真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响

目的 研究分别来源于镰刀菌Fusarium solani和黑曲霉Aspergillum niger的真菌诱导子(fungal elicitors)对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响。方法 用真菌诱导子对长春花愈伤组织进行诱导处理后提取吲哚总碱，并用RP—HPLC法测定其中阿玛碱和长春质碱含量。结果 两种真菌诱导子对吲哚总碱及其中阿玛碱和长春质碱的积累均有较明显的正向调节作用，并且确立了真菌诱导子最佳处理时间。结论 这两种真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱的积累有显著影响。     

用长春花细胞悬浮培养物生产泻花碱和其它吲哚生物碱

长春花的细胞培养受到特别重视是因为期待它能产生具有生理活性的吲哚类生物碱。组织培养中生物碱的产生可以看作是一个受环境条件和研究对象的基因所控制的分化过程。本文介绍了连续培养的愈伤组织和非常均匀外植体的细胞即生长阶段相同的蓓蕾花药悬浮培养物的变异性,只有采用3种长春花培养物和用诱变剂处理蓓蕾才可能引起这些变异。将几百株长春花连续培养的细胞悬浮液     

盐胁迫对长春花愈伤组织生长及阿玛碱积累的影响

目的 研究盐胁迫对长春花愈伤组织生长及阿玛碱积累的影响。方法 用浓度为0、50、100、150 mmol/L的NaCl处理长春花愈伤组织,测定其鲜质量、干质量、丙二醛（MDA）量、光合速率、呼吸速率等生理指标和阿玛碱的量。结果 盐胁迫显著地降低了长春花愈伤组织的鲜质量和干质量,提高了MDA量、光合速率和呼吸速率;在含有不同浓度NaCl的培养基上生长30 d后,愈伤组织的阿玛碱量随NaCl浓度的增加而逐渐降低;用不同浓度的NaCl溶液喷洒生长27 d的愈伤组织,发现3 d后50 mmol/L处理的愈伤组织中阿玛碱量比对照高出近1倍。结论 长期盐胁迫能够抑制长春花愈伤组织的生长,同时引起阿玛碱积累的减少;低浓度NaCl喷洒处理则对长春花细胞中阿玛碱的积累有较大的促进作用。     

长春花叶片中吲哚生物碱增产的研究

目的探讨乙烯利、乙酰水杨酸、色氨酸3种试剂对长春花植株中药用成分积累的影响。方法用不同质量浓度的3种试剂溶液分别处理温室盆栽长春花植株,2d后,测定叶片中的总吲哚生物碱含量,并采用RP-HPLC法测定长春碱和长春质碱的含量。结果3种试剂处理后吲哚总碱、长春碱、长春质碱的积累均有明显的提高,并确定了最适的处理质量浓度。结论3种试剂对长春花植物中吲哚生物碱的产生有明显的促进作用。     

长春花叶片愈伤组织诱导及培养过程中生物碱合成类型的变化和调节及有关

在４种不同培养基上诱导长春花叶片愈伤组织的过过程中,叶片中含量较高的文多灵和长春质碱迅速降解有低水平,而叶片中含量较低的阿玛码和蛇根碱的合成却逐渐增加,同时酸性和碱性过氧化物酶活性呈上升趋势,尤其碱性过氧化物酶与蛇根碱和阿玛碱的相关性较密切。     

不同培养方式对三尖杉培养细胞中生物碱组成和含量的影响

采用植物组织和细胞培养方法，研究固体和液体培养方式对三尖杉细胞生长及其有效成分组成与含量的影响。结果证实，在MS基本培养基上生长的三尖杉愈伤组织可以合成较多的三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱，分别为在White、Heller和6，7-V培养基上生长组织的5.6,14.6和2倍。液体培养方式培养的三尖杉细胞的生长速度比固体培养的增加3倍，总生物碱含量增加近1倍，其中具有生物活性的三尖杉酯碱增加54倍。结论：液体培养方式有利于通过大规模培养技术生产三尖杉培养细胞和抗癌药物。     

羊乳组织培养育成再分化植株

羊乳 Codonopsis lanceolata 茎尖于补充0.5mg/L 6-苯甲氨基嘌呤(6-benzylaminop-urine,BAP)的 MS 培养基上培养,能生长出复枝(multiple shoot,约11个)而无愈伤组织形成。形成的茎枝数与 BAP 的浓度成反比。另补充吲哚乙酸(IAA)和 BAP 合并培养能促进愈伤组织形成,其后再分化茎枝。从愈伤组织再分化的茎枝数平均为4.2～6.0个。     

定量测定长春花组织培养液中的长春花碱

抗癌剂长春花碱和长春新碱为存在于植物长春花(Catharanthus roseus(L)G.Don)中的吲哚生物碱,因含量很低,价格昂贵,因而用组织培养法生产这些碱引起重视。作者用放射免疫法定量测定存在于组培,特别是多枝培养中的少量长春花碱。先将含有长春花碱(VLB}的组培样品纯化后用     

长春花突变细胞生理特征的研究

目的研究以秋水仙碱处理的长春花突变细胞在继代培养过程中的生长规律、吲哚生物碱积累的规律及营养成分的适宜浓度等方面的特征,期望得到适于工业化细胞培养的理想材料。方法将突变细胞培养于MS固体培养基上,定期称取其鲜质量,用有机溶剂萃取吲哚生物碱,应用RP-HPLC法检测药用成分阿玛碱和长春质碱。结果突变细胞培养至第30代时,生长速度和吲哚总碱积累得最快,培养至第45代时,两者均明显下降。而药用成分的量于第20代达到最高;在培养基中添加适量的色氨酸能提高药用成分的量;培养基中Ca2 和Zn2 的质量浓度分别为1760和12.6mg/L时,明显促进了药用成分的积累。结论长春花突变细胞可能是一种适于工业化细胞培养的理想材料。     

长春花叶片愈伤组织诱导及培养过程中生物碱合成类型的变化和调节及有关酶的分析

在４种不同培养基上诱导长春花叶片愈伤组织发生的过程中,叶片中含量较高的文多灵（ｖｉｎｄｏｌｉｎｅ）和长春质碱（ｃａｔｈａｒａｎｔｈｉｎｅ）迅速降解至极低水平,而在叶片中含量较低的阿玛碱（ａｊ－ｍａｌｉｃｉｎｅ）和蛇根碱（ｓｅｒｐｅｎｔｉｎｅ）的合成却逐渐增加,同时酸性和碱性过氧化物酶（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）活性呈上升趋势,尤其碱性过氧化物酶与蛇根碱和阿玛碱的相关性较密切。光照和黑暗中的变化趋势基本一致,但光照可提高过氧化物酶的活性,对培养物的长春质碱、文多灵和蛇根碱的合成有利。不同的培养基对生物碱的合成影响较大,２,４－Ｄ显著抑制生物碱的合成,持续光照使愈伤组织的生长受到抑制,使阿玛碱向其蛇根碱转化。     

甲基磺酸乙酯化学诱变川芎的方法研究

目的:通过甲基磺酸乙酯(EMS)诱导川芎材料突变,筛选最佳诱变条件为川芎新品种的培育研究提供方法学基础。方法:本实验在组织培养基础上,使用多浓度(0.1%、0.2%、0.5%、1.0%)的甲基磺酸乙酯(EMS)对川芎茎节进行不同时间段(0.5 h、1 h、2 h、5 h、8 h、12 h)的化学诱变处理,观察无菌试管苗的生长速度、发育形态,比较优化EMS诱变川芎无菌苗的最佳条件。结果:经0.1%EMS、1%EMS处理1 h、5 h的川芎茎节较对照粗壮且生长快速。结论:0.1%EMS、1%EMS处理1h、5h为川芎茎节的最佳诱导条件。     

不同产地益母草中总生物碱含量的比较

目的比较不同产地益母草中总生物碱的含量。方法采用超声法对益母草总生物碱进行提取,雷氏铵盐法进行沉淀浓缩;以丙酮为溶剂,并用紫外可见分光光度法,选用测定波长510nm;测定采自栾川、开封、南阳、方城、内乡、鲁山、连云港7个地区10个样品总生物碱含量。结果各地益母草总生物碱含量有较大差别,其中以方城益母草总生物碱含量为最高,为13.598mg/g;连云港总生物碱含量最低,仅为1.329mg/g。结论各地区益母草中总生物碱含量有很大差别。     

云南狗牙花吲哚类生物碱成分及其生物活性研究

目的:研究云南狗牙花吲哚类生物碱成分,阐明其戒毒活性的物质基础.方法:云南狗牙花茎枝粉末的95%乙醇提取浸膏经酸提碱沉后得到总生物碱(TEYA),TEYA经反复硅胶柱层析、Sephadex LH20 凝胶柱层析分离纯化化学成分,波谱学分析鉴定化学结构,采用条件性位置偏爱模型对单体化合物进行活性评价.结果:分离鉴定了9个吲哚类生物成分:冠狗牙花定碱(1),伏康京碱(2),3-R-乙氧基冠狗牙花定碱(3),3-S-乙氧基冠狗牙花定碱(4), 19-表-海尼山辣椒碱(5),海尼山辣椒碱(6),19-表-非洲伏康树碱(7),7-羟基冠狗牙花定碱(8),12-methoxyl-voaphylline(9).化合物2、7对吗啡的身体依赖性和精神依赖性都有一定的防治作用.结论:化合物3、4、8、9为首次从该植物中分离得到,冠狗牙花定碱类吲哚生物碱为云南狗牙花总碱的主要活性成分.     

白英中甾体类总生物碱的含量测定研究

目的:建立白英中甾体类总生物碱含量的测定方法。方法:采用醇提-酸醇水解法提取白英中的总生物碱,分离得到甾体类总生物碱,用紫外-可见分光光度法,以澳洲茄胺为对照,溴甲酚绿为显色剂,在412 nm处测定吸光度值,计算白英中甾体总生物碱的含量。结果:澳洲茄胺在1.6μg/m L~9.6μg/m L范围内与吸光度值呈良好的线性关系(r=0.999 5),平均回收率为88.70%~102.2%(n=9),RSD为3.09%~4.96%,不同来源的白英药材中甾体总生物碱的含量有一定的差异。结论:该方法准确、简单、灵敏,适合测定白英药材中甾体类总生物碱的含量,并且可为白英的质量评价提供理论参考。     

大孔吸附树脂富集纯化川贝母总生物碱的工艺研究

目的:研究大孔吸附树脂富集纯化川贝母总生物碱的工艺参数及条件。方法:7种不同类型的大孔吸附树脂被研究,以总生物碱的吸附率及解吸率为考察指标,探索吸附和解吸的条件,筛选出纯化总生物碱的最佳工艺。结果:HPD-100大孔树脂对川贝母总生物碱有较好的富集纯化性能。最佳工艺条件为:上样药液质量浓度为0.293g生药/mL,pH值为11.6,6BV的80%乙醇洗脱总生物碱,洗脱体积流量为2BV/h。按照此工艺条件纯化的总生物碱纯度达到51.92%,收率76.65%。结论:建立HPD-100大孔吸附树脂富集纯化川贝母总生物碱的方法简单,可靠,重现性好,适合富集纯化川贝母总生物碱,为其它种贝母总生物碱的富集纯化提供参考。     

酸性染料比色法测定飞龙掌血提取物中总生物碱的含量

目的:建立飞龙掌血提取物中总生物碱含量测定的方法。方法:通过酸性染料比色法,利用紫外分光光度计进行飞龙掌血总生物碱的含量测定,并进行方法学考察,建立适宜的含量测定方法。结果:建立了飞龙掌血总生物碱含量测定方法;于330 nm的检测波长下,以氯化两面针碱(Nitidine Chloride)为对照品,在1.497 6～5.990 4μg/ml范围内对照品含量与吸光度呈良好的线性关系;回归方程为A=0.115 9c+0.137 6(r=0.999 7);日内精密度RSD=0.53%、日间精密度RSD=2.57%;加样回收率为100.08%,RSD=3.30%。结论:该方法回收率、稳定性、重现性、精密度良好,可用于飞龙掌血总生物碱的含量测定。     

伸筋草醇提工艺研究

目的：优选伸筋草总生物躺提取工艺。方法：以醇溶液的PH值、乙醇体积分数、提取时间、料液比为影响生物碱提取量的因素,采用k（3^4）正交设计试验,以总生物碱为考察指标进行正交实验。结果：最佳工艺为pH值为3的30％乙醇,提取60min,提取料液比为1：10。结论：该提取工艺可用于伸筋草总生物碱的提取,并适用于工业化生产。