四逆汤类方提取物对内毒素血症大鼠血浆中PGI2、AgⅡ、IL-2和TNF含量的影响

目的 观察四逆汤类方提取物(ESNTSD)对内毒素血症大鼠血浆、血清中血管紧张素Ⅱ(AgⅡ)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素Ⅱ(IL-2)、前列环素(PGI2)含量的影响。方法 经ESNTSD提取物作用后，取内毒素休克模型的大鼠血浆、血清，采用放射免疫法测定上述指标。结果 与模型组比较，葱白、干姜加附子提取物(EAGO)，猪胆汁、干姜加附子提取物(EAGB)，甘草、干姜加附子提取物(EAGL)，人参、干姜加附子提取物(EAGG)可以减少内毒素血症大鼠血清中IL-2、TNF和血浆中AgⅡ含量，增加血浆中6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)含量。EAGO减少TNF含量的作用强于附子加干姜(EAG)。EAGO、EAGL、EAGB、EAGG减少IL-2含量的作用强于EAG。EAGL增加6-keto-PGF1α的作用强于EAG。EAGO和EAGL减少AgⅡ含量的作用强于EAG。结论 ESNTSD可以提高内毒素血症大鼠血浆中6-keto-PGF1α含量，降低血清中IL-2、TNF和血浆中AgⅡ的含量。EAGO、EAGL、EAGB、EAGG的药理作用特点不尽相同。     

四逆汤对大鼠血清IgG水平的影响

本文以血清IgG水平为指标,研究了四逆汤及其各单味药附子、干姜、甘草对正常大鼠体液免疫的影响并对比附子、干姜、甘草三者的作用强度。结果表明:四逆汤全方和单味干姜、附子有显著提高正常大鼠血清免疫球蛋白G(IgG)水平,且干姜作用较附子强,而甘草显著降低正常,大鼠血清IgG。结果提示:四逆汤方药可提高正常大鼠体液免疫。     

四逆汤方药对注射大剂量氢化考的松大鼠血清IgG水平影响的初步观察

本文以血清IgG水平为指标,研究了四逆汤及各单味药附子,干姜,甘草对注射大剂量氢化考的松大鼠体液免疫的影响。结果表明:四逆汤全方及单味附子、干姜、甘草均可显著防止氢化考的松引起的大鼠血清IgG水平的降低。提示四逆汤方药可防止氢化考的松引起的体液免疫抑制。     

熊果酸抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用及其机制

目的:研究熊果酸(UA)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用,并探讨其对p38MAPK信号通路的影响。方法:高糖(葡萄糖,25mmol/L)诱导VSMC增殖为模型,MTT法检测UA对细胞增殖的影响,Cell-based ELISA测定UA对p38MAPK磷酸化水平变化,采用SABC免疫组化法测定UA对细胞c-fos蛋白表达水平的影响。结果:UA(20,40μmol/L)能抑制高糖诱导的VSMC增殖作用(P<0.05)。UA组p38MAPK的磷酸化水平明显低于葡萄糖模型组(P<0.05),且c-fos的蛋白表达水平较模型组也明显降低。结论:UA可以抑制大鼠VSMC增殖,此作用可能与其抑制p38MAPK信号传导通路激活,从而下调c-fos蛋白表达有关。     

超声造影剂对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察超声造影剂对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响.方法血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激大鼠VSMC建立细胞增殖模型.在培养基中加或不加脂质体微泡(1μl/ml),采用台盼蓝排斥染色、MTT法和3H-TdR掺入法检测不同强度、时间的连续波超声辐照对VSMC的毒性作用以及增殖和DNA合成的抑制作用.结果频率1MHz、声强0.3W/cm2的超声联合造影荆辐照VSMC,未见细胞溶解,24h后细胞核蓝染率较辐照即刻显著降低(P＜0.01);辐照30s即可显著抑制PDGF-BB所致的VSMC增殖和DNA合成(P＜0.05),随着辐照时间延长,抑制作用增强,60s时抑制程度最强(P＜0.01).结论低强度超声辐照下超声造影荆的空化效应可抑制VSMC增殖,并对细胞膜有暂时性的损伤作用.     

烟草烟雾刺激通过骨桥蛋白对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖的影响及骨桥蛋白(osteopontin,Opn)在其中的作用。方法体外培养VSMC,用不同浓度CSE刺激,并且设置对照组,采用MTT法检测CSE对大鼠VSMC增殖活性的影响,用免疫细胞化学检测CSE作用后VSMC中骨桥蛋白和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果①MTT结果示2.5%、5%CSE组吸光度(A值)增高,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01)。10%、20%CSE组A值与对照组比较,差异无显著性意义(P0.05)。对照组VSMC中有少量Opn和PCNA蛋白表达。2.5%CSE组Opn和PCNA蛋白表达增加。5%CSE组Opn和PCNA蛋白表达达到高峰,此后逐渐下降。10%、20%CSE组仍高于高于对照组。②Opn抗体可显著抑制5%CSE诱导的MTTA值和Opn、PCNA蛋白表达增加。结论①低浓度CSE(2.5%、5.0%)对大鼠VSMC的增殖逐渐增加,高浓度(10%、20%)时增殖趋势逐渐下降。②CSE可通过增加Opn的表达促进大鼠VSMC的增殖。     

复方丹参注射液对主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 :探讨复方丹参注射液对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响。方法 :应用细胞计数法测定VSMC的数目 ,氚 -胸腺嘧啶核苷 (3 H -TdR)掺入实验观察VSMC的DNA合成 ,同时测定培养液中超氧化物歧化酶 (SOD)、脂质过氧化物 (LPO)的含量。结果 :复方丹参注射液剂量依赖性地抑制VSMC数目的增加和3 H -TdR掺入量 ,增强SOD的活性 ,降低LPO的含量。结论 :复方丹参注射液能明显抑制VSMC的增殖 ,作用机制可能与其清除氧自由基 ,抗脂质过氧化有关     

叶下珠对人肝癌细胞影响的研究

为研究叶下珠对人肝癌细胞SMMC7721的影响,采用噻唑蓝(MTT)还原法和氚标胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法观察叶下珠提取物对人肝癌细胞SMMC7721细胞活性及DNA合成的影响。结果发现,经叶下珠提取物处理后,SMMC7721活力明显减弱,~3H-TdR掺入率明显降低,DNA合成抑制率与药物剂量呈线性关系。结论:叶下珠具有杀伤人肝癌细胞SMMC7721和抑制其增殖作用。     

Kindlin-2 RNA干扰经Wnt信号通路抑制血管平滑肌细胞增殖

目的:观察Kindlin-2 RNA干扰(RNA interference,RNAi)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖的影响并探讨相关的作用机制。方法:构建并制备Kindlin-2 siRNA慢病毒载体并感染大鼠VSMC,CCK-8和BrdU技术检测重组Wnt3a蛋白诱导的VSMC增殖情况,实时定量PCR测定VSMC中Kindlin-2、c-Myc和cyclin D1 mRNA的表达水平,免疫共沉淀了解Kindlin-2和β-catenin的关系,Western blot检测VSMC中Kindlin-2、β-catenin、磷酸化β-catenin(Ser675)、GSK-3β和磷酸化GSK-3β(Ser9)蛋白的表达。结果:Kindlin-2 siRNA慢病毒载体能有效感染大鼠VSMC。CCK-8和BrdU结果表明Kindlin-2 RNAi能够显著抑制Wnt3a诱导的VSMC增殖(1.12±0.14 vs. 2.25±0.15,P=0.000;0.162±0.017 vs. 0.288±0.019,P=0.000)。与阴性...     

化湿利水泄浊法对培养SHR血管平滑肌细胞增殖的影响

为研究化湿利水泄浊法治疗高血压的机理。组织贴块法行自发性高血压大鼠(SHR）主动脉VSMC的分离培养，并以饲置显黼．α-SM actin免疫组化法鉴定；以MTT法观察含药血清对VSMC增殖的影响、^3H-TdR掺入法观察含药血清对VSMC DNA合成的影响，并与平肝潜阳法、西药依那蕾利比较。结果：化湿利水泄浊法各浓度组对VSMC增殖均有抑制作用，且在1．25％～15％之间有一定的量效关系；化湿利水泄浊法对VSMC的增殖抑制作用与依那蕾利相似优于平肝潜阳组；化湿利水泄浊法对VSMC DNA合成的抑制作用．优于对照组。结论：化湿利水泄浊法对培养SHR的VSMC增殖有明显抑制作用。由此改善高血压血管重构。     

PDGF-induced proliferation of smooth muscular cells is related to the regulation of CREB phosphorylation and Nur77 expression

This study examined the relationship between PDGF-induced proliferation of vascular smooth muscle cells (VSMCs) and Nur77 expression and the effect of atorvastatin on VSMC proliferation and Nur77 in PDGF-treated VSMCs. Rat VSMCs were isolated and cultured. After incubation with atorvastatin or Nur77 siRNA, the cells were stimulated with PDGF and detected for BrdU incorporation to measure the proliferation of the VSMCs. Quantitative PCR and Western blotting were used to determine the Nur77 protein and the CREB phosphorylation level, to observe their relations with PDGF-induced VSMC proliferation. Our results showed that PDGF increased the BrdU incorporation in VSMCs, suggesting that it induced the proliferation of the cells. The VSMC proliferation was associated with increased Nur77 expression and elevated CREB phosphorylation. Atorvastatin inhibited the PDGF-induced VSMC proliferation, suppressed Nur77 expression. After silencing of Nur77 gene, the PDGF-induced VSMC proliferation was decreased. It was concluded that PDGF-induced VSMC proliferation was related to the Nur77 expression and CREB phosphorylation. Atorvastatin reduced the Nur77 expression and, at the same time, inhibited the VSMC proliferation.     

维生素E抑制同型半胱氨酸介导的血管平滑肌细胞增殖

目的 探讨在同型半胱氨酸诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中,活性氧(ROS)的作用和维生素E的影响.方法 [3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷掺人法测定细胞DNA合成率,锥虫蓝染色计数细胞数量,DCF-DA荧光探针测定细胞内ROS.结果 (1)同型半胱氨酸诱导VSMC的DNA合成增加,促进细胞增殖和ROS水平升高;尽管半胱氨酸诱导VSMC内ROS水平升高,但是对细胞DNA合成和增殖无影响.(2)过氧化氢酶抑制同型半胱氨酸介导的VSMC内ROS升高,而对VSMC增殖无影响.(3)α-生育酚、β-生育酚均可抑制同型半胱氨酸诱导VSNC内ROS水平升高,但是只有α-生育酚显著抑制VSMC增殖.结论 ROS升高不是同型半胱氨酸诱导的VSMC增殖的原因之一.维生素E降低同型半胱氨酸诱导的VSMC增殖可能与抑制蛋白激酶C活性有关,而与它的抗氧化性无关.     

附子石油醚、氯仿提取物对虚寒模型大鼠肝组织LDH、SDH活性的影响

目的:研究附子石油醚提取物、附子氯仿提取物对虚寒模型大鼠肝组织乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的影响。方法:用生石膏、龙胆草、黄柏、知母水煎液造虚寒型大鼠模型,再用附子石油醚提取物、附子氯仿提取物治疗,用分光光度计法测定肝组织中LDH、SDH的活力。结果:与空白对照组比较,虚寒模型组大鼠肝组织LDH活力明显升高(P<0.05),SDH活力明显降低(P<0.05);附子氯仿提取物可显著降低肝组织LDH活力(P<0.01),附子石油醚提取物、附子氯仿提取物可显著升高肝组织SDH活力(P<0.01)。结论:附子石油醚提取物、附子氯仿提取物可拮抗虚寒型大鼠肝组织LDH活力的升高、SDH活力的下降,从而改善大鼠的能量代谢。     

腺病毒介导血管紧张素Ⅱ2型受体基因转染表达抑制血管平滑肌细胞增殖

目的：探讨血管平滑肌细胞（VSMC）转染表达血管紧张素II（AngII)2型受体（AT2R）对其增殖的影响。方法：构建带AT2R基因的重组复制缺陷型腺病毒载体（AdCMV-AT2R)体外转染大鼠主动脉VSMC,用RT－PCR方法检测AT2R mRNA表达,流式细胞仪检测AT2R表达率,用细胞周期,分裂指数,MTT比色法和5－溴尿苷（BrdU)掺入法检测VSMC增殖。结果 构建的AdCMV-AT2R体外转染培养VSMC表达率为89．51％,AT2R峰值表达时,其S期和G2－M期细胞比率从31．7％降低到13．9％（P＜0．05）,分裂指数从37．4％降低互9．6％（P＜0．01）,MTTK有光度和BrdU掺入量分别降低61．4％和51．6％（P＜0．01）,结论：AT2RL志染表达可显著抑制体外培养VSMC的增殖,这一作用对再狭窄防治是有益的。     

尾加压素Ⅱ对大鼠肾小管上皮细胞的促丝裂作用

目的：研究尾加压素Ⅱ（UⅡ）对大鼠肾小管上皮细胞的促丝裂作用。方法：采用机械分离和酶消化法获取肾小管上皮细胞进行培养、鉴定;用免疫细胞化学法定位溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）掺入到肾小管上皮细胞DNA内;用MTT和BrdU掺入法观察不同浓度UⅡ（0、10^-10、10^-9、10^-8、10^-7和10^-6mol•L^-1）对肾小管上皮细胞增殖和DNA合成的影响,以确定其促丝裂作用。结果：培养的细胞经Cytokeratin-18免疫细胞化学染色后,强度不一和不均匀分布的棕黄色颗粒定位于大部分细胞的胞核周围和胞浆内。培养的肾小管上皮细胞经BrdU掺入和免疫细胞化学显色后,细胞核内有棕黄色颗粒沉着。10^-10 mol •L^-1 UⅡ组的MTT值、 BrdU掺入量与对照组（0 mol•L^-1 UⅡ）比较差异无显著性（P>0.05）;10^-9和10^-8mol•L^-1 UⅡ组的MTT值、BrdU掺入量高于对照组（P<0.01或P<0.05）;与对照组比较,10^-7和10^-6 mol•L^-1 UⅡ组的MTT值明显增加（P<0.05）,但增加的幅度较10^-9 和10^-8mol•L^-1 UⅡ组低,而BrdU掺入量无明显改变。结论：UⅡ对体外培养的大鼠肾小管上皮细胞具有促丝裂作用。     

半夏泻心汤加减治疗慢性粘连性肠梗阻45例总结

目的：探讨半夏泻心汤加减方法治疗慢性粘连性肠梗阻的效果。方法：采用半夏泻心汤（半夏、黄芩、干姜、人参、炙甘草、黄连、大枣）加减方法治疗慢性粘连性肠梗阻45例1个月，观察临床疗效。结果：临床治愈21例（46．7％），显效：9（20．0％），有效：12例（26．7％），总有效率93．4％。结论：半夏泻心汤加减对慢性粘连性肠梗阻有较好的治疗效果。     

INTERLEUKIN 10 INHIBITS THE RAT VSMC PROLIFERATION AND COLLAGEN SECRETION STIMULATED BY ANGIOTENSIN Ⅱ

Objective. To study the effect of interleukin 10 (IL-10) on the angiotensin II (AagII) stimulated rat VSMC proliferation and collagen secretion, and furthermore, explore its mechanism.Methods. On cultured VSMC of rat, 3H-thymine (3H-TdR) and 3H-proline incorporations were used to evaluate the DNA and collagen synthesis, respectively. Western blot and immunoprecipitation were applied to assay the expression and activity of focal adhesion kinase (FAK), respectively.Results. IL-10 (10-8 ～ 10-10g/ml) inhibited the increase of 3H-TdR and 3H-proline incorporation as well as FAK activity, which was induced by 10-7mol/L AngI ( P ＜ 0. 05 or P ＜ 0. 01 ). IL-10 also obviously downregulated the synthesis and secretion of collagen by AngII stimulated VSMC. But there was no difference in the protein expression of FAK among all the groups ( P ＞ 0. 05).Conclusion. IL-10 antagonizes the VSMC proliferation and collagen synthesis by regulating FAK activity stimulated by AngII.     

Advanced glycosylation end products, protein kinase C and renal alterations in diabetic rats

Objective To study the relationship between advanced glycosylation end products (AGE) an d protein kinase C (PKC), and their effects on renal alteration in diabetic rats .
Methods Insulin or aminoguanidine was administered to diabetic rats. Blood glucose, hem oglobin A_1C (HbA_1C), glomerular tissue extracts AGE (GTE-AGE), PKC, glomerular basement membrane thickness (GBMT) and urine protein/creatinine ( Pr/Cr) ratio in diabetic rats were measured and analysed.
Results Levels of blood glucose, HbA_1C and AGE, PKC activity, the Pr/Cr ratio an d GBMT were all significantly increased (P values all less than 0.01) in di abetic rats. Insulin could decrease the formation of HbA_1C and AGE, and improve PKC activity. Aminoguanidine had no influence on PKC activity (P >0.05) although it decreased the formation of AGE. Both drugs could delay t he increase of urine Pr/Cr ratio and GBMT (P<0.05 or P<0.01).
Conclusions Chronic hyperglycemia may lead to an increase of PKC activity. HbA_1Cand AGE may not directly contribute to alterations of PKC activity, but the increa se of PKC activity could promote the action of AGE on GBM thickening. It is imp ortant t o inhibit the formation of AGE and reduce the PKC activity so as to prevent or d elay the development of diabetic nephropathy.     

血管活性肽对同型半胱氨酸刺激平滑肌细胞增殖的实验研究

目的 观察对兔主动脉平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖起负调节作用的Ｃ－型利钠利尿肽（ＣＮＰ）、肾上腺髓质素（Ａｄｍ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）、生长抑素（ＳＳＴ）和甲状旁腺素相关蛋白（ＰＴＨｒＰ）等活性肽对同型半胱氨酸（Ｈｃｙ）刺激的ＶＳＭＣ增殖的影响。方法 ６只大耳白兔胸主动脉贴块法离体培养平滑肌细胞;分对照及Ｈｃｙ加不同处理因素组;＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入测定ＶＳＭＣ增殖;差速离心分离细胞膜、胞浆及胞