高效液相法测定黄芪中性多糖的单糖组成

目的:采用高效液相法测定黄芪中性多糖的单糖组成。方法:正交设计优选三氟乙酸水解黄芪中性多糖的条件;水解产物直接采用高效液相-视差检测器(HPLC-RID)检测或经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化后高效液相-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)检测两种方法,以6种单糖为对照,测定水解产物中单糖的组成。结果:黄芪中性多糖的三氟乙酸完全酸水解最佳条件为采用1M TFA,水解温度100℃,水解时间5 h;两种高效液相色谱法测得水解产物中的单糖均为葡萄糖。结论:采用三氟乙酸完全酸水解条件和高效液相色谱法测定单糖的方法简便易行,可用于黄芪中性多糖的单糖组成研究。     

白茅根多糖IC1的分离及其相对分子质量和单糖组成的测定

目的:分离纯化白茅根多糖,建立白茅根多糖相对分子质量的测定方法,并通过高效液相色谱法测定其单糖组成和摩尔比.方法:通过多次醇沉的方法对白茅根多糖进行分离纯化,得到白茅根多糖IC1;采用高效液相色谱法,以右旋糖酐为标样,绘制多糖分子量的标准曲线,测定白茅根多糖IC1的相对分子质量;通过酸水解,使IC1水解成单糖,分析这些单糖的组成及其摩尔比.结果:经测定,白茅根多糖IC1的相对分子质量为8 292.2;白茅根多糖IC1由鼠李糖,木糖,果糖,甘露糖,葡萄糖5种单糖组成,其摩尔比为1∶11.45∶1.26∶1.02∶59.23.结论:多次醇沉的方法对白茅根多糖进行分离,效果良好,操作简便.高效液相法测定白茅根多糖分子质量及单糖组成灵敏度高,重复性好.     

黄芪毛状根与栽培黄芪中多糖的比较

目的：比较栽培黄芪和生物技术培养的黄芪毛状根总多糖的组成与含量。方法：采用脱脂、水煎、醇沉、脱蛋白、透析、冷冻干燥的方法,用硫酸－苯酚法进行二者中多糖的含量比较,采用高效液相凝胶渗透色谱法对黄芪状根多糖为1．85％。结论：黄芪毛状根多糖低于栽培黄芪中多糖含量。     

北豆根多糖的单糖组成分析及分子量研究

目的:分析北豆根多糖的单糖组成及分子量。方法:采用水提醇沉获得北豆根粗多糖,用TCA-正丁醇除蛋白后得到北豆根多糖样品,采用气相色谱法(GC)测定其单糖组成,高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测分子量。结果:北豆根多糖是由D-阿拉伯糖(D-Ara)、L-岩藻糖(L-Fuc)、D-甘露糖(D-Man)、D-葡萄糖(D-Glc)和D-半乳糖(D-Gal)组成,其摩尔比为13.04∶1.00∶1.69∶8.99∶4.32,重均分子量为4826。结论:用GC和HPGPC可以测得北豆根多糖的单糖组成和分子量,方法简便可行,可以用于北豆根多糖的研究,为北豆根多糖的深入研究奠定基础。     

太子参均一多糖的分离与表征

目的:对太子参抗二型糖尿病多糖活性部位(PF40),进行分离纯化得到均一多糖并对其进行结构表征。方法:太子参粉碎后,通过水提醇沉法(40%乙醇)得到太子参粗多糖,采用DEAE-纤维素、葡聚糖凝胶柱对其分离纯化,得到一种均一多糖,采用高效凝胶渗透色谱法测定分子量,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)-柱前衍生高效液相色谱法分析单糖组成。结果:分离得到一种均一多糖,由葡萄糖组成,分子量为18400Da,命名为HPh-1-1。结论:太子参均一多糖HPh-1-1是一种葡聚糖。     

滇黄精中多糖的分离与抗氧化活性研究

目的分离纯化滇黄精Polygonatum kingianum中的均一多糖,并阐释其理化性质和抗氧化活性。方法通过水提醇沉、分级醇沉得滇黄精总多糖(PKS)的50%和70%醇沉部位,再经DEAE-琼脂糖凝胶FF离子交换柱和Sephadex G-100柱色谱法分离纯化得到均一多糖,并利用柱前衍生化HPLC、高效凝胶渗透色谱法和红外光谱法分别对其单糖组成、相对分子质量和结构进行研究;同时采用总还原力实验、1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和羟基自由基(·OH)清除法对其抗氧化活性进行评价。结果从50%和70%醇沉部位分离纯化得到3个均一多糖(PKS-1、PKS-2和PKS-3),其单糖组成均含有D-甘露糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖、D-阿拉伯糖和L-岩藻糖,其中PKS-1及PKS-3还分别含有D-核糖和L-鼠李糖;相对分子质量分别为85 017.83、266 084.76和474 799.22;PKS、PKS-1和PKS-2的总还原能力、·OH及DPPH自由基的清除能力为PKS PKS-2PKS-1。结论从滇黄精50%和70%醇沉部位分离到3个均一多糖,均为含有β构型的吡喃环酸性多糖,其单糖组成相似,PKS、PKS-1和PKS-2均有一定的抗氧化活性,为滇黄精抗氧化活性成分的研究及抗衰老药物和功能性食品的开发利用奠定了科学基础。     

响应面法优化水提醇沉玄参多糖工艺及其含量分析

目的:优化水提醇沉法提取纯化玄参多糖的工艺条件,建立多糖酸水解、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化高效液相色谱法(HPLC)测定玄参多糖单糖组成和含量的方法。方法:在单因素试验基础上,选择溶媒量(A)、提取时间(B)和醇沉浓度(C)为考察因素,应用Box-Behnken响应面中心组合法进行三因素三水平设计,以多糖含量为指标,优化玄参多糖的提取工艺;玄参多糖用三氟乙酸(TFA)水解后,以PMP对水解单糖进行衍生化,并建立6种单糖的HPLC分离和含量测定方法。结果:玄参多糖的最佳提取工艺条件为50倍溶媒量,提取时间1 h,醇沉浓度90%;玄参多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成;各单糖的平均质量比为0.48∶1.40∶1.00∶69.80∶93.00∶2.20;玄参多糖平均质量分数为16.80%。结论:优选的玄参多糖水提醇沉提取纯化工艺可将玄参中的多糖提取完全,用于后续分析;PMP柱前衍生化HPLC单糖测定法的精密度、重复性和准确性良好,适用于玄参多糖的组成及含量测定。     

绞股蓝多糖的组成分析及其对质粒DNA的保护作用

目的:提取分离从陕西省平利县采集的绞股蓝中的多糖成分,分析其组成和对质粒DNA的保护作用.方法:绞股蓝经水提醇沉、透析和脱蛋白后得多糖,将多糖酸水解并用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后进行高效液相色谱分析;同时,观察绞股蓝多糖体外对过氧化氢(H2O2)光解反应诱导质粒DNA损伤的保护作用.结果:绞股蓝多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖8种单糖组成;绞股蓝多糖能保护DNA免受损伤,这种保护作用呈浓度依赖关系.结论:本试验方法简便灵敏,结果准确可靠,为综合开发利用绞股蓝提供了科学依据.     

地黄活性成分梓醇在大鼠体内的代谢变化研究

目的观察大鼠口服地黄水提液后其主要成分梓醇在体内的代谢变化,初步探讨梓醇在体内的可能代谢途径和变化规律。方法 SD大鼠灌胃给予地黄水提液,分别给药后在不同时间点取血浆,采用HPLC-MS检测血浆中梓醇及其代谢物的变化。结果大鼠口服地黄煎液后,梓醇在大鼠体内主要有1个异构体和5个代谢转化产物:异构体、甲基化物、羟基化物、糖基化物、脱氧羟基化物和脱氧羟基化甲基化物。且梓醇及其代谢物均在给药后45 min达到最高值,随后呈下降趋势。结论地黄梓醇在体内可能代谢途径分析研究,可为地黄及含有梓醇的药物的体内外代谢分析和进一步与药效结合、作用机理研究提供参考。     

亮菌多糖的分离纯化

目的 通过醇沉、色谱等分离提取技术对发酵得到的亮菌胞内多糖进行分离纯化,并对纯化的多糖进行结构及部分性质研究.方法 采用水提、醇沉、除蛋白等方法得到亮菌胞内粗多糖,然后通过离子交换色谱、分子筛色谱对粗多糖进行进一步的分离纯化,得到单一多糖.同时采用红外光谱法、紫外光谱法、核磁共振法对该单一多糖进行结构研究,确定其单糖组成及糖链的连接方式.结果 通过去蛋白、醇沉、离子交换色谱和凝胶滤过色谱的方法得到亮菌胞内多糖IPS-B2,该多糖为直链α-D-(1→6)-吡喃型葡聚糖,不含蛋白质、多肽和氨基酸.结论 通过纯化得到了直链α-(1→6-葡聚糖(IPS-B2),该多糖在体内具有较好的抑瘤效果.     

黄芪多糖对Tg诱导PERK/eIF2α通路介导HT29细胞凋亡的保护机制研究

目的 探讨黄芪多糖对毒胡萝卜素内酯(Tg)诱导PERK/eIF2α通路介导HT29细胞凋亡的保护作用.方法 将细胞分为空白组、模型组、黄芪多糖低剂量组、黄芪多糖高剂量组.除空白组外,其余组给予1 μmol/LTg诱导24h后进行PERK及p-eIF2α蛋白表达的检测.结果 用Tg诱导HT29细胞,PERK及p-eIF2...     

黄芪多糖含量的相关种植因素研究

摘 要 目的:分析产地、种植方式、采收时期等种植因素对黄芪多糖含量的影响,以期为黄芪质量评价提供科学依据。方法:采用紫外分光光度计法对产自山西、内蒙、东北、甘肃、安徽、陕西种植方式为栽培、野生、半野生,采收期2年、3年、4年、5年、6年的21批黄芪样品中多糖含量进行测定计算。分析产地、种植方式和采收期对多糖的影响。结果:黄芪多糖检测质量浓度的线性范围为001 0.13 mg/ml,测量过程具有良好精密度、稳定性和重复性,加样回收率达97.66%。从产地分析,山西产黄芪中黄芪多糖含量最高,内蒙、东北次之,陕西、安徽较低。从种植方式分析,人工栽培黄芪中黄芪多糖高于半野生和野生品,半野生高于野生。从采收期分析3年生黄芪中黄芪多糖含量最高,2年生次之,6年生最低。结论:紫外分光光度计法测量黄芪多糖具有操作简单,稳定性、重复性高,价格低廉等优点,可用于黄芪多糖含量测定。黄芪产地、种植方式和采收期是影响其质量的主要因素。     

漏芦多糖的提取、单糖组分分析及含量测定

目的：提取漏芦多糖，分析其单糖组分并测定其质量分数，为以后漏芦多糖研究提供参考。方法：水提醇沉法提取粗多糖，Sevag法除蛋白，高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测( HPAEC-PAD )法测定其单糖组成，苯酚-硫酸法测定多糖质量分数。结果：漏芦多糖的单糖组成为葡萄糖、阿拉伯糖和果糖，其摩尔比为1∶1.61∶2.21。以单糖混合物为对照品测得漏芦多糖中总糖的质量分数为 95.78%。结论：HPAEC-PAD法具有样品不用衍生、灵敏度高、精密度好等优点，适合多糖类样品中单糖的分析；苯酚-硫酸法实验操作简便，准确可靠，可用于多糖含量测定。     

乌头母根、子根、须根多糖的比较

目的:研究乌头母根、子根、须根的多糖含量及单糖组成.方法:分别以精制多糖测得多糖对葡萄糖的换算因子,以苯酚-硫酸分光光度法测定乌头母根、子根、须根的多糖含量;以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱法测定多糖中的单糖组成.结果:乌头母根、子根、须根的多糖含量分别为22.0%,33.5%,6.1%;母根、子根、须根的多糖中主要含有葡萄糖,另外含有少量的半乳糖醛酸、半乳糖、阿拉伯糖,子根中还含有甘露糖,须根中还含有甘露糖、鼠李糖、木糖.结论:多糖含量检测方法简便、快速,测定结果更客观、准确;须根中多糖含量最低,且单糖组成与母根、子根有明显不同.     

分步醇沉对玛咖多糖单糖组成及抗氧化活性的影响

目的:分析分步醇沉所得玛咖多糖的单糖组成,并对各部分玛咖多糖的抗氧化能力进行研究。方法:采用水提醇沉法得到玛咖粗多糖,通过分步醇沉对玛咖粗多糖进行分离、纯化;采用气相色谱分析法对各玛咖多糖的单糖组成进行分析;最后采用三氯乙酸法和清除DPPH自由基的方法考察各部分玛咖多糖的抗氧化能力。结果:分步醇沉随乙醇浓度增加依次得到0~40%乙醇多糖部分,40%~50%乙醇多糖部分,50%~60%乙醇多糖部分,60%~70%乙醇多糖部分及70%~80%乙醇多糖部分,依次命名为MP1,MP2,MP3,MP4和MP5;其中收率最大的为MP1,纯度最高的为MP4,分别为0.856%和68.5%;经气相色谱技术分析发现不同体积分数乙醇所得玛咖多糖的单糖组成种类及比例不同;抗氧化能力试验结果表明各部分玛咖多糖的抗氧化能力存在显著性差异,其中抗氧化能力最强的为MP5,MP4抗氧化能力次之,抗氧化能力最弱的为MP1。结论:分步醇沉所得各部分玛咖多糖的抗氧化能力有较大差异,玛咖多糖的抗氧化活性与其单糖组成的种类、比例及其空间构象密切相关,分步醇沉对分离纯化玛咖多糖具有重要意义,为玛咖多糖进一步分离纯化、结构组成和药理研究提供可靠的参考依据。     

当归多糖对移植肌卫星细胞的受体鼠造血功能恢复的影响

目的:探讨当归多糖对移植肌卫星细胞的照射小鼠造血功能恢复的影响。方法:将昆明小鼠随机分为4组:照射组、移植骨髓组、移植肌卫星组、移植肌卫星且注射当归多糖组。小鼠经8Gy的137Cs-γ照射后按组别给予不同方式治疗,观察其生存状态、体重、外周血常规变化,PCR法检测Y染色体性别决定基因(sex determining region on Y chro-mosome,Sry)的表达。结果:照射组小鼠在照射后17天内全部死亡,移植骨髓组、移植肌卫星且注射当归多糖组、移植肌卫星组小鼠在照射后1周内体重和血象值均明显下降,各组体重分别于11天、12天、20天左右开始恢复,28天基本恢复到正常水平;各组血象值于第2周开始恢复,第4周时基本恢复,移植肌卫星且注射当归多糖组常规指标均优于移植肌卫星组,第3周时各存活小鼠体内均可检测到供体小鼠Sry基因。结论:当归多糖可促进移植肌卫星细胞的照射小鼠造血功能的恢复,并加速其造血重建。     

Immunomodulatory effects of astragalus polysaccharide on Human peripheral blood mononuclear cells co-cultured with cervical cancer cell line

OBJECTIVE:To investigate immunomodulatory ef-fects of Astragalus polysaccharides (APS) on the co-culture of peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) with HeLa ...     

芦笋多糖提取、单糖组分分析及定量测定

目的提取芦笋多糖,纯化后分析其单糖组分并测定总糖,为今后芦笋多糖研究提供参考。方法水提醇沉法提取粗多糖,Sevage法除蛋白,H2O2脱色,高效毛细管电泳(HPCE)测定单糖组成,苯酚-硫酸法测定多糖。结果芦笋粗多糖主要单糖组成为木糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖,其质量分数分别为3.44%、7.92%、10.52%、17.15%、41.85%。以单糖混合物为对照品测得粗多糖中总糖的质量分数为79.14%。结论高效毛细管电泳分离度高,可用于单糖组分分析;苯酚-硫酸法实验操作简便,准确可靠,可用于芦笋多糖的测定。