盐酸青藤碱对实验性结肠炎小鼠TLR4/NF-κB信号通路的影响

摘 要 目的：研究盐酸青藤碱对葡聚糖硫酸钠诱导的实验性结肠炎小鼠的治疗作用。方法: 制备实验性结肠炎小鼠模型,随机分为空白对照组、葡聚糖硫酸钠（DSS）模型对照组、柳氮磺吡啶组及青藤碱低、中、高剂量组（n=6）。空白对照组与DSS模型对照组每天给予生理盐水0.2ml,柳氮磺吡啶组（100 mg·kg-1）,青藤碱低剂量组（30 mg·kg-1）、中剂量组（90 mg·kg-1）、高剂量组（270 mg·kg-1）,连续灌胃10d。评价各组小鼠疾病活动指数（DAI）和组织学损伤评分,Western blotting检测结肠组织中Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子（Myd88）表达,免疫组织化学法检测结肠组织中核转录因子 κB（NF-κB）的表达。结果:DSS模型对照组小鼠DAI和组织损伤评分、结肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达均显著高于空白对照组（P＜0.01）,柳氮磺吡啶组和青藤碱低、中、高剂量组均能降低DAI和组织损伤评分,降低结肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达（P＜0.01）,且呈浓度依赖性。柳氮磺吡啶组与青藤碱中、高剂量组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论:青藤碱能通过影响实验性结肠炎小鼠TLR4/NF-κB信号通路,降低TLR4、Myd88、NF-κB表达,发挥治疗作用。     

安子合剂对抗磷脂抗体阳性流产小鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的:研究安子合剂对抗磷脂抗体(APA)阳性流产小鼠Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(My D88)/核因子κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨其抗APA阳性流产作用机制。方法:将BALB/c小鼠(♀)随机分为空白对照组、模型组、阿司匹林组(阳性对照,0.019 5 g/kg)和安子合剂低、中、高剂量组(37.7、75.4、150.8 g/kg,以生药计),每组10只。除空白对照组外,其余各组小鼠均以人β2-糖蛋白Ⅰ为诱导剂建立APA阳性流产模型。从妊娠第1天起,各给药组小鼠ig相应药物,空白对照组和模型组小鼠ig等体积生理盐水,每天1次,连续9 d。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应法和免疫组化法测定胎盘组织TLR4、髓样分化蛋白2(MD2)、My D88、NF-κB m RNA及其蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠胎盘组织TLR4、MD2、My D88、NF-κB m RNA及其蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,阿司匹林组和安子合剂低、中剂量组小鼠胎盘组织TLR4、MD2、My D88 m RNA及其蛋白表达水平,安子合剂高剂量组小鼠胎盘组织TLR4蛋白表达水平,以及各给药组小鼠胎盘组织NF-κB蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);安子合剂低剂量组小鼠胎盘组织TLR4、MD2 m RNA表达水平和MD2、My D88蛋白表达水平较阿司匹林组更低(P<0.05或P<0.01)。结论:安子合剂可抑制APA阳性流产小鼠TLR4/My D88/NF-κB信号通路转导,这可能是其抗APA阳性流产的作用机制之一。     

复方谷氨酰胺肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎的临床价值分析

目的探究复方谷氨酰胺肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎的临床价值。方法选取2017年8月至2018年10月在本院接受治疗的溃疡性结肠炎患者86例,依照治疗的药物不同,把研究的患者分为治疗组、对比组,治疗组的患者为39例、对比组患者有47例。对比组采用美沙拉嗪治疗,治疗组使用复方谷氨酰胺肠溶胶囊展开治疗,比价两组患者的治疗有效率、不良反应发生率的变化情况。结果治疗组患者的治疗有效率为97.4%,对比组为80.9%,治疗组显著高于对比组(P <0.05)。治疗组患者的不良反应发生率为0.0%,对比组为14.9%,治疗组明显低于对比组(P <0.05)。结论复方谷氨酰胺肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎有显著的临床价值,对临床疗效有提升作用,减少不良感应,在临床上适合。     

复方谷氨酰胺肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎的疗效观察

目的分析复方谷氦酰胺肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎的临床疗效。方法选取我院收治的90例溃疡性结肠炎患者,使用随机分类法将90例平均分为对照组和观察组各45例,对照组患者予以美沙拉秦缓释片治疗,观察组在对照组的基础上联合复方谷氦酰胺肠溶胶囊治疗,对两组患者的治疗结果进行比较。结果观察组的近期治愈时间及不良反应均低于对照组,观察组的治疗有效率高于对照组,P<0.05。结论复方谷氨酰胺肠溶胶囊应用于溃疡性结肠炎的治疗中,可提高临床的治疗效果,降低不良反应,可在临床进行推广。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB通路研究愈疡胶囊抗中耳炎的作用

目的构建肺炎链球菌诱导大鼠中耳炎(OM)模型,探讨愈疡胶囊延缓OM炎的作用与机制。方法体外抑菌实验测定愈疡胶囊对肺炎链球菌的最低抑菌质量浓度(MIC)与最低杀菌质量浓度(MBC)。将50只大鼠均分为模型组、阳性对照组(左氧氟沙星20 mg·kg~(-1))以及愈疡胶囊高、中、低剂量组(600,300,150 mg·kg~(-1)),每组10只。采用鼓室内注射菌液构建模型,灌胃给药,每日1次(20 mL·kg~(-1))。第7天和第14天观察鼓膜情况并收集眼眶静脉血,使用Elisa法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白G(IgG)的含量。第14天后处死大鼠,采集中耳鼓室,使用HE染色与扫描电镜观察鼓室黏膜,用Western Blot法检测鼓室Toll-样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白-88(MyD88)和磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)的含量。结果体外MIC与MBC分别为12.5,25.0 g·L~(-1);与模型组相比,愈疡胶囊高剂量组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IgA和IgG含量均降低,TLR4、MyD88与p-NF-κB蛋白含量均降低(P<0.05),鼓膜观察、HE染色与电镜观察均显示细菌感染情况减轻。结论愈疡胶囊对大鼠细菌感染OM具有抑菌抗炎作用,主要表现为减少炎症与免疫反应,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关。     

迷迭香酸通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对高糖诱发大鼠神经细胞损伤的保护机制

目的 分析迷迭香酸(RA)通过Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对高糖诱发大鼠神经细胞损伤的保护机制。方法 取大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤高分化PC12细胞作为神经元细胞模型,采用不同浓度的D-葡萄糖处理后,通过MTT法观察细胞活性变化筛选最佳葡萄糖浓度。收集对数生长期PC12细胞随机分为对照组、高糖组,在高糖组基础上分别加入不同浓度RA及TLR4激活剂-脂多糖(LPA),记为RA低浓度组(30μmol/L RA)、RA高浓度组(60μmol/L RA)、RA高浓度+LPA组(60μmol/L RA+2μg/ml LPA),MTT检测各组细胞存活率;Hoechst33258观察细胞凋亡变化;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测5组细胞中TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及凋亡蛋白-Bax的表达水平。结果 100 mmol/L D-葡萄糖为本研究的最佳浓度。与对照组比较,高糖组细胞核严重皱缩,细胞形态发生明显变化,细胞活力明显下降,细胞凋亡率、Bax、TLR4、MyD88、p-NF-κB p65/NF-κB p...     

益生菌VSL#3对DSS大鼠结肠炎TLR4-NF-κB通路的调节作用

目的 阐明益生菌VSL#3对硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导结肠炎大鼠TLR4-NF-κB通路的影响,深入探讨VSL#3对结肠黏膜炎症免疫调控机制。方法 将33只Sprague-Dawly大鼠(SD大鼠)分为正常组、DSS造模组以及益生菌治疗组。5% DSS溶液自由饮用一周,构建溃疡性结肠炎模型。观察和评价大肠黏膜的组织学损伤,计算DAI评分以及病理学评分;使用real-time PCR检测结肠组织TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β mRNA的表达水平;Western-Blot检测TLR4、NF-κB蛋白的表达水平;应用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中TNF-α和IL-1β的表达。结果 益生菌治疗组DAI评分、病理学评分均低于DSS造模组(P<0.05);益生菌治疗组大鼠结肠组织中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β的mRNA水平与DSS造模组相比表达下调,差异具有统计学意义(P＜0.05);与DSS造模组相比,益生菌治疗组SD大鼠结肠组织TLR4、NF-κB p65蛋白水平下调,血清TNF-α、IL-1β表达水平降低,差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论 益生菌VSL#3可能是通过抑制TLR4-NF-κB通路,发挥其抑制免疫,减轻炎症反应的作用,从而达到治疗溃疡性结肠炎的目的。     

脂多糖对类风湿关节炎外周血单核细胞TLR4、Myd88蛋白表达的影响

目的 观察脂多糖(LPS)对类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞TLR4、MyD88蛋白表达的影响。方法 采用活动期RA患者外周血进行单核细胞的分离培养,并与健康志愿者做对照。分为以下5组观察：健康对照组、健康 LPS组、RA对照组、RA LPS组、RA LPS TAK-242组,并采用western blot 法检测各组TLR4、 MyD88蛋白的表达。 结果 健康 LPS组或RA LPS组TLR4、MyD88蛋白表达与健康对照组或RA对照组比较均明显升高(均P<0.01);RA对照组或RA LPS组TLR4、MyD88蛋白表达与健康对照组或健康 LPS组比较均明显升高(均P<0.01); RA LPS TAK-242组TLR4、MyD88蛋白表达与RA LPS组比较明显降低(均P<0.01)。结论RA活动期单核细胞可能存在TLR/MyD88信号通路的激活,且对LPS的刺激反应性增强。     

麻杏石甘汤对流感病毒肺部感染小鼠肺组织TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达的效应机制

目的：探讨麻杏石甘汤对流感病毒肺部感染模型肺组织TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达的效应机制。方法：选取80只SPF级Balb/c小鼠为研究对象,根据随机数字表法分为对照组、模型组、奥司他韦组、麻杏石甘汤组,每组20只。比较各组肺组织TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB水平。结果：给药后3 d,与对照组相比,模型组TLR2、TLR4、NF-κB水平升高;与模型组相比,给药组TLR2水平降低,奥司他韦组和麻杏石甘汤组TLR4水平降低,麻杏石甘汤组NF-κB水平降低（P<0.05）。给药后7 d,与对照组相比,模型组TLR4、MyD88水平升高;与模型组相比,麻杏石甘汤组TLR4、MyD88水平降低,奥司他韦组MyD88水平降低（P<0.05）。结论：麻杏石甘汤通过调节TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达水平起到流感病毒肺部感染抗病毒的作用。     

固肠止泻丸联合复方谷氨酰胺肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎的价值

目的:分析固肠止泻丸联合复方谷氨酰胺肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎的临床疗效.方法:将溃疡性结肠炎患者68例随机分为两组各34例,对照组以复方谷氨酰胺肠溶胶囊治疗,观察组在对照组基础上加固肠止泻丸治疗,比较炎性因子水平、结肠炎疾病活动指数及治疗效果.结果:观察组治疗总有效率100.0％明显高于对照组的82.4％(P<0.05),治疗后观察组结肠炎疾病活动指数明显低于对照组(P<0.05),炎症因子TNF-α、IL-8水平明显低于对照组(P<0.05).结论:固肠止泻丸联合复方谷氨酰胺肠溶胶囊对溃疡性结肠炎有显著疗效,可减轻炎症反应,改善疾病程度,值得推广.     

复方苦参结肠溶胶囊对比相关化学药治疗溃疡性结肠炎疗效和安全性的Meta分析

目的:系统评价复方苦参结肠溶胶囊对比相关化学药治疗溃疡性结肠炎(UC)的疗效和安全性。方法:计算机检索Pub Med、Embase、Cochrane图书馆、中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库、万方数据库,收集复方苦参结肠溶胶囊对比相关化学药治疗UC疗效(有效率、中医证候疗效、黏膜病变疗效)和安全性(不良反应发生率)的随机对照试验(RCT),提取资料并采用Cochrane 5.1.0进行质量评价后,采用Rev Man 5.3统计软件进行Meta分析。结果:共纳入9项RCT,合计649例患者。Meta分析结果显示,复方苦参结肠溶胶囊治疗UC的有效率[OR=2.16,95%CI(1.28,3.63),P=0.004]、黏膜病变疗效[OR=2.42,95%CI(1.07,5.47),P=0.03]显著高于化学药,差异均有统计学意义;两组患者在中医证候疗效[OR=1.70,95%CI(0.87,3.32),P=0.12]、不良反应发生率[OR=1.15,95%CI(0.62,2.15),P=0.65]方面比较,差异均无统计学意义。结论:复方苦参结肠溶胶囊治疗UC的疗效较相关化学药好,安全性相当。     

4种肠溶胶囊崩解时限的研究

2005～2007年我院在临床上发现有数例老年患者服用肠溶胶囊后以原型排出的现象(简称排片现象),为探讨此现象发生的原因及机理,笔者特选临床上常用的4种肠溶胶囊并对其崩解时限加以研究。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路研究黄连素对小鼠巨噬细胞极化的干预作用

目的:基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路研究黄连素对小鼠巨噬细胞极化的影响。方法:以小鼠巨噬细胞RAW264.7为对象,以阿托伐他汀钙为阳性对照,经脂多糖(LPS)诱导以复制炎症细胞模型,采用酶联免疫吸附测定法检测低、中、高剂量黄连素(5、10、20μmol/L)作用24 h后细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、NF-κB含量,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测细胞中TLR4、MyD88 mRNA的表达水平,采用Western blotting法检测细胞中TLR4、MyD88、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD206蛋白的表达水平。结果:与空白对照组比较,LPS诱导组细胞培养液中TNF-α、IL-6、NF-κB含量,细胞中TLR4、MyD88 mRNA的相对表达量以及TLR4、MyD88、iNOS蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05)。与LPS诱导组比较,阿托伐他汀钙组和黄连素中、高剂量组TNF-α、IL-6含量,TRL4、MyD88 mRNA及其蛋白的相对表达量以及各给药组NF-...     

乳酸菌对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠肠道通透性影响

目的观察乳酸菌制剂对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠黏膜通透性影响。方法采用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠UC模型。小白鼠60只分为4个组,正常对照组、模型对照组、乳酸菌1组、乳酸菌2组。乳酸菌1组、2组用菌液灌胃,正常对照组模型对照用0.9%氯化钠溶液灌胃。9 d后各组小鼠每日记录疾病活动指数(DAI)评分,观察小鼠结肠黏膜组织学改变,应用酶联免疫法检测小鼠血D-乳酸含量。结果与模型组比较,乳酸菌1组、2组小鼠DAI与组织学损伤评分(CMDI)均下降(P<0.01),血D-乳酸的含量明显降低(P<0.01),乳酸菌1组、2组各指标差异无统计学意义。结论乳酸菌制剂灌胃可降低溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜通透性。     

桑黄多糖对人TLR4信号通路的激活作用研究

目的 观察桑黄多糖（polysaccharide from Phellinus igniarius,PPI）对人Toll-样受体4（Toll like receptor 4,TLR4）通路的激活作用及作用特点。方法 采用转染了人TLR4基因、分泌型胚胎碱性磷酸酶报告基因的HEK-Blue^TM hTLR4细胞模型,快速评价PPI对TLR4通路的激活作用,并用PMA诱导的THP-1细胞模型观察药物对TLR4通路作用的特点;MTT法检测细胞活性;ELISA法检测细胞因子分泌量;Real time PCR检测细胞mRNA表达水平。结果 PPI作用24 h不影响细胞活性,但能剂量依赖性地增加HEK-Blue^TM hTLR4细胞分泌型胚胎碱性磷酸酶的表达,并使THP-1细胞TLR4通路相关细胞因子TNF-α,IP-10分泌量增加。TLR4受体阻断剂TAK-242能显著降低PPI诱导的细胞因子分泌量（P<0.01）。Real-time PCR结果显示PPI既可以增加MyD88通路TNF-α、IL-6、IL-12、IL-1β、COX-2等细胞因子的mRNA表达,又可以增加TRIF通路IP-10、IFN-β等细胞因子的mRNA表达。结论 PPI对人TLR4受体具有直接激活作用,能同时激活TLR4下游MyD88和TRIF 2条分支,对TLR4分支通路的激活没有选择性。     

固肠止泻丸联合复方谷氨酰胺肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎的疗效观察

目的观察固肠止泻丸联合复方谷氨酰胺肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎的临床疗效。方法选取2014年1月—2015年1月鄂州市中医医院消化科收治的溃疡性结肠炎患者140例,随机分为对照组和治疗组,每组各70例。对照组患者饭前口服复方谷氨酰胺肠溶胶囊,3粒/次,3次/d。治疗组在对照组治疗基础上口服固肠止泻丸,4 g/次,3次/d。两组均连续治疗6周。观察两组的临床疗效,同时比较两组疾病活动指数(DAI)、治愈时间和不良反应发生情况。结果治疗后,两组症状疗效总有效率分别为74.29%、92.86%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。两组内镜疗效总有效率分别为70.0%、90.0%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组DAI评分均显著降低,同组治疗前后差异具有统计学意义(P0.05),且治疗后治疗组DAI评分的降低程度优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗组的治愈时间显著短于对照组;对照组和治疗组的不良反应发生率分别为18.57%、7.14%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论固肠止泻丸联合复方谷氨酰胺肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎具有较好的临床效果,且不良反应发生率较低,治愈时间短,具有一定的临床推广应用价值。     

美沙拉嗪与枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊联用对溃疡性结肠炎患者的疗效及其对炎性因子水平的影响

目的:评价美沙拉嗪与枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊联用对溃疡性结肠炎患者的疗效及其对炎性因子水平的影响。方法:选取2016年1月—2017年2月间收治的溃疡性结肠炎患者90例资料,采用随机分组法将其分为观察组45例和对照组45例;对照组患者给予美沙拉嗪治疗,观察组患者在对照组基础上加用枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊治疗;比较两组患者治疗后总有效率的差异,以及治疗前后肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、白介素-10(IL-10)等炎症因子水平测得值的变化情况。结果:观察组患者治疗后的总有效率为97.78%高于对照组为80.00%(P<0.05);两组患者治疗后TNF-α、IL-6、IL-8及IL-10的测得值均优于治疗前(P<0.05),且观察组的改善程度均优于对照组(P<0.05)。结论:采用美沙拉嗪与枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊联用治疗溃疡性结肠炎患者的疗效较为显著,有效改善了炎性因子水平。     

复方谷氨酰胺肠溶胶囊辅助治疗溃疡性结肠炎患者的效果及对患者胃肠功能康复的影响

目的 研究复方谷氨酰胺肠溶胶囊辅助治疗溃疡性结肠炎（UC）患者的临床效果,以及对患者胃肠功能康复的促进效果。方法 选取2018年3月至2021年3月江门市中心医院消化内科收治的92例UC患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为试验组（n=46）和对照组（n=46）。试验组患者采用美沙拉嗪+复方谷氨酰胺肠溶胶囊治疗,对照组患者采用美沙拉嗪治疗。比较两组患者的治疗效果与不良反应发生率、治疗前后肠屏障功能和胃肠功能康复指标差异。结果 试验组治疗总有效率（95.65%）高于对照组（82.61%）,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗后,试验组二胺氧化酶、D-乳酸、细菌内毒素水平均低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;试验组结肠镜下评分、改良梅奥评分（Mayo）低于对照组,胃肠道生活质量指数（GIQLI）高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组的不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 复方谷氨酰胺肠溶胶囊辅助美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎,能有效提升患者治疗效果且安全性良好,对改善溃疡性结肠炎患者的肠屏障功能、抑制患者肠黏膜病情进展、降...