万新发病例．每年约300万人死于结核病。     

以噬菌体浸染实验检测结核菌的新技术及其临床应用

肺结核是一种因结核分枝杆菌(MTB)—鲜为牛分枝杆菌非洲分枝杆菌感染而引发的传染病,在低收入地区发病率相对较高。据WHO统计,全球约1/3的人口感染MTB,每年新增患者900万,并有300万人死于该病。目前,对于结核病诊断主要依靠实验室诊断,影像诊断临床体症相结合。而实验室诊断主要包括涂片法、培养法、分子生物学方法、免疫学方法和噬菌体法。痰涂片直接镜检是检测抗酸杆菌最普遍的实验室诊断方法,特异性较高,但灵敏性较低,涂片中分枝杆菌要达到103-104/ml,才可检测出阳性结果,且仅能检出1/2-3/4的活动性结核患者,漏检率相当高。罗氏培养…     

结核病金标法免疫学诊断临床应用研究

本介绍的金标法结核抗体诊断药盒．应用特异性膜抗原，点样于硝酸纤维膜，运用间接法原理检测结核抗体，具有特异性强、敏感性高等特点，全程操作仅2分钟，是目前世界上结核病诊断最快捷的方法。     

DC-SIGN分子与结核病的发生

目前结核病防治面临严峻挑战，全球约有20亿人感染结核分枝杆菌，每年新发结核病例800万例，200万人因结核病死亡…。结核病治疗主要依赖化疗，然而逐步攀升的耐药率及近4JD年没有突破性抗结核新药问世，使当前结核病防治陷入困境，急需发展新的治疗药物和方法。近年来一个新发现的树突状细胞表面免疫分子DC-SIGN（CD209）可能与结核病发生密切相关。这一发现可能为结核病防控技术和药物开发带来新思路。现将DC-SIGN的结构、功能以及在结核病发病中的作用介绍如下。     

应用喹诺酮类药物治疗儿童结核病的研究进展

结核疾病是指由感染结核分枝杆菌所引起的慢性感染性疾病,可发病于全身各个器官,尤以肺结核为主[1].儿童结核病,即0 ～16 岁的结核疾病患者,其传染源以家庭内部成人患者为主,传播途径主要包括呼吸道传染、消化道传染以及母婴传染等[2].儿童结核病患者的主要临床表现为低热以及结核中毒等症状,病情严重者可出现咯血、呼吸困难等...     

002 应用检测T细胞法诊断儿童结核瘸的研究

儿童结核病临床表现非特异性，标本收集困难，结核分枝杆菌（MTB）培养时间过长，结核菌素试验（TST）又受多种因素影响，导致TST诊断的敏感性下降。作者采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测对MTB抗原敏感的特异性T淋巴细胞诊断结核病，缩短了时间，提高了结核病诊断的敏感性。     

应用结核病DNA疫苗治疗小鼠耐多药结核病的研究

目的 研究结核分枝杆菌Ag85A质粒DNA疫苗单独或联合药物治疗小鼠耐多药结核病的效果,为建立耐多药结核病的免疫治疗新策略和新方案奠定基础.方法 用结核分枝杆菌高耐利福平、低耐异烟肼临床分离株HB361尾静脉注射17～19 g的6～8周龄雌性BALB/C小鼠后,将小鼠随机分为6组,每组10只.感染后第2天开始,分别用pVAX1载体(A组)、利福平(B组)、吡嗪酰胺(C组)、Ag85A质粒DNA疫苗(D组)、Ag85A质粒DNA疫苗联合利福平(E组)、Ag85A质粒DNA疫苗联合吡嗪酰胺(F组)治疗60 d.治疗结束后4周,分别取肺、肝和脾观察病理改变,称取重量,做菌落计数.结果 小鼠感染4周后,肺内菌量达到1.5×107 CFU,脾内菌量达到1.1×106 CFU.A、B组小鼠死亡率均为10%,其余各组小鼠均存活.治疗结束后4周,肺组织病理显示,各治疗组肺组织病变均有不同程度减轻,病变局限,可见正常的肺泡结构,肺泡轮廓相对清晰.与A组比较,C、D、E、F组肺组织菌落数分别减少了1.18、1.35、1.38、1.08 logs,脾脏菌落数分别减少了0.91、1.00、1.26、1.03 logs(P＜0.01).结论 结核分枝杆菌Ag85A质粒DNA疫苗单独或联合药物治疗小鼠耐多药结核病均有显著疗效.Ag85A质粒DNA疫苗与抗结核药物联合治疗是治疗耐多药结核病的最有前途的免疫策略.     

儿童结核病需要关注的几个问题

儿童结核病是一个严重的公共卫生问题。其临床表现缺乏特异性,痰含菌量少、标本采集困难等因素使儿童 结核病诊断依然面临着巨大的挑战。儿童尤其是婴儿和5 岁以下的潜伏性结核感染儿童,进展为活动性结核病的风 险高,容易发生结核性脑膜炎、结核全身播散甚至死亡等严重情况。治疗儿童潜伏性结核感染的获益可能大于成人。 只有关注儿童结核病的快速准确诊断、合理治疗,加大政府投入,才可能实现“儿童结核零死亡率”的愿景。     

应用结核病DNA疫苗治疗小鼠耐多药结核病的研究

Objective To establish foundation for new strategy and program on immune therapy of multi-drug resistant tuberculosis (MDR-TB) by studying the therapeutic effects of Mycobacterium tuberculosis Ag85A plasmid DNA vaccine alone or combined with drugs on MDR-TB mice. Methods Sixty 6-8 weeks old female BALB/C mice were injected via tail vein with clinical isolate Mycobacterium tuberculosis HB361 which was highly resistant to rifampin (RFP) and lowly resistant to isoniazid. The mice were randomly divided into six groups, ten mice in each group. From the second day after infection,the mice respectively received pVAX1 vector (group A), RFP (group B), pyrazinamide (PZA) (group C),Ag85A plasmid DNA vaccine (group D), Ag85A plasmid DNA vaccine combined with RFP (group E),Ag85A plasmid DNA vaccine combined with PZA (group F) for sixty days. Four weeks after the end of treatment,the lung, liver and spleen of the mice were taken and their pathological changes, weight and colony count were examined. Results Four weeks after infection, the numbers of bacteria in lung and spleen of the mice reached up to 1.5×107 CFU and 1.1 × 106 CFU,respectively. The death rates of mice in group A and group B were both 10% ,and the mice in other groups were alive. Four weeks after the end of treatment,lung pathology in the treated groups showed that the lung lesions were slight and limited,normal alveolar structure were seen, and the profile of the alveoli was relatively clear. Compared with group A, group C, D, E, F reduced by 1.18,1.35,1.38,1.08 logs on the colony count of lung, and reduced by 0.91,1.00,1.26 and 1.03 logs on the colony count of spleen (P＜0.01), respectively. Conclusions Mycobacterium tuberculosis Ag85A plasmid DNA vaccine alone or combined with drugs has significant therapeutic effects on MDR-TB mice. Ag85A plasmid DNA vaccine combined with anti-tuberculosis drugs is the most promising immunization strategy for treatment of MDR-TB.     

应用结核病DNA疫苗治疗小鼠耐多药结核病的研究

Objective To establish foundation for new strategy and program on immune therapy of multi-drug resistant tuberculosis (MDR-TB) by studying the therapeutic effects of Mycobacterium tuberculosis Ag85A plasmid DNA vaccine alone or combined with drugs on MDR-TB mice. Methods Sixty 6-8 weeks old female BALB/C mice were injected via tail vein with clinical isolate Mycobacterium tuberculosis HB361 which was highly resistant to rifampin (RFP) and lowly resistant to isoniazid. The mice were randomly divided into six groups, ten mice in each group. From the second day after infection,the mice respectively received pVAX1 vector (group A), RFP (group B), pyrazinamide (PZA) (group C),Ag85A plasmid DNA vaccine (group D), Ag85A plasmid DNA vaccine combined with RFP (group E),Ag85A plasmid DNA vaccine combined with PZA (group F) for sixty days. Four weeks after the end of treatment,the lung, liver and spleen of the mice were taken and their pathological changes, weight and colony count were examined. Results Four weeks after infection, the numbers of bacteria in lung and spleen of the mice reached up to 1.5×107 CFU and 1.1 × 106 CFU,respectively. The death rates of mice in group A and group B were both 10% ,and the mice in other groups were alive. Four weeks after the end of treatment,lung pathology in the treated groups showed that the lung lesions were slight and limited,normal alveolar structure were seen, and the profile of the alveoli was relatively clear. Compared with group A, group C, D, E, F reduced by 1.18,1.35,1.38,1.08 logs on the colony count of lung, and reduced by 0.91,1.00,1.26 and 1.03 logs on the colony count of spleen (P＜0.01), respectively. Conclusions Mycobacterium tuberculosis Ag85A plasmid DNA vaccine alone or combined with drugs has significant therapeutic effects on MDR-TB mice. Ag85A plasmid DNA vaccine combined with anti-tuberculosis drugs is the most promising immunization strategy for treatment of MDR-TB.     

结核分枝杆菌天然黏附素HBHA的制备及其检测应用

目的探讨HBHA在ELISA检测结核病方面的应用。方法将BCG培养至稳定生长期将其苏通培养基上清通过CL-6B层折柱．利用含NaCL的PBS溶液梯度洗脱得到天然HBHA．然后以纯化的天然HBHA蛋白和原核表达的HBHA蛋白为包被抗原分别对肺结核组、肺外结核组、PPD阳性和PPD阴性健康对照组血清各47例进行ELISA检测抗HBHA抗体水平。结果在进行梯度洗脱时含有375mMNaCL的PBS洗脱液可以获得较纯的天然HBHA蛋白。ELISA检测结果表明肺结核组和肺外结核组的血清抗体水平高于PPD阳性和PPD阴性健康对照组（x^2=36．48，P〈0．01），肺结核组和肺外结核组之间（x^2=0.27。P〉0．05）、PPD阳性和PPD阴性健康对照组之间（x^2=0．30，P〉0.05）血清抗体水平没有显著差异。结论利用天然HBHA蛋白和重组HBHA蛋白进行ELISA结核病诊断都具有较高的特异性和敏感性，可以较好地用于结核病的诊断。以天然HBHA为基础的血清学诊断方法具有更好的敏感性和特异性。     

耐多药结核病的预防

耐多药结核病（MDR—TB）是指至少同时对异烟肼和利福平产生耐药的结核分枝杆菌引起的结核病。由于这类患者同时耐至少两种最有效的抗结核病药物，不仅治疗困难，还有可能不可治愈而持续传播耐多药结核菌，增加原发性MDR—TB发病的可能性，造成严重的流行病学和公共卫生隐患。WHO估计全球每年有30万MDR—TB新病例，而我国2000年耐多药率已达10．7％，其中初始耐多药率为7．6％，获得性耐多药率为17．1％。近年来一些省市报道的耐多药率还远远超过该水平，辽宁省和河南省已分别居于西太区9个耐药监测国家和地区的第1和第2位，被WHO称为两个MDR—TB的“热点省”，我国的耐多药结核病问题已经引起了我国和世界范围的关注。紧抓“初治”这个根本环节，采取多种积极措施，预防耐多药结核病的产生，已经成为控制结核病及耐药结核病在我国流行的迫切任务之一。     

结核分枝杆菌活菌检测方法及应用

结核病是古老的传染性疾病,已在人类社会肆虐了数千年。当今,结核病仍然严重威胁着人们的生命健康。结核病发生和蔓延的过程也是人类同结核病做斗争的历程,自1882年Koch发现结核分枝杆菌是结核病的病原菌以来的10 0余年,特别是分子生物学技术应用后,人类对结核分枝杆菌的生物学特性、致病机制、耐药机制、诊断方法、抗结核药物的研制等方面都取得了具大的成就。结核分枝杆菌死活的鉴别具有临床意义及广泛的应用价值,是结核病的诊断、药物敏感性实验、化疗反应监测、新抗结核药物筛选及结核病预防等研究的基础。随着人们对结核分枝杆菌认识…     

当前我国儿童结核病流行情况及对策

结核病是一严重危害人们身体健康的传染病。20世纪80年代以来，随着耐药、结核病合并HIV及移民等情况的加剧，结核病在全球出现“复燃”趋势。以致世界卫生组织1993年宣布全球结核病“紧急状态”。目前，全球结核病感染者约为世界人口的1/3，每年新发活动结核病人约800万，死亡约200～300万。我国结核病疫情同样不容乐观，我国是世界22个结核病高负担国家之一，近一半人口被结核菌感染，估计全国现有活动性肺结核病人451万，每年死亡约13万人。结核病已不仅仅是公共卫生问题，也是一社会问题。     

二代测序技术在结核病病原学诊断、耐药性检测及流行病学监测中的应用研究进展

结核病是一种病死率较高的传染病,也是我国重点防治的传染病之一.传统的结核病病因学诊断存在易于和其他疾病混淆及实验室检查假阳性率高的问题,分子生物学技术如Xpert可以促进结核病的诊断,但其仍存在不足.二代测序技术(NGS)作为一种新型诊断方式,在多种传染病中被用于疾病诊断、病原体鉴定、耐药性检测和疫情调查,其在结核病的...     

结核分枝杆菌T细胞斑点实验在肺结核诊断中的应用

目的 探讨肺结核快速、准确的诊断方法.方法对 1 171例肺结核患者、502例非肺结核患者进行痰涂片、结核分枝杆菌T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）、结核菌核酸检测（TB-DNA）、抗结核抗体检测,对比分析检测结果.结果 与其他3种方法相比,T-SPOT.TB诊断肺结核具有较高的灵敏性、阳性预测值、阴性预测、约登指数（P均＜0.05）,其诊断不同类型肺结核的阳性率最高（P均＜0.05）.结论 T-SPOT.TB检测诊断肺结核具有较高的灵敏性和特异性.     

涂片抗酸染色T-SPOT.TB与GeneXpert MTB/RIF联合检测在结核病诊断中的应用价值分析

［摘要］　目的　分析涂片抗酸染色（涂片法）、结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（GeneXpert MTB/RIF）三种方法联合检测在结核病诊断中的应用价值。方法　回顾性分析2021年12月至2022年9月在广西壮族自治区人民医院同时进行涂片法、T-SPOT.TB、GeneXpert MTB/RIF检测的临床疑诊结核分枝杆菌感染患者的检测结果,以临床确诊结果为“金标准”计算上述三种方法及其中两者联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确率。分析三种检测方法单独和联合检测对结核病的诊断价值。结果　298例疑似结核患者中,排除31例,最终临床确诊为结核74例,非结核193例。涂片法、T-SPOT.TB、GeneXpert MTB/RIF检测的灵敏度分别为43.2%、94.6%、63.5%,比较差异有统计学意义（χ²=44.861,P=0.000）;T-SPOT.TB检测特异度低于涂片法和GeneXpert MTB/RIF,差异有统计学意义（χ²=74.861,P=0.000; χ²=78.162,P=0.000）;三种方法检测准确率比较差异有统计学意义（χ²=23.468,P=0.000）。涂片法联合T-SPOT.TB检测的灵敏度与涂片法相比,差异有统计学意义(χ²=45.548,P=0.000)。涂片法联合GeneXpert MTB/RIF检测的灵敏度与涂片法相比,差异有统计学意义(χ²=6.965,P=0.008)。结论　在结核病诊断中,GeneXpert MTB/RIF和涂片法的准确率比T-SPOT.TB高,T-SPOT.TB或GeneXpert MTB/RIF的检测灵敏度显著高于涂片法。采用T-SPOT.TB或GeneXpert MTB/RIF联合涂片法均可显著提高结核病诊断的灵敏度,推荐采用联合检测方法以提高临床诊断效能。