不同剂量维生素C结合辅酶Q10对小儿病毒性心肌炎外周血象及免疫功能的影响研究

目的 观察不同剂量维生素C结合辅酶Q10治疗小儿病毒性心肌炎的效果及对患儿外周血象、免疫功能的影响。方法 本次研究选择2021年6月至2022年6月南阳医学高等专科学校第一附属医院收治的126例病毒性心肌炎患儿作为研究对象,通过计算机随机分组法将入组患儿分为对照组(63例,采用常规剂量维生素C结合辅酶Q10治疗)和观察组(63例,采用大剂量维生素C结合辅酶Q10治疗),比较两组患儿治疗前后的外周血象、免疫功能、心肌酶谱及用药安全性。结果 观察组治疗1周后微小RNA(MicroRNA-133,miR-133)(3.35±0.27)高于对照组(2.46±0.33),miR-155水平(2.23±0.44)低于对照组(3.41±1.06),治疗2周后的miR-133(4.02±1.25)高于对照组(3.47±0.61),miR-155水平(0.92±0.11)低于对照组(1.58±0.63),差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后的T淋巴细胞表面抗原₃⁺(CD₃⁺)(65.44±10.46...     

甾体皂苷TSA对局灶性脑缺血大鼠运动感觉功能的影响

目的 探讨甾体皂苷TSA对脑缺血再灌注大鼠恢复早期运动感觉功能的影响.方法 建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分为模型组,TSA 15 mg/kg、30 mg/kg、60 mg/kg给药组,安宫牛黄丸400 mg/kg组以及假手术组.于造模后3～14 d给药,术后3 d、7 d、10 d、14 d观察横木行走功能和揭除胶布的潜伏期,观察皮层运动感觉区神经细胞的形态结构,免疫组化法检测脑梗死周围区血管内皮生长因子(VEGF)的表达以及微血管密度.结果 与模型组比较,TAS 30 mg/kg、60 mg/kg给药组能够增强脑缺血大鼠横木行走的能力(P<0.05),缩短揭除胶布的潜伏期(P<0.05),减轻皮层运动感觉区的神经细胞损伤,升高梗死周围区VEGF的表达以及微血管的数目.结论 TSA可加快大鼠局灶性脑缺血后运动感觉功能的恢复,其可能的机制是促进了大脑VEGF的表达和微血管的新生.     

黄芩苷对高致瘤HL-60细胞裸鼠移植瘤模型的体内抑瘤作用和机制探讨

本研究旨在探讨黄芩苷对高致瘤人白血病HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的体内抑瘤作用及其作用机制。制备高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为6组:阴性对照组(注射5%NaHCO3),黄芩苷25、50和100 mg/kg剂量组,联合用药组(黄芩苷50 mg/kg+VP16 2 mg/kg)和VP16 4 mg/kg阳性对照组,每组10只裸鼠。采用腹腔注射方式给药,14 d后每组处死5只裸鼠,对剥取的瘤块称重计算抑瘤率;通过电子显微镜观察瘤组织超微结构,病理组织学观察裸鼠各主要脏器结构改变,瘤块组织蛋白检测信号转导通路指标。观察裸鼠生存时间。结果表明,黄芩苷可抑制裸鼠HL-60细胞皮下移植瘤的生长,呈剂量依赖性。瘤组织病理组织学和透射电子显微镜检查结果显示,黄芩苷组和联合用药组的肿瘤坏死和细胞凋亡现象较阴性对照组多见。黄芩苷可能通过抑制Akt活性,下调p-Akt、mTOR和p-mTOR的表达来抑制裸鼠异种移植瘤的增长。联合用药组裸鼠中位生存时间明显长于阴性对照组(P<0.05)。结论:黄芩苷可抑制高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的生长,诱导瘤组织中HL-60细胞的凋亡,其机制之一可能与抑制Akt活性并下调PI3K/Akt/mTOR信号通路有关;黄芩苷与VP16联用可明显提高荷瘤裸鼠的中位生存期,具有协同抗高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的作用。     

石吊兰醇提取液抗S180实体瘤作用和对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:观察石吊兰醇提取液对荷S180实体瘤小鼠体内抗肿瘤作用,分析对其免疫功能的影响。方法:实验于2003-02/08在赣南医学院动物实验中心完成。取昆明种小鼠90只。先设正常对照组15只,其余小鼠右腋皮下接种瘤液0.2mL,24h后随机数字表法分为模型组、石吊兰2,4g/kg组、环磷酰胺组、环磷酰胺 石吊兰组。正常对照组、模型组用生理盐水腹腔注射,每次20mL/kg,石吊兰2,4g/kg组、环磷酰胺组、环磷酰胺 石吊兰组分别给予石吊兰2,4g/(kg·d),环磷酰胺0.3g/(kg·d),石吊兰2g/(kg·d) 环磷酰胺0.3g/(kg·d),腹腔注射,1次/d,连续10d。第11天称质量后拔眼球取血,采用双抗体夹心ELISA法测定血清白细胞介素2浓度;剥取肿瘤、胸腺、脾组织,计算抑瘤率、胸腺指数、脾指数。结果:①石吊兰4g/kg组、环磷酰胺组和环磷酰胺 石吊兰组对肿瘤组织有明显的抑制作用(42.1%,74.7%,71.3%,P<0.05～0.01);环磷酰胺组和环磷酰胺 石吊兰组抑瘤作用优于石吊兰4g/kg组(P<0.01)。②荷瘤小鼠胸腺指数、脾指数均低于正常小鼠(P<0.05～0.01),但石吊兰4g/kg组胸腺指数、脾指数均较模型组显著提高,差异有显著性意义(P<0.01),石吊兰2g/kg组仅胸腺指数高于模型组(3.84±0.21,P<0.01)。环磷酰胺 石吊兰组能提高小鼠胸腺指数与脾指数,与环磷酰胺组比较,差异有显著性意义(2.51±0.33,1.69±0.15;5.03±0.51,4.30±0.27;P<0.01)。③石吊兰2,4g/kg组小鼠血清中白细胞介素2含量较正常对照组和模型组均显著提高,差异有显著性意义[(253.3±17.8),(330.9±24.2),(189.1±45.3),(145.6±15.7)ng/L,P<0.01]。环磷酰胺 石吊兰组白细胞介素2含量高于环磷酰胺组[(277.1±33.2),(133.3±12.5)ng/L,P<0.01]。结论:石吊兰醇提取液具有抑制S180实体瘤生长及提高荷瘤小鼠免疫功能的作用,可能与其提高血清中白细胞介素2水平有关。     

新型氨基甾体类对人粒系白血病HL-60细胞系的增殖抑制和分化诱导的作用

研究发现一种新型氨基甾体化合物,2β-(4’-甲基-1’-哌嗪基)-3α,17β二羟基-5α-雄甾烷(HY)可抑制HL-60细胞的增殖,并诱导该类细胞向巨噬样细胞分化。其主要证据如下:①细胞计数,集落计数及MTT检测显示抑制HL-60细胞的增殖;②液体培养6天后形态学显示诱导HL-60细胞向巨噬样细胞分化;③可诱导NBT反应阳性;④可诱导α-萘酚醋酸酯酶反应阳性;⑤流式细胞术显示可诱导CD11b和CD14的表达。结论提示该化合物具有治疗白血病的潜在价值。     

四逆汤对hepa1-6肝癌细胞的抑瘤作用和细胞周期影响的体内外实验研究

目的:研究四逆汤对肝癌细胞的体内外抗癌作用;从细胞周期角度揭示温阳法抗癌的作用机制;为采用温阳法治疗肝癌提供理论与实验依据,为肝癌的防治开辟新的研究领域。方法:运用细胞培养技术,MTT法,整体小鼠移植瘤实验等从整体及细胞水平评价四逆汤对肝癌细胞增殖的抑制作用。并采用流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化,从细胞周期角度观察四逆汤对肝癌细胞周期的影响。结果:①四逆汤对肝癌细胞有显著的抑制作用,具有浓度依赖性。②四逆汤对免疫器官具有保护作用,脾脏指数与胸腺指数明显上升,与化疗组相比有显著差异(P0.05),四逆汤与化疗联合,脾脏指数与胸腺指数明显上升,与单纯化疗组比较有显著差异(P0.05)。③四逆汤可以通过G0/G1期阻滞诱导细胞凋亡,与化疗联合出现S期阻滞。     

维生素C联合免疫球蛋白对病毒性心肌炎患儿心肌损伤程度及miR-21和miR-451表达水平的影响

目的探讨维生素C联合免疫球蛋白对病毒性心肌炎(VMC)患儿心肌损伤程度及miR-21、miR-451的影响。方法前瞻性选取2017年1月至2019年1月间在天津儿童医院接受治疗的VMC患儿90例,经随机数表法分为对照组、研究组各45例。对照组患儿接受免疫球蛋白+常规治疗,研究组患儿接受维生素C+免疫球蛋白+常规治疗,治疗2个疗程后评估疗效,对比两组患儿的血清心肌损伤标志物[心肌肌钙蛋白I(cTnI)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、N端前脑钠肽前体(NT-pro BNP)],炎症介质[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-18(IL-18)],miR-21,-451表达水平的差异,判定治疗效果并记录用药不良反应。结果治疗后,研究组患者血清中cTnI、cTnT、NT-pro BNP的水平低于对照组患儿;血清中hs-CRP、TNF-α、IL-18的水平低于对照组患儿;血清中miR-21的水平低于对照组患儿,miR-451的水平高于对照组患儿(P <0. 05)。两组患儿的疗效分级差异有统计学意义(P <0. 05),总有效率差异无统计学意义(P>0. 05)。两组患儿治疗期间均未见明显药物不良反应发生。结论维生素C联合免疫球蛋白可有效减轻VMC患儿的心肌损伤,减少炎症因子释放,其机制可能与miR-21,miR-451表达改变相关。     

腹腔镜直肠癌根治术对血清血管内皮生长因子C和可溶性白介素-2受体水平的影响及临床意义

目的 探讨腹腔镜结直肠癌根治术对血清血管内皮生长因子C(VEGF-C)和可溶性白介素-2受体(sIL-2R)表达影响及其临床意义.方法 收集2004年11月～2006年11月该院行根治性直肠癌手术患者150例,其中,腹腔镜组50例,开腹组100例,采用双抗体夹心酶联免疫方法(ELISA)检测两组术前和术后不同时期血清VEGF-C和sIL-2R水平,并进行两组间比较.结果 腹腔镜组患者血清VEGF-C水平从术后第3天开始一直呈下降趋势,于术后第10天时已明显低于术前水平(P＜0.05);而开腹组患者术后第3天血清VEGF-C水平出现升高,之后逐渐下降,术后1个月时明显低于术前水平(P＜0.05),术后第3、7天与腹腔镜组同期比较差异有显著性(P＜0.05).两组患者术前血清sIL-2R从术后第3天开始两组患者血清sIL-2R水平水平均呈下降趋势,于术后第10天时均明显低于术前水平(P＜0.05).结论 腹腔镜手术治疗直肠癌比传统开腹手术可能更具有优势,规范操作下不会增加肿瘤侵袭转移机会,安全性较好.     

IL-21单独或联合IL-15／IL-2对G-CSF动员人外周血单个核细胞体外增殖和抗肿瘤活性作用研究

本研究探讨IL-21单独或联合IL-15／IL-2对G—CSF动员的人外周血单个核细胞（G-PBMNC）体外增殖和抗瘤活性的影响，评价IL-21及相关细胞因子组合在肿瘤免疫治疗方面的可行性。应用IL-21单独或联合IL-15／IL-2体外培养G—PBMNC，用CCK-8法进行细胞增殖分析；以白血病细胞株K562为靶细胞。用CFSE／PI流式双染法检测其对肿瘤的杀伤作用；用流式细胞术分析免疫细胞表型。结果显示：培养72小时后单独IL-21因子组对靶细胞杀伤活性与IL-2结果相近；当效靶比为25：1时IL21＋IL15／IL21＋IL15＋IL2组与IL21＋IL2组相比杀伤能力有显著增强（P〈0．05）；效靶比50：1时，细胞因子联合应用组均显著高于细胞因子单独应用组（P〈0．05），以IL21＋IL15＋IL2诱导效果最佳。复苏冻存的G-PBMNC处理结果与新鲜的G—PBMNC结果基本-致。细胞因子组和对照组相比CD3、CD4和CD8抗原表达有所增加，以IL21＋IL15组的CD4、CD3^- 56^＋和CD3^＋56^＋抗原表达增加最为显著（P〈0．05）。结论：IL-21可增强G—PBMNC的体外杀伤活性，联合IL-15可更显著提高G—PBMNC的抗瘤活性。     

人脐血源基质细胞与骨髓基质细胞对造血功能损伤修复作用的比较研究

目的比较人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)与骨髓基质细胞(hBMSCs)对造血功能损伤的修复作用。方法取63只BALB/c小鼠均给予6.0 Gy60Co射线全身照射,随机分为hUCBDSCs组(n=21)、hBMSCs组(n=21)和对照组(生理盐水组)(n=21),分别于移植后1、3、5、7、10、14、21 d检测1次外周血细胞,于照射后7和21 d分别制备股骨骨髓涂片观察骨髓细胞形态学改变,收集小鼠骨髓细胞并作集落培养。结果 3组小鼠移植后白细胞、血小板、红细胞在3～5 d降至最低,hUCBDSCs组白细胞和血小板均从7 d开始回升,10 d后回升速度与程度提高,21 d时回升接近未照射水平,hBMSCs组从7 d开始回升,回升趋势与hUCBDSCs组相似,21 d后回升程度低于未照射水平,对照组从7 d后开始回升,回升较慢,21 d回升程度低于实验组(P<0.05);hUCBDSCs组,hBMSCs组及对照组红细胞均在3 d时降至最低,21 d后恢复,但实验组较对照组回升更快,(P<0.05),hUCBDSCs组与hBM-SCs无甚差异(P>0.05)。集落培养CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-GMEM,hUCBDSCs组21 d为(113±6)、(167±6)、(131±6)、(14±4)个,hBMSCs组(46±6)、(141±11)、(118±18)、(10±1)个,对照组为(87±3)、(122±4)、(84±7)、(5±1)个(P<0.05)。hUCBDSCs组所有小鼠均存活。结论 hUCBDSCs较hBMSCs修复造血功能损伤和血小板恢复的作用更佳,hUCBDSCs移植是1种安全有效的促进造血损伤修复的方法。     

外周血中CD4＋调节性T细胞检测与慢性丙肝患者抗病毒疗效分析

目的：研究 T 细胞调节性外周血中 CD4＋慢性丙肝患者与抗病毒疗效的关系。方法以收集的经过抗病毒治疗和随访的128例慢性丙肝患者作为试验组,分别抽取治疗前后以及随访24周患者的外周血,采用流式细胞术检测外周血中的CD4＋细胞的百分比,并进行 HCV-RNA 定量和肝功能指标的检测。对照组为同期体检健康者80例。结果试验组和对照组HCV-RNA 定量、AST、ALT、CD4＋（％）在两组之间比较,差异具有统计学意义（P ＜0.05）;治疗前后以及随访24周后,患者的HCV-RNA 定量、AST、ALT、CD4＋（％）的水平均显著的降低（P ＜0.05）。结论抗病毒治疗可以有效地降低慢性丙型肝炎的伤害,提高治愈率,减少对肝脏的损害。外周血中 CD4＋调节性 T 细胞可以作为抗病毒治疗疗效以及丙型肝炎病毒感染的指标。     

类风湿关节炎患者外周血白细胞介素-32的表达及临床意义

目的分析类风湿关节炎(RA)患者外周血白细胞介素-32(IL-32)的表达及临床意义。方法选取122例RA患者,根据活动度积分(DAS28)将其分为高活动组45例(DAS285.1)、中低活动组42例(DAS28≥2.6~≤5.1)和缓解期组35例(DAS282.6)。选取同期50例非RA结缔组织病患者作为非RA组,选取同期50名健康志愿者作为对照组。对5组研究对象血清IL-32、TNF-α水平及外周血单核细胞(PBMC)中的IL-32、TNF-α基因相对表达量进行检测和比较。结果高活动组患者PBMC中IL-32、TNF-αmRNA相对表达量和血清IL-32、TNF-α水平最高,其次为中低活动组患者,非RA组患者的血清TNF-α水平显著高于缓解期组和对照组(P0.05)。缓解期、非RA组和对照组PBMC中IL-32、TNF-αmRNA相对表达量和血清IL-32水平的差异均无统计学意义(P0.05),缓解期组和对照组研究对象的血清TNF-α水平的差异无统计学意义(P0.05)。RA患者血清和PBMC中的IL-32、TNF-α水平与RA患者的病情指标均具有相关性(P0.05)。结论 RA患者表现为外周血IL-32水平的显著升高,其水平与其疾病严重程度和活动性程度指标具有相关性,提示了IL-32可能在RA的活动性增强过程中具有重要的作用,可作为评价RA病情的辅助指标。     

铁过载骨髓造血细胞体外模型的建立及其对造血的影响

本研究通过铁与骨髓单个核细胞共培养,建立铁过载骨髓造血细胞模型并观察其对造血功能的影响.在体外培养骨髓单个核细胞的过程中,在培养液中添加枸橼酸铁铵(FAC),使细胞铁过载,建立铁过载骨髓造血细胞模型,然后检验这一过程中造血细胞的凋亡水平、造血集落形成(CFU-E、CFU-GM、BFU-E和CFU-mix)和CD34+细胞的计数变化.再用去铁胺(DFO)祛铁,观察上述指标的变化.结果发现:在不同时间加入培养液中不同浓度FAC,骨髓造血细胞内可变铁池(LIP)水平升高,且具有时间和浓度依赖性,在含400 μmol/L FAC的培养液中培养24小时时LIP水平达到最高.骨髓细胞造血功能检测表明,FAC组细胞凋亡比例(24.8 ±2.99%)较对照组(8.9±0.96%)显著升高(P＜0.01);造血集落形成单位计数明显低于对照组(P＜0.05);CD34+细胞比例(0.39±0.07%)与对照组(0.91±0.12%)相比也显著降低(P＜0.01).这些损伤影响可以通过DFO的处理部分消除.结论:在体外培养过程中添加铁能诱导骨髓单个核细胞铁过载,建立铁过载骨髓造血细胞模型,并能引起骨髓造血功能损伤,而这种损伤作用可以通过祛铁法减轻.本模型为深入研究铁过载对骨髓细胞造血功能的作用机制提供实验方法,并为骨髓造血功能低下的铁过载病人治疗提供新的靶点.     

外周血涂片与骨髓细胞形态、骨髓活检用于骨髓增殖性疾病患者诊断中的临床效果

目的：探究骨髓增殖性疾病患者应用骨髓细胞形态、外周血涂片和骨髓活检诊断的临床效果。方法从本院2011年6月至2016年2月接收并进行诊断的骨髓增殖性疾病患者中随机性抽取100例,分为对照组和研究组,每组各50例,并进行回顾性而分析和探究,采用骨髓细胞形态、外周血涂片和骨髓活检技术联合进行检查诊断,对照组单纯采用骨髓涂片诊断,分析两组患者采用不同方式诊断的效果与特点。结果从抽取的100例骨髓增殖性疾病患者分别采用骨髓细胞形态、外周血涂片和骨髓活检技术联合诊断和单一骨髓涂片诊断,结果显示,研究组应用联合诊断法效果较好,检出率明显高于对照组（P＜0．05）,差异性较大,具有统计学研究价值。结论针对骨髓增殖性疾病采用骨髓细胞形态、外周血涂片和骨髓活检联合诊断效果较好,检出率更高,值得在临床诊断中应用和推荐。     

探讨性别和年龄在慢性丙型肝炎患者 外周血Toll样受体3和7基因表达中的影响

目的 观察不同性别和年龄慢性丙型肝炎(CHC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体7(TLR7)mRNA表达,探讨性别和年龄在CHC患者外周血TLR3和TLR7基因表达中的影响。方法 选择CHC患者115例,健康人群113例,取抗凝全血,实时荧光定量PCR检测TLR3和TLR7 mRNA表达。结果 CHC患者TLR3和TLR7表达量与健康人群相比,差异均有统计学意义(t=38.73,6.16,P<0.05)。CHC患者中非绝经期女性TLR3和TLR7表达量与绝经期女性和青年男性相比,差异均有统计学意义(t=61.210,6.464,P<0.05; t=24.166,26.266,P<0.05)。CHC患者中老年男性TLR3和TLR7表达量与青年男性相比,差异均有统计学意义(t=86.349,19.583,P<0.05),而与绝经期女性相比,仅TLR3表达量差异有统计学意义(t=122.941,P<0.05)。不同性别和年龄CHC患者的TLR3,TLR7基因表达量与HCV-RNA载量均无相关性(|r|<0.40,P>0.05),但是青年女性CHC患者HCV含量均比青年男性和老年女性低,差异有统计学意义(t=3.49,2.51,P<0.05),老年男性患者HCV含量比青年男性低,差异有统计学意义(t=2.35,P<0.05),老年男性和女性CHC患者HCV-RNA含量差异无统计学意义(t=1.20,P>0.05)。结论 性别和年龄与CHC患者TLR的表达有一定的关系,为临床合理有效治疗CHC提供理论依据和新方法。     

The influence of growth hormone substitution therapy on erythroid and myeloid progenitor cells and on peripheral blood cells in adult patients with growth hormone deficiency

It has been reported that hypophysectomized rats exhibit normochromic, normocytic anaemia. Pancytopenia with impaired DNA synthesis in the bone marrow can be restored in these hypophysectomized rats by syngeneic pituitary grafts placed under the kidney capsule or treatment with growth hormone (GH). Until now, adults with hypopituitarism have received adequate replacement therapy with thyroxine, cortisol and sex steroids, but not with GH. We therefore investigated the effects of GH replacement therapy on the proliferation and differentiation of erythroid and myeloid progenitor and peripheral blood cells in 11 adult patients with growth hormone deficiency in a double-blind, placebo-controlled study for the first 6 months of therapy. The placebo group showed no changes during the first 6 months without therapy in either insulin-like growth factor I (IGF-I) levels, erythroid and myeloid progenitor precursor cells or peripheral blood cells. After commencement of GH therapy, IGF-I levels rose significantly during 24 months of therapy from 75.3±13.5 to 225±34.7ngmL^?1 (P<0.001). Erythroid and myeloid progenitor precursor cells showed a steep and significant increase after 18 and 24 months of therapy (erythroid: from 10.7±3.5 to 261.4±79.8, P<0.02, after 18 months and to 276.8±149.8 × 10⁵ mononuclear cell colonies, P<0.03, after 24 months; granulocyte–macrophage colony-forming units: from 39.7±9.8 to 316.9±124.6, P<0.002, after 18 months and to 366±188.7×10⁵ mononuclear cell colonies, P<0.03, after 24 months), whereas the peripheral red and white blood cells exhibited only minimal non-significant changes. The principal regulators of erythropoiesis, such as erythropoietin, and parameters reflecting erythropoiesis in the peripheral blood, such as reticulocytes, remained almost unchanged throughout the whole study period. We therefore conclude that patients with GH deficiency do not have anaemia, but have haematopoietic precursor cells in the lower normal range, and that GH substitution therapy over a period of 24 months has a marked effect on erythroid and myeloid progenitor precursor cells but only negligible effects on peripheral blood cells in GH-deficient adults.