188Re/99Tcm-IGF-1类似物的制备及与胰腺癌细胞结合实验研究

目的 研究188Re/99Tcm标记胰岛素样生长因子1类似物(IGF-1A)的方法,及其与胰腺癌细胞的结合特点.方法 采用直接标记法标记经修饰的IGF-1A,标记条件设定:吐温-80用量2～10 μl;不同时间点测定标记率;SnClz·2H2O质量浓度变化为0.75～25 g/L;IGF-1A的用量20～100 μg;洗脱液的体积10～500 μl;通过实验确定最佳标记条件.测定标记物的体外稳定性及其与胰腺癌Patu8988细胞的结合率.荷瘤裸鼠尾静脉注射99Tcm-IGF-1A后显像,瘤内注射188Re-IGF-1A后平面显像.结果 最佳188Re标记条件为:100 μl SnCl2·2H2O(10 g/L)加入50 μl IGF-1A(2 g/L);300 μl Na3PO4和10 μl质量分数0.1%吐温-80,混匀后加人50 μl 188ReO4-新鲜洗脱液;在IGF-1A体系中加入洗脱液体系,混匀,室温下反应30 min;加入500 μl NaH2PO4,将pH值调至7.0左右,标记完成.最高标记率为(94.07±0.32)%,胶体含量为(5.50±1.50)%,与50 μl 5×106个胰腺癌细胞(Patu8988)的最高总结合率为(24.13±2.03)%,特异性结合率为12.68%.最佳99Tcm标记条件为:SnCl2·2H2O质量浓度为3 g/L,质量分数0.1%吐温-80用量为2 μl,IGF-1A用量为40 μl,余同188Re标记.最高标记率为(94.43±0.75)%,胶体含量为(3.47±0.71)%,与胰腺癌细胞最高总结合率为(22.95±3.94)%,特异性结合率为19.31%.99Tcm-IGF-1A显像6 h内肿瘤显影清晰,188Re-IGF-1A瘤内注射显像48 h内肿瘤显影清晰.结论 用直接标记法进行188Re/99Tcm标记IGF-1A,方法简便,具有较高标记率和良好稳定性,能与胰腺癌Patu8988细胞特异性结合.     

188Re-Hepama-1单克隆抗体荷人肝癌裸鼠模型实验研究

目的 研究188Re-单克隆抗体(简称单抗)Hepama-1在荷人肝癌裸鼠体内生物学分布及肿瘤抑制,为放免治疗提供依据.方法 制备188Re-Hepama-1并测定其标记率及体外稳定性.将40只荷瘤裸鼠用完全随机法分为5组:生理盐水对照组、188ReO4-瘤内注射组、188Re标记健康小鼠IgG(188Re-mIgG)瘤内注射组、188Re-Hepama-1静脉给药组、188Re-Hepama-1瘤内注射组.注射后48 h每组各处死3只,测定肿瘤和肝等重要器官的放射性,用每克组织百分注射剂量率(%ID/g)表示;分别于治疗后1,2,3及4周计算肿瘤体积,与治疗前肿瘤体积进行对比;治疗后4周,每组各处死3只荷瘤裸鼠,观察肿瘤细胞超微结构改变及组织病理学改变.结果 188Re-Hepama-1标记率为85%,放化纯＞95%.注射后48h瘤内注射188Re-Hepama-1组肿瘤组织放射性摄取为11.53%ID/g,静脉注射188Re-Hepama-1组为2.79%ID/g;而瘤内注射188Re-Hepama-1组血、肝、肾等组织摄取均＜1.00%ID/g,明显低于静脉注射188R-Hepama-I组(均＞1.50%ID/g);静脉注射188Re-Hepama-1组和瘤内注射188Re-Hepama-1组的肿瘤体积与188ReO4-组及188Re-mIgG组的差异均具有统计学意义(P均＜0.05).形态学观察可见瘤内注射188Re-Hepama-1组和静脉注射188Re-Hepama-1组细胞凋亡,凋亡小体及变性坏死增多,而其余组少见.结论 静脉注射和瘤体内注射188Re-Hepama-1对裸鼠模型肝癌具有较好的治疗效应.静脉注射188Re-Hepama-1在临床肝癌的导向治疗方面有较好的应用前景.     

188Re(Ⅴ)-DMSA药盒制备及其质量评估

目的研制188Re(Ⅴ)-二巯基丁二酸(DMSA)标记配方并制备药盒,评价药盒的质量.方法酸性环境下,SnCl2·2H2O还原高价态ReO4-为Ⅴ价,并与DMSA反应,制备药盒,以高压液相色谱仪(HPLC)测定该药盒的标记率、标记物的体外稳定性、药盒的稳定性,并与99Tcm(Ⅴ)-DMSA在小鼠体内分布比较.结果药盒标记率为100%,标记物室温放置24 h后标记率＞97%;药盒置-20和4℃条件下3个月后,标记率＞95%;188Re(Ⅴ)-DMSA与99Tcm(Ⅴ)-DMSA在小鼠体内分布相似,在骨骼高浓聚,经肾脏排泄.结论188Re(Ⅴ)-DMSA药盒性能优良.     

188Re标记几种小分子配体的研究

目的：通过对^188Re配位化学理论研究,探讨^188Re标记化学反应的内在规律。方法：用多种配体进行^188Re标记反应,观察诸多因素对反应的影响;运用化学热力学,动力学和结构化学等进行综合分析,揭示^188Re标记反应的因果关系。结果：^188Re-GH;pH值2,SnCl21mg,室温反应30min,标记率85．9％,^188Re－MDP：pH值2,SnCl2 1mg,室温反应30min,标记率85％。^188Re－MIBI：pH值2,SnCl2 1mg,100℃反应30min, 标记率58％。^188Re－柠酸：pH值2,SnCl21mg,室温反应30min,标记率92．1％。结论：从^188Re标记化学实验现象所抽象出的理论表述有助于指导^188Re标记化学实验工作。     

99Tcm-HMIBP的生物学特性及与99Tcm-MDP的骨显像比较

目的 通过99Tcm-1-羟基-2-(1-甲基咪唑-2-基)乙烷-1,1-二膦酸(HMIBP)和鲫99Tcm-亚甲基二膦酸盐(MDP)的骨显像质量比较,评价99Tcm-HMIBP作为骨显像剂的可能性.方法 制备HMIBP冻干药盒,对HMIBP及SnCl2-2H2O含量、放化纯、药盒pH值及在4℃下的稳定性等进行了研究.测定99Tcm-HMIBP在正辛醇/水相中的分配系数(P)及血浆蛋白结合率,计算血药清除动力学方程参数.同时研究了HMIBP的半数致死剂量(LD50).新西兰兔静脉注射99Tcm-HMIBP和99Tcm-MDP后同步显像比较.结果 99Tcm-HMIBP药盒含HMIBP 5 mg,SnCl2·2H2O 0.05 mg,药盒pH值为5,标记率和放化纯均为98%;在4℃下放置180 d后标记率为96%.在pH值为7.0和7.4时,P值分别为0.0125和0.0054,血浆蛋白结合率为44.77%.小鼠血药清除动力学方程为C=3.0979 e-0.0721t+0.1250 e-0.0076.HMIBP的LD50为8.2 mg/kg.兔骨显像表明,99Tcm-HMIBP和99Tcm-MDP在3 h时均可获得清晰的图像.结论 99Tcm-HMIBP生物学性能优良,显像效果与99Tcm-MDP相当,可能成为集显像与治疗于一体的骨显像剂.     

炎症显像剂^99Tc^m—lomefloxacin的制备及其炎症小鼠模型体内生物学分布

目的建立^99Tc^m标记洛美沙星（lomefloxacin）的方法,评价^99Tc^m-lomefloxacin体外结合能力和炎症小鼠模型体内生物学分布特征。方法制备^99Tc^m-lomefloxacin并用薄层层析法（TLC）进行鉴定。在标记过程中,研究SnCl2·2H2O、lomefloxacin、pH、温度和反应时间等因素对标记结果的影响。测定标记化合物的稳定性、脂水分配系数和体外细菌特异性结合能力。制备小鼠炎症模型30只,用抽签法分为6组,经尾静脉注入^99Tc^m-lomefloxacin,分别于0．5,1,2,4,6h各处死1组小鼠,取出重要脏器组织测量放射性,计算每克组织百分注射剂量率（％ID／g）及炎症肌肉与正常肌肉放射性比值（T／NT）,观察其体内分布特征;另一组行放射自显影,观察显像效果。采用Concise Statistics 10．3软件,组间差异比较行方差分析。结果^99Tc^m-lomefloxacin的标记率和放化纯为97．5％,室温放置6h内标记率和放化纯均〉95％。^99Tc^m-lomefloxacin为脂溶性物质,与金黄色葡萄球菌的体外结合呈现良好的时间和浓度梯度变化。^99Tc^m-lomefloxaein在炎症模型小鼠体内主要分布于炎症组织及肾、肝、脾中,炎症肌肉与对侧正常肌肉的放射性比较,差异有统计学意义（F=9．19,P〈0．05）,T／NT比值峰值为4．07±1．05,给药后2h的显像质量最佳。结论^99Tc^mlomefloxacin标记简单、标记率和放化纯高、稳定性好、体外结合分析和体内生物学分布具有比较理想的炎症显像剂特性。     

新配方99TCm-TRODAT-1药盒的研制

目的 制备标记率＞90%的99Tcm-2β-[N,N'-双(2-巯乙基)乙撑二胺基]甲基-3β-(4-氯苯基)托烷(TRODAT-1)药盒,并研究药盒中各组分含量与pH值对其标记率的影响.方法 按每支药盒含TRODAT-1 50μg、SnCl2·2H2O 70μg、EDTA-2Na 1.0 mg、Na2HPO4·12H2O 17.6 mg,KH2PO42.37 mg和葡庚糖酸钠(GH)10 mg制备药盒,用上行薄层色谱法测定标记率;保持其他组分含量不变,分别改变TRODAT-1、SnCl2,EDTA-2Na和GH的用量,并测定标记率;保持其他组分含量不变,调节pH缓冲剂的用量,使药盒在不同的pH值下标记,测定标记率.结果 制备的药盒标记率＞90%,稳定性好.药盒中各组分含量在下列范围内标记率＞90%TRODAT-1 20～200 μg、SnCl2 4～100 μg、EDTA-2Na 0.5～2.0 mg、GH 1～20 mg、pH值4.5～8.3.结论 可成功制备标记率＞90%的TRODAT-1药盒,其稳定性较好.     

HER2放射性配体99Tcm-ABH2的制备及荷乳腺癌裸鼠显像

目的 制备99 Tcm-人表皮生长因子受体2(HER2)亲和体(ABH2),探讨其作为HER2阳性乳腺癌分子显像剂的可行性.方法 以葡庚糖酸钠和SnC12·2H2O为标记体系在ABH2上标记99Tcm,测定标记产物的标记率和放化纯,再用PBS和血清测定标记后6.0h内的稳定性.用表达HER2的MBA-MD-361乳腺癌细胞测定99Tcm-ABH2的平衡解离常数(Kd).于4只荷MBA-MD-361乳腺癌小鼠尾静脉注射37 MBq 99Tcm-ABH2,注射后1.0、4.5 h进行SPECT/CT显像,计算肿瘤对肝脏、大脑、肺、心脏、骨骼、肌肉的T/NT,2d后预先注射200 μg未标记的ABH2,再注射37 MBq 99Tcm-ABH2,以相同方法显像,应用单因素方差分析对比不同显像的T/NT.结果 99 Tcm-ABN2标记率在99％以上,其在PBS和血清中都稳定,在血清中37 ℃保温6.0 h放化纯达(95.0±1.0)％.99Tcm-ABH2的Kd为1.7 nmol/L.荷瘤鼠注射99Tcm-ABH2后1.0和4.5h显像见乳腺癌的放射性摄取,99 Tcm-ABH2主要从泌尿系统清除;4.5 h肿瘤对肝脏、肺、大脑、心脏、肌肉、骨骼的T/NT分别为1.81±0.60、8.95±1.13、20.08±6.12、7.61±0.56、10.62± 1.78、11.422.07;阻断后注射99Tcm-ABH2,4.5 h相应T/NT分别为0.60±0.23、3.05± 1.38、5.24±2.17、2.42± 1.02、8.16±2.66、2.76±0.48(F=29.38,P＜0.05).结论 成功制备了高纯度的99Tcm-ABH2,荷瘤鼠实验表明99Tcm-ABH2能够特异地对HER2阳性乳腺癌进行显像.     

188Re标记免疫靶向磁性纳米微粒及其生物学分布

目的研究^188Re标记具有HER-2／neu癌基因靶向特异性的Herceptin免疫磁性纳米微粒及其在小鼠体内的生物学分布。方法利用戊二醛作为交联剂，将人源性单克隆抗体Herceptin与化学修饰的磁性纳米微粒进行连接，构建免疫磁性纳米微粒。采用直接标记法将^188Re标记到免疫磁性纳米微粒上。采用羰基铼标记法，以fac-[^188Re（CO）3（H2O）3]^＋作为放射性标记前体，对表面固载组氨酸的磁性纳米微粒进行标记。分别测定所制备^188Re标记物的标记率和体外稳定性及免疫磁性纳米微粒的单克隆抗体免疫活性，并观察^188Re标记的磁性纳米微粒及免疫磁性纳米微粒的小鼠体内生物分布。结果经扫描电镜证实免疫磁性纳米微粒的单个粒径大小平均为60nm，而表面固载组氨酸的磁性纳米微粒的粒径平均为30nm。^188Re对Herceptin、免疫磁性纳米微粒及固载组氨酸的磁性纳米微粒的标记率均〉90％，在小牛血清中具有良好的体外稳定性，并且磁性纳米微粒上连接的单克隆抗体仍保持较高的免疫活性。小鼠体内分布实验显示^188Re标记的磁性纳米微粒及免疫磁性纳米微粒在血液中有较高的放射性分布且血循环时间较长，同时两者在肝内均有较多的摄取。结论^188Re标记的磁性纳米微粒及免疫磁性纳米微粒在体外及动物体内较稳定，无明显的^188Re脱落。可用于下一步荷瘤裸鼠体内的研究。     

心脏交感神经显像剂11C-N-CH3-Dopamine的合成及生物分布

目的 制备11C-甲基多巴胺(11C-MDA),并探讨其作为心脏交感神经分子显像剂的可行性.方法 通过N端甲基化的方法合成11C-MDA,并用半制备HPLC进行分离纯化.取昆明小鼠30只,采用随机数字表法分5组,每组6只,静脉注射11C-MDA 7.4 MBq,分别于注射后2、5、10、20和30 min断颈处死,收集血液、心、肺、肝、脾、肾、胃、肠、脑、肌肉、骨等组织器官,测质量及放射性计数,经衰减校正后计算放射性摄取(％ID/g).取中华小型猪6只,同样随机分为正常组和抑制组,每组3只,行11C-MDA PET/CT显像.抑制组先按体质量静脉注射10 mg/kg盐酸丙咪嗪,30 min后静脉注射11C-MDA 370 MBq.采用SPSS 15.0软件进行统计分析.结果 11C-MDA的总制备时间为45 min,标记率为(20±3)％,为无色澄明液体,pH值为6.5,放化纯＞98％,比活度为50 GBq/mmol.静脉注射11C-MDA后2 min,小鼠心脏放射性分布达到高峰,心肌摄取率为(8.78±1.18) ％ID/g,并随时间逐渐下降;11C-MDA主要经肝、肾代谢.中华小型猪PET/CT显像示,正常组心肌放射性摄取明显,图像清晰;而抑制组放射性摄取减低或缺失,图像模糊.结论 11C-MDA合成简便易行,制备成本低,心肌摄取率高,是一种具有潜在临床应用价值的心脏交感神经显像齐.