键合β-环糊精琼脂凝胶微球分离纯化大豆苷元及其色谱机制研究

目的通过制备键合β-环糊精琼脂凝胶微球(AG-β-CD)作为分离介质,对大豆异黄酮粗品中大豆苷元进行高效分离纯化。方法利用琼脂为原料,通过乳化、交联并键合功能基团β-环糊精(β-CD)制备AG-β-CD;将其作为一种分离介质,通过考察流动相、洗脱体积流量和微球负载量3个方面,确定AG-β-CD分离纯化大豆苷元的工艺并进行验证,质谱和核磁共振鉴定其结构;通过与其他2种黄酮类物质表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和葛根素在C18反相柱色谱保留行为比较,结合auto DOCK4.0进行分子模拟,以及流动相乙腈体积分数变化对3种黄酮类物质在AG-β-CD固定相上的保留时间的变化曲线证明其色谱机制。结果大豆异黄酮粗品中主要成分为大豆苷元(57.14%),AG-β-CD的负载量为1.33 mg/m L(大豆异黄酮粗品总量/柱体积),体积流量为2 BV/h时,通过20%乙醇洗脱2 BV、40%乙醇洗脱1.33 BV、70%乙醇洗脱6~7 BV,得到质量分数≥95%(平均质量分数96.98%)的大豆苷元,收率为97.86%。色谱机制实验表明AG-β-CD具有亲水和反相双重保留与分离作用。结论 AG-β-CD能够高效地分离纯化大豆苷元。     

β-环糊精、羟丙基-β-环糊精对薄荷醇的包合行为差异性研究

挥发油是中药中一类重要的活性物质,其成分复杂,稳定性较差。环糊精包合技术常用于改善挥发油的稳定性并利于制剂。目前中药挥发油的包合材料多选用β-环糊精(β-CD),包合工艺评价指标常为包合物的得率及含油率等。包合材料的选择在挥发油包合研究中少有报道。该文以薄荷挥发油中的主要活性成分薄荷醇为模型药物,以β-CD和羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)为包合材料进行包合,对包合物平衡常数(K)、增溶倍数进行考察,并结合IR,DSC,TG等分析手段验证包合物的形成。结果在0~15 mmol·L~(-1)时,薄荷醇的溶解度随着HP-β-CD浓度的增加呈线性增加,相溶解度图呈AL型,K=3 188.62L·mol~(-1);在0~12.5 mmol·L~(-1)时,薄荷醇的溶解度随β-CD浓度的增加而增加,呈线性关系,K=818.73 L·mol~(-1);超过12.5mmol·L~(-1)后,随着β-CD浓度的增加呈负向偏离型,相溶解度图呈AN型。表明薄荷醇与β-CD,HP-β-CD的包合行为存在差异,为进一步研究挥发油多组分包合规律奠定基础。     

大孔树脂对葛根总黄酮的吸附及分离纯化研究

以三峡库区丰富的葛根为材料,研究葛根黄酮的分离纯化工艺。方法利用柱层析技术,比较了4种大孔吸附树脂分离纯化葛根总黄酮的效果。结果用AB-8树脂柱进行吸附洗脱,洗脱液为60%乙醇,流速2.4 ml/min,得到的葛根总黄酮(以葛根素计)纯度为53.5%,AB-8树脂的吸附容量为103.2 mg/g。结论建立了AB-8大孔吸附树脂分离纯化葛根总黄酮的适宜条件,发现AB-8大孔吸附树脂在葛根总黄酮的分离纯化中有好的表现。     

大孔吸附树脂分离纯化葛根总黄酮和葛根素的工艺优选

目的:优选大孔吸附树脂分离、纯化葛根总黄酮和葛根素的工艺。方法:考察AB-8,D-101,HPD-100,S-8 4种不同极性吸附树脂对葛根中总黄酮和葛根素的静态吸附及解吸性能,筛选树脂型号;以葛根素、总黄酮转移率和纯度为指标,通过单因素试验考察其吸附和洗脱条件。结果:选用AB-8型大孔吸附树脂,优选的工艺条件为上样液质量浓度1.0 g.mL-1,葛根与大孔树脂质量比1∶2,径高比1∶6,用2 BV水洗除杂,加2 BV 80%乙醇以2 mL.min-1洗脱。转移率均>92%,所得葛根总黄酮纯度达80%,葛根素质量分数25%。结论:AB-8型大孔树脂用于富集葛根总黄酮和葛根素效果最佳,是一种理想的分离纯化介质,且优选的工艺操作简单、方法可靠。     

大孔树脂分离纯化巴豆中木兰花碱工艺研究

目的:优化大孔树脂分离纯化巴豆中木兰花碱的工艺条件。方法:采用HPLC法测定木兰花碱,筛选AB-8,HPD400,ADS-17,NKA-9,D101树脂对木兰花碱的吸附和解吸附能力,并优化分离纯化条件。结果:优选出D101树脂,上样液浓度为生药1.5g/mL,吸附流速1.5BV/h,药材量:树脂量为6∶1;分离纯化条件为:先用4BV水冲洗除去不吸附杂质,再用3BV 8%乙醇除去大极性干扰杂质,最后用4BV 23%乙醇冲洗收集目标滤液。结论:该方法简便易行,适用于巴豆中木兰花碱的精制与纯化。     

西洋参茎叶总皂苷中分离纯化拟人参皂苷F11工艺

目的:优选从西洋参茎叶总皂苷中分离纯化拟人参皂苷F11的最佳工艺.方法:以拟人参皂苷F11(PF11)提取率为指标,建立HPLC-ELSD检测PF11的方法,并优选AB-8大孔吸附树脂纯化西洋参茎叶总皂苷中PF11的工艺.结果:最佳工艺为西洋参茎叶总皂苷过10倍量AB-8大孔吸附树脂柱,流速5 mL·min-1,依次用7.5 BV 30％～33％乙醇,8 BV 35％～40％乙醇进行洗脱,收集35％～40％乙醇洗脱液,回收乙醇,蒸千,得PF11粗品纯度＞50.0％.结论:大孔吸附树脂分离拟人参皂苷F11方法简单、快速、可行.     

大孔吸附树脂分离纯化枫香槲寄生总黄酮的工艺研究

目的 研究大孔吸附树脂富集纯化枫香槲寄生总黄酮的最佳工艺参数.方法以枫香槲寄生总黄酮吸附量为指标,通过正交实验考察确定了该树脂分离纯化总黄酮的工艺条件.结果 AB-8型树脂对枫香槲寄生总黄酮有良好的吸附分离性能,其吸附分离工艺条件为:上样浓度为2.55 mg·ml-1,上样液pH为3,吸附流速为3 BV·h-1,洗脱剂为60%乙醇.结论 AB-8型大孔吸附树脂在所确立的工艺条件下,纯化枫香槲寄生总黄酮效果良好,总黄酮纯度可达60%左右.     

大孔吸附树脂分离纯化草珊瑚总黄酮的工艺研究

目的研究大孔吸附树脂分离纯化草珊瑚总黄酮工艺,为草珊瑚总黄酮的工业化生产提供实验依据。方法以贵州产草珊瑚为原料,以草珊瑚总黄酮含量及回收率等为考察指标,选用大孔吸附树脂对草珊瑚总黄酮进行分离纯化,分别采用静态试验、动态试验等考察大孔树脂对草珊瑚总黄酮的分离纯化效果及影响因素。结果AB-8型大孔吸附树脂对草珊瑚总黄酮静态饱和吸附量为116.25mg·g-1(干树脂),洗脱率92.9%,动态饱和吸附量为94.5mg·g-1(干树脂),总黄酮回收率在96.1%、纯度在90%以上,是实验树脂中分离纯化草珊瑚总黄酮的最佳大孔吸附树脂。结论分离纯化草珊瑚总黄酮最佳工艺条件为:AB-8型大孔吸附树脂,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量为3倍树脂体积,流速3~4ml/min,上柱总黄酮量与树脂比为1∶10.5,上柱液总黄酮浓度为19.8mg/ml,流速2~3ml/min,冲洗杂质用水体积2~3BV,上柱液pH值4~5。     

大孔吸附树脂分离纯化红花黄色素的研究

目的 考察ADS-17大孔吸附树脂对红花黄色素的分离纯化方法.方法 采用静态和动态吸附,考察了ADS-17树脂的吸附性能,并采用紫外-可见分光光度法对红花黄色素含量进行了定量分析.结果 ADS-17树脂对红花黄色素具有较好的吸附选择性.在最优化工艺条件下,即吸附流速2 BV/h,50%乙醇作为洗脱剂,洗脱流速2 BV/h,产品纯度达到85.34%.结论 ADS-17树脂用于红花黄色素的分离纯化效果良好.     

玫瑰花总黄酮纯化工艺和口服毒性研究

目的优化玫瑰花总黄酮纯化工艺并考察其口服安全性。方法静态吸附与洗脱考察HPD500(极性)、ADS-17(中极性+氢健)、HPD826(氢健)和AB-8(弱极性)四种大孔树脂对玫瑰花总黄酮纯化的适用性,正交设计法优化动态吸附洗脱条件。通过急性亚急性毒理试验评价口服安全性。结果 AB-8型大孔树脂适用于玫瑰花总黄酮纯化。最佳吸附洗脱条件为0.5 ml·min-1的上样浓度,1 ml·min-1的上样流速,2 ml·min-1的洗脱流速和4倍柱体积的洗脱体积。玫瑰花总黄酮未显示出口服急性亚急性毒理。结论该方法简便可靠,适用于玫瑰花总黄酮纯化。低于剂量500 mg·kg-1·d-1的口服给药是安全的。