PPARγ、PTEN、Akt在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系

目的：检测人胃癌组织中过氧化物酶增殖激活受体γ（PPARγ）、10号染色体缺失张力蛋白同源的磷酸酶基因（PTEN）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）mRNA表达,探讨其与胃癌生物学行为的关系。方法应用逆转录PCR法检测60例人胃癌组织及相应癌旁组织,20名正常胃组织中PPARγ、PTEN、Akt mRNA的表达情况,并分析三者与胃癌分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、浸润深度和临床分期及患者性别、年龄之间的关系,同时分析三者的相关性。结果胃癌组织中PPARγ及Akt mRNA表达水平高于癌旁组织及正常胃组织（P＜0.05）,而PTEN mRNA 表达水平明显较癌旁组织及正常胃组织低（P＜0.05）,在癌旁组织与正常胃组织间PPARγ、PTEN、Akt mR-NA的表达水平均无明显差异。胃癌组织中PPARγ、PTEN、Akt mRNA表达量与患者性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关,而与胃癌的 TNM分期、侵犯浆膜、淋巴结转移及远处转移相关（P＜0.05）。PPARγ与PTEN 的表达呈负相关（rs ＝-0.492,P＜0.05）,与 Akt 表达呈正相关（rs ＝0.623,P＜0.05）,PTEN与Akt表达呈负相关（rs ＝-0.565,P＜0.05）。结论 PPARγ、Akt在胃癌中高表达而PTEN呈低表达,三者中存在明显相关,联合检测可作为判断胃癌恶性程度和预后的指标。     

Syndecan-1表达缺失促进胃癌淋巴结转移

目的:探讨Syndecan-1基因在胃癌及癌旁组织中的表达及其与癌淋巴结转移的关系。方法:将44例胃癌手术病例分为伴淋巴结转移组和不伴淋巴结转移组,以相应的癌旁正常组织为对照。应用RT-PCR及免疫组化技术检测Syndecan-1的表达,并同时检测p53表达水平的改变。结果:所有癌旁正常组织均有Syndecan-1基因的表达,而44例胃癌组织中只有10例有表达,阳性表达率为22.7%(10/44),癌旁正常组织中Syndecan-1基因表达率显著高于胃癌组织(χ~2=9.14.P<0.05)。35例伴有淋巴结转移的胃癌组织中,2例有Syndecan-1基因表达,阳性表达率为5.7%(2/35),不伴淋巴结转移的9例胃癌组织中有8例检测到Syndecan-1 mRNA的表达,阳性表达率为88.9%(8/9),伴有淋巴结转移的胃癌组织中Syndecan-1 mRNA的表达率显著低于不伴淋巴结转移者,两组间差异明显(χ~2=23.66,P<0.05)。p53表达阳性的胃癌组织Syndecan-1 mRNA的表达低于p53表达阴性的胃癌组织(χ~2=6.18,P<0.05)。结论:Syndecan-1 mRNA表达缺失促进了胃癌生成及淋巴结转移。     

RhoC基因在胃癌中的表达及其意义

目的 研究胃癌与癌旁胃黏膜中RhoC mRNA的表达情况及其与胃癌主要临床病理特征的关系. 方法 采用半定量RT-PCR方法检测23例新鲜胃癌组织和相应的癌旁胃黏膜组织中RhoC mRNA的表达. 结果 胃癌组织中RhoC mRNA的表达水平高于相应的癌旁组织,其吸光度比值分别为1.40±0.23和0.36±0.15(P<0.01);同时RhoC mRNA在胃癌组织中的表达水平与胃癌浸润深度、TNM分期和有无淋巴结转移有相关性(均P<0.01). 结论 RhoC mRNA在胃癌组织中过表达可能与胃癌的发生发展密切相关,有望成为胃癌的早期诊断指标.     

脆性组氨酸三联体(FHIT)基因外显子5,8纯合性缺失及突变与胃癌的关系

目的:探讨胃癌组织中抑癌基因FHIT外显子5.8纯合性缺失及突变情况。方法:采用外显子特异聚合酶链反应(PCR)及聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)-银染方法对30例胃癌和18例正常组织中FHIT基因外显子5,8的纯合性缺失和点突变显示检测和比较。结果:胃癌组织中FHIT基因外显子5、8总纯合性缺失率为23.3%,正常组织无一例缺失(P=0.011);外显子5、8纯合性缺失率分别为16.67%和13.33%(P>0.05);FHIT基因外显子5、8纯合性缺失与胃癌的分化程度、病理分期及淋巴结转移无显著性相关(P>0.05)。所有胃癌组织标本均未检测到外显子5,8的点突变。结论:提示FHIT基因外显子5、8纯合性缺失可能在胃癌的发生中起重要作用。而点突变不是FHIT基因失活的主要方式。     

PTEN基因突变与胃癌临床分期的相关性研究

目的研究抑癌基因PTEN（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN）突变高发区外显子5（exon5）和外显子8（exon8）在胃癌组织中的突变频率．探讨其突变与临床分期的相关性．方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析（PCR—SSCP）方法检测胃癌组织和相应癌旁正常组织中PTEN基因的突变,并对突变样本的PCR产物进行测序分析。结果42例胃癌组织中检测到PTEN基因突变3例,突变率为7．14％（3／42）,42例胃癌不同临床病理分期中,Ⅰ、Ⅱ期突变率为5．88％（1／17）,Ⅲ、Ⅳ期突变率为8．00％（2／25）,二者差异无显著性（P〉0．05）。42例相应癌旁正常组织未检测到突变,二者差异无显著性（P〉0．05）。对42例胃癌进行组织学分级,结果低分化腺癌突变率为12．00％（3／25）,中、高分化腺癌突变率为0（0／17）,二者差异无显著性（P〉0．05）。结论胃癌组织中存在PTEN基因突变,主要发毕在低分化腺癌中。而PTEN基因突褒与胃癌病理组织学分级和临床病理分期之间无显著相关性。     

Anxa2基因在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨Anxa2基因表达在胃癌发生、发展中的作用及其与临床病理特征的相关性。方法应用实时荧光定量PCR方法检测50例胃癌及癌旁组织中Anxa2基因mRNA的表达水平;用Western blot方法检测20例胃癌及癌旁组织中Anxa2蛋白的表达水平;制作组织芯片,通过免疫组化染色分析139例胃癌Anxa2蛋白表达与临床病理特征的关系。结果 Anxa2 mRNA在胃癌和癌旁组织中的表达水平分别为2.072±1.477和1.271±0.907,两组差异显著(P0.01);胃癌组织中Anxa2蛋白的表达量(2.144±1.226)高于癌旁组织(1.269±0.736),差异显著(P0.001)。免疫组化显示Anxa2定位于肿瘤细胞膜,在胃癌组织中的阳性率为49.6%(69/139),高于癌旁组织18.7%(26/139),两者差异显著(P0.001),且Anxa2过表达与胃癌组织分化、淋巴结转移和临床分期密切相关(P0.05)。结论 Anxa2过表达与胃癌的发生、发展密切相关,可能是新的治疗靶点或预后评估指标。     

H1-钙结合蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 分析H1-钙结合蛋白(H1-calponin)在胃癌组织中的表达,探讨其与基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的关系及临床意义.方法 应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹分析检测胃癌组织(n=20)及癌旁正常组织中H1-calponin的mRNA和蛋白表达水平;RT-PCR和明胶酶图检测胃癌组织及癌旁正常组织中MMP-2的mRNA水平及酶活性.结果 Western印迹灰度扫描显示,胃癌组织中H1-calponin表达水平显著低于癌旁正常组织(0.98±0.28 vs 3.11±1.37,t=-6.833,P<0.01),而MMP-2的活性显著高于癌旁正常组织(3.48±1.25 vs 1.26±0.39,t=7.556,P<0.01),胃癌组织中H1-calponin表达水平与MMP-2活性呈负相关(r=-0.623,P<0.01).结论 H1-calponin在胃癌组织中表达下调且与MMP-2活性呈负相关,表明其在胃癌发生过程中发挥重要作用.     

Tiam-1和PTEN在胃癌组织中表达的相关性及意义

目的探讨胃癌组织中Tiam-1和PTEN蛋白表达的相关性及临床病理意义。方法应用免疫组织化学法检测57例胃癌患者手术切除的胃癌及其癌旁组织中Tiam-1和PTEN的蛋白表达水平。结果 Tiam-1蛋白在胃癌组织中表达阳性率（77.2%）高于癌旁组织（7.0%）（χ2=57.576,P=0.000）;PTEN蛋白在胃癌组织中表达阳性率（64.9%）低于癌旁组织（98.2%）（χ2=21.072,P=0.000）;Tiam-1表达水平与胃癌组织分化程度低、TNM分期高以及淋巴结转移呈正相关（P〈0.05）;PTEN表达水平与胃癌组织分化程度低、TNM分期高及淋巴结转移呈负相关（P〈0.05）;二者表达与年龄、性别及肿瘤直径均无相关性（P〉0.05）;Tiam-1与PTEN的表达呈明显负相关（r=-0.312,P=0.018）。结论联合检测Tiam-1和PTEN对胃癌侵袭、转移及预后评估有一定价值。     

胃癌中多基因甲基化状态及其表达的研究

目的了解胃癌中p16、E-cadherin、Runx3、DAPK和CHFR基因启动子CpG岛的甲基化状态,并探讨基因异常甲基化与mRNA表达的关系及其意义。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测12例胃癌患者癌组织及其相应的癌旁正常组织中5种基因的甲基化状态,以12例胃镜活检的正常胃组织作为对照,采用RT-PCR方法相应检测了5种基因的mRNA表达水平。并分析每种基因甲基化程度与表达水平之间的关系。结果胃癌组织中,p16、E-cadherin、Runx3、DAPK和CHFR基因的甲基化率分别为41.7%、8.3%、58.3%、33.3%和58.3%,相应的癌旁正常组织中,p16、E-cadherin、Runx3、DAPK和CHFR基因的甲基化率分别为8.3%、0.0%、8.3%、8.3%和16.7%,且75%的胃癌组织中至少有一种基因甲基化,显著高于癌旁正常组织25%(P<0.05),而健康对照组织中无基因甲基化,在甲基化的胃癌组织中均无p16、E-cadherin和DAPKmRNA表达,而癌旁正常组织、非甲基化的癌组织中均有其表达。结论胃癌中多基因启动子CpG岛高甲基化是一个频繁的事件,并且基因启动子高甲基化与其mRNA表达缺失有关,这可能参与了胃癌的发生发展。     

胃癌中FHIT基因外显子5、8纯合性缺失及其蛋白表达的研究

目的:探讨FHIT基因外显子5、8纯合性缺失与蛋白表达的关系及其在胃癌发病机制中的作用.方法:应用PCR及免疫组化SP法检测30例胃癌组织、18例正常胃组织中FHIT基因外显子5、8的纯合性缺失和FHIT蛋白的表达.结果:FHIT蛋白阴性表达率及外显子5、8纯合性缺失率在胃癌组织中均高于正常胃组织(P＜0.05).FHIT蛋白表达与胃癌的分化程度有关(P＜0.05):胃癌组织中FHIT基因外显子5、8纯合性缺失与FHIT蛋白阴性表达有显著相关性(r=0.59,P＜0.05).结论:胃癌组织中FHIT基因外显子5、8纯合性缺失可能是引起FHIT蛋白表达降低并进而导致胃癌发生的重要机制.