银杏叶提取物对肾缺血-再灌注后细胞凋亡的影响

目的:观察银杏叶提取物对大鼠肾缺血-再灌注后细胞凋亡的影响.方法:采用动脉夹闭大鼠双侧肾蒂45 min、再灌注24 h的方法制成急性肾缺血-再灌注模型.光、电镜观察细胞结构改变;采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的DNA原位末端标记技术检测细胞凋亡的情况,流式细胞仪定量分析细胞凋亡;测定血浆肌酐、尿素氮,并观察肾功能变化.结果:缺血-再灌注组较假手术组肾小管凋亡细胞数明显增多;银杏叶提取物处理组较缺血-再灌注组凋亡细胞数明显减少,组织损害明显减轻.结论:银杏叶提取物预防给药能减轻肾缺血-再灌注损伤,其机制可能与抑制细胞凋亡有关.     

银杏叶提取物对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及对凋亡的影响

肝外科实践中常常需要阻断肝门血管以完成复杂的肝脏手术，如肝破裂修补术、肝移植术等。阻断入肝血流后导致的肝脏缺血再灌注（IR）损伤受到肝外科广泛关注。银杏叶提取物（EGB）由于在心、脑血管疾病等方面的作用广泛用于临床治疗。而EGB对肝IR后损伤是否有保护作用研究较少。本实验通过研究EGB对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（IRI）中对肝细胞凋亡的影响来探讨EGB对大鼠肝脏IRI的保护作用及可能的机制。     

银杏叶提取物对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及对凋亡的影响

肝外科实践中常常需要阻断肝门血管以完成复杂的肝脏手术,如肝破裂修补术、肝移植术等。阻断入肝血流后导致的肝脏缺血再灌注(IR)损伤受到肝外科广泛关注。银杏叶提取物(EGB)由于在心、脑血管疾病等方面的作用广泛用于临床治疗。而EGB对肝IR后损伤是否有保护作用研究较少。本实     

银杏叶提取物对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤热休克蛋白表达的影响

目的　探讨银杏叶提取物通过诱导热休克蛋白的合成 ,保护大鼠肾脏缺血 再灌注损伤作用与机理。方法　 34只SD大鼠随机分为假手术组 (n =10 )、单纯缺血 再灌注组 (n =12 )、缺血再灌注 +银杏叶提取物处理组 (n=12 )。通过免疫组织化学方法观察诱导型HSP70的表达情况。结果　与假手术组相比 ,单纯缺血 再灌注组肾小管上皮细胞呈明显的缺血性改变 ,HSP70表达明显增强 ,两组差异有显著性(P <0 0 1) ;缺血再灌注 +银杏叶提取物处理组与单纯缺血 再灌注组相比 ,肾小管上皮细胞缺血性改变减轻 ,HSP70表达增强 (P <0 0 5 )。结论　银杏叶提取物诱导大鼠肾缺血 再灌注组织中HSP70表达 ,减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤     

微量去甲肾上腺素预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的　探讨微量去甲肾上腺素预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响并与缺血预处理比较.方法　采用大鼠在体缺血再灌注(I/R)模型,分别以缺血前去甲肾上腺素预处理(NE-P),缺血预处理(IP),采用末端脱氧核苷酸转换酶介导的生物素平移缺口末端标记技术(TUNEL)检测各组心肌细胞凋亡情况;同时检测心肌梗死范围.结果　I/R组细胞凋亡率[(43.33±4.92)%]较高,NE-P组及IP组虽然也有一定的心肌细胞凋亡率[(25.24±1.56)%、(24.44±2.96)%],但较I/R组明显降低(P＜0.001).IP组及NE-P组心肌梗死范围较I/R组明显减少,IP组及NE-P组两项指标无显著差异.结论　心肌缺血再灌注损伤可诱发心肌细胞凋亡,NE-P能明显减少缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡的发生率,能明显减少心肌梗死范围,减轻缺血再灌注损伤;NE-P减少心肌梗死范围、减轻缺血再灌注损伤的机理可能与其能明显减少心肌细胞凋亡有关.     

银杏叶提取物对肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的：通过观察银杏叶提取物（EGB）对家兔肾缺血再灌注（I／R）损伤模型血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）含量和磺胺嘧啶代谢的影响，探讨EGB对肾I／R损伤的保护作用。方法：24只家兔随机分为假手术组（A组）、IR组（B组）和EGB预处理组（c组）。B、C组家兔肾缺血45min，再灌注4h建立家兔肾I／R损伤模型．C组加用EGB预处理。于再灌注同时注射磺胺嘧啶，测定其分布半衰期（t1/2α）、消退半衰期（t1/2β），并检测不同时间点血清BUN和Cr含量变化，同时观察肾组织病理学改变。结果：B组磺胺嘧啶的t1/2α与A组相比明显缩短，而t1/2β明显延长（均P〈0．05），其血清中BUN、Cr含量亦明显升高（P〈0．05），肾组织出现明显的病理改变。而经EGB预处理的c组磺胺嘧啶的t1/2α与B组相比延长，t1/2β缩短，血清中BUN、Cr含量降低．差异有显著性（P〈0．05），肾组织病理改变明显减轻。结论：EGB对肾I／R损伤有一定的保护作用。[著者文摘]     

银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :探讨银杏叶提取物 (GBE)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :制造大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。 40只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组 (A组 )、缺血组 (B组 )、小剂量GBE组 (C组 )、大剂量GBE组 (D组 )。C、D 2组于术前 3 0min及术后 1h分别给予银杏叶提取物 2 0mg/kg、40mg/kg腹腔内注射。应用TTC染色及HE染色观察梗死体积及缺血坏死程度 ,应用TUNEL法检测凋亡细胞数。结果 :①C、D 2组梗死体积明显小于B组 (P <0 .0 1) ,D组小于C组 (P <0 .0 5)。②C、D 2组凋亡细胞数明显少于B组 (P <0 .0 1) ,D组少于C组 (P <0 .0 5)。结论 :银杏叶提取物可减少脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和梗死体积 ,疗效与剂量有关     

银杏叶提取物对心肌缺血再灌注微循环的保护作用

复制家兔缺血再灌注模型，采用显微电视和微机图像处理系统对２０吸家兔球结膜微血管口径，流速，流量等参数进行定量分析。结果：银杏叶提取物组在结扎即刻，３０分钟再灌注３０分钟等时相，与生理盐水比较，微动脉，微静脉口径，微静脉流速，流量毛细血管密度增增加，交换距离缩小。     

缺血再灌注损伤与心肌细胞凋亡研究进展

再灌注治疗是急性心肌梗死最重要的治疗方法，但再灌注的同时也出现了心肌细胞不可逆的损伤，称为缺血再灌注损伤。坏死和凋亡是缺血再灌注过程中心肌细胞的主要死亡形式，二者的共同作用造成心肌梗死面积的扩大和心功能的下降。心肌细胞凋亡主要由两大途径介导：细胞膜受体介导的外源性途径，线粒体介导的内源性途径。本文就目前有关缺血再灌注损伤中心肌细胞凋亡途径的最新研究进展和缺血后处理对心肌的保护作用进行综述。     

人参对大鼠缺血再灌注后心肌细胞凋亡的抑制作用

背景：心肌细胞凋亡与缺血再灌注损伤直接相关，心肌细胞凋亡数的多寡可以作为判断再灌注损伤程度的指标之一。人参及其提取物人参皂甙被证实能改善心肌缺血、缩小梗死面积，对缺血再灌注损伤有明显的保护作用。目的：探讨人参对大鼠心脏缺血再灌注后心肌细胞凋亡及bcl-2基因表达的作用。设计：随机对照的实验研究。地点、材料和干预：本实验在湖北省武汉市同济医院动物实验中心完成。实验共用Wistar大鼠15只，雌雄不分。Wistar鼠的左冠状动脉前降支(Left descending coronary artery,LAD)被结扎30min后再松开建立缺血再灌注心脏模型。应用原位末端标记法检测心肌凋亡细胞，并进行细胞计数；原位杂交和免疫组化检测bcl-2 mRNA和基因表达产物的蛋白质，通过图像分析系统测量阳性染色区域的平均吸光度进行量化分析，以观察人参对大鼠心肌缺血再灌心肌细胞凋亡的影响及基因表达。主要观察指标：大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡情况及bcl-2 mRNA，Bcl-2蛋白的表达。结果：人参治疗组bcl-2 mRNA吸光度为0．11&;#177;0．02，较单纯结扎组(0．07&;#177;0．02)和假手术组(0．06&;#177;0，01)明显升高(t=8.72，P&;lt;0．001)；人参治疗组Bcl-2蛋白吸光度为0．15&;#177;0.02，与单纯结扎组(0.09+0.02)比较，差异有非常显著性意义(t=8.631，P&;lt;0．001)，但与假手术组(0.14&;#177;0．01)比较，差异无显著性意义(P&;gt;0.05)。结论：心肌缺血再灌注可使心肌细胞凋亡数显著增加，人参治疗可明显地抑制缺血再灌注损伤诱导的心肌细胞凋亡，其机制可能是通过增强bcl-2基因表达而实现的。     

银杏叶提取物对大鼠脑缺血再灌注后自由基损伤的保护作用

目的 :研究银杏叶提取物 (GBE)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后SOD、MDA及NO含量的影响 ,探讨GBE的脑保护作用的机制。方法 :4 0只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组 (A)、缺血组 (B)、小剂量GBE组 (C)、大剂量GBE组 (D)。制造大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。C、D组于术前 30min及术后 1h分别给予银杏叶提取物2 0mg/Kg、4 0mg/Kg腹腔内注射。应用TTC染色观察梗死体积、检测脑缺血组织SOD活性、MDA和NO含量。结果 :①SOD活性C、D组明显高于B组 (P <0 .0 1) ,D组高于C组 (P <0 .0 5 )。②MDA和NO含量C、D组明显低于B组(P <0 .0 1) ,D组低于C组 (P <0 .0 5 )。③梗死体积C、D组明显小于B组 (P <0 .0 1) ,D组小于C组 (P <0 .0 5 )。结论 :银杏叶提取物可减少脑缺血再灌注后自由基生成及梗死体积 ,疗效与剂量有关。     

丙泊酚对大鼠肾缺血再灌注损伤细胞凋亡信号通路的影响

背景:肾移植中肾缺血再灌注损伤能引发凋亡程序的执行,丙泊酚可能的肾保护作用及其与细胞凋亡通路间的关系,有助于探讨丙泊酚的作用机制.目的:探讨丙泊酚对大鼠肾缺血再灌注损伤细胞凋亡通路的影响及可能的作用机制.设计,时间及地点:动物实验,细胞形态学观察,于2004/2005在北京友谊医院泌尿外科研究所实验室共同设计和完成.材料:选取封闭群SD成年雄性大鼠99只.兔抗鼠Bcl-2、Bax、caspase3、cytochrome C均为武汉博士德生物工程有限公司产品.方法:将动物随机分为对照组26只、缺血再灌注组35只、缺血再灌注+丙泊酚组38只.建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,术前单次静脉缓慢输注乳酸林格液5 mL/kg,逐层正中切口开骏,切除右肾,用无创血管夹夹闭左侧肾蒂,缺血时间45 min,松夹再灌注后全层缝合腹壁,取再灌注0,3,12,24,72 h左侧肾脏,取肾同时采血处死动物.缺血再灌注+丙泊酚组在缺血前15 min用药,丙泊酚1 mg/(kg·min)直至再灌注后30 min,共用药75 min.对照组和缺血再灌注组以乳酸林格液等量输注.主要观察指标:观察损伤肾的形态学改变,用免疫组织化学观察细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase 3和细胞色素C的表达情况.结果:光镜可观察到肾缺血再灌注引起的肾损害,程度依次为近曲小管、远曲小管、集合管、肾小球;免疫组化图像分析观察到缺血再灌注组与对照组相比,Bax、caspase 3,细胞色素C表达增加,Bcl-2表达未见明显变化;缺血再灌注+丙泊酚组与对照组比较,前者Bax、caspase 3和细胞色素C表达下降,Bcl-2表达增高(P＜0.05).结论:丙泊酚对肾缺血再灌注损伤引起的细胞凋亡可能具有保护作用,可能机制是抑制促凋亡蛋白Bax、caspase 3和细胞色素C的表达,对Bcl-2的表达无影响,与细胞凋亡的线粒体通路途径有关.     

缺血预处理对大鼠移植胰细胞凋亡的影响

目的 观察缺血预处理对大鼠移植胰细胞凋亡的影响。方法 6只正常大鼠为对照组，18只糖尿病SD大鼠随机分为缺血再灌注组（I／R组，n=6）、供胰缺血预处理组（DIPC组，n=6）和受体双后肢缺血预处理组（RIPC组，n=6），均行单纯胰腺移植（18只正常SD大鼠为供体）；检测各组大鼠再灌注前、后血糖；再灌注后2h移植胰组织中超氧化物歧化酶（SOD）和髓过氧化物酶（MPO）含量；用TUNEL法观察移植胰组织细胞凋亡情况。结果 与I／R组比较，DIPC组和RIPC组大鼠再灌注后的血糖、MPO活性和移植胰组织细胞调亡指数明显降低，移植胰组织中SOD活性明显增高（均为P〈0．01）。结论 供胰和受体大鼠双后肢缺血预处理能减轻大鼠移植胰细胞的凋亡现象。     

银杏叶提取物对大鼠肠缺血/再灌注后肠黏膜的保护作用及机制

目的研究银杏叶提取物（EGb761）预先给药对大鼠肠缺血／再灌注（I／R）后肠黏膜的保护效应，并观察氧自由基、bcl-2蛋白表达，探讨其作用机制。方法32只SD大鼠随机分为4组（n=8）：对照组、损伤组、EGbl组、EGb2组。监测平均动脉压（MAP），实验结束后取回肠末端组织行光镜检查，并进行肠黏膜组织Chiu’s评分，称量肠干重、湿重并计算肠含水率：检测肠黏膜组织SOD活性、MDA含量的变化，免疫组化检测bcl-2蛋白表达。结果EGb预先给药能显著升高肠I／R后的MAP，明显减轻肠黏膜组织病理损害。损伤组Chiu’s评分、肠含水率及MDA含量均显著高于对照组（P〈0．01），SOD活性显著低于对照组（P〈0.01），EGb能剂量依赖性地显著改善上述指标（P〈0．05）。损伤组bcl-2蛋白表达显著低于对照组（P〈0．01），EGb761可使bcl-2蛋白表达显著高于损伤组及对照组（P〈0.01）。结论EGb761预先给药对肠I／R后肠黏膜具有保护作用，可能与其清除氧自由基、诱导bcl-2的高表达有关。     

银杏叶对大鼠脊髓缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的探讨预先给予银杏叶提取物能否预防大鼠脊髓缺血再灌注损伤。方法将30只大鼠随机分为3组,假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、银杏叶提取物保护组(G组)。其中G组每日腹腔注射给予0.83 ml.kg-1GBE,连续给药5天。采用腹主动脉缺血法制备大鼠的脊髓缺血再灌注损伤模型。缺血45 min,再灌注24 h后进行Tarlov神经功能评价和病理组织学改变的观察。结果 G组与IR组相比较,神经功能评分结果显示IR组后肢神经功能改善明显,神经功能评分结果差异具有显著的统计学意义(P0.05)。病理组织学结果表明,IR组出现明显的病理改变,神经细胞固缩、组织内血管充血等病理改变,G组的病理改变较轻,明显好于IR组。结论银杏叶对大鼠脊髓缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

缺血后处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的:观察缺血后处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响。方法:实验于2006-02/05在首都医科大学附属朝阳医院心脏中心实验室完成。选择健康SD大鼠48只,随机数字表法分为3组:假手术组、缺血再灌注组和缺血后处理组,每组16只。制备大鼠心肌缺血再灌注模型。缺血再灌注组,收紧结扎线缺血40min,放松结扎线再灌注240min;缺血后处理组,缺血40min后,再灌注10s,缺血10s,连续3个循环,然后再灌注239min;假手术组,开胸后穿线做套环,但不收紧结扎线。采用TUNEL技术检测心肌细胞凋亡率,同时测定血清肌酸激酶活性和心肌梗死范围。结果:纳入动物48只,均进入结果分析。①血清中肌酸激酶活性的测定:再灌注结束后缺血后处理组和缺血再灌注组肌酸激酶活性明显高于假手术组[分别为(13.54±1.50),(20.72±1.58),(2.90±0.28)μkat/L,P<0.01],缺血后处理组明显低于缺血再灌注组(P<0.01)。②心肌梗死范围:再灌注结束后缺血后处理组和缺血再灌注组心肌缺血区与左室面积比值无明显差异,缺血后处理组心肌坏死区与缺血区比值显著低于缺血再灌注组(分别为26.1±6.7,40.2±7.2,P<0.01)。③心肌凋亡细胞计数:再灌注结束后假手术组未见明显细胞凋亡(<5%),缺血后处理组心肌细胞凋亡率明显低于缺血再灌注组[分别为(12.5±2.9)%,(21.3±3.8)%,P<0.01]。结论:缺血后处理可减轻缺血再灌注损伤、其机制可能与减少心肌细胞凋亡有关。     

双侧迷走神经切断对肺缺血再灌注氧化应激反应的影响

目的 研究双侧迷走神经切断对肺缺血再灌注引起的氧化应激反应的影响.方法 将24只健康雄性新西兰大白兔随机分为:假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、双侧迷走神经切断合并缺血再灌注组(NIR组).缺血前和再灌注末抽取动脉血进行血气分析,观察动脉血氧分压PaO<,2>及肺泡动脉氧分压差(A-aDO<,2>)的变化.再灌...     

异搏定对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的：在大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型上，研究异搏定对视网膜缺血再灌注损伤后视网膜内细胞凋亡的影响。方法：60只大鼠随机分为对照组及异搏定处理组，每组30只。通过结扎大鼠左颈总动脉1h，然后再灌注。异搏定处理组腹腔注射异搏定1mg／kg，对照组腹腔注射生理盐水1mL／kg，分别检测1、6、12、24、48、72h各时段大鼠视网膜内的细胞凋亡，每时段大鼠各5只。结果：再灌注后，细胞凋亡主要出现于视网膜的神经节细胞层和内核层，大鼠视网膜在再灌注6h逐渐出现细胞凋亡，12h逐渐增加，24h细胞凋亡达到高峰，偶尔在外核层可见凋亡细胞。然后细胞凋亡逐渐减少，但是，到了术后72h，仍然可见视网膜内有细胞凋亡，而异搏定可以减少视网膜细胞凋亡的发生。结论：异搏定可以抑制再灌注后细胞凋亡的发生。对大鼠视网膜具有保护作用。     

缺血再灌注损伤诱导大鼠心肌细胞凋亡的实验研究

目的：探讨大鼠心肌缺血再灌注后不同时相心肌细胞凋亡情况及其与缺血再灌注的关系，并进一步探讨心肌细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤中的可能作用。方法：64只SD大鼠随机分为5组：对照组（假手术45min、105min、165min、225min，各时间点n=8），心肌缺血45min组（I15min,n=8），心肌缺血45min后再灌注1h、2h、3h组（I／R1h、I／R2h、I／R3h，各时间点n=8），分别在各时点处死大鼠取材。应用DNA琼脂糖凝胶电泳分析与透射电镜的检测心肌细胞凋亡的改变。结果：DNA琼脂糖电泳分析显示，I／R2h组、I／R3h组出现凋亡特征性“梯状电泳带”而对照组、L45min组及I／R1h组均未见凋亡带谱。透射电镜检测显示，对照组、L45min组、I／R1h组均未见到凋亡的心肌细胞，I／R2h组、I／R3h组心肌细胞染色质凝聚、边集、核膜完整，显示出典型的凋亡特征。结论：心肌缺血再灌注可导致心肌细胞凋亡，心肌细胞凋亡因缺血再灌注不同时相而变化；心肌细胞凋亡在大鼠心肌缺血再灌注损伤的病理生理过程中起重要作用；大鼠心肌缺血后再灌注可促发或加速心肌细胞凋亡。     

大鼠肾急性缺血再灌注损伤与氧化侵袭与细胞凋亡相关性研究

目的 探讨急性肾缺血再灌注损伤过程氧化侵袭与肾细胞凋亡在肾损伤发生机制中的作用。方法 采用摘除大鼠左肾，钳夹右侧肾蒂的方法，制成急性缺血再灌注肾损伤模型，测定GSH-Px、SOD活性和MDA含量及检测肾细胞凋亡率。结果 缺血再灌注不同时期肾组织SOD活力水平降低，与对照组相比差异显著（P〈0．05、P〈0．01），MDA含量高于对照组（P〈0．05），GSH-Px在再灌注早期活力减弱，明显低于对照组（P〈0．01），晚期活力基本恢复；肾细胞凋亡率与对照组相比差异显著（P〈0．05、P〈0．01）；抗氧化酶SOD活力与细胞凋亡率负相关，MDA含量与细胞凋亡率正相关。结论 缺血再灌注不同时期肾组织氧化侵袭在肾损伤病理过程中起重要作用；再灌注损伤与氧化侵袭和细胞凋亡有关。