以棋盘法测定汉防己甲素与伊曲康唑的体外联合抗烟曲霉作用

目的 探讨汉防己甲素在体外对伊曲康唑抗烟曲霉活性是否有增效作用。方法 参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）推荐的M38-A2方案,采用棋盘式微量液基稀释法,以21株烟曲霉临床株为研究对象,测定汉防己甲素联合伊曲康唑对其的抗真菌活性,以OD值测定法判读最低抑菌浓度,并以FICI法评价结果,同时以其中的AF46株为代表,用等效线图解法验证结果。结果 汉防己甲素与伊曲康唑单独作用于上述烟曲霉临床株的最低抑菌浓度值分别为256~512 μg/mL、0.125~32 μg/mL,联合用药时的最低抑菌浓度值分别降至8~64 μg/mL、0.03~2 μg/mL,且终点清晰,“拖尾现象”消失,FICI值为0.08~0.38,均表现为显著协同作用。AF46株的等效曲线呈凹形,也表明具有协同作用。结论 汉防己甲素在体外对伊曲康唑抗烟曲霉活性有显著增效作用。     

汉防己甲素对益康唑抗须癣毛癣菌活性增效作用的体内实验研究

目的探讨体内汉防己甲素(tetrandrine,TET)对益康唑(econazole,ECZ)抗须癣毛癣菌活性的增效作用。方法以须癣毛癣菌构建豚鼠皮肤癣菌病模型,将造模成功的40只豚鼠随机分为4组,分别涂用1%ECZ+1%TET(ECZ+TET组)、1%ECZ(ECZ组)、1%TET(TET组)和霜剂基质(基质组)每d 1次,连续14d,从皮损一般情况、病原学、病理学三方面观察TET对ECZ抗须癣毛癣菌的增效活性。结果ECZ+TET组从用药第4d起,皮损评分开始呈持续下降趋势;用药第14d的皮损评分降至0.75分。ECZ组皮损评分与之类似,但总体下降趋势小于ECZ+TET组,用药第14d的皮损评分为2.00分。两组皮损评分差异有统计学意义(P=0.037)。ECZ+TET组皮损组织真菌培养阳性率、病理组织中真菌菌丝和孢子、炎症反应和组织破坏程度明显轻于其它3组。结论TET在须癣毛癣菌所致豚鼠皮肤癣菌病模型中能增加ECZ抗须癣毛癣菌活性。     

汉防己甲素对氟康唑抗白念珠菌生物膜增效活性的初步研究

目的探讨汉防己甲素（tetrandrine,TET）对氟康唑（fluconazole,FLC）抗白念珠菌生物膜是否有增效活性。方法构建白念珠菌生物膜,参照微量稀释法,测定FLC单独及其联合TET对生物膜不同时期的最小抑菌浓度（minimum in-hibitory concentration,MIC）;生物膜重新悬浮后,测定FLC单独及其联合TET对不同浓度菌液的MIC。结果 FLC单独及其联合TET对白念珠菌生物膜最初期（0h）的MIC50值范围分别为0.25～64μg/mL和0.125～16μg/mL（P=0.002）;早期（4h）的MIC50值范围分别为8～256μg/mL和1～64μg/mL（P=0.000）;中期（24h）、成熟期（48h）的MIC50值均〉1024μg/mL。生物膜重新悬浮后,FLC单独及其联合TET对低浓度菌液（终浓度为1×103 CFU/mL）的MIC值范围分别为0.25～64μg/mL和0.125～16μg/mL（P=0.003）,高浓度菌液（终浓度为1×106 CFU/mL）的MIC值均〉64μg/mL。结论汉防己甲素在体外对氟康唑抗白念珠菌生物膜最初期（0h）、早期（4h）有增效活性,对中期（24h）、成熟期（48h）无增效活性;汉防己甲素对氟康唑抗白念珠菌生物膜重新悬浮后的低浓度菌液（终浓度为1×103 CFU/mL）有增效活性,高浓度菌液（终浓度为1×106 CFU/mL）无增效活性。     

泊沙康唑体内及体外活性研究进展

泊沙康唑是广谱三唑类抗真菌新药,对大多数酵母菌和丝状真菌体外高度敏感,如念珠菌属、新型隐球菌、曲霉属、镰刀霉属及接合菌属等。对部分双相型真菌和地方性真菌,泊沙康唑也具有体外活性。对免疫正常及免疫抑制动物的侵袭性感染,泊沙康唑都有广谱、高效的抗真菌活性。对光滑念珠菌、克柔念珠菌、土曲霉、镰刀霉及接合菌等,泊沙康唑的体内外活性优于其他唑类药物。在体内敏感度研究中,对不同免疫状态及不同部位的重度侵袭性感染,泊沙康唑预防和治疗用药都显示了良好的效果。     

汉防己甲素体外抗泡球蚴作用的研究

目的　比较汉防己甲素、阿苯哒唑和汉防己甲素脂质体体外抑制原头节作用 ,探讨汉防己甲素抗泡型包虫病的作用。　方法　将汉防己甲素、阿苯哒唑和汉防己甲素脂质体分别配制成 2 0 μg/ml、40 μg/ml、80 μg/ml 3个浓度 ,并且选择低、中剂量的汉防己甲素和阿苯哒唑合用 ,加入RPMI164 0培养基中 ,体外培养泡球蚴原头节 ,观察计数每天的死亡率 ,直到所有的用药组头节全部死亡。　结果　汉防己甲素、阿苯哒唑低、中、高浓度组与相应的对照组比较 ,原头节死亡率的差异均有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;汉防己甲素脂质体在中、高浓度下与对照组的原头节死亡率差异有统计学意义(P <0 .0 5 ) ;联合用药组与单药组的原头节死亡率差异亦有统计学意义 (P <0 .0 5 )。　结论　汉防己甲素体外具有抑制泡球蚴原头节的作用 ,并且与阿苯哒唑联合使用时具有一定的协同作用。     

汉防己甲素治疗矽肺抗肺纤维化作用的研究

目的研究汉防己甲素对矽肺患者的临床效果。方法对我院收治的66例矽肺病I期患者,随机分为实验组34例,对照组32例。实验组在对照组的基础上加用汉防己甲素40mg口服,每天三次,疗程6个月,对照组使用安慰剂。比较两组治疗前后的症状积分、和各实验室指标、X线报告好转率以及副作用。结果实验组治疗后的症状评分要显著优于对照组(P0.05),治疗总有效率也优于对照组(P0.05);实验组治疗后肺功能指标和动脉血气指标要明显优于对照组(P0.05),胸片好转率也优于对照组。结论汉防己甲素可以明显缓解矽肺患者的临床症状,抑制肺纤维化,值得临床上推广使用。     

汉防己甲素对氟康唑抗白念珠菌活性增效作用的体内实验研究

目的探讨汉防己甲素在体内对氟康唑是否有增效作用。方法小鼠阴道内接种白念珠菌构建念珠菌性阴道炎模型，将造模成功小鼠随机分为10组。接种后第3d各用药组开始阴道内给药（汉防己甲素和氟康唑的高、低剂量均分别取26mg／（kg·d）、13mg／（kg·d），按不同组合给药），每天1次，连续7d，同时设未用药组做对照。接种后第2、6、11d分别取小鼠阴道灌洗液进行真菌载量分析、涂片镜检，并取其阴道组织进行病理学检查。结果至接种后第11d，与单独给予氟康唑26mg／（kg·d）组相比，同时予汉防己甲素26mg／（kg·d）和氟康唑26mg／（kg·d）组真菌载量明显降低（分别为2．11±0．36×10^4、0．19±0．04×10^4CFU／ml，P=0．039）。与其余9组相比，涂片镜检，该组小鼠未见假菌丝，而其余9组均可见数量不等的假菌丝或假菌丝团（χ2=33．084，P=0．000）；阴道组织病理学检查，该组粘膜水肿较轻，炎性细胞浸润较少，且阴道腔、粘膜层假菌丝消失。结论汉防己甲素（26mg／kg·d）在小鼠阴道腔内能增强氟康唑抗白念珠菌活性。     

汉防己甲素和阿苯达唑体外抗细粒棘球蚴原头节作用的观察

通过比较汉防己甲素和阿苯达唑体外抗细粒棘球蚴原头节作用，以探讨中药单体汉防己甲素抗包虫病的作用，将汉防己甲素和阿苯达唑分别配成不同浓度，加入RPMI 1640培养基中，体外培养细粒棘球蚴原头节，观察其每天的死亡率。结果显示各用药组原头节的死亡率分别与对照组相比，差异均有统计学意义(P＜0．01)；阿苯达唑和汉防己甲素联合组与阿苯达唑组，汉防己甲素低、中浓度组相比，差异有统计学意义(P＜0．05)，而与汉防己甲素高浓度组相比，差别无统计学意义(P＞0．05)。表明汉防己甲素在体外有明显的抗原头节作用；汉防己甲素体外抗原头节作用与阿苯达唑相当．同时两药联合抗原头节效果明显优于单药组，两药联合可能具有协同效果。     

伏立康和唑伊曲康唑治疗慢性阻塞性肺疾病合并侵袭性肺曲霉病的对照研究

目的 探讨应用伏立康唑对照伊曲康唑治疗慢性阻塞性肺疾病合并侵袭性肺曲霉病患者的临床疗效.方法 收集中山大学附属第一医院及中山大学附属江门医院2005年1月～2012年8月收治的确诊为慢性阻塞性肺疾病合并侵袭性肺曲霉病,且初始时选用伏立康唑或伊曲康唑治疗的患者43例,分为伏立康唑组(24例)和伊曲康唑组(19例),对两组患者的临床资料进行回顾性分析.结果 两组患者,使用广谱抗生素、肺功能、营养状态等影响因素及临床症状、体征等比较差异均无统计学意义.伏立康唑组患者治愈或好转率(79.17％)明显高于伊曲康唑组(52.63％,P＜0.05).伏立康唑补救治疗有效率为60.00％ (3/5).结论 初始选用伏立康唑治疗慢性阻塞性肺疾病并发侵袭性肺曲霉病的疗效明显优于伊曲康唑.     

汉防己甲素对氟康唑抗白念珠菌菌丝相活性的增效作用及其机制研究

目的探讨体外汉防己甲素对氟康唑抗白念珠菌菌丝相活性是否有增效作用及其机制。方法参照微量稀释法确定汉防己甲素对白念珠菌菌丝相的非细胞毒性剂量,并测定氟康唑单独及联合汉防己甲素时对16株同一亲本白念珠菌菌丝相的MIC。荧光分光光度计测定加入及未加入汉防己甲素时此系细胞内罗丹明123的荧光强度。结果在终质量浓度≤2μg/mL汉防己甲素的作用下,白念珠菌菌丝相的存活率>95%;氟康唑单独作用时,对16株白念珠菌菌丝相的MIC值为0.250～64μg/mL;与汉防己甲素(2μg/mL)联合时,氟康唑对受试菌的MIC值降至0.125～8μg/mL,且终点清晰,"拖尾现象"消失。蓄积实验后,加入与未加入汉防己甲素的此系细胞内罗丹明123荧光强度分别为2.499～50.428、2.849～26.035(P=0.025);外排实验后,该值分别为1.006～7.267、0.191～6.685(P=0.000)。结论汉防己甲素在体外对氟康唑抗白念珠菌菌丝相活性有增效作用;汉防己甲素可抑制白念珠菌菌丝相药物外排泵的功能。     

Aspergillus mediastinitis following orthotopic heart transplantation: case report and review of the literature

Bacterial mediastinitis after orthotopic heart transplantation (OHT) is well described in the literature. However, little information has been published on fungal mediastinitis in this population. We describe a man with Aspergillus fumigatus mediastinitis diagnosed 10 weeks after OHT. The patient was treated with voriconazole. The literature on Aspergillus mediastinitis is also reviewed.     

烟曲霉感染中Th17免疫应答的作用机制

侵袭性肺曲霉病是一种多见的真菌感染性疾病,感染时可激活体内的固有免疫及适应性免疫以清除病原菌,起到宿主免疫保护作用.免疫细胞Th17是近年来研究热点,其主要参与免疫性疾病的免疫应答,在宿主免疫保护中起重要作用.近年来关于Th17细胞在烟曲霉感染中相关作用的研究逐渐增多,本文就烟曲霉感染时宿主的免疫应答机制的最新进展进行综述.     

烟曲霉Bem46基因荧光定位菌株构建及对极性生长相关基因影响作用初探

目的 构建以eGFP作为荧光标记的烟曲霉Bem46基因定位菌株,观察其在烟曲霉不同形态中的定位情况,初步明确该基因对极性生长相关基因Bem1、Bud5表达的影响。方法 运用分子生物学方法将烟曲霉Bem46基因克隆入质粒pUCGH,构建荧光定位载体。原生质体法转化烟曲霉获得该基因定位菌株并验证。激光共聚焦显微镜观察绿色荧光在烟曲霉孢子、芽管以及菌丝状态下分布情况。RT-PCR观察对照菌株Ku80和ΔBem46中极性生长相关基因Bem1、Bud5的表达量。结果 通过全基因克隆成功获得烟曲霉Bem46基因定位菌株并经PCR验证。激光共聚焦显微镜下绿色荧光在孢子中弥散分布,在孢子即将发芽时荧光在孢子一侧聚集,并随着芽管形成,荧光在极性生长的一侧延伸分布于整个菌丝中,在菌丝形成侧枝膨大处可见荧光明显聚集。RT-PCR结果表明ΔBem46中基因Bem1、Bud5表达量均较对照菌株有所下降。结论 烟曲霉Bem46基因可能同孢子发芽、菌丝发生侧枝的极性生长相关;且该基因缺陷可影响极性生长相关基因Bem1、Bud5表达。     

Aspergillus fumigatus pacemaker lead endocarditis: a case report and review of the literature

The diagnosis of fungal endocarditis requires a high index of clinical suspicion. Rarely, pacemaker implantation may be a risk factor for the development of fungal endocarditis. A 71-year-old man with a history of multiple transvenous pacemaker manipulations and fever of an uncertain source is described. A diagnosis of culture-negative pacemaker endocarditis was established only after repeat transthoracic echocardiography. Amphotericin B was instituted; however, the patient developed a cerebral infarct and died. Postmortem examination demonstrated Aspergillus fumigatus within a large pacemaker lead thrombus, tricuspid and aortic valve vegetations, and septic pulmonary and renal emboli. The present report describes the clinical and pathological features of a rare case of Aspergillus fumigatus pacemaker lead endocarditis and suggests that serial echocardiograms may be effective in the early detection of pacemaker lead vegetations. The diagnostic features and therapeutic management of pacemaker lead endocarditis are reviewed.     

五种抗深部真菌药物对烟曲霉体外抗菌活性的实验研究

目的 测定五种抗深部真菌药物对烟曲霉体外抗菌活性,为临床治疗侵袭性烟曲霉感染提供理论依据.方法 应用美国临床实验室标准化协会(CLSI)的微量液基稀释法 M38-A方案,测定烟曲霉临床株对伊曲康唑(ICZ)、两性霉素B(AmB)、伏立康唑(VRC)、卡泊芬净(CBF)、 氟康唑(FCZ)的敏感性.结果 MIC几何均数VRC为 0.29 μg/ml、CBF为0.45 μg /ml、ICZ为0.52 μg /ml、AmB为0.55 μg /ml、FCZ为62.58 μg /ml.结论 VRC、CBF、ICZ、AmB均有很强的抗烟曲霉作用,FCZ对烟曲霉均耐药.