云南常见药用红景天的分子鉴定研究

目的:分析大花红景天Rhodiolacrenulata与长鞭红景天R.fastigiata、云南红景天R.yunnanensis等云南常见药用红景天及景天属的长丝景天Sedumbergeri的核糖体内转录间隔区(ITS)基因序列,为药用红景天分子鉴定提供依据。方法:用PCR产物直接测序法测定其核糖体内转录间隔区序列并作同源性分析。结果:构建了大花红景天11个地方居群、长鞭红景天9个地方居群、云南红景天1个地方居群及长丝景天1个地方居群的ITS基因片段序列数据库。序列比较的结果表明红景天属样品的ITS序列与长丝景天有显著差别;红景天属内各种序列差异虽小,却存在显著而稳定的差别,能准确鉴定出各种药用红景天植物。结论:根据rRNAITS区碱基序列差异,能准确鉴别大花红景天及其近源植物及药材。     

红景天属植物的研究进展

红景天属（Rhodiola L．）植物为红景天科多年生草本或亚灌木，世界有90余种，多分布在北半球的高寒地带，大多数生长在海拔3500～5000m左右的高山流石或灌木丛，我国有73种2亚种7变种，分布于东北、华北、西北及西南，主要以其根和根茎入药。目前主要研究的红景天属植物有菱叶红景天Rhodiola henryi（Diels）S．H．Fu、西藏红景天R．tibetica（Hook．f．etThomas）Fu、云南红景天R．yunnanensis（Franch．）S．H．Fu、     

云南常见药用红景天的RAPD分析

目的研究云南常见药用植物红景天的遗传背景。方法采用RAPD技术对3种6个居群59个红景天样品进行了遗传关系研究。结果大花红景天3个居群的多态位点百分率(PPB)分别为37.97%、46.15%、39.45%,Nei's基因多样性(h)分别为0.1103、0.1437、0.1371,Shannon's信息指数(I)分别为0.1736、0.2221、0.2067,物种水平的PPB为70.47%,I为0.2583,基因分化系数Gst为0.2630;长鞭红景天2个居群的PPB分别为43.67%、44.42%,I分别为0.2153、0.2174,物种水平的PPB为65.51%,Gst为0.3132,I为0.3139;云南红景天的PPB为36.97%,I为0.1881。结论RAPD分子标记可很好地用于红景天物种的分子鉴定和遗传背景研究。     

红景天及其制剂的应用研究近况

红景天及其制剂的应用研究近况张巍云青海省中医药研究所（８１００００）关健词红景天深红红景天狭叶红景天红景天制剂中图分类号Ｒ２８５．１红景天属植物全世界有９０多种，我国有７３种。近年来对红景天属研究较多的有深红红景天〔Ｒｈｏｄｉｏｌａ，ｅｏｃｉｎｃａ（...     

狭叶红景天中的生氰甙

前文报道了从狭叶红景天(Rhodiola kirilowii (Reg)Reg)根茎中分离得到具有抗缺氧活性的成分红景天甙和酪醇，定性试验表明为一生氰甙(在6N琉酸溶液中由加热时，可使悬挂的苦味酸试纸呈棕红色反应)。红景天属植物中存在有生氰甙的研究报道并不多，娄红祥等人曾从菱叶红景天中分得heteroden drin，晶V系首次从狭叶红景天中分离得到的生氟甙。经理化及HNMR CNMR和FD-MS光谱分析，确认为2-β-D葡萄糖-2-羟基丁腈，即百脉根甙(Lotaustzalin)。     

狭叶红景天氨基酸和微量元素的分析

狭叶红景天(Rhodiola Kirilowii(Reg)Reg)系景天科红景天属多年生草本植物。藏药名嘎都尔，在藏医书籍中已有记载。异名大株红景天，生长在海拔2500～4000m的多石草地、林缘、灌丛或山坡上。分布于西藏、青海、四川、甘肃等地。其有效成分为红景天甙(Salidro side)及甙元酪醇(Tyrosin)。     

人工种植高山红景天中抑制脯酰肽内切酶的化学成分

目的 研究人工种植高山红景天中具有较强的脯酰肽内切酶(prolyl endopeptidase，PEP)抑制活性的化学成分。方法人工种植高山红景天用甲醇提取，不同极性溶剂分级萃取，分别用硅胶和sephadex LH-20柱色谱分离，测定化合物的理化常数和波谱数据，鉴定化合物结构。结果 从人工种植高山红景天甲醇提取物的醋酸乙酯萃取部分分离得到8个单体化合物：没食子酸(Ⅰ)、红景天苷(Ⅱ)、7-O-β-D-葡萄糖-3，4′，5，8-四羟基黄酮(Ⅲ)、红景天黄酮苷(Ⅳ)、表儿茶素(Ⅴ)、表儿茶素没食子酸(Ⅵ)、红景天氰苷A(Ⅶ)、β-D-葡萄糖-3，7-二甲基-4-羟基-2，6-辛二烯(Ⅶ)。结论 首次从人工种植红景天分离出显示较强的PEP抑制活性组份中分离出8个单体化合物。     

RAPD分析野生和栽培柴胡亲缘关系

目的 探讨不同居群北柴胡及其近缘种狭叶柴胡、大叶柴胡亲缘关系,对其进行分子标记鉴定.方法 采用RAPD技术对柴胡属3个栽培类型和4个野生居群进行亲缘关系分析.DPS v7.05软件计算Jaccard遗传距离,UPGMA方法聚类,构建亲缘关系树系图.结果 7条随机引物共扩增出71条DNA片段,其中91.5％的扩增条带表现出多态性,遗传距离在0.230 8～0.975 6.聚类分析结果表明利用RAPD技术可将全部供试材料区分开.结论 柴胡属种质资源在分子水平上存在较大差异.RAPD分子标记法可以鉴定柴胡属种质资源并揭示其亲缘关系,为药材柴胡的栽培育种及资源保护提供重要参考.     

柴胡属5种植物RAPD分析与分类鉴定

目的 探讨正晶柴胡与同属近似种包括柴胡Bupleurum chinense、狭叶柴胡B.scozonerifolium、竹叶柴胡B.marginatum、小叶黑柴胡B.smithii var.parvifolium、大叶柴胡B.longiradiatum5种柴胡属植物鉴定的分子证据。方法 CTAB法提取柴胡属原植物总DNA，以随机引物进行非特异扩增。结果 用随机引物OPA－1（5‘－CAGGCCCTTC－3‘），OPD－8（5‘－GTGTGCCCCA－3‘）和OPD－11（5‘－AGCGCCATTG－3‘）能有效地鉴定这5种柴胡属植物。结论 RAPD法可准确鉴定正品柴胡及其近似种。     

高山红景天的研究概况

本文对红景天属植物的研究进行了简述，主要对高山红景天的基源、性状、化学、药理进行了综述，并对高山红景天的粉末显微特征进行实验观察和报道。     

RAPD法鉴定射干类中药

目的：用RAPD技术对射干类药材射干Belamcanda chinensis及混淆品鸢尾属鸢尾Iris tectorum、野鸢尾I．dichotoma、蝴蝶花I．japonica、德国鸢尾I．germanica等5种药用植物进行分子水平的鉴定。方法：CTAB法和DNeasy^TM Plant Mini Kit法提取射干类药材5种原植物总DNA,以随机引物进行随机扩增。结果：用OPD－08（5’-gtgtgcccca-3‘）等作随机扩增引物进行随机扩增时,可得到识别这些物种基因组DNA的多态片段。结论：RAPD法能有效的鉴别射干类药材,把射干和鸢尾、野鸢尾、蝴蝶花、德国鸢尾等药用植物区分开。     

川木通的随机扩增多态性DNA与序列特征性扩增区域标记研究

目的采用随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA,RAPD）法建立川木通的分子鉴定方法,为川木通的快速鉴定奠定基础。方法从100对随机引物中筛选出5对多态性丰富的RAPD引物进行川木通10个种的扩增分析,最终得到C13为阳性序列特征性扩增区域（sequence characterized amplified regions,SCAR）标记。结果阳性SCAR标记均可以进行川木通原植物与药材的分子鉴定引物,C13可以鉴定上述2种药典品种和商品主流品种（粗齿铁线莲、钝萼铁线莲）。结论RAPD法简便易行,为亲缘关系较近的多基原药材的鉴定提供了一种新方法。     

石蒜属植物遗传多样性的ISSR和RAPD标记比较研究

目的研究石蒜属4种植物的种间亲缘关系和同一种内不同采集地材料的遗传多样性,为其种质资源评价和合理开发利用提供分子佐证。方法用ISSR和RAPD标记分别对不同采集地的37份石蒜属植物(石蒜18份、中国石蒜10份、换锦花5份、忽地笑4份)的基因组DNA的遗传多样性进行检测。结果(1)16条ISSR和17条RAPD引物分别扩增出229和215条带,多态比率分别为85.59%和69.77%,显然,ISSR检测出的多态性条带的能力优于RAPD;(2)ISSR和RAPD标记检测同组供试材料种间或种内的Nei′s遗传相似系数范围分别为0.5459～0.9345,0.6419～1.0000,平均为0.6836,0.7428。两者相关系数r=0.8582,达极显著水平。(3)ISSR和RAPD标记的分子聚类结果相近,两种标记均能准确地把不同来源的材料先按种聚类,种间的分子分类结果与传统经典分类相符;种内不同采集地材料间存在一定的遗传差异,其遗传多样性较为丰富。(4)用POPGENE3.2分析的种间基因分化系数(Gst)与用AMOVA进行的遗传变异巢式方差分析所得结果基本一致。结论两种标记均可用于石蒜属植物种间亲缘关系与种内的遗传多样性研究,虽然ISSR标记在种间遗传多样性检测上分辨力较RAPD标记低,但ISSR标记能检测到更高的种内遗传差异性,更适合种下水平的遗传多样性研究。     

柴胡栽培种的RAPD和AFLP遗传关系研究

目的 应用不同的分子标记进行柴胡药材干根遗传多样性分析,为柴胡栽培种鉴别和药材鉴别奠定基础。方法 以柴胡栽培种干根为材料,采用RAPD和AFLP两种分析方法。结果 以筛选到的3条随机引物对9个柴胡栽培种进行RAPD分析,共扩增出28条DNA带,平均每条引物组合扩增9.33条带,其中多态性带为6.67条,多态性比率为71.43%;而在AFLP分析中,筛选出4对特异性引物,共获得107条DNA带,平均每对引物扩增26.75条带,其中多态性带为23.25条,多态性比率为86.92%。经统计分析,9个柴胡栽培种RAPD和AFLP分析的Jaccard遗传相似系数分别介于0.61～0.93和0.39～0.86。UPGMA聚类分析,两种标记方法均可将9个柴胡栽培种聚为3大类群,聚类结果相似但不完全相同。结论 以柴胡药材干根为材料,RAPD和AFLP两种分子标记均可用于植物种间及种下遗传关系分析,且AFLP条带较多,多样性丰富,更有利于柴胡属植物多样性的分析。     

云南铁线莲属12种药用植物的RAPD分析

目的:通过对12种铁线莲属药用植物进行遗传多样性和亲缘关系分析,为生药鉴定提供依据.方法:随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析遗传多样性,UPGMA类平均法进行聚类分析.结果:利用筛选出的10个随机引物对供试材料DNA进行随机扩增,共得到89条带,其中多态性带有89条,多态性百分率为100%.采用UPGM聚类法对扩增出的谱带进行遗传聚类分析,得出反映各种间亲缘关系的树状图.对多数种而言,种间差异明显,同种不同分布点也存在差异,但同一分布点的不同个体差异较小.结论:该标记技术对铁线莲属植物的生药鉴定是可行的,在系统学方面的应用有待进一步研究.     

利用RAPD分析13种石斛属植物的遗传多样性和亲缘关系

目的通过对13种石斛属植物进行遗传多样性和亲缘关系分析,为更好地开发利用石斛资源奠定基础。方法随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析遗传多样性,U PGM A类平均法进行聚类分析。结果利用筛选出的10个随机引物对供试材料DNA进行随机扩增,共得到188条带,其中多态性带有180条,多态性百分率为95.74%。采用U PGM A类平均法对扩增出的谱带进行遗传聚类分析,得出反映各种间亲缘关系的树状图。在遗传距离(D)=0.63处,可将供试材料分为3类,RAPD对基因组的分析结果与传统分类学的结果差异不大。结论该标记技术对石斛属植物的遗传多样性和分类研究是可行的。     

配对肝癌组织与非癌肝组织基因组差异的随机扩增多态性DNA分析

目的：研究同一肝癌患者配对肝癌组织与非癌肝组织基因组之差异。方法：应用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析技术。结果：６例配对标本作基因组差异分析显示，与各自配对的非癌肝组织相比，所有肝癌组织基因组ＤＮＡ的ＲＡＰＤ指纹图谱均存在差异，其中３例配对肝癌基因组中均存在一相同的０．９ｋｂ的随机扩增片段。结论：ＲＡＰＤ技术为差异基因分析提供了一有效方法。     

WHBE兔、日本大耳白兔和新西兰兔遗传多样性的RAPD分析

目的 应用随机引物扩增多态性DNA技术 （random amplified polymorphic DNA,RAPD） 对大耳白黑眼兔（white hair black eyes rabbit,WHBE rabbit）、日本大耳白兔（Japanese white rabbit,JW rabbit）和新西兰兔（New Zealand white rabbit,NZW rabbit） 3个实验兔品系进行遗传分析。方法 选用90只实验兔的皮肤组织样品提取基因组DNA,用60个随机引物对实验兔基因组DNA进行PCR扩增,根据电泳结果筛选出多态性较高的引物进行RAPD-PCR分析,再利用Popgene 3.2统计软件对3个品系的扩增条带进行遗传分析,获得实验数据。结果 分析结果表明：（1） 60个随机引物中筛选出25个多态性较高的引物,3个品系实验兔共检测到493个扩增片段,长度在100 ~1800 bp之间,筛选的25个引物中,其中16个引物既可扩增出3个品系共同的DNA条带,也可扩增出WHBE兔特有的特征条带;（2） WHBE兔位点数为234个,其中多态位点数166个,多态位点比为70.94%,JW兔位点数为228个,其中多态位点数122个,多态位点比为53.51%,NZW兔位点数为231个,其中多态位点数94个,多态位点比为40.69%;（3） 三个群体的Shannon多样性指数分别为0.3385,0.2222和0.1905;（4） JW兔和NZW兔的遗传相似系数最高,为0.8443,其次为WHBE兔和JW兔的遗传相似系数,为0.8204,WHBE兔和NZW兔的遗传相似系数最低,为0.7862。结论 结果表明WHBE兔与JW兔和NZW兔之间有遗传的相似性,也存在着遗传差异,应用RAPD技术可以很好地检测实验兔不同品系之间以及同一品系不同个体之间的亲缘关系。     

马拉色菌属RAPD基因分型与相关疾病的关系

目的 :探讨马拉色菌属在临床疾病中的意义。方法 :利用RAPD对临床分离株进行基因分型 ,建立马拉色菌属带型关系树状图 ,分析与相关疾病的对应关系。结果 :临床标本可分成 6类 ,其中 5类可进一步分为亚类。各类与疾病无明显的对应关系 ,但可得到具有临床意义的结果。结论 :RAPD作为研究马拉色菌属基因多态性的工具 ,马拉色菌属在相关疾病中存在多样性