高效液相层析法检查β地中海贫血应用评价

目的 对高效液相层析法快速筛查β地中海贫血进行评价。方法 用高效液相层析法测定血中血红蛋白A2（HbA2）、血红蛋白F（HbF）的含量，并与抗碱变试验法测得HbF、琼脂糖电泳法测得HbA2的含量进行比较；取低、中、高三种浓度值的标本进行重复性试验；在HbF含量为3．5％、5．7％和HbA2含量为5．9％、7．7％的两份标本中加入不同浓度的胆红素液及脂肪乳作干扰试验；与已知HbF浓度为33．0％和1．1％的两份标本按不同比例混合，分别进行测定，观察该法测定的线性范围。结果 该法测定HbF与抗碱变试验法结果相符、HbA2与琼脂糖电泳法有良好相关（r=0．8656）；HbF的线性范围可达33％；HbF和HbA2批内变异系数分别为1．5％～3．4％和3．7％～5．9％，批间变异系数分别为1．9％～4．2％和4．9％～7．5％；胆红素浓度在250μmol／L，甘油三酯浓度在22mmol／L以下时对测定结果无影响。结论 高效液相层析法测定HbF和HbA2具有准确度高，重复性好，不受脂浊、黄胆标本的干扰，且检测速度快，对G地中海贫血具有较好的初筛作用。     

游离雌三醇时间分辨免疫荧光分析法的建立

目的建立游离雌三醇（uE3）时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）方法。方法采用竞争抑制一步法建立检测uE3的TRFIA分析方法,并对该试剂的各项性能指标进行评价。结果该方法的灵敏度为0．14nmol／L,线性范围为0．14—120nmol／L,回收率为97．7％。分析内和分析间变异系数分别为1．6％-4．1％和4．4％-8．8％。与E2、孕酮和睾酮的交叉反应率分别为0．24％、0．36％和0．40％。149份血样用本试剂与进口的同类试剂同时检测,其相关系数为0．925。结论试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒。     

两种HBV—DNA荧光定量PCR检测试剂比较

目的比较及评价两种HBV—DNA荧光定量PCR试剂特异性、灵敏度、重复性及检测结果的相关性。方法用深圳匹基生物工程有限公司生产的两种HBV—DNA荧光定量PCR试剂（试剂A,试剂B）对已知结果的质控血清、标准品及本院154份HBsAg阳性的临床标本进行平行检测,比较两种试剂检测结果的特异性、灵敏度、重复性及结果的相关性。结果试剂A与试剂B的特异性均为100％,灵敏度分别为90．91％和95．45％,符合率分别为93．33％和96．67％;对强阳性、临界阳性标本,试剂A重复性试验批内CV值为3．16％、5．61％,批间为3．18％、6．32％。试剂B批内CV值为2．11％、5．36％,批间CV为3．58％、4．59％;两种试剂对临床标本的检测结果相关性良好（r=0．93、P〈0．01）,但试剂A检测的灵敏度和符合率均低于试剂B（P〈0．01）。结论试剂B总体性能优于试剂A,适于临床使用;试剂A有待校准及（或）改进。实验室必须选择质量好且符合自己实验室要求、与本实验室仪器相匹配的试剂以保证检验质量。     

癌胚抗原时间分辨荧光免疫分析法的建立及方法学评价

目的建立癌胚抗原（CEA）时间分辨荧光免疫分析（TrFIA）法。方法采用两株CEA单克隆抗体（CEA McAb），一株用于固相包被（4．00μg/mL），另一株用于标记铕（Eu3＋）制备Eu3＋-CEAMcAb（1：1600），固相双抗体夹心二步分析法检测人血清中的CEA，并对此方法进行方法学评价。结果本方法与甲胎蛋白（AFP）和糖类抗原19—9（CA19—9）的交叉反应率分别为O．25％和3．58％，而与其他常用肿瘤标志物无交叉反应；低、中、高浓度的CEA质控批内实验变异系数分别为4．75％，4．25％和2．89％，批间实验变异系数分别为9．55％，7．38％和3．69％；平均回收率为95．94％；试剂盒37℃烘烤7d后检测性能基本稳定；并与CEA化学发光免疫分析技术（CLIA）比对试验结果相关系数达0．9986；CEA—TrFIA法检测系统的检测低限（LLD）、生物检测限（BLD）和功能灵敏度（FS）分别为0．4315ng/mL、1．000ng/mL和1．000ng/mL；线性范围为1．000～500．0ng/mL。结论CEA—TrFIA法具有灵敏度高、特异性强、精密性好、线性范围宽、试剂有效期长和非放射性等优点，具有良好的临床应用价值。     

猴T淋巴细胞趋向性病毒1型双抗原夹心ELISA检测试剂盒的研制

目的研制灵敏度和特异性高的检测实验猴血清中T淋巴细胞趋向性病毒-1型（STLV-1型）／E体的双抗原夹心ELISA（dsELISA）检测试剂盒。方法采用经原核表达系统表达并纯化的人T淋巴细胞白血病病毒-1型（HTLV-1型）的Env蛋白作为包被用抗原，建立了检测STLV-1的dsELISA诊断方法。通过优化反应条件和筛选试剂，确定了dsELISA诊断试剂盒的相关条件，并经敏感性、特异性和重复性试验考查该试剂盒质量。结果试剂盒特异性好，批内重复试验变异系数（CV）〈7％，批间重复试验CV〈10％。对200份猴血清进行随机检测，与国际公认的诊断试剂盒（美国BioReliance公司）的符合率为97％。结论本试剂盒可初步应用于临床上实验猴STLV-1型抗体的检测。     

胶体金法测定降钙素原试剂盒的研究

目的利用胶体金技术,开发新的半定量检测人血清降钙素原（PCT）试剂盒,为临床提供一种快速、简便、准确的PCT检测方法。方法依据双抗体夹心法原理,结合金标免疫层析试验,建立降钙素原的半定量检测方法。校准品梯度稀释,检测吸光度,建立标准曲线,并从灵敏度、精密度、特异性和稳定性等方面作出全面的方法学评价。结果本方法的最低检测限为不低于0．1ng／ml,线性良好,线性范围为0．1～30．0ng／ml;批内变异系数（CV）13．2％,批间CV为17．76％;与血清中常见的干扰物质特异性良好,重复性稳定。结论本研究成功建立胶体金技术半定量检测人血清降钙素原（PCT）含量检测方法,具有灵敏、简便、准确等特点,实现了PCT检测的自动化和快速化,所受干扰因素少,能完全满足临床检测需求,具有良好的应用前景。     

三种抗-HCV检测试剂盒对无偿献血者筛检价值评价

目的：评价3种抗．HCV筛检试剂对无偿献血者的筛检价值。方法：以卫生部临床检验中心抗-HCV临床科研血清盘标本50份为评价标本，分别用快速试剂法，国产ELISA试剂及进口ELISA试剂对评价标本作盲法检测，以卫生部临床检验中心血清盘标本所提供的阴性和阳性结果为金标准，用四格表法计算出评价真实性及可靠性指标，并对ELISA法的cut-off值的合理性进行评价．结果：快速试剂法，国产英科新创ELISA试剂盒与进口傲拓ELISA试剂盒的灵敏度分别为48％，88％，76％，特异度均为100％，准确度分别为74％，94％，88％．约登指数分别为0．48，0．88，0．76．3种试剂盒的重复符合率均为100％．国产英科新创ELISA试剂盒规定的cut-off值是合理的，而进口傲拓ELISA试剂盒规定的cut-off值太高．结论：3种试剂盒的灵敏度与准确度以国产ELISA试剂盒为最好，3种试剂盒的重复性均好，因此使用2种优选的国产ELISA试剂盒对血液进行联合筛检，既可以保证输血的安全性，又可以减低筛检成本．     

C-反应蛋白快速定量检测系统性能评价

目的评价c-反应蛋白（CRP）快速定量检测系统检测C反应蛋白的性能。方法对金标法定量检测CRP进行了性能评价,内容包括批内重复性、线性、准确度。结果该法重复测定高、低值样本,CV〈10％;线性回归方程Y=1．021X＋3．237,r=0．991;与免疫速率散射比浊法的相关性分析,r=0．986。结论c-反应蛋白快速定量检测系统具有良好的重复性、线性和方法学的相关性,符合试验设计要求。     

时间分辨荧光免疫法定量检测CA125试剂盒临床应用研究

目的对自制CA125定量测定试剂盒（时间分辨荧光免疫法）进行临床应用研究，为该试剂盒的临床应用提供科学依据。方法按照自制试剂盒操作说明书对收集的410份血清进行测定，以电化学发光CA125定量测定试剂盒（Roche公司）为对照试剂，微粒子酶联免疫定量测定药盒（ABBOTT公司）为复核试剂，对测定的结果进行统计学分析。结果以电化学发光法为对照试验，其阳性符合率为98．35％，阴性符合率为98．81％，检验差异无统计学意义（P〉0．05）；相关系数为0．937，相关性良好；ROC曲线下面积为0．998。结论本试剂盒检测性能能满足临床应用的需要。     

两种方法检测血清低水平乙肝病毒表面抗原比较

目的：比较时间分辨免疫荧光分析法（TRFIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测低值乙肝病毒表面抗原（HB-sAg）的符合率。方法：分别用国产TRFIA试剂盒和ELISA试剂盒检测血清标本。结果：在234例乙肝病毒表面抗原浓度介于0～0．5ng／ml的临床标本中，两种方法检测HBsAg同时阳性共41例，其中TRFIA检测阳性有46例，ELISA检测阳性有66例，符合率为87．18％。结论：在国产试剂HBsAg中，TRFIA与ELISA相比，特异性较高但灵敏度较低，在临床应用中应注意0．2～0．5ng/ml的低值。     

两种C反应蛋白试剂盒在急性冠脉综合征患者中的应用比较

目的 探讨国产德赛C反应蛋白（CRP）试剂盒在贝克曼全自动生化仪上应用的可行性,以及在急性冠脉综合征（ACS）患者中的应用评估。方法 选择笔者医院冠心病重症监护治疗病房（CCU）30例ACS患者以及体检中心25例健康对照者,收集临床资料,用贝克曼库尔特（Beckman Coulter）公司的试剂盒与上海德赛试剂盒同时对上述55份临床血液标本在贝克曼仪器上进行检测,通过精密度试验、正确度试验、低值检测限、线性试验、生物参考区间验证试验以及干扰试验对德赛CRP试剂盒进行性能验证;同时比较分析两种试剂盒在30例ACS患者中的检测应用。结果 德赛CRP检测值的批内变异系数小于1/4CLIA''88,偏差小于1/2CLIA''88;德赛CRP的低值检测限为0.257mg/L;德赛与Beckman原装试剂盒的相关性良好（r=0.996）,检测结果比较,差异无统计学意义（P>0.05）;德赛CRP试剂盒在0.0~340.0mg/L范围内,线性良好;生物参考区间验证合格;一定程度的溶血、黄疸及脂血对检测结果无明显干扰;两种试剂盒在ACS患者中的检测结果比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 德赛CRP试剂盒在贝克曼仪器上的性能验证结果准确可靠,该试剂盒能安全可靠的应用于临床,尤其适用于ACS患者的疾病监测。     

超敏C-反应蛋白时间分辨荧光免疫分析法的建立

目的:血清超敏C-反应蛋白(CRP)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)法的建立. 方法: 采用双抗体夹心法检测血清CRP水平(1株抗CRP的单抗用于包被微孔板,另1株抗CRP的单抗用于Eu3 标记). 结果: TRFIA的线性测量范围为1～1000 mg/L,灵敏度为0.06 mg/L,批内和批间精密度分别为4.0%～7.2%,6.7%～10.8%. 与人IgG和白蛋白未见明显的交叉反应. 109份血清标本用本方法与国外试剂盒同时检测,其相关系数为0.916. 结论: CRP-TRFIA各项指标均达到临床检测要求,可替代国外产品试剂盒,用于临床血清CRP的测定.     

聚乙烯基萘纳米微球制备及在胶乳增强免疫比浊法检测中的应用

目的：采用乳液聚合法制备聚乙烯基萘（PVN）纳米微球,将其用作β2微球蛋白（β2-M）胶乳增强免疫比浊（LETIA）检测试剂的新型载体。方法：以乙烯基萘（VN）为聚合单体,十二烷基硫酸钠（SDS）为乳化剂,碳酸盐缓冲液为水相,制备PVN纳米微球,并对微球的理化性能进行表征。以物理吸附的方式分别将β2-M的抗体连接到PVN及聚苯乙烯微球表面,制备得到用于β2-M检测的两种LETIA试剂,并在生化分析仪上对试剂的性能进行评价。结果：制备的PVN纳米微球具有均一的粒径分布。利用自制的以PVN纳米微球为载体的LETIA免疫检测试剂在一定范围内有较好线性,同时与自制的以同等粒径PS纳米微球为载体的LETIA检测试剂相比具有更高灵敏度。结论：PVN纳米微球作为LETIA检测试剂的载体具有很好应用前景。     

血清PCT和CRP对癌症化疗后腹泻患者肠原性细菌感染的检测价值

目的：探究血清降钙素原(PCT)和C反应蛋白(CRP)对癌症化疗后腹泻患者肠原性细菌感染的检测价值。方法将我院2012年1月至2014年6月就诊的42例化疗后腹泻患者作为观察组进行腹泻等级评估,其中1级17例,2级13例,3级8例,4级4例;58例化疗后无腹泻患者作为对照组。采用化学免疫发光法检测PCT水平,免疫散射比浊法检测CRP水平。比较各组患者血清PCT和CRP含量。结果观察组腹泻1级到4级PCT、CRP含量逐渐升高,对照组与观察组腹泻1级、2级比较,PCT、CRP水平差异均无统计学意义(P<0.05),对照组、观察组腹泻1级、2级与观察组3级、4级PCT、CRP水平差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组PCT阳性率为88.09%(37/42),明显高于对照组的12.07%(7/58),差异具有统计学意义(P<0.05);观察组CRP阳性率为95.23%(40/42),明显高于对照组的51.72%(30/58),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论癌症化疗后腹泻患者血清PCT和CRP对诊断腹泻肠原性细菌感染具有一定的临床参考价值,为临床应用提供了一定的科学依据。     

肺癌患者血清C反应蛋白测定的临床意义

目的探讨肺癌患者血清C反应蛋白(CRP)水平的变化及其临床意义。方法采用快速免疫消浊比浊法测定52例肺癌患者血清CRP水平,并与正常对照组进行比较。结果肺癌患者血清CRP水平明显增高(P<0.05),并与疾病的临床分期有关(P<0.05,P<0.01)。结论血清CRP水平有助于肺癌患者的诊断与病情的判断。     

化学发光法与酶联免疫吸附法检测血清抗结核抗体的比较研究

目的比较化学发光免疫分析（chemiluminescence immunoassay,CLIA）与酶联免疫吸附试验（enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA）两种抗结核抗体检测试剂盒在结核病辅助诊断中的应用价值。方法分别用CLIA和ELISA检测试剂盒对360例血清标本中的抗结核抗体进行检测,并对检测结果进行比较分析。结果 CLIA和ELISA两种检测试剂盒对260例活动性肺结核患者血清标本的检出率分别为71.2%（185/260）和58.5%（152/260）,差异有统计学意义（P〈0.05）;100例健康人血清标本中两种试剂盒检测的阴性例数分别为89例和93例,两种试剂盒的特异性分别为89.0%和93.0%,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论在结核抗体检测中CLIA检测试剂盒与ELISA检测试剂盒的特异性无显著性差别,CLIA检测试剂盒灵敏度显著高于ELISA检测试剂盒。     

HBV-DNA检测试剂的性能评估与室内质控数据评价

参照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)文件,对临床检验使用的实时荧光定量PCR扩增检测试剂盒定量结果的精密度、正确度、定量限、线性范围及抗污染性进行评价.同时用乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)试剂盒检测2016年3月~8月两个批号的质控血清HBV-DNA,并计算质控结果、标准曲线斜率、截距和相关系数的均值()、标准差(SD)和变异系数(CV).其中批内、批间精密度CV分别为1.08%~4.41%、2.17%~2.74%,达到核酸检测试剂盒的国家标准及《医学实验室质量和能力认可准则》中基因扩增检验项目分析性能标准(CV≤5%).参加2016年卫生部室间质评结果总体平均偏倚为2.03%,准确度符合卫生部质评要求.相关系数r=0.999 9,>0.98,线性关系符合要求.定量限结果符合±0.5个对数数量级的要求(评价中至少22次为阳性).本室2016年3月~8月测定的室内质控物结果对数的累积均值(±2s)为4.34(4.20~4.44),符合参考范围要求.经验证,实时荧光定量PCR HBV-DNA检测试剂盒的各项性能指标以及室内质控结果满足《医学实验室质量和能力认可准则》要求,可以为临床提供快速、准确的报告.     

血清C反应蛋白水平与2型糖尿病及肥胖的相关性分析

目的:测定2型糖尿病患者的血清C反应蛋白(CRP)水平,分析CRP与肥胖的相关性。方法:受试者精确测量身高、体质量,计算体质量指数(BMI)。同步检测空腹血糖(FPG)、胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(IR)、胆固醇(CH)、甘油三脂(TG),用免疫比浊法测定CRP水平。结果:糖尿病组CRP水平与对照组比较,差异显著(P<0.05);无论是糖尿病组还是对照组,肥胖者的CRP水平与非肥胖者的CRP比较,差异显著(P<0.05),相关分析显示CRP与BMI(r=0.191,P=0.009)FINS(r=0.146,P=0.049)FPG(r=0.132,P=0.046)IR(r=0.140,P=0.045)TG(r=0.212,P=0.003)CH(r=0.263,P=0.002)均有相关性。结论:CRP可能是肥胖和2型糖尿病之间相关的主要因素。     

肥胖与非肥胖糖耐量受损患者血清C反应蛋白表达水平的研究

目的：探讨肥胖和非肥胖糖耐量受损（IGT）患者血清CRP表达的差异和临床意义。方法：117例IGT患者和68例正常糖耐量（NGT）对照组按BMI≥25kg／m^2和BMI〈23kg／m^2分为肥胖组与非肥胖组,以免疫散射比浊法测定CRP并加以比较。结果：CRP水平IGT组和NGT组各自组内比较,肥胖者均较非肥胖者高（P〈0．05）;组间比较,IGT组较NGT组CRP水平在肥胖者和非肥胖者均增高,差异显著（P〈0．01）。结论：IGT患者较NGT患者,肥胖较非肥胖者的炎症因子表达更显著。     

两种试剂盒快速检测疟原虫的比较

目的寻找更适合基层和贫困疟区的敏感、特异、快速、廉价的检测疟原虫的方法，比较两种恶性疟金标免疫层析试剂盒的敏感性和特异性。方法采用ACON试剂盒和Paracheck试剂盒对镜检确认的134例疟疾病人血样进行平行检验。结果ACON试剂盒和Paracheck试剂盒分别检测恶性疟84例，阳性均为84例，符合率均为100％；检测间日疟30例，均为阴性，特异性均为100％；检测恶性疟和间日疟混合感染20例，阳性分别为19例，18例，敏感性分别为95％和90％。结论ACON试剂盒胶体金法具有与Paracheck试剂盒ICT法相同的敏感性和特异性，具有操作快速、简便、直观的特点，并且价格便宜，更适合在基层和疟疾贫困地区推广应用。