复方芪参提取物对糖尿病足溃疡模型大鼠创面愈合及HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路的影响

目的:探讨复方芪参提取物对糖尿病足溃疡模型大鼠创面愈合及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)通路的影响.方法:建立糖尿病足溃疡大鼠模型,将造模成功48只大鼠随机分为模型组、二甲双胍组(0.2g/kg)、复方芪参提取物低剂量组(4g/kg)、复方芪参提取...     

DFO通过HIF-1α/VEGF信号通路促进脊髓损伤修复

目的 探讨去铁胺(DFO)对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)表达的调控作用,以及因此对脊髓损伤修复的促进作用.方法 对40只SD大鼠进行脊髓损伤造模,并随机分为4组:假手术组10只,对照组10只,DFO 30 mg/Kg腹腔注射组(DFO 30组)10只以及100 mg/Kg腹腔注射组(...     

长链非编码RNA BCYRN1对脑胶质瘤大鼠HIF-1α/VEGF信号通路和血管生成的作用机制

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA) BCYRN1对脑胶质瘤大鼠的作用和潜在机制,为优化临床治疗方案积累理论基础。方法:制备脑胶质瘤大鼠模型并随机分为三组,每组12只,分别经尾静脉注射lncRNA BCYRN1 siRNA质粒(si-BCYRN1组),lncRNA BCYRN1过表达质粒(OE-BCYRN1组),lncRNA BCYRN1空载质粒(Sham组)。同时选取12只大鼠作为空白对照组(Control组),尾静脉注射等量0.9%氯化钠溶液。比较各组大鼠抑瘤率、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白和mRNA表达水平及血管生成相关指标。结果:干预后,OE-BCYRN1组大鼠的瘤重、瘤重/脑重明显低于其他组,且Sham组低于si-BCYRN1组;与Control组相比,各组的HIF-1α蛋白和mRNA、VEGF蛋白和mRNA及苏氨酸激酶3(AKT3)蛋白表达升高,OE-BCYRN1组表达最低,si-BCYRN1组最高;同时,干预后,OE-BCYRN1组大鼠微血管数量明显低于其他组,且Sham组低于si-BCYRN1组,差异均具有统计学意义(均P&...     

下调miR-155通过抑制HIF-1α/VEGF通路增强人结直肠癌细胞的放射敏感性

目的:探讨miR-155对结直肠癌细胞SW620放射敏感性的影响及其特异性的作用机制.方法:将anti-miRNA-155和anti-miRNA-155 NC转染至结直肠癌细胞SW620,分别标记为anti-miR-155组和NC组;利用qRT-PCR检测细胞转染效率;对转染后的细胞进行电离辐射;经过电离辐射后采用克隆...     

胃癌细胞系幽门螺杆菌感染对HIF-1α、HIF-2α及VEGF表达的影响

目的研究幽门螺杆菌对人胃癌细胞株BGC-823中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将不同浓度的H.pylori悬液与BGC-823细胞共培养24h后收集细胞,应用MTT法检测细胞存活率,RT-PCR和Western blotting技术检测HIF-1α、HIF-2α及VEGF的表达。对照组加稀释用培养液。结果与对照组比较,H.pylori可显著促进BGC-823细胞的增殖(P<0.05)并能显著提高细胞HIF-1α、HIF-2α及VEGF mRNA和蛋白的表达(P<0.05),呈浓度依赖性。结论 H.pylori感染能够刺激BGC-823细胞VEGF的表达,其机制可能是通过HIF-1α、HIF-2α途径介导。这可能是其诱导胃癌血管生成和促进胃癌侵袭转移的机制之一。     

氯沙坦通过AT1R/VEGF 信号通路对肝癌血管生成的影响

目的 探讨氯沙坦是否通过下调血管紧张素Ⅱ 1 型受体（AT1R）/ 血管内皮生长因子（VEGF）信号通路,抑制肝癌细胞的血管生成。方法 采用免疫荧光染色和Western blot 检测AT1R 在肝癌细胞系HepG2、HuH-7 和PLC/PRF/5,以及正常肝细胞LO2 中的表达。采用Western blot 检测氯沙坦对肝癌细胞系HepG2 中AT1R 表达的影响,酶联免疫吸附法（ELISA）检测氯沙坦对肝癌细胞系HepG2 中VEGF 的影响。采用免疫组织化学法检测氯沙坦对大鼠肝癌组织中AT1R、VEGF 和CD34 表达的影响。结果 AT1R 在正常肝细胞LO2 中低表达（P <0.05）,在肝癌细胞系HepG2、HuH-7 和PLC/PRF/5 中高表达（P <0.05）,在HepG2 细胞中表达最高（P <0.05）。在肝癌细胞系HepG2 中加入氯沙坦后,AT1R 蛋白水平和VEGF 浓度降低（P <0.05）。大鼠肝癌组织中AT1R、VEGF 和CD34 高表达,而加入氯沙坦后,AT1R、VEGF 和CD34 表达降低（P <0.05）。结论 氯沙坦通过抑制AT1R/VEGF 信号通路,可以阻碍肝癌血管的生成。     

华蟾素调控HIF-1α/VEGF通路逆转结肠癌HCT15/5-FU细胞耐药的体外研究

目的 探讨华蟾素(CINO)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人源结肠癌(CRC)耐药细胞株HCT15/5-FU的逆转作用,明确缺氧诱导因子(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)通路在逆转结肠癌化疗耐药中的调控作用。方法 MTT法检测细胞耐药性及耐药指数的变化,流式细胞术评价细胞凋亡的情况,划痕实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力的变化。Western blot检测上皮间充质转化(EMT)相关蛋白及HIF-1α/VEGF通路相关蛋白的表达。结果 与HCT15细胞相比,HCT15/5-FU的耐药指数约为8.720。CINO联合5-FU作用后,能够明显提升HCT15/5-FU细胞的药物敏感性,降低耐药指数,剂量依赖性地上调细胞凋亡水平、抑制细胞迁移和侵袭能力;Western blot结果显示CINO联合5-FU作用后能够抑制EMT及HIF-1α/VEGF通路的活性。结论 体外研究显示,华蟾素具有逆转结肠癌5-FU耐药的作用,其机制可能与调节HIF-1α/VEGF通路抑制EMT、血管生成有关。     

Ruxolitinib对人红白血病HEL细胞VEGF、HIF-1α表达的影响

目的 探讨JAK2抑制剂Ruxolitinib对人红白血病HEL细胞血管内皮生长因子（VEGF）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）分泌的影响。方法 用不同浓度Ruxolitinib（1、5、10、50、100、500 nmol/L）处理HEL细胞24、48、72 h,通过CCK-8法观察其对HEL细胞增殖的抑制作用;不同浓度Ruxolitinib处理细胞24、48、72 h,RT-PCR检测Jauns激酶2基因（JAK2） mRNA水平,Western blot检测p-JAK2、VEGF、HIF-1α蛋白表达;鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）体内血管生长实验检测Ruxolitinib对血管生成的影响。结果 不同浓度Ruxolitinib（除外1 nmol/L作用24 h）均可抑制HEL细胞增殖。不同浓度Ruxolitinib处理HEL细胞24、48、72 h 后,RT-PCR结果显示JAK2 mRNA表达较对照组降低（P<0.01）;Western blot结果显示p-JAK2、VEGF、HIF-1α蛋白表达较对照组亦均降低（P<0.05）;CAM实验结果显示Ruxolitinib处理细胞72 h后血管数目明显减少。结论 Ruxolitinib可能通过抑制JAK2通路,抑制HEL细胞VEGF、HIF-1α表达进而抑制血管新生。     

SP1介导CD147通过HIF-1α/VEGF信号通路影响卵巢癌的血管形成

目的:探讨特异性蛋白(specific protein,SP1)介导CD147,即细胞外基质金属蛋白诱导因子(extracellular matrix metalloprotein inducer,EMMPRIN)的表达激活缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)信号通路对卵巢癌血管形成的影响。方法:血管生长是肿瘤发生的关键步骤,多数恶性肿瘤的血管生成密集且生长迅速。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。因此,血管生成在肿瘤的发展转移过程中起到重要作用,抑制这一过程将能明显阻止肿瘤组织的发展和扩散转移。体外的血管生成试验能很好地模拟肿瘤的血管发生过程,实验分为过表达组(OE组)、沉默组(SI组)、控制组(CONTROL组)、阴性对照质粒组(NC组),通过沉默或过表达卵巢癌细胞株SKOV3中SP1或CD147,并使用HIF-1α蛋白翻译抑制剂KC7F2阻断HIF-1α/VEGF信号通路,然后用培养上清液作用于人脐静脉血管内皮...     

前列腺癌中HIF-1α和COX-2的表达及与血管生成的关系

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和环氧合酶-2（COX-2）在前列腺癌组织中的表达情况及与肿瘤血管形成的关系。方法应用免疫组化（SP）法检测72例不同病理级别前列腺癌组织中HIF-1α、COX-2的表达,用八因子相关抗原（VIII-R-Ag）标记微血管密度（MVD）。结果 HIF-1α、COX-2在不同病理级别前列腺癌中表达差异有统计学意义;HIF-1α、COX-2与前列腺癌病理分级存在显著相关性;MVD在不同病理级别前列腺癌组织中差异有统计学意义;HIF-1α、COX-2的表达与MVD存在显著相关性,HIF-1α与COX-2的表达呈正相关。结论 HIF-1α和COX-2与前列腺癌的恶性程度有关,并可能在促进肿瘤血管形成过程中起协同作用。     

HIF-1α与胶质瘤血管生成的关系

研究表明许多肿瘤组织内都有显著的缺氧区域，处于缺氧状态的肿瘤细胞仍能不断增殖、浸润。肿瘤在适应缺氧时，主要有两种生长方式：（1）肿瘤血管生成，肿瘤生长超过儿立方毫米，就必须生成血管，而血管内皮生长因子（vascular endothelial growthfactor，VEGF）在肿瘤血管形成调控方面起着重要作用。（2）Warburg效应，即肿瘤在缺氧甚至有氧状态下增加糖酵解酶活性而加速糖酵解来获取能量。     

柴胡皂苷D调控VEGF/VEGFR2信号通路抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移及侵袭

目的:探讨柴胡皂苷D(SSD)对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其对VEGF/VEGFR2信号通路的调控作用.方法:体外培养人非小细胞肺癌细胞A549,分别加入不同浓度(5、10、20μmol/L)的SSD处理48 h,记作SSD-L组、SSD-M组、SSD-H组,分别将pcDNA、pcDNA-VEGF转染至A...     

HIF-1α、VEGF在胃癌中的表达及关系

目的:探讨HIF-1α、VEGF在胃癌组织中的表达及相关性.方法:应用免疫组织化学方法检测84例胃癌组织及癌旁正常组织中HIF-1α、VEGF的表达,并分析它们与临床病理因素的关系及相互间的关系.结果:84例胃癌组织中及癌旁内对照正常胃组织HIF-1α阳性表达分别为60.7%,16.7%(P<0.05).有、无淋巴结转移的癌组织中HIF-1α的表达率分别为79.1%、41.5%(P<0.05),侵润深度分别为粘膜或粘膜下、肌层或浆膜下、穿透浆膜层的癌组织中HIF-1α的表达率分别为29.2%、62.2%、91.3%(P<0.05).未或低分化、中或高分化的癌组织中HIF-1α的表达率分别为76%、54.2%(P>0.05).肿瘤大小≤5cm、>5cm的癌组织中HIF-1α的阳性表达率分别为64.7%、58%(P>0.05).男性为63%,女性为57.9%(P>0.05),<60岁为52.3%,≥60岁为70%(P>0.05). VEGF阳性表达为73.8%(62/84).HIF-1α与VEGF的表达显出相关性,P<0.05.结论:HIF-1α与胃癌的侵润、淋巴结转移有关,并与VEGF的表达具有明显相关性,HIF-1α的作用部分通过VEGF的表达实现.因此可以将HIF-1α作为胃癌患者判断生物学行为及预后的指标之一,也为临床提供靶向治疗的方向.     

miR-600通过抑制HIF-1α信号通路降低宫颈癌细胞的增殖能力

目的探讨miR-600是否可通过HIF-1α信号通路调控宫颈癌HeLa细胞的增殖及对Cyclin D1和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法采用miR-600 mimic和Plasmid-HIF-1α转染HeLa细胞增加和诱导miR-600和HIF-1α的表达。qPCR和Western blot检测转染6 h后Plasmid-HIF-1α对于HeLa细胞HIF-1α表达的影响。将HeLa细胞分为空白对照组（无特殊处理）、miR-600 mimic组（转染miR-600拟似物miR-600 mimic）、Plasmid-HIF-1α组（P-HIF-1α组，转染Plasmid-HIF-1α）和miR-600 mimic+Plasmid-HIF-1α组（miR-600 mimic+P-HIF-1α组，同时转染miR-600 mimic和Plasmid-HIF-1α）。在转染6 h后，使用MTT法检测细胞活性，采用qPCR和Western blot测定VEGF、Cyclin D1和HIF-1α mRNA和蛋白的表达水平。结果在转染6 h后，miR-600 mimic和Plasmid-HIF-1α对HeLa细胞活性无显著影响（P均 < 0.05）。但转染Plasmid-HIF-1α 6 h后，细胞HIF-1α表达水平显著增加。在转染24 h和48 h，与对照组相比较，miR-600 mimic组细胞活性呈时间依赖性下降，Plasmid-HIF-1α组和miR-600 mimic+Plasmid-HIF-1α组细胞活性呈时间依赖性增加，且Plasmid-HIF-1α组较miR-600 mimic+Plasmid-HIF-1α组细胞活性时间依赖性增加更加显著（P均 < 0.05）。转染6 h后，与对照组相比较，miR-600 mimic组VEGF、Cyclin D1和HIF-1α表达均明显下降，Plasmid-HIF-1α组和miR-600 mimic+Plasmid-HIF-1α组VEGF、Cyclin D1和HIF-1α表达均明显增加，且Plasmid-HIF-1α组较miR-600 mimic+Plasmid-HIF-1α组增加更明显（P均 < 0.05）。结论在HeLa细胞中miR-600可以通过抑制HIF-1α信号通路下调Cyclin D1和VEGF的表达，从而抑制肿瘤细胞的增殖和分化。     

HIF-1α与VEGF在稽留流产组织中的表达及意义

目的探讨HIF-1α与VEGF在稽留流产及正常早期妊娠绒毛组织中的表达及意义。方法选择早期妊娠(对照组)及稽留流产(实验组)患者各50例,用免疫组化SABC法分别检测两组患者绒毛组织中HIF-1α与VEGF的表达情况。结果 HIF-1α在对照组中表达阳性率为42%,在实验组表达阳性率为76%,差异有统计学意义(P<0.05);VEGF在对照组中表达阳性率为100%,在实验组表达阳性率为66%,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组中HIF-1α和VEGF的表达无明显相关关系(r=-0.298,P>0.05);对照组中HIF-1α与VEGF的表达呈正相关(r=0.387,P<0.05)。结论 HIF-1α及VEGF表达异常可能与稽留流产发生有关。     

芍药苷对难愈性溃疡大鼠创面愈合及HIF-1α/VEGF/VEGFR2信号通路的影响

目的:探讨芍药苷(PF)调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)对难愈性溃疡大鼠创面愈合的影响和作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(Model)组、PF组(30mg/kg, 2次/d)、PX-478组(100mg/kg HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路抑制剂PX-478,1次/d)、PF+PX-478组,每组12只,持续2周。通过一般创面注射肌注氢化可的松制成大鼠难愈性创面模型,用相机结合Image J软件计算各组大鼠创面的愈合率;用ELISA法检测大鼠血清中氧化应激指标;HE染色检测大鼠创面病理变化;TUNEL染色检测创面组织细胞凋亡;RT-qPCR检测大鼠创面组织转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板衍生因子(PDGF)表达情况;Western blotting法检测大鼠创面组织HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路相关蛋白表达。结果:与Sham组相比,Model组大鼠创面成纤维细胞和毛细血管稀疏,愈合率、SOD、GSH-PX水平、TGF-β1、PDGF mRNA水平及H...     

HIF-1α、VEGF在甲状腺肿瘤中的表达及其与肿瘤血管生成的关系

目的 探讨HIF-1α和VEGF蛋白在甲状腺肿瘤组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系.方法 应用免疫组织化学Envision法检测140例甲状腺癌组织、50例甲状腺腺瘤及30例正常甲状腺组织中HIF-1α和VEGF的表达,并检测肿瘤微血管密度(MVD),分析HIF-1α和VEGF蛋白的表达与肿瘤血管生成的关系.结果 甲状腺癌组织中HIF-1α、VEGF阳性表达和MVD计数均明显高于正常甲状腺和甲状腺腺瘤组织(P＜0.05).在140例甲状腺癌组织中,有颈部淋巴结转移、浸润达包膜或包膜外、分化程度高以及AJCC分期高者HIF-1α的表达明显高于无颈部淋巴结转移、未突破包膜、分化程度低以及AJCC分期低者(P＜0.05).有颈部淋巴结转移、浸润达包膜或包膜外以及AJCC分期高者VEGF及MVD计数明显高于无颈部淋巴结转移、未突破包膜以及AJCC分期低者(P＜0.05).甲状腺癌组织中HIF-1α、VEGF表达及MVD值之间相互两两呈显著正相关(r=0.605、0.564、0.513,P＜ 0.05).结论 HIF-1α、VEGF和MVD计数可作为辅助甲状腺肿瘤早期鉴别诊断和预测其甲状腺癌生物学行为的参考指标.     

乔松素通过调节HIF-1α/BNIP3信号通路介导细胞自噬减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤

目的：探究乔松素通过调节缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)信号通路介导细胞自噬减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的机制。方法：体外培养大鼠心肌细胞H9c2,建立H/R模型后以0、25、50、100、200、300μg/mL乔松素处理24h,采用MTT法检测各处理组细胞活力,筛选出合适的药物作用浓度。将体外培养的H9c2细胞随机分为对照组、模型组、乔松素低剂量组、乔松素高剂量组、HIF-1α siRNA阴性对照组、乔松素高剂量+HIF-1α siRNA组,除对照组外其余各组建立H/R模型,然后以乔松素、HIF-1α siRNA及其阴性对照分组处理后,采用MTT法、流式细胞实验分别检测各组细胞增殖及凋亡;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测量各组H9c2细胞炎性因子白细胞介素（IL）-17、IL-1β、IL-18水平;采用试剂盒测量各组H9c2细胞氧化应激因子过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）水平;采用单丹磺酰戊二胺（MDC）荧光染色法检测各组H9c2细胞自噬体的形成;采用免疫印迹法...