Hemmung extrazellulärer Sproßpilzproteinasen durch Pepstatin A und Leupeptin im Plattentest: Inhibition of Extracellular Proteinases from Yeasts by Pepstatin A and Leupeptin in vitro

Zusammenfassung: Auf Serumalbuminagar mch Staib wurde eine Proteinaseaktivitüt bei 23% der Candida-albicans-, bei 78% der Candida-tropicalis- und bei 64% der Candida-pantpsilosis- Stömme nachgewiesen. Andere fakultativ-pathogene Sproßpilze wie Candida guilliermondü, Candida krusei, Candida pseudotropicalis, Candida (Tomlopsis) glabrata und Trichosporon capitatum verhielten sich durchweg proteinasenegativ. Mein das Ausmaß der induzierbaren Proteolyse liefert somit im Einzelfall kein eindentiges Indiz über den Krankheitswert eines Pilzes. Unter dem Einfluß von Pepstatin A wurde die Proteolyse völlig gehemmt, während Leu- peptin nur einen geringen Aktivitätwerlust bewirkte.
Summary: Activity of secretory proteinases was detected on serum albumin agar by the method of Staib for 23% of Candida albicans strains, 78% of Candida tropicalis strains, and 64% of Can- dida parapsilosis strains. Tested strains of Candida guilliermondü, Candida h s e i, Candida pseudotropicalis, Candida (Tomlopsis) glabrata, and Trichosporon capitatum were free of any detectable extracellular prateinases. In a particnlar case the degree of inducible proteolysis can- not be the sole criterion for virulence of any of these potential pathogens. Proteolysis was completely inhibited by Pepstatin A, whereas Leupeptin caused only a slight decrease of enzyme activity.     

Die in vitro-Empfindlichkeit der wichtigsten Sproßpilze gegen BAY b 5097

Die in vitro-Empfindlichkeit der in unserem Einzugsgebiet vorkommenden Sproßpilze gegen das neue Breitbandantimykotikum BAY b 5097 war Gegenstand der vorliegenden Untersuchung, die insgesamt 287 Stämme aus 5 Gattungen bzw. 22 Species umfaßte. Eine Empfindlichkeit von 1,25 mcg/ml oder weniger zeigten 64% der geprüften Hefen, 95% wurden durch 5 mcg/ml gehemmt. Insgesamt waren Candida tropicalis und Torulopsis-Stämme weniger empfindlich als Candida albicans.

Resumen

La sensibilidad "in vitro" de levaduras halladas en nuestro medio contra el antimicótico de amplio espectro BAY b 5097 fué el objeto de este estudio que incluyó en total 287 cepas de 5 géneros y 22 especies. Una sensibilidad de 1,25 mcg/ml o menos mostraron 64 % de las levaduras examinadas, entre ellas 106 de 150 cepas de Candida albicans, además Candida catenulata (1 cepa), C. guilliermondii (1), C. krusei (5 de 6), C. mycoderma (1), C. pseudotropicalis (8 de 10). 95 % fueron inhibidas por 5 mcg/ml. En general las cepas de C. tropicalis y Torulopsis fueron menos sensibles que C. albicans.     

Sproßpilze im Kot von Zoovögeln, freilebenden einheimischen Vögeln und verwilderten Tauben (Untersuchungen zum Vorkommen von Cryptococcus neoformans bei Vögeln)

Mit dem Ziel, Cryptococcus neoformans nachzuweisen, wurden 357 Vogelkotproben auf Sproßpilzbefall untersucht. Es handelte sich um 117 Proben von Freilandvögeln, 147 von verwilderten Tauben und 103 von Vögeln des Zoologischen Gartens. Als Züchtungs-medium diente Negersaat-Kreatinin-Antibiotika-Diphenyl-Agar nach Staib und See-liger . Hefepilze konnten in 94,9 % aller untersuditen Materialien aufgefunden werden, der Nachweis von Cryptococcus neoformans gelang jedoch nicht. Die insgesamt 762 kulturell erfaßten Mikroorganismen verteilten sich vorwiegend auf die Gattungen Rhodotorula (19,7 %), Torulopsis (18,4 %), Candida (15,6 %), Geotrichum (11,5 %). Häufigste Pilzarten waren Rhodotorula minuta, Geotrichum candidum, Aureobasidium spec, Torulopsis famata, Trichosporon pullulans, Candida albicans, Torulopsis glabrata, Torulopsis can-dida, Kloeckera apiculata und Candida krusei. Dabei wies die Hefeflora der Wildvögel das artenreichste Spektrum auf. Candida albicans züchteten wir einmal aus Taubenmist, 7mal von Zoovögeln und 14mal von freilebenden einheimischen Vögeln. Ein Vergleich der intestinalen Hefebesiedlung bei Vögeln, Säugetieren und beim Men-schen zeigte, daß Vögel zwar keine spezifische Kotflora aufweisen, den Vertretern der Gattungen Debaryomyces, Rhodotorula, Kloeckera und Cryptococcus jedoch offenbar günstigere Ansiedlungsbedingungen bieten. Für fast alle der isolierten Mikroorganismen sind Standorte auch außerhalb des Warm-blüterorganismus in der unmittelbaren Umwelt des Vogels bekannt geworden. Neben Candida albicans konnten folgende für den Menschen fakultativ pathogene Sproßpilze nachgewiesen werden: Candida pseudotropicalis (Sacch. fragilis), Candida parapsilosis, Candida krusei (Pichia fermentans), Candida guilliermondii und Torulopsis glabrata. Die Bedeutung dieser Funde für die Epidemiologie humaner Hefepilzerkran-kungen wird diskutiert.     

Der Einfluß von Amphotericin B auf den Candida-Befall der Mundhöhle und des Darmes bei Tetracyclin-Therapie

Quantitative Bestimmungen der Keimzahl an Sproßpilzen der Candida-Gruppe im Stuhl zeigen, daß unter Tetracyclin-Therapie bei Zugabe von Amphotericin B die Pilzflora des Darmes stark reduziert wird oder vollkommen verschwindet. Ein Einfluß auf die Pilzbesiedlung im Rachenraum war — wie erwartet — nicht festzustellen, auch nicht bei solchen Patienten, deren Stuhlflora frei von Sproßpilzen wurde.     

Die Bedeutung zentraler Venenkatheter bei der Entstehung von Candida-Endomykosen: The Significance of Central Venous Catheters for the Rise of Deep-seated Candidosis

A high concentration of yeasts in feces creates the possibility of active penetration of yeast cells into the surrounding tissue and thereby into blood vessels. Fungaemia is probably caused by this process more often than generally suspected. It is our opinion that venous catheters are contaminated very rarely by yeasts residing on the skin and it is more likely that fungaemia is the causative mechanisms. Adhesion of Candida albicans cells to the catheter wall could not be demonstrated in these investigations. The catheter material examined had no fungistatic properties. To prevent catheters becoming a secondary source of infection it would be advisable for manufacturers to add fungistatic substances to the plastic material of venous catheters.     

Eine Methode zur quantitativen Bestimmung von Sproßpilzen. A Method for the Quantitative Determination of Yeasts

Es wird eine Methode zur quantitativen Bestimmung von Sproßpilzen im Rachengurgelwasser, Sputum, Stuhl und Urin beschrieben. Sie ist für die Routineuntersuchung geeignet, da sie einfach durchzuführen ist und die Ergebnisse bereits nach 24 Stunden vorliegen. Die Methode kann kritische Sproßpilzkonzentrationen erfassen und dient somit der mykologischen Überwachung von immundefizienten Patienten.
Summary: A method for the quantitative determination of yeasts in throat washings, sputa, faeces and urine specimens is described. It is useful for routine examination because of its simple practicability and because of the availability of the results after 24 hours. This method is supposed to render critical yeast cell concentrations and consequently serves to the mycological control of risk patients.     

Verteilung der Dermatophyten in der Wüsten-Steppe von Nord-Algerien im Zusammenhang mit den Hauptverbindungswegen

Das Resultat der durchgeführten Untersuchungen über die Verteilung der Dermato-phyten in der Wüstensteppe bei Bou-Sâada in Nordalgerien zeigt, daß in den abgele-genen Ortschaften, sofern überhaupt, nur eine Monoflora anzutreffen ist, während in den Ortschaften an den Hauptverbindungswegen sowohl Trichophyton schönleinii, als auch Mikrosporum canis vorhanden sind. Die feststellbare Durchseuchung der Schul-jugend beträgt 1,5%.

Résumé

La distribution des dermatophytes dans la région semi-désertique en Algérie septen-trionale et les relations avec les routes principales
L'étude présente les résultats du dépistage mycologique dans la région semi-désertique de Bou-Sâada en Algérie septentrionale. Dans les villages situés près des grandes routes, les agents responsables de ces mycoses étaient T. schönleinii et M. canis, tandis que les villages éloignés étaient épargnés ou ils ne présentaient qu'une monoflore. Les écoliers affectés de mycoses présentaient 1,5 p. c.     

Biometrische Analyse der natürlichen Variabilität des Myzel Wachstums von Dermatophytenmakrokolonien auf Glukose Pepton-Agar während der exponentiellen Wachstumsphase. II. Heterogenität der Stämme

Mit Hilfe der biometrischen Analyse wurde die Heterogenität aus pathologischen Herden von Patienten isolierter Dermatophytenstämme verfolgt. Dermatophyten können in Bezug auf Wachstumsintensität und Empfindlichkeit gegenüber Griseofulvin heterogene Populationen darstellen.
Bei einigen Stämmen wurde die Heterogenitüt schon in der Primärkultur deutlich, bei anderen wurde sie erst durch die Analyse der Wachstumsmessungen bewiesen oder trat erst unter Selektionsdruck in Erscheinung. Die Eigenschaften der gewonnenen Varianten waren erblich bedingt. Das Studium verschiedener biologischer Varianten von Dermatophyten kann zum Verständnis einiger Faktoren in den Lebensäußerungen keratinophiler Pilze beitragen.

Summary

The heterogeneity of dermatophyte strains, isolated from pathologic infection foci of patients were investigated by aid of a biometric method. The results proved that the populations could be heterogenous. In some strains the heterogeneity was visible already in the culture, in others it could be observed only after on objective analysis of final results, or it appeared only after an alteration of experimental conditions under the influence of a selective pressure. The properties of the obtained variants were hereditary. It was discussed, that a study of the biological variants of dermatophyte strains can contribute to the explanation of some factors in the life manifestation of these fungi.     

Kriterien zur Empfindlichkeitsprüfung von Fluconazol im Mikrodilutionstest: Vorschlag für eine standardisierte Methode zur Testung von Sproßpilzen

Zusammenfassung. Für den Vorschlag zu einer standardisierten Empfindlichkeitsprüfung von Hefen gegenüber Fluconazol wurden die Laborerfahrungen der letzten Jahre sowie die Ergebnisse eines Ringversuches mit 21 Laboratorien aus Deutschland und Österreich zusammengefafßt. Die vorliegende Arbeit erläutert den Arbeitsablauf und gibt Hinweise zur Durchführung und Bewertung der Mikrodilutions-Methode.
Summary. For the proposal of a standardised susceptibility testing method of yeasts against fluconazole the laboratory experiences of the last years and the results of a collaborative study of 21 laboratories from Germany and Austria were compiled. The present paper reflects the work flow and gives advice for performing the microdilution method.     

Annotations to the Pathogenicity and Toxicity of Yeasts as used in Production of Single Cell Proteins: Bemerkungen zur Pathogenität und Toxizität von Hefen in der Herstellung von Einzellerprotein*

Summary: Yeast strains of various species have been used experimentally and on large scale commercially for the production of single cell-proteins. Claims have been made by some research workers that such strains, f. i. Candida tropicalis, Candida utilis and Candida lipolytica - among others - are noxious to animals and man because they are pathogenic and contain or produce toxic substances. Many of the tests which led to these conclusions, are, however, considered as irrelevant because the authors of the respective papers have not only used unphysiological routes of application of living cells (for instance intracerebral inoculation), but also exceedingly high cell counts which were injected into rodent animal hosts compromised by previous treatment with corticosteroides, x-rays or antimetabolic drugs. It is the opinion of the authors that on the basis of so obtained results no valid conclusions can be drawn. It should be left to the toxicologists to determine eventual toxicity of the cell lines, of metabolic products and of the ready product. As Candida tropicalis is known to be an opportunistic pathogen for compromised human hosts, efforts should be made either not to use this yeast or to select cell-lines of no or only minimal experimental pathogenic ability. The final product must be treated in such way that it will not contain any living cells of the producing strain nor any products which by natural (per os) ingestion would be noxious. The workers in production plants should be adequately protected against contamination of the production strain. Zusammenfassung: Hefestämme verschiedener Arten wurden experimentell und in kommerzieller Großproduktion von Einzellerprotein eingesetzt. Einige Forscher haben die Behauptung aufgestellt, daß solche Stämme, z. B. Candida tropicalis, Candida utilis und Candida lipolytica - unter anderen - für Mensch und Tier schädlich seien, da sie pathogen wären und toxische Substanzen enthielten oder produzierten. Viele Testverfahren, die zu solchen Folgerungen führten, werden jedoch als irrelevant angesehen, da die Autoren der betreffenden Arbeiten nicht nur unphysiologische Infektionswege (z. B. intercerebral) für die applizierten Zellen benutzten, sondern auch ungewöhnlich hohe Zellmengen in kleine Nagetiere einspritzten, die durch vorherige Behandlung mit Corticoiden, Röntgenstrahlen oder Antimetaboliten schutzlos gemacht worden waren. Nach Meinung der Verfasser können aus solchermaßen erhaltenen Resultaten keine gültigen Schlüsse gezogen werden. Es möge dem Toxikologen überlassen bleiben, die eventuelle Toxizität von Zellinien, von Stoffwechselprodukten und des Endprodukts zu bestimmen. Da Candida tropicalis einen opportunistisch-pathogenen Pilz für den vorgeschädigten Menschen darstellt, sollten die Anstrengungen dahin zielen, entweder die Benutzung dieser Hefe zu vermeiden oder Zellinien zu selektionieren, die experimentell keine oder nur minimale Pathogenität erkennen lassen. Das Endprodukt muß so behandelt werden, daß es keine lebenden Zellen des Produktionsstammes mehr enthält, natürlich auch keine Substanzen, die bei natürlicher Aufnahme (per os) schädlich wirken. Die Beschäftigten in den einschlägigen Produktionsstätten müssen adequat vor Verunreinigung ihres eigenen Körpers mit dem Produktionsstamm geschützt werden.     

Vergleichende Untersuchungen zum Vorkommen von Sproßpilzen auf gesunder und krankhaft veränderter Haut*) 2. Mitteilung Zur Epidemiologie der Ausbreitung von Sproßpilzen auf gesunder und kranker Haut

Die Untersuchungen, über deren Ergebnisse berichtet wurde, waren eine Fortsetzung der in einer ersten Mitteilung von S eebacher , H übner und B laschke -H ellmessen dargelegten unter Verwendung derselben Probanden und Methoden. Erörtert wurden nunmehr epidemiologische Aspekte der Ausbreitung von Sproßpilzen beim einzelnen Individuum. Dabei interessierte einerseits der Einfluß gesunder bzw. krankhaft veränderter Haut, andererseits die Auswirkung der eventuell beim Probanden bereits vorhandener Infektionsquellen (z. B. Sproßpilzflora der Mundhöhle) auf das Vorkommen von Sproßpilzen an der Haut.
Bei 31,8% der hautgesunden weiblichen und 57,2% der hautgesunden männlichen Probanden kamen einzelne Hefearten (z. B. C. albicans, C. tropicalis, C. guilliermondii, C. parapsilosis, Rhodotorula mucilaginosa oder Debaryomyces hansenii) jeweils gleich-zeitig auf mehreren (maximal 7) Körperregionen einer Person vor. Für die Patienten mit intertriginösem Ekzem lag dieser Anteil bei 95,5%, für Patienten mit Psoriasis vulgaris bei 46,2% und für Personen mit anderen Hauterkrankungen bei 55,1%.
Bei 95,6% der Patienten mit gleichzeitiger Besiedlung von Mundhöhle und Haut durch C. albicans gehörten die Stämme eines Individuums stets dem gleichen individuellen Biotyp (Bestimmungsmethode nach B laschke -H ellmessen ) an, so daß epidemiologisch ein Zusammenhang zwischen der Besiedlung der Mundhöhle mit C. albians und ihrem Vorkommen auf der Haut angenommen werden kann.
Für die unermüdliche Mitarbeit bei der Durchführung der Untersuchungen verdienen Fräulein H ilde S chmidt , Frau U ta U llrich und Fräulein E dith M eyer unseren besonderen Dank.     

Die Zuverliissigkeit des Uni-Yast-Tek™-Systems in der Routinediagnostik der pathogenen Sproβpilze

Zusammenfassung: Die Zuverliissigkeit des Uni-Yeast-Tek-Systems wurde an 136 frisch aus Patientenmaterial isolierten Hefestämmen geprüft. Es ergab sich eine Übereinstimmung von 95,6% mit den Ergebnissen herkömmlicher Methoden.
Summary: The Uni-Yeast-Tek, a rapid system for identification of common clinical yeast isolates based on assimilation patterns and on germ tube and pseudohyphal production was evaluated in a comparative study with conventional methods. There was 95.6% agreement.     

Einfluß von Pinocembrin auf den Verlauf der experimentellen Candida-lnfektion der Maus

Der antimikrobiell wirksame Propolisinhaltsstoff Pinocembrin (5,7-Dihydroxyflava-non) wurde am Modell der experimentellen Candida-Infektion der Maus auf seine in two-Effektivität untersucht.
Hierzu eignete sich die intravenöse Infektion hauseigener Mäuse eines AB-Jena-Stam-mes mit 2,5 × 10⁵ Candida albicans-ZeWen besonders gut.
Bei täglicher peroraler Applikation von 100mg/kg Pinocembrin starben die Tiere wie die Kontrollmäuse zwischen dem 6. und 24. Versuchstag. Alle Tiere, die 5 mg/kg Amphotericin B intravenös erhielten, überlebten die 30tägige Beobachtungszeit. Die Frage nach der Unwirksamkeit des Pinocembrins in vivo sollte in pharmakokinetischen Untersuchungen abgeklärt werden.

Summary

Pinocembrin (5,7-dihydroxy-flavanon) – a component of the bee product propolis – was tested for its in vivo activity against Candida albicans in mice.
It was shown that the intravenous infection of AB-Jena mice with 2.5 × 10⁵ Candida albicans cells was a very suitable model.
Despite of treatment with pinocembrin at daily doses of 100 mg/kg body weight the animals as well as the controls died between the 6th and 24th day after beginning. On the other hand the animals treated with 5 mg/kg amphotericin B survived the test-period of 30 days. The question of ineffectiveness of pinocembrin in vivo should be cleared up in further pharmacokinetic investigations.