黄芪、水蛭对脂多糖诱导的大鼠肾系膜细胞MMP-2及TIMP-2表达的影响

目的:研究黄芪、水蛭有效成分及大鼠含药血清对脂多糖(LPS)诱导的系膜细胞增殖中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)因子的调控作用,探讨黄芪、水蛭治疗系膜增生性肾小球肾炎的机制。方法:LPS诱导大鼠系膜细胞增殖,选用MTT法检测后最大无毒浓度的黄芪、水蛭有效成分及含药血清进行干预。实验分为正常组、LPS组、黄芪多糖组、黄芪甲苷组、毛蕊异黄酮组、水蛭素组、黄芪高剂量血清组、水蛭高剂量血清组、黄芪低水蛭高剂量血清组、黄芪高水蛭高剂量血清组,干预24 h后收集细胞,Western Blot法测定MMP-2及TIMP-2表达的变化。结果:模型组经LPS诱导后,MMP-2表达高于正常组(P<0.01),TIMP-2蛋白表达低于正常组(P<0.01),黄芪、水蛭能不同程度地抑制MMP-2蛋白的表达(P<0.05),同时上调TIMP-2蛋白的表达(P<0.01)。结论:说明黄芪、水蛭通过调节MMP-2/TIMP-2动态平衡来减少肾小球细胞外基质的沉积,延缓肾纤维化进程。     

基于TGF-β1/Smad信号通路的加味黄芪赤风汤抗肾脏纤维化机制研究

目的观察加味黄芪赤风汤对TGF-β1/Smad信号通路的影响,探讨其抗肾脏纤维化的机制。方法采用血清药理学方法,大鼠予加味黄芪赤风汤和替米沙坦灌胃,制备含药血清。体外培养小鼠系膜细胞,以脂多糖作为炎症刺激因子。实验分为6组:正常组、模型组、替米沙坦组、加味黄芪赤风汤(简称中药)高、中、低剂量组。含药血清干预72h后,采用酶联免疫法吸附试验测定各组细胞上清液中层粘连蛋白(laminin,LN)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的含量;采用Western blot法检测各组细胞中TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表达。结果(1)与正常组比较,模型组上清液中LN和FN含量增加(P0.01);与模型组比较,替米沙坦组与中药中剂量组LN及FN含量减少(P0.05,P0.01),中药低剂量组上清液中FN含量亦减少(P0.01)。(2)与正常组比较,模型组TGF-β1、p-Smad2/3、CTGF蛋白表达显著增加,Smad7蛋白表达减少,差异均有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,替米沙坦组、中药高、中、低剂量组TGF-β1、CTGF蛋白表达均降低(P0.01,P0.05),替米沙坦组、中药高、中剂量组p-Smad2/3蛋白表达降低(P0.01),中药高、中剂量组Smad7蛋白表达明显增加(P0.05)。结论加味黄芪赤风汤能够抑制致炎因子诱导的肾小球系膜细胞分泌细胞外基质增加和肾小球系膜细胞TGF-β1/Smad信号通路的过度激活,这可能是加味黄芪赤风汤抗肾脏纤维化的机制之一。     

从自噬机制探讨加味黄芪赤风汤含药血清对阿霉素诱导的肾小球足细胞损伤的保护作用

目的研究加味黄芪赤风汤对肾小球足细胞自噬及足细胞损伤相关蛋白nephrin、podocin及desmin表达的影响。方法采用体外培养小鼠肾小球足细胞、以阿霉素(adriamycin,ADR)诱导的方法制作足细胞损伤模型。随机分为空白组、模型组、替米沙坦组及加味黄芪赤风汤高、中、低剂量组(简称中药高、中、低剂量组)。采用Western blot法检测各组足细胞相关蛋白nephrin、podocin、desmin和自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达水平,透射电镜下观察各组足细胞自噬超微结构变化。结果 (1)与空白组比较,模型组nephrin、podocin表达明显下降(P0.01),desmin表达明显升高(P0.01);与模型组比较,中药高、中剂量组及替米沙坦组nephrin、podocin表达明显升高(P均0.01),desmin表达明显下降(P均0.01),中药低剂量组无明显改善(P0.05)。(2)模型组较空白组自噬小体数量明显增多,体积增大,细胞器减少;中药高、中剂量组及替米沙坦组较模型组自噬超微结构均有不同程度改善,而中药低剂量组无明显改变。(3)与空白组比较,模型组Beclin-1、LC3-Ⅱ表达明显上升(P0.01);与模型组比较,中药高、中剂量及替米沙坦组Beclin-1、LC3-Ⅱ表达明显下降(P0.01),中药低剂量组无明显下降(P0.05)。结论加味黄芪赤风汤对ADR诱导的足细胞损伤具有保护作用,调节足细胞自噬活性可能是其足细胞保护作用的内在机制之一。     

中药川贝母对哮喘模型小鼠MMP-2,MMP-9和TIMP-1的影响

观察中药川贝母对哮喘模型小鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的影响,探讨其治疗哮喘的作用机制。BALB/C小鼠,随机分为正常组、模型组、高剂量组、低剂量组、阳性对照组。除正常组外,其他各组用卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型。造模成功后高剂量组和低剂量组分别按18.0,9.0 mg·kg-1剂量给予中药川贝母灌胃;阳性对照组于腹腔注射0.5 mg·kg-1剂量地塞米松;正常组和模型组等量生理盐水灌胃,每天1次,连续28 d。观察各组小鼠气道反应性的变化,支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和白细胞分类的变化以及支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度的变化;ELISA法检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1水平;RT-PCR检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1 mRNA的表达。结果显示,模型组气道反应性、BALF中细胞总数以及中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞计数、支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组(P0.05或P0.01);模型组MMP-2,MMP-9和TIMP-1水平和mRNA表达明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。推断中药川贝母可改善哮喘模型小鼠气道重塑状态,其机制可能与其降低MMP-2,MMP-9和TIMP-1有关。     

清热燥湿方对急性肺损伤大鼠肺组织基质金属蛋白酶2及其抑制因子基因表达的影响

目的探讨清热燥湿方对细菌脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制因子(TIMP-2)基因表达的影响。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、LPS模型组、地塞米松组和清热燥湿方组,每组再分为4h和8h两个亚组。分别用地塞米松和清热燥湿方在LPS诱导ALI模型前预处理大鼠,分别采用免疫组化法和实时荧光定量PCR法检测大鼠肺组织MMP-2及TIMP-2 mRNA表达。结果与模型组相比,4h清热燥湿方组MMP-2 mRNA表达明显降低(P0.01),TIMP-2蛋白染色阳性面积率及TIMP-2 mRNA表达均显著增高(P0.01或P0.05);8h清热燥湿方组MMP-2蛋白染色阳性面积率及MMP-2 mRNA表达显著降低(P0.01或P0.05)。病理学观察显示,模型组大鼠肺组织出现大片出血及坏死,清热燥湿方组大鼠肺组织病理损伤程度较模型组减轻。结论清热燥湿方能减轻LPS致ALI大鼠肺组织损伤,对LPS致ALI大鼠有保护作用。     

基于活性氧簇-自噬通路调控的加味黄芪赤风汤对肾小球足细胞的保护机制研究

目的观察加味黄芪赤风汤基于活性氧簇(ROS)-自噬通路对AngⅡ诱导肾小球足细胞损伤的保护机制。方法制备低、中、高剂量加味黄芪赤风汤(分别应用生药浓度为0.57、1.15、2.29 g/mL的加味黄芪赤风汤灌胃小鼠)含药血清及替米沙坦(0.83 mg/mL灌胃小鼠)含药血清,采用AngⅡ(1×10~(-7)mol/L)诱导足细胞损伤模型,分为空白组,模型组,加味黄芪赤风汤低、中、高剂量组以及替米沙坦组;为验证自噬与模型的关系,设置3MA与氯喹组。采用Western Blot检测足细胞损伤相关蛋白nephrin、podocin及自噬相关蛋白LC3、Beclin-1、P62表达,溶酶体荧光探针检测自噬流活性,透射电镜观察足细胞内自噬体的形成,流式细胞仪检测细胞内ROS平均荧光强度(MFI)。结果与空白组比较,模型组足细胞nephrin、podocin、P62表达下调(P0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1表达上调(P0.01),ROS的MFI增强(P0.01)。透射电镜及溶酶体荧光探针结果显示模型组自噬体数量增多,溶酶体表达增强。与模型组比较,加味黄芪赤风汤中、高剂量组及替米沙坦组nephrin、podocin、P62表达上调(P0.01,P0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1表达下调(P0.01,P0.05);3MA及氯喹组足细胞nephrin、podocin表达下调(P0.01,P0.05);加味黄芪赤风汤低剂量组Beclin-1表达下调(P0.05);各给药组ROS MFI减弱(P0.01,P0.05)。透射电镜及溶酶体荧光探针结果显示加味黄芪赤风汤组及替米沙坦组自噬体数量减少,溶酶体表达减弱。结论 AngⅡ通过下调nephrin、podocin表达损伤足细胞;加味黄芪赤风汤可上调AngⅡ诱导的nephrin、podocin表达,缓解足细胞损伤;加味黄芪赤风汤可能基于ROS-自噬通路,下调AngⅡ诱导的自噬流,拮抗肾小球足细胞损伤。     

黄芪建中汤对胃黏膜损伤模型大鼠MMP-2及TIMP-1表达的影响

目的:观察黄芪建中汤对胃黏膜损伤模型大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法:将健康SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、黄芪建中汤组、生胃酮组,每组10只。采用改良Okabe法复制动物模型。胃黏膜MMP-2、TIMP-1表达水平检测采用免疫组织化学法。结果:模型组MMP-2表达较假手术组显著升高(P<0.01),各治疗组MMP-2表达水平显著低于模型组(P<0.01);模型组TIMP-1表达较假手术组显著降低(P<0.05,P<0.01),各治疗组TIMP-1表达水平显著高于模型组(P<0.01);黄芪建中汤组较生胃酮组MMP-2表达水平显著降低(P<0.01),TIMP-1表达水平显著升高(P<0.01)。结论:黄芪建中汤通过调控MMP-2、TIMP-1的表达水平,修复胃黏膜损伤。     

愈肾颗粒不同药对配伍对肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-2及其抑制剂-2的影响

目的:考察黄芪、太子参(益气摄血组),牡丹皮、丹参(凉血化瘀组),紫草、益母草(解毒化瘀组)3组药对对大鼠肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)m-RNA表达的影响.方法:应用血清药理学方法,制取中药药对的含药血清.以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作为刺激因子,培养大鼠肾小球系膜细胞,使其发生增殖.应用反转录多聚酶链反应技术(RT-PCR)观察各组间MMP-2,TIMP-2的基因表达情况.结果:益气摄血组对TIMP-2抑制作用显著,与模型组比较有显著性差异;其他2组虽有抑制趋势,但无统计学意义.3组药对对MMP-2的影响均无统计学意义.结论:黄芪、太子参可通过抑制TIMP-2的基因表达,发挥防治肾小球硬化的作用.     

黄芪、水蛭及其配方含药血清对脂多糖诱导增生的大鼠GMCs中NF-κB?p65、MMP-2?mRNA表达的影响

目的:观察黄芪、水蛭及其配方含药血清对脂多糖(LPS)诱导增生大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)表达核转录因子p65(NF-κB p65)、金属蛋白酶组织抑制剂-2(MMP-2)的影响,探索益气化瘀药物及其配方含药血清治疗系膜增生性肾小球肾炎的可能机制。方法:LPS诱导大鼠GMCs(HBEH)增殖,分别采用黄芪高剂量血清、水蛭高剂量血清、黄芪高剂量水蛭高剂量血清、黄芪低剂量水蛭高剂量血清进行干预,24h后收集细胞,用CCK-8法观察含药血清对GMCs增殖的影响,Real time PCR法测定NF-κB p65、MMP-2因子的表达变化。结果:LPS诱导系膜细胞增殖后,NF-κB p65mRNA表达较正常组明显升高(P0.01),表达量达到正常细胞的2.07倍,各含药血清组NF-κB p65mRNA表达量与LPS组比较均显著下降(P0.01)。LPS诱导GMCs增殖后,MMP-2 mRNA表达较正常组明显升高(P0.01),表达量达到正常细胞的2.0倍,而各含药血清组MMP-2 mRNA表达量与LPS组比较均显著下降(P0.01)。上述指标各含药血清组组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:黄芪、水蛭及其配方含药血清能够通过影响NF-κB65、MMP-2的表达减少GMCs的增殖及细胞外基质的沉积,益气化瘀含药血清的应用有利于缓解系膜增生性肾小球肾炎的进展。     

通肾络1号对高糖状态下大鼠肾系膜细胞金属蛋白酶2及其抑制物2mRNA影响的研究

目的:探讨通肾络1号对在高糖刺激下大鼠肾系膜细胞MMP-2、TIMP-2mRNA转录水平及其对细胞培养上清产物FN、ColⅣ的影响。方法:大鼠肾小球系膜细胞在高糖、高糖 ET-1、高糖 ANGⅡ培养下,给予通肾络1号、缬沙坦刺激后,运用荧光定量PCR方法及ELISA方法检测MMP-2、TIMP-2mRNA转录水平及细胞培养上清产物FN、ColⅣ的含量。结果:通肾络1号能提高高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞MMP-2mRNA转录水平(P<0.05),降低TIMP-2mRNA水平(P<0.05),以及提高MMP2/TIMP2(P<0.05)比值,降低细胞上清FN(P<0.05)、ColⅣ含量(P<0.05)。结论:通肾络1号降低细胞上清FN、ColⅣ含量是通过提高高糖刺激下系膜细胞MMP-2mRNA转录水平,降低TIMP-2mRNA水平,达到提高MMP2/TIMP2比值实现的。     

染料木素对人胚皮肤成纤维细胞胶原、基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制剂mRNA表达的影响

目的：探讨染料木素对人胚皮肤成纤维细胞(CCC-ESF-1)胶原(collagen, Col)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase, TIMP)mRNA表达的影响。方法体外培养的CCC-ESF-1细胞按随机数字表法分为空白对照组、雌二醇组以及染料木素小、中、大剂量组。采用MTT法检测细胞活力,RT-PCR技术检测ColⅠ、ColⅢ、MMP-1、TIMP-1和TIMP-2 mRNA表达。结果与空白对照组比较,雌二醇组、染料木素中剂量组[(0.451±0.037)、(0.446±0.047)比(0.385±0.061)]均可促进CCC-ESF-1细胞增殖(P均＜0.05),且雌二醇组、染料木素中剂量组细胞 ColⅠ[(0.960±0.012)、(0.929±0.015)比(0.812±0.014)],Col Ⅲ[(0.892±0.009)、(0.824±0.022)比(0.768±0.025)]、TIMP-1[(0.841±0.023)、(0.838±0.053)比(0.751±0.027)]、TIMP-2[(0.456±0.017)、(0.448±0.036)比(0.381±0.029)]mRNA 水平较空白组增高(P 均＜0.01),MMP-1[(0.398±0.043)、(0.402±0.044)比(0.525±0.006)]mRNA水平较空白组降低(P均＜0.01)。结论染料木素可促进 CCC-ESF-1细胞增殖,可能与上调 ColⅠ、Col Ⅲ、MMP-1、TIMP-1、TIMP-2以及下调MMP-1有关。     

抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠心肌基质金属蛋白酶-2及其抑制剂-2表达的影响

目的 观察抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠心肌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响.方法 喂饲大鼠呋喃唑酮8周建立扩张型心肌病动物模型,随机分组后药物干预8周,检测心肌MMP-2及TIMP-2的表达.结果 与模型组比较,中西药联用组、中药大剂量组和卡托普利组均明显下调MMP-2表达(P均<0.05),上调TIMP-2蛋白表达(P均<0.05).中药小剂量组也能够下调MMP-2表达(P<0.05),但TIMP-2蛋白表达与模型组无差异(P>0.05).结论 抗纤益心方能够减轻扩张型心肌病大鼠心肌组织纤维化,其机制与下调MMP-2表达、上调TIMP-2表达有关.     

玉屏风散加味方干预COPD气道重塑相关细胞因子作用研究

目的探讨玉屏风散加味方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道重塑大鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)的调节作用。方法将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、玉屏风散加味方高剂量组、玉屏风散加味方中剂量组、玉屏风散加味方低剂量组、阳性组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠采用被动吸烟加气管内注入LPS的方法复制COPD大鼠模型,玉屏风散加味方各组给予相应剂量玉屏风散加味方灌胃,阳性组给予罗红霉素胶囊溶液灌胃,正常组、模型组给予等量生理盐水灌胃。灌胃30 d后用ELISA方法测定大鼠肺泡灌洗液中MMP-9、TIMP-1、TGF-β1水平,计算MMP-9/TIMP-1比值。结果模型组MMP-9、TIMP-1、TGF-β1表达水平均明显高于正常组(P均0.05),MMP-9/TIMP-1比值明显低于正常组(P0.05);玉屏风散加味方高、中剂量组及阳性组MMP-9、TIMP-1、TGF-β1表达水平均明显低于模型组(P均0.05),玉屏风散加味方高剂量组MMP-9、TIMP-1、TGF-β1表达水平均明显低于玉屏风散加味方低剂量组(P均0.05)。结论玉屏风散加味方可延缓COPD气道重塑病变,其干预COPD气道重塑的作用可能是通过调节气道局部细胞因子MMP-9、TIMP-1和TGF-β1表达实现的,且以高剂量效果最为明显。     

心脑血脉宁对家兔动脉粥样硬化易损斑块模型MMP-2、TIMP-2表达的影响

[目的]探讨心脑血脉宁对家兔动脉粥样硬化易损斑块模型基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响。[方法]通过喂养高脂饲料和主动脉球囊内皮拉伤术复制动脉粥样硬化易损斑块模型,实验分为模型组,假手术组,心脑血脉宁组,历时15周。处死后,取腹主动脉行苏木精-伊红(HE)染色,观察镜下病变,计数斑块破裂数,免疫组化方法检测MMP-2、TIMP-2蛋白含量。[结果]1)HE观察:假手术组镜下形态结构完整,模型组斑块中心可见大量脂核,斑块表面覆盖纤维帽,在斑块肩部可见残存泡沫细胞和大炎细胞浸润。心脑血脉宁组介于两者之间。2)免疫组化结果:与假手术组相比,模型组MMP-2、TIMP-2蛋白含量明显升高,差异有显著性(P0.01);心脑血脉宁组MMP-2与模型组比较表达降低,差异有显著性(P0.01),而TIMP-2含量与模型组相比有降低趋势,但无统计学差异(P0.05);心脑血脉宁组能够有效降低两者比值,与模型组相比差异有显著性(P0.01)。[结论]心脑血脉宁干预家兔动脉粥样硬化易损斑块模型,能减少斑块破裂,其机制可能与降低斑块MMP-2含量以及调节MMP-2与TIMP-2比值有关。     

补肾健脾解毒利咽法对IgA肾病模型大鼠肾组织MMP-9、TIMP-1影响的研究

目的探讨补肾健脾、解毒利咽法治疗Ig A肾病(Ig AN)的作用机制。方法将72只Wistar大鼠随机分为空白组,模型组,洛丁新组,补肾健脾、解毒利咽法高、中、低剂量组(简称为中药高、中、低剂量组)。采用口服BSA和尾静脉注射LPS方法建立Ig AN大鼠模型。观察给药8周后大鼠各时相尿红细胞计数、24h尿蛋白定量(UTP)及肾组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的含量变化。结果1)与模型组相比,各组大鼠24 h UTP均有所下降,其中中药中剂量组下降最为显著(P0.05);2)与模型组相比,中药各治疗组尿红细胞计数明显减少(P0.05),以中药中剂量组减少显著(P0.01);洛丁新组尿中红细胞计数无下降(P0.05)。3)与空白组相比,模型组大鼠肾组织中MMP-9含量明显降低,TIMP-1含量升高,MMP-9/TIMP-1下降(P0.05);4)给药后,与模型组相比,治疗组MMP-9含量明显升高、TIMP-1含量明显降低,MMP-9/TIMP-1明显升高(P0.05),以中药中剂量组最为显著(P0.01)。结论补肾健脾、解毒利咽法能降低Ig AN模型大鼠血尿、蛋白尿,升高肾组织中MMP-9含量,降低TIMP-1含量,使MMP-9/TIMP-1趋于平衡,疗效优于洛丁新组。     

加味芎蝎散对CVA大鼠肺组织MMP-9和TIMP-1mRNA表达的影响

目的:观察加味芎蝎散对咳嗽变异性哮喘模型鼠肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9),基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA表达的影响。方法:将4月龄的SPF级Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,顺尔宁组(1.2 mg·kg-1),加味芎蝎散高、中、低剂量组(8.64,4.32,2.16 g·kg-1)。除正常组外,从第1天开始,各组im 4%卵清蛋白(OVA)溶液0.5 m L,同时ip 2%Al(OH)30.2 m L,每日1次。除正常组外,从第14天开始,各组CSWH 1%OVA溶液攻击2 min,隔日1次,共7次制备模型。造模后第14天起连续ig 15 d,测定咳嗽次数后取材;HE染色观察肺组织病理学改变,瑞氏染色观察肺泡灌洗液炎性细胞变化,RT-q PCR检测肺组织MMP-9,TIMP-1 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组肺部病理组织损伤和炎性细胞浸润较明显,咳嗽次数明显增加,肺组织MMP-9,TIMP-1 mRNA表达明显升高,均具有统计学差异(P0.01);与模型组比较,加味芎蝎散高、中、低剂量均可改善模型鼠肺部病理损伤及炎性细胞浸润,其中高剂量组最为明显(P0.01),可降低模型鼠咳嗽次数(P0.05,P0.01),下调模型鼠肺组织MMP-9,TIMP-1 mRNA表达(P0.05,P0.01)。结论:加味芎蝎散对咳嗽变异性哮喘气道重塑有一定的抑制作用,其机制可能与下调肺组织MMP-9,TIMP-1 mRNA的表达有关。     

黄芪-水蛭对阿替普酶静脉溶栓治疗急性脑梗死增效作用及机制

目的 探讨药对黄芪-水蛭对阿替普酶静脉溶栓治疗大鼠急性脑梗死的增效作用及其可能的作用机制。方法 将SD雄性大鼠随机分为假手术组，模型组，rt-PA组，低剂量中药+rt-PA组，高剂量中药+rt-PA组。采用凝血酶建立大脑中动脉闭塞模型(MCAO);参考改良后Longa方法进行神经功能缺损评分；TTC染色法检测脑梗死体积；ELISA检测基质金属蛋白酶(MMP-2,MMP-9和MMP-10)水平；PCR技术检测MMP-2,MMP-9,MMP-10,基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA水平。结果 与模型组相比，rt-PA溶栓组第1天，第3天，第5天的Longa评分(P<0.05)显著下降，脑梗死体积(P<0.01)以及血清中MMP-2(P<0.001),MMP-9(P<0.001),MMP-10(P<0.01)和脑组织中MMP-2(P<0.01),MMP-9(P<0.001),MMP-10(P<0.001)表达均下降，TIMP-1(P<0.01)表达显著上升；与rt-PA溶栓组相比，低、高剂量中药联合rt-PA溶栓组第1天(P...     

芪参颗粒对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞基质代谢的影响

目的:通过观察芪参颗粒对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)外基质(ECM)代谢的影响,探讨其抗心肌纤维化(MF)的分子机制。方法:将传代培养的乳鼠原代CFs细胞分为空白对照组、AngⅡ组、卡托普利组和芪参颗粒组。干预48 h后,检测CFs基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)的分泌情况及MMP-2、MMP-9、Col Ⅰ、Col Ⅲ、TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达情况。结果:CFs的增殖对比,AngⅡ组高于空白对照组,卡托普利组和芪参颗粒组低于AngⅡ组(P<001);Col Ⅰ、Col Ⅲ含量及其mRNA表达水平比较,AngⅡ组较空白对照组增加,卡托普利组与芪参颗粒组较AngⅡ组减少(P<001);MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达对比及MMP-2/TIMP2和MMP-9/TIMP-1比值对比,AngⅡ组较空白对照组前者显著增加,卡托普利组和芪参颗粒组较AngⅡ组均下降(P>005),芪参颗粒组较卡托普利组前者显著下降(P<001)。结论:芪参颗粒可抑制AngⅡ诱导的CFs的增殖,并减少CFs Col Ⅰ、Col Ⅲ的表达,效果优于卡托普利,其作用机制可能与下调MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达,并降低MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1的比值,调控基质代谢有关。     

固本防哮饮对支气管哮喘缓解期小鼠肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白的影响

目的:观察固本防哮饮对支气管哮喘缓解期小鼠肺组织基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)2、9,及基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)1、2蛋白的影响,初步探讨固本防哮饮防治哮喘气道重塑的可能作用机制。方法:用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发联合呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染的方法,建立BALB/c小鼠哮喘缓解期模型,将40只小鼠分为4组,分别为正常组、模型组、孟鲁司特钠组、固本防哮饮组,每组10只。造模成功后,采用固本防哮饮和孟鲁司特钠进行干预,干预结束后,采用Envision法免疫组织化学技术检测各组小鼠肺组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白分布及表达情况。结果:MMP-2、TIMP-2和TIMP-1蛋白主要分布于支气管管壁,而MMP-9蛋白分布于广泛肺组织。与正常组比较,模型组小鼠肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白表达水平显著升高(P0.01);与模型组比较,孟鲁司特钠组、固本防哮饮组小鼠肺组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白表达明显降低(P0.01)。结论:固本防哮饮能降低MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达,维持ECM内环境的稳定,减少黏液的分泌和胶原的沉积,从而减轻气道重塑。     

氧化苦参碱对慢性乙肝和肝硬化患者血清MMP-2和TIMP-2的影响

目的 观察氧化苦参碱对慢性乙型病毒性肝炎（简称慢乙肝）和乙型肝炎后肝硬化（简称肝硬化）患者血清基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-2组织抑制因子（TIMP-2）以及肝纤维化指标[透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）和Ⅳ型胶原（ⅣC）]的影响.方法 慢乙肝（36例）和肝硬化（36例）患者用氧化苦参碱治疗前后采用ELISA方法检测血清MMP-2、TIMP-2,采用放射免疫法检测HA、LN、ⅣC的变化,并分析MMP-2、TIMP-2和肝纤维化指标之间相关性.结果 氧化苦参碱能降低慢乙肝中、重度和肝硬化Child-pugh A、B、C级血清HA、LN、ⅣC水平及血清MMP-2水平（与本组治疗前比较,P＜0.05）.血清MMP-2、TIMP-2水平分别与HA、LN、ⅣC均有良好相关性（P＜0.01）.结论 MMP-2、TIMP-2可用来评价纤维化情况,氧化苦参碱有一定抗肝纤维化作用.