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1.
利用地高辛标记的cDNA探针,原位检测DDPH[1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙胺基)丙烷酸盐]对缺氧内皮细胞条件培养液致猪PASMCPDGF基因表达的影响。实验分6组:常氧、低氧无血清培养液组(N、H组),常氧、低氧内皮细胞条件培养液组(NECCM、HECCM组),NECCM+DDPH、HECCM+DDPH组。用自动图像分析仪检测各组细胞PDGF-A和-B链杂交产物的平均光密度(OD)值。结果:HECCM组PDGF-A和-B链mRNA表达量分别是NECCM组的1.40、1.49倍(P<0.01),分别是N组的1.8倍、1.7倍(P<0.01),HECCM+DDPH组PDGF-A、-B链mRNA表达量分别为HECCM的0.73倍、0.65倍(P<0.01),与NECCM组相比,均无显著差异。提示DDPH在PDGF基因转录水平抑制HECCM诱导的PASMC的增殖。  相似文献   

2.
张燕  李丰 《同济医科大学学报》1996,25(6):421-424,F003
利用地高辛标记的cDNA探针,原位检测DDPH〔10(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙胺基)丙烷酸盐〕对缺氧内皮细胞条件培养液致猪PASMC PDGF基因表达的影响。实验分6组:常氧、低氧无血清培养液组(N、H组),常氧、低氧内皮细胞条件培养液组(NECCM、HECCM组),NECCM+DDPH、HECCM+DDPH组。用自动图像分析仪检测各组细胞PDGF-A和-B链杂交产物的平  相似文献   

3.
采用免疫组织化学和原位杂交方法,研究自由基(FR)对猪主动脉内皮细胞(EC)的c-sismRNA及血小板源生长因子(PDGF)B链蛋白表达的影响。结果显示,FR促进c-sismRNA和PDGF-B链蛋白的表达。EC暴露于FR20min,c-sismRNA和PDGF-B链蛋白的表达较对照组分别增加1.0和2.2倍。提示,FR损伤EC所诱导的PDGF合成增多在动脉粥样硬化的发病过程中可能起重要作用。  相似文献   

4.
目的: 克隆造血干细胞因子( S C F)并在 C H O 细胞中表达。方法: 采用 P C R 方法从p R C/ C M V(含 S C Fc D N A)中钓取 S C F c D N A 膜外段活性区,克隆入真核表达载体pc D N A3,转染入 C H O 细胞;用 R T- P C R 方法检测 m R N A 水平表达及通过协同刺激骨髓细胞集落形成来检测转染细胞上清的生物活性。结果:转染 S C Fc D N A 的 C H O 细胞可表达 S C Fm R N A,其细胞培养上清可协同 G M - C S F刺激骨髓细胞形成集落数比 G M - C S F 单独作用高 2 倍,转染外源基因对细胞周期没有明显影响。结论:转染 S C Fc D N A 在 C H O 细胞中表达,转染细胞上清协同 G M - C S F 刺激骨髓细胞集落的形成,而本身对集落的形成没有影响。  相似文献   

5.
用放射免疫分析法(RIA)测定40例慢性肝炎(CH),32例肝炎后肝硬化(HC)及28例原发性肝癌(HCC)患者的血清IL-6,转化生长因子-α(TGF-)及透明质酸(HA)水平。结果:CH,HC及HCC血清IL-6,TGF-α及HA水平均显著高于正常对照组(P〈0.05和〈0.01)。且IL-6与HA水平呈显著正相关(r=0.6206,P〈0.05);TGF-α值的变化与HC向HCC发展呈明显平  相似文献   

6.
人胰腺癌血小板活化生长因子及其受体基因表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:观察胰腺和癌变标本中血小板活化生长因子PDGF及其受体PDGFR基因表达的变化关系,探讨PDGF及其PDGFR在肿瘤袭和转移过程中的作用。方法:用Northern杂交方法,采用cDNA探针(PDGF A、B,PDGFR-α、-β)对两株胰腺癌细胞(PaTu8988、PaTu8902)、15例胰腺癌手术切除标本和8例正常胰腺组织标本进行了分子杂交检测。结果:正常胰腺组织中,在RNA水平,PDG  相似文献   

7.
对慢性肝炎、亚急性重症肝炎、肝硬变及肝细胞肝癌共379例标本,进行了癌基因c-myc、c-erbB-2和胰岛素样生成因子Ⅱ(IGFⅡ)及表皮生成因子(EGT)受体的测定。结果,EGF受体主要定位于良、恶性肝组织中的血窦内皮细胞,可能不参与肝癌发生;c-myc表达选择性不强,也见于21%结构正常肝中,可能与成熟肝细胞的增殖有关;c-erbB-2阳性率最高,广泛分布于肝小多角细胞(SPLC)、小细胞性不典型增生(SCD)及小管状化生(DM)之肝细胞及癌细胞,提示c-erbB-2不仅参与肝癌发生,可能还与肝细胞DM有关;IGFⅡ表达仅见于慢性肝脏病变,在细胞类型上有严格的选择性,集中于癌细胞、SPLC和SCD肝细胞,提示IGFⅡ基因的活化及高表达与SPLC明显增生及SCD有关,是肝癌发生过程中的关键环节。还观察到SPLC和SCD肝细胞中IGFⅡ和c-erbB-2的表达与乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)密切相关,提示HBVX基因表达可能与这两种肝癌相关基因活化有关。  相似文献   

8.
单克隆抗体F(ab‘)2片段2种纯化方法的建立及比较   总被引:2,自引:1,他引:1  
刘成刚  陈志南 《医学争鸣》1998,19(4):388-390
目的:建立纯化(mAb)F(ab‘)2片段的有效方法。方法:在pH5.5环境下,用DTT激活木瓜酶,在没有DTT存在下消化抗人肝癌mAb HAb18 IgG1,37℃,反应8h,然后分别用Sephacryl S-200(1cm×65cm)凝胶过滤柱和DEAE-Sepharose-FF(2cm×18cm)阴离子交换柱纯化。结果:经SDS-PAGE(100g/L)电泳测定,2种方法纯化的F(ab’)2  相似文献   

9.
DeterminationoftheContentsofEPAandDHAandLipidConstituentsinMainFreshWaterFishesin ChinaYANGJun-guo(杨钧国)(InstituteofCardiovasc...  相似文献   

10.
国人Ⅱ型糖尿病患者载脂蛋白A—Ⅳ血清水平的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
用酶联免疫吸附法(ELISA)检测了我国Ⅱ型糖尿病(NIDDM)患者血清中载脂蛋白A-Ⅳ(apoA-Ⅳ)的水平,并分析了它与其他7项血清参数TG、TC、HDL-C、空腹血葡萄糖(FPG)、apoA-Ⅰ、apoB100和对数Lp(a)之间的关系。结果显示:与正常人群相比,NIDDM患者apoA-Ⅳ和FPG的血清水平显著增高(皆P<0001),HDL-C和apoA-Ⅰ的血清水平显著降低(P<0001,P<005)。通过简相关分析和多元回归分析,两组人群apoA-Ⅳ的血清水平与HDL-C和FPG的血清水平呈正相关,与TG血清水平无显著相关性。可看出:NIDDM患者血清HDL中的两种主要载脂蛋白A-Ⅰ和A-Ⅳ的分布比例可能发生异常,致使HDL逆向转运胆固醇的功能减弱,推测这可能与NIDDM患者伴发动脉粥样硬化的机率增高有关  相似文献   

11.
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和血小板衍化内皮细胞生长因子(PD-ECGF)与肝癌微血管密度及门静脉癌栓形成的关系.方法用免疫组化法对61例手术切除的肝细胞癌(HCC)标本分别作抗肿瘤血管内皮细胞染色以及抗bFGF、VEGF、PD-ECGF染色.结果HCC组织中bFGF、VEGF和PD-ECGF表达阳性率分别为45.9%、75.4%和70.5%.HCC组织中bFGF、VEGF和PD-ECGF表达均阴性、其中之一表达阳性、其中两种表达阳性及三种均表达阳性者,伴有门静脉癌栓的阳性率分别为16.7%、25.0%、54.2%和63.2%,趋势卡方检验差异有显著意义(P<0.05);HCC组织中的MVD计数分别为99±56、113±27、140±47和194±52,方差分析差异有非常显著差异(P<0.001).结论随着HCC组织中血管生长因子表达阳性数目的增多,其肿瘤血管生成能力明显增大,形成门静脉癌栓的机率亦增加.  相似文献   

12.
肝细胞癌中VEGF,HPA的表达与肿瘤微血管密度的关系及意义   总被引:3,自引:1,他引:2  
目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF),乙酰肝素酶(HPA)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达与肿瘤微血管密度(MVD)的关系及其意义。方法:应用免疫组织化学二步法联合检测72例HCC,62例肝硬化和23例正常肝组织中VEGF,HPA的表达和进行MVD计数,结合临床病理资料进行分析。结果: HCC中VEGF,HPA的表达率均明显高于肝硬化及正常肝,HCC中MVD值也显著高于肝硬化及正常肝。VEGF,HPA的表达率在TNMⅠⅡ期、无转移复发组、AFP<400μg/L组、无门脉癌栓组均明显低于ⅢⅣ期、转移复发组、AFP≥400μg/L组、有门脉癌栓组。在TNMⅠⅡ期、无转移复发组、AFP<400μg/L组、无门脉癌栓、单个肿瘤结节以及肿瘤直径<5cm组MVD计数亦明显低于ⅢⅣ期、转移复发组、AFP≥400μg/L组、有门脉癌栓、多个肿瘤结节以及肿瘤直径≥5cm组。VEGF,HPA的表达率与MVD值三者两两之间显示明显正相关。结论: VEGF,HPA在促进肿瘤微血管生成中起重要的作用,联合检测VEGF,HPA,CD34在肝癌中的表达,对肝癌患者的预后评估有一定的辅助意义。  相似文献   

13.
目的研究环氧化酶-2(Cox-2)RNA和Kiss-1RNA在原发性肝细胞肝癌中的表达及临床意义。方法采用RT—PCR技术检测Cox-2RNA和Kiss-1RNA在正常肝组织(10例)、癌旁肝硬化组织(30例)和肝癌组织(39例)的表达情况,并比较它们在不同组织中表达的差异及临床意义。结果Cox-2RNA在正常的肝组织中不表达,在肝硬化组和肝癌组中高表达,但两者比较差异无统计学意义(P〉0.05),但都与正常组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。Cox-2RNA的表达与肝癌的大小、静脉浸润、TNM分期、Edmenson分级等无关(P〉0.05)。Kiss-1RNA在正常肝组织.肝硬化和肝癌组织中均有表达,正常组和肝硬化组比较差异无统计学意义(P〉0.05),但都与肝癌组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。Kiss-1RNA的表达与TNM分期和Edmenson分级等密切相关(P〈0.05),与肿瘤的大小、静脉浸润等无关(P〉0.05)。结论Cox-2RNA在肝癌中表达明显升高,实验证明它可能与肿瘤的浸润、转移等无关;Kiss-1RNA的表达在肝癌中抑制显著,实验证明它可能与肿瘤的浸润、转移等有密切相关。同时Cox-2RNA和Kiss-1RNA的表达呈显著负相关(P〈0.05)。  相似文献   

14.
Background We investigated the expression and role of TN4 in the oncogenesis of human hepatocellular carcinoma (HCC) from Qidong which is a HCC risk area.Methods The expression of TN4 in HCC was observed using immunohistochemical staining (IHC). TN4 levels were manipulated in human liver cancer cell SMMC7721, using pcDNA3.1 eukaryotic expression constructs designed to express the complete TN4 cDNA. The biological changes of the cells were observed before and after transfection of TN4 and the change of gene expression was analysed by atlas cDNA expression array. Results Among 100 pairs of samples of HCC, TN4 down-regulation expression and up-regulation expression positive rate were 81% (81/100), 19% (19/100), respectively (P&lt;0.01). TN4 protein was mainly localized in cytoplasm and membrane. The positive rate of TN4 were 10% (3/30), 100% (70/70) in lymph node metastasis and no lymph node metastasis, respectively (P&lt;0.01). The growth rates of the derivative SMMC7721-TN4 cell lines were decreased in comparasion with that of normal SMMC7721 cells and pcDNA- SMMC7721. Some gene expression was changed before and after transfection of TN4. At 30 days of post-implantation of SMMC7721-TN4, SMMC7721-pcDNA3, SMMC7721 group produced tumors of (301.9±143.4) mm3, (2418.7±362.8) mm3, (2317.4±587.8) mm3, respectively, (P&lt;0.01). Tumor inhibiting rate was 82.4% in TN4 transfection group. Sections of tumors were observed for their degree of tissue necrosis and there was higher degree of necrosis in tumors of the TN4-SMMC7721 cell group than those of the SMMC7721, SMMC7721-pcDNA groups.Conclusions TN4 may play an important role in the oncogenesis of human HCC, especially in Qidong, the HCC risk area and TN4 could be a candidate tumor suppressor gene for HCC.  相似文献   

15.
肝细胞性肝癌中乙酰肝素酶与nm23-H1的表达及其临床意义   总被引:16,自引:0,他引:16  
Liu Y  Chen X  Peng S  Fang H  Wu Y  Peng C  Shi L  Bai M  Xu B  Wang J  Deng G 《中华医学杂志》2002,82(22):1553-1556
目的:探讨乙酰肝素酶(HPA)和nm23-H1在原发性肝细胞肝癌(HCC)中的相互关系,及其作为CC术后转移复发预测指标的价值。方法:选用33例HCC癌组织和癌旁组织标本,9例肝脏良性肿瘤瘤周肝组织作正常对照。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化S-P法检测标本中HPA mRNA和nm23-H1蛋白的表达,并结合患者的临床病理指标和随访结果进行分析。结果:33例HCC中,16例HPA表达阳性,其阳性率显著高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.01)。HPA表达与肿块大小、包膜形成、AFP水平、HBsAg状态和有无肝硬化等无关(P>0.05);但高转移复发倾向组和随访转移复发组HPA表达率显著高于低转移复发倾向组(P<0.05)和无转移复发组(P<0.01);此外,HPA基因表达多见于分化较差(P<0.05)、TNM分期较晚(P<0.05)的患者。nm23-H1蛋白在HCC癌组织中的阳性率显著低于癌旁和正常肝组织(P<0.05)。nm23-H1与肿块大小、包膜形成、AFP水平、HBsAg状态、有无肝硬化、Edmondson分级和TNM分期均无关(P>0.05);但高转移复发倾向组和随访转移复发组HPA表达率明显高于低转移复发倾向组(P=0.018)和无转移复发组(P=0.024)。nm23-H1在HPA阳性组和阴性组表达差异无显著意义(P=0.082)。按随访结果判断,HPA阳性预测转移复发准确率为78.6%(11/14);nm23-H1阴性预测准确率为68.8%(11/16);PHA阳性和nm23-H1阴性联合应用预测准确率为88.9%(8/9)。结论:HPA表达阳性和/或nm23-H1阴性患者有较高的肿瘤侵袭性和术后转移复发倾向,二者联合检测可提高预测HCC术后转移复发的准确性。  相似文献   

16.
目的:探讨PcG(polycomb group)相关蛋白RYBP在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中差异表达 的临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测77例HCC癌组织及癌旁正常组织中RYBP的表达水平,分析其表达水平 与HCC临床病理特征、患者5年生存率及预后的关系。结果:RYBP在HCC癌组织中的表达水平明显低于癌旁正常组 织(P<0.05)。HCC患者RYBP表达水平与HBsAg,ALT,谷氨酰转肽酶(glutamyl transpetidase,GGT)、III型前胶原、肿瘤 大小、远处转移、肿瘤分化程度等临床指标明显相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析表明HCC癌组织中RYBP低表达患者 无复发生存率(recurrence-free survival,RFS)和总体生存率(overall survival,OS)均明显低于RYBP高表达患者(P<0.05)。单因素Cox回归分析提示低龄和RYBP高表达是RFS的保护因素,而GGT、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度和肿瘤大小等指标是RFS的危险因素(P<0.05);RYBP高表达是OS的保护因素,但肿瘤个数,ALT,GGT,甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP),腹膜癌胚抗原(peritoneal carcinoembryonic antigen,pCEA),淋巴结转移,TNM分期和肿瘤大小是危险因素(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示年龄、GGT、淋巴结转移和TNM分期是RFS的独立危险因素(P<0.05),淋巴 结转移和TNM分期是OS的独立危险因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析提示:与血清中AFP水平相比,肿瘤组织 中RYBP的表达水平能更好地预测HCC患者的预后。结论:PcG相关蛋白RYBP在HCC组织中表达降低,影响HCC患者 的预后,可能成为HCC治疗的新靶点。  相似文献   

17.
Huang X  Wang L  Shi HB  Zhang XJ  Men XW  Chen B  Wang XH 《中华医学杂志》2011,91(44):3127-3130
目的 探讨血小板衍化内皮细胞生长因子(PD-ECGF)在肾细胞癌中的表达及其预后意义.方法 采用免疫组化EnVision两步法检测2002年6月至2006年12月76例肾细胞癌患者肿瘤组织中PD-ECGF的表达水平,并分析其与肾细胞癌患者临床病理特征及预后的关系.结果 76例肾癌患者肿瘤组织中PD-ECGF高表达41例,低表达35例.PD-ECGF表达水平与肿瘤分期及组织学分级呈正相关.PD-ECGF高表达患者5年总生存率(60.98%)显著低于PD-ECFG低表达患者(94.29%,P=0.000).单因素分析显示肿瘤分期、淋巴结转移、远处转移、组织学分级及PD-ECGF表达水平均与肾癌患者5年生存率密切相关,Cox比例风险模型多因素分析显示肿瘤分期、组织学分级及PD-ECGF表达水平为影响肾癌患者预后的独立危险因素(OR=17.971、9.702、6.790,95%CI:3.010~107.290、1.835 ~ 51.305、1.156 ~ 39.894).结论 PD-ECGF在肾细胞癌的发生、发展中可能起重要作用,PD-ECGF高表达可能与肾细胞癌的预后有关.  相似文献   

18.
目的:研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关性肝病患者肝移植术后合并症的发生率,以及不同合并症发生的危险因素.方法:回顾性观察北京大学第三医院2000年8月至2004年8月期间54例HBV相关性肝病患者肝移植术后所有肝活检切片,并分析临床病例资料,研究肝移植术后不同合并症的发生率和发生时间,重点研究乙型病毒性肝炎(乙肝)复发与急性排斥反应的关系,肝癌再发/转移与急性排斥反应、肝癌大小及术前门静脉是否有癌栓之间的关系.结果:4例HBV相关性肝病患者术后合并急性排斥反应38例(70.4%;发生时间:-365 d)、慢性排斥反应1例(1.9%;发生时间:0.7个月)、胆道合并症24例(44.4%;发生时间:~940 d)、乙肝复发7例(13.O%;发生时间:~540 d)、丙型肝炎病毒感染3例(5.6%;发生时间:0 d、60 d和33个月)、巨细胞病毒感染8例(14.8%;发生时间:7~90 d)和移植肝肝癌再发/转移17例(31.5%;发生时间:~41个月).乙肝后肝硬化患者肝移植术后1年存活率为95%,术后3年存活率为85%;乙肝后肝癌患者肝移植术后1年存活率为67.6%,术后3年存活率为50%.乙肝复发病例和无乙肝复发病例中,急性排斥反应的人均发生次数分别为(0.86±1.46)次/人和(1.07±O.90)次/人,其中急性排斥反应活动指数(rejection activity index,RAI)≥4分的急性排斥反应人均发生次数分别为(O.29±O.49)次/人和(O.5±O.63)次/人,发生过≥3次急性排斥反应的患者分别占14.3%和10.6%,两者差异无统计学意义(P>0.05).移植肝肝癌再发/转移病例和无肝癌再发/转移病例中,急性排斥反应的人均发生次数分别为(1.12±O.93)次/人和(1.06±1.39)次/人,RAI>4分的急性排斥反应人均发生次数分别为(0.65±0.79)次/人和(O.65±1.06)次/人,发生过≥3次急性排斥反应的患者分别占5.9%和17.6%,两者差异无统计学意义.移植肝肝癌再发/转移病例和无肝癌再发/转移病例的术前肝癌直径为(6.72±3.40)cm和(3.55±2.17)cm(P=0.004 7),术前门静脉癌栓的发生率为68.75%和33.3%(P=0.006).结论:HBV相关性肝病患者肝移植术后乙肝复发和移植肝肝癌再发/转移与急性排斥反应无关,但移植肝肝癌再发/转移与术前癌肿较大和存在门静脉癌栓直接相关.  相似文献   

19.
祁军安  梁容瑞  李宗芳  张澍  江奎  黄辰  杨军 《西部医学》2013,(10):1444-1446
目的探讨Lasp-1蛋白在肝癌(HCC)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化染色法检测42例肝癌癌组织、28例癌旁组织以及15例正常肝组织标本中Lasp-1蛋白表达情况,并探讨其与肝癌临床病理特征的关系。结果Lasp-1蛋白在肝癌组织中的阳性表达率为54.76%,明显高于癌旁(32.14%,P〈O.01)及正常肝组织(6.67%,P〈0.01),Lasp1表达阳性率在正常肝组织、癌旁、和肝癌中呈递增趋势;Lasp-1在伴发转移的肝癌病例标本中未发生转移者表达阳性率更高(P=o.006);肝癌组织中Lasp-1的阳性率与患者TNM分期呈正相关(P=0.013)。结论Lasp-1可能在促进HCC的发生和发展过程中发挥了重要的作用,有望成为早期诊断HCC发生以及评估预后的指标。  相似文献   

20.
原发性肝癌组织中陷井受体3基因表达与扩增的临床意义   总被引:9,自引:0,他引:9  
Shen HW  Wu YL  Peng SY 《中华医学杂志》2003,83(9):744-747
目的 观察原发性肝癌组织中陷井受体 3(DcR3)基因的表达和扩增 ,探讨该基因在肝癌组织中过度表达的原因 ,分析临床病理学因素在肝癌DcR3基因表达和扩增中的作用。方法 对4 8例病理学证实的原发性肝癌患者的组织 ,利用RT -PCR检测癌组织及癌旁组织DcR3基因mRNA表达 ,荧光定量PCR检测该基因的扩增倍数 ,统计分析肝癌组织中DcR3基因表达与扩增的相关性 ,比较不同临床病理学类型肝癌中该基因表达及扩增的差异。结果  4 8例肝癌组织中DcR3基因mRNA阳性表达 2 9例 ,阳性率为 6 0 4 % ;癌旁组织无阳性表达。mRNA表达与肿瘤大小、临床分期及肿瘤的浸润和转移有关 (P <0 0 5 )。mRNA阳性表达组的基因扩增倍数为 1 5 3± 0 82 ,阴性组为 0 75± 0 33,其差异有显著意义 (P <0 0 1)。 4 8例患者的DcR3基因扩增倍数为 0 18~ 3 86 ,平均值为 1 2 2± 0 77,扩增倍数超过 2的患者共 7例 ,占 14 6 %。不同扩增倍数肝癌患者该基因mRNA的表达差异有显著意义 (P <0 0 1) ;不同临床病理学特征肝癌间DcR3基因的扩增倍数差异无显著意义 (P >0 0 5 )。序列分析发现其mRNA序列与源序列有 3个碱基改变。结论  (1)原发性肝癌组织中存在DcR3基因的高表达 ,对应的癌旁组织中未见表达 ;(2 )原发性肝癌组织中存在DcR3基  相似文献   

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