巨细胞病毒感染对内皮细胞凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1 mRNA表达的影响

目的探讨巨细胞病毒(CMV)感染对人内皮细胞凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1 mRNA表达的影响.方法原代培养人脐静脉内皮细胞并传代,CMV感染3～6代细胞,不同时间提取细胞总RNA,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1 mRNA的表达.结果病毒感染6h凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1 mRNA表达与对照组相似,病毒感染12、24h与对照组比较明显增强.结论CMV感染上调凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1 mRNA表达,可能是CMV参与动脉粥样硬化的机制之一.     

银杏叶提取物对同型半胱氨酸诱导血管内皮细胞血凝素样

目的: 探讨银杏叶提取物可否拮抗同型半胱氨酸诱导的血管内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA表达升高。方法：采用含不同浓度（0.001mmol/L、0.01 mmol/L和0.1 mmol/L）同型半胱氨酸的培养液孵育人脐静脉血管内皮细胞，观察同型半胱氨酸对血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA的表达水平的影响；取最能诱导血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达升高的同型半胱氨酸浓度，分别加入银杏叶提取物（0.01mmol/L银杏苦内酯A，0.01mmol/L银杏苦内酯B和0.01mmol/L白果内酯）和B族维生素（0.01mmol/L 叶酸，0.01mmol/L维生素B6，0.01mmol/L维生素B12），观察银杏叶提取物对同型半胱氨酸诱导的血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA表达升高的作用，并与B族维生素进行比较。结果：随着同型半胱氨酸浓度的增加，血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA表达增加，0.1mmol/L 的同型半胱氨酸最能诱导血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA的表达；同型半胱氨酸＋银杏叶提取物组和同型半胱氨酸＋B族维生素组血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA表达较同型半胱氨酸组明显减少（吸光度值0.42±0.03和0.65±0.04 VS 0.83±0.05，P＜0.05），同型半胱氨酸＋银杏叶提取物组降低血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA表达的幅度较同型半胱氨酸＋B族维生素组更大(吸光度值0.42±0.03 VS 0.65±0.04，P＜0.05)。结论：同型半胱氨酸具有诱导血管内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 m RNA表达的作用，且呈剂量依赖性。银杏叶提取物可拮抗同型半胱氨酸诱导的血管内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA表达升高，有望应用于治疗高同型半胱氨酸所致的动脉粥样硬化。     

P21在单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化中的表达及依那普利对其表达的调节

目的：观察黄花倒水莲皂苷C抑制氧化型低密度脂蛋白（oxidized low density lipopprotein，ox-LDL）诱导的人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体（oxidized low desity lipoprotein receptor-1，LOX-1）表达的作用。方法：培养人脐静脉内皮细胞株（HUVEC-12），随机分为：对照组、ox-LDL（50mg／L）组和氧化型低密度脂蛋白（50mg／L）＋黄花倒水莲皂苷C（1，3，10μmol／L）组，通过RTPCR和Western blot蛋白印迹分析检测LOX-1 mRNA和蛋白的表达。结果：ox-LDL上调LOX-1 mRNA和蛋白的表达，黄花倒水莲皂苷C明显抑制ox-LDL诱导的LOX-1 mRNA和蛋白的表达，且呈浓度依赖性。结论：黄花倒水莲皂苷C明显抑制ox-LDL诱导的内皮细胞LOX-1 mRNA和蛋白的表达。     

ADMA对人单核/巨噬细胞MCP-1及LOX-1表达的影响

目的通过观察不对称二甲基精氨酸（ADMA）对单核细胞转化为巨噬细胞过程中分泌单核细胞趋化蛋白-1及植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1的影响,探讨ADMA在单核细胞转化为巨噬细胞过程中的作用。方法分别用ADMA、ADMA及L-精氨酸孵育单核细胞48h,酶联免疫吸附法测定上清液中单核细胞趋化蛋白-1的含量,Western blotting法测定细胞中植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1的蛋白表达量,逆转录聚合酶链反应法测定单核细胞趋化蛋白-1及植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1mRNA的表达。结果 ADMA能够促进单核细胞中单核细胞趋化蛋白-1的分泌（p〈0.01）,以及上调单核/巨噬细胞中植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1蛋白的表达（p〈0.05）,增加单核/巨噬细胞中单核细胞趋化蛋白-1mRNA（p〈0.01）及植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1mRNA的表达（p〈0.05）,而L-精氨酸能抑制ADMA的作用（p〈0.05）。结论 ADMA能够增加单核细胞向巨噬细胞转化过程中单核细胞趋化蛋白-1及植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1的表达,并且这种作用能被L-精氨酸所抑制。     

氧化低密度脂蛋白诱导小鼠心脏内皮细胞炎性反应中Toll样受体2的表达

目的 研究氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导小鼠心脏内皮细胞炎性反应中Toll样受体（TLR）2的表达.方法 分离小鼠心脏内皮细胞,对照组给予DMEM培养,干预组分别给予不同浓度的ox-LDL（20,40 μg/mL）作用细胞24 h,采用Western blot法检测细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、TLR2的表达,利用ELISA方法检测炎症因子白细胞介素（IL）-6、IL-8的变化.结果 与对照组相比,ox-LDL干预组TLR2蛋白表达减少（P＜ 0.01）,ICAM-1蛋白表达增多（P＜ 0.01）,IL-6和IL-8表达明显增加（P＜0.05）;与低浓度组比较,高低浓度组ICAM-1、IL-6和IL-8表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 ox-LDL可以诱导小鼠心脏内皮细胞的炎性反应,同时可能抑制了TLR2受体的表达.     

LOX-1在动脉粥样硬化形成过程中的作用研究进展

动脉粥样硬化是一种长期、缓慢进展的退行性炎性疾病;血凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)是氧化型低密度脂蛋白在内皮细胞上的主要受体,通过促进内皮细胞功能失调、单核细胞黏附、平滑肌细胞迁移和泡沫细胞形成等过程参与动脉粥样硬化的发生发展。LOX-1还可通过诱导巨噬细胞释放基质金属蛋白酶影响动脉斑块的稳定性。研究LOX-1在动脉粥样硬化形成中的机制可为心血管疾病提供新的诊疗思路。     

血管紧张素Ⅱ调控人脐静脉内皮细胞表达血凝素样氧化低密度脂蛋白受体

目的：研究血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对人脐静脉内皮细胞表达血凝素样氧化低密度脂蛋白受体（LOX－1）基因转录和蛋白表达的影响。方法：将不同浓AngⅡ(10^-5mol/L－10^－5mol/L）与人脐静脉内皮细胞（HUVECs）共孵育24h，将10^-6mol/LAngⅡ与HUVECs作用不同时间（0、3、6、12、24、36、48h）后，用细胞酶联免疫法和半定量RT－PCR分别检测LOX－1蛋白和mRNA表达。结果：10^-5mol/L－－10^-10mol/LAngⅡ作用24h，使内皮细胞LOX－1蛋白一达的OD值与对照组相比显著增加（P＜0．001），其中AngⅡ浓度为10^-5mol/L－10^-9mol/L时，LOX－1表达增加呈浓度依赖性。10^-10mol/LAngⅡ的作用结果与10^-9mol/LAngⅡ的作用结果差异无显著性；10^-5mol/L－10^-8mol/LAngⅡ可以使内皮细胞LOX－1mRNA的表达增加，分别为对照组的4．43、4．25、2．71和1．84倍。10^-9mol/L,10^-10mol/AngⅡ作用24h,LOX－1mRNA表达与对照组相比无显著变化（P＞0．05）。用 10^-6mol/LAngⅡ作用HUVECs不同时间，发现共孵育3h后，内皮细胞LOX－1mRNA的表达和LOX－1蛋白表达的OD值与对照组相比都有显著增加（P＜0．001），随着时间延长，LOX－1mRNA的表达至24h左右达最高峰；LOX－1蛋白表达至24－36h达到最高峰之后表达量逐渐减低，结论：AngⅡ能明显增加强HUVECs表达LOX－1，并随着AngⅡ浓度的增加和作用时间的延长，LOX－1表达增加。     

银杏黄酮苷元对内皮细胞植物血凝素样低密度脂蛋白受体-1表达的影响

目的：探讨银杏黄酮苷元对氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein,ox-LDL）诱导脐静脉内皮细胞株ECV304植物血凝素样低密度脂蛋白受体-1（Lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX-1）表达的调节作用。方法：应用逆转录聚合酶链式反应、SP免疫组织化学法,探讨ox-LDL诱导下内皮细胞表达LOX-1及银杏黄酮苷元的干预作用。结果：6.25~25 mg/L银杏黄酮苷元与脐静脉内皮细胞株ECV304共同培养6~48 h可显著抑制ox-LDL诱导的内皮细胞LOX-1mRNA和蛋白表达（P〈0.05）,具有浓度、时间效应关系（P〈0.05）;LOX-1拮抗剂聚肌苷酸可抑制ox-LDL诱导的内皮细胞LOX-1mRNA和蛋白表达（P〈0.05）。结论：ox-LDL可能通过LOX-1导致内皮功能障碍,银杏黄酮苷元可显著抑制ox-LDL诱导的内皮细胞LOX-1表达,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。     

ADMA对人单核/巨噬细胞MCP-1及LOX-1表达的影响

目的 通过观察不对称二甲基精氨酸(ADMA)对单核细胞转化为巨噬细胞过程中分泌单核细胞趋化蛋白-1及植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1的影响,探讨ADMA在单核细胞转化为巨噬细胞过程中的作用.方法 分别用ADMA、ADMA及L-精氨酸孵育单核细胞48h,酶联免疫吸附法测定上清液中单核细胞趋化蛋白-1的含量,Western blotting测定细胞中植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1的蛋白表达量,逆转录聚合酶链反应法测定单核细胞趋化蛋白-1及植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1 mRNA的表达.结果 ADMA能够促进单核细胞中单核细胞趋化蛋白-1的分泌(p＜0.01),以及上调单核/巨噬细胞中植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1蛋白的表达(P＜0.05),增加单核/巨噬细胞中单核细胞趋化蛋白1 mRNA(P＜0.01)及植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1 mRNA的表达(p＜0.05),而L-精氨酸能抑制ADMA的作用(p＜0.05).结论 ADMA能够增加单核细胞向巨噬细胞转化过程中单核细胞趋化蛋白-1及植物凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1的表达,并且这种作用能被L-精氨酸所抑制.     

NF-κB对冠心病患者外周血单核细胞LOX-1 mRNA和蛋白表达的影响

目的探讨核因子-κB（NF-κB）对冠心病患者外周血单核细胞凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）mRNA表达的影响。方法分离收集冠心病患者外周血单核细胞,分为3组:对照组在不含血清的RPMI-1640中孵育24h;ox-LDL组在不含血清的RPMI-1640中加ox-LDL（40μg/ml）孵育24h;PDTC（NF-κB抑制剂）组:先加PDTC(10^-5mol/L)培育1h之后加ox-LDL（40μg/ml）继续孵育24h,之后收集单核细胞及细胞上清液,采用异硫氰酸胍—酚—氯仿抽提法提取总RNA,扩增目的基因LOX-l,并采用ELISA法测定上清液中sLOX-1蛋白浓度。结果与对照组比较,ox-LDL组单核细胞LOX-1 mRNA表达增加（0.304±0.047vs0.813±0.131,P<0.05）,细胞上清液中sLOX-1蛋白含量（ng/ml）增加（7.277±1.979 vs 16.517±2.064,P<0.05）;PDTC组单核细胞LOX-1 mRNA表达及细胞上清液中sLOX-1蛋白含量均增高（分别为0.502±0.140和11.997±1.757,P<0.05）。与ox-LDL组相比,PDTC组单核细胞LOX-1 mRNA表达减少,细胞上清液中sLOX-1蛋白含量显著减少（P<0.05）。结论 ox-LDL可诱导人单核细胞LOX-1表达增加,NF-κB也参与了ox-LDL对LOX-1表达并有促进作用。