大鼠增殖抑制基因表达变化与恶性脑胶质瘤生长的关系

目的:探讨大鼠增殖抑制基因(rat hyperplasia suppressor gene,rHSG)表达变化与恶性脑胶质瘤生长之间的关系,为外源性rHSG治疗提供实验依据.方法:采用立体定向法,于尾状核注射C6细胞建立SD大鼠脑胶质瘤动物模型;采用SABC免疫组织化学法检测注射C6细胞后第9、15和21天,脑胶质瘤中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、rHSG及微血管度(microvessel density,MVD)的表达;RT-PCR法检测不同生长期脑胶质瘤中rHSG mRNA的表达.结果:第9、15和21天脑胶质瘤中PCNA标记指数和MVD高于对照组,rHSG蛋白的表达低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组大鼠胶质瘤rHSG mRNA相对表达量分别为(13.53±2.11)%、(10.39±2.71)%和(8.86±1.91)%,低于对照组的(19.94±3.23)%.差异有统计学意义(P<0.05).结论:rHSG表达下调可能与大鼠脑恶性胶质瘤的发生、发展及血管增生有关,rHSG的高表达可能会抑制肿瘤的生长.     

RGS5表达变化和大鼠胶质瘤生长的关系

目的 探讨G蛋白信号调节因子5 (regulator of G protein signaling 5,RGS5)表达变化与大鼠胶质瘤生长之间的关系.方法 72只Sprague-Dawley (SD)大鼠随机平均分为胶质瘤组、生理盐水组、健康对照组、腺病毒-大鼠增殖抑制基因-绿色荧光蛋白重组复合物(adenovirus-rat hyperplasia suppressor gene-green fluorescent protein,Adv-rHSG-GFP)组.胶质瘤组和Adv-rHSG-GFP组建立大鼠C6胶质瘤动物模型,生理盐水组颅内注射10 μL生理盐水,健康对照组为健康大鼠.Adv-rHSG-GFP组在接种C6胶质瘤细胞后第4和11天,于肿瘤原位注射重组腺病毒Adv-rHSG-GFP.接种C6胶质瘤细胞后第9、15和21天取脑胶质瘤观察肿瘤的生长情况,免疫组织化学法检测RGS5蛋白的表达.结果 Adv-rHSG-GFP组肿瘤体积小于胶质瘤组(P＜0.01).生理盐水组和健康对照组无肿瘤生长.接种后第15和21天胶质瘤组RGS5蛋白表达均高于生理盐水组、健康对照组和Adv-rHSG-GFP组(均P＜0.01).结论 RGS5高表达与大鼠胶质瘤生长密切相关.     

光激活金丝桃素对大鼠C6胶质瘤抑制作用及其对bFGF和bFGF-R及MVD的影响

目的:研究金丝桃素被光激活后对C6胶质瘤的抑制作用及其对bFGF、bFGF-R和微血管密度(microvesseldensity,MVD)的影响。方法:将接种C6胶质瘤细胞后的40只Wistar大鼠随机分为5组,空白对照组、高和低剂量金丝桃素作用组、高和低剂量金丝桃素 光照组,16d后切取肿瘤组织,称质量计算抑瘤率,标本用SP法免疫组化染色,检测瘤组织中bFGF、bFGF-R和MVD。结果:1)光照下,当金丝桃素为0·8μg/mL时,抑瘤率为67·2%,金丝桃素为2·0μg/mL时抑瘤率为82·4%,非光照金丝桃素组对肿瘤无抑制作用。2)bFGF在各组大鼠C6胶质瘤组织中均有表达,表达值较高,各组间差异无统计学意义。空白对照组中bFGF-R表达较高,且微血管计数最多。金丝桃素 光照组中bFGF-R蛋白表达和MVD明显低于非光照组及对照组,P=0·019,P=0·007,呈剂量依赖关系。bFGF-R与肿瘤MVD呈正相关,rbFGF-R=0·85。结论:光激活金丝桃素对bFGF-R有抑制作用,对bFGF表达没有影响。光激活的金丝桃素能抑制大鼠C6胶质瘤生长的机制,可能是抑制肿瘤组织中bFGF-R后,阻止了bFGF发挥效应,抑制了肿瘤间质血管生成,而抑制肿瘤的生长。     

p16基因蛋白治疗胶质瘤的实验观察

[目的]探讨p16抑癌基因蛋白在体内对胶质瘤的治疗作用.[方法]将实验大鼠分成4组:对照组(接种C6胶质瘤细胞)、空载体组(接种C6胶质瘤细胞后再注射空载体cDNA)、治疗组(接种C6胶质瘤细胞后再注射p16混悬液)、转染组(接种已转染p16基因的C6胶质瘤细胞),每组大鼠各10只.对各组大鼠生态情况及生存期进行观察比较,并对各组大鼠进行动态MRI检测,标本进行免疫组化、原位杂交检测.[结果]转染组和治疗组大鼠生存时间较对照组明显延长.MRI检测显示与对照组比较,治疗组大鼠肿瘤生长缓慢,转染组大鼠肿瘤形成不良.免疫组化显示对照组大鼠肿瘤组织p16蛋白表达阴性,但治疗组和转染组大鼠肿瘤组织p16蛋白表达明显.[结论]动物实验表明p16蛋白具有抑制胶质瘤细胞生长作用.     

冷冻治疗抑制大鼠C6脑胶质瘤增殖的实验研究

目的：研究冷冻治疗对大鼠C6脑胶质瘤的增殖抑制作用及其机制。方法：建立大鼠C6脑胶质瘤模型，冷冻治疗后免疫组化检测CyclinD1蛋白的表达，流式细胞仪检测细胞周期的变化，磁共振检测肿瘤体积变化。结果：与对照组比较，冷冻治疗后CyclinD1蛋白的表达下调，细胞周期出现G1期阻滞，肿瘤体积缩小。结论：冷冻治疗可抑制大鼠C6脑胶质瘤的增殖，其机制与下调CyclinD1蛋白的表达后，肿瘤细胞周期发生G1期阻滞有关。     

PDGF-B链基因的TFO对大鼠脑胶质瘤细胞增殖和凋亡影响

目的观察原位注射血小板源生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)B链基因的三链形成寡核苷酸(Triplex forming oligonucleotide,TFO)对荷瘤大鼠胶质瘤细胞增殖和凋亡影响.方法所有大鼠均在立体定向导引下右尾状核区微量灌注1×106C6胶质瘤细胞,其中实验Ⅰ和Ⅱ组在细胞接种后的第8天开始分别在肿瘤部位注射TFO 1.5 mg/20 μL和3.0 mg/20μL的生理盐水,以后每隔72 h原位注射相同剂量的TFO,共注射3次.对照组仅在相同时间原位注射20 μL生理盐水.实验至3周时处死所有的大鼠,观察肿瘤的生长情况,定性和定量观察肿瘤PDGF-B的表达、PCNA表达及细胞凋亡.结果实验Ⅰ组的成瘤抑制率为66.1%,实验Ⅱ组为91.8%.TFO对C6胶质瘤细胞PDGF-B、PCNA表达有明显的抑制作用;TFO能使C6胶质瘤细胞凋亡增加,以上作用均存在浓度依赖性.结论原位应用TFO能抑制PDGF-B表达,使胶质瘤细胞增殖降低、细胞凋亡增加,TFO能取得很好的抗胶质瘤生长的治疗效果.     

骨髓间充质干细胞表达外源性IL-12对胶质瘤C6细胞增殖的影响

目的: 探讨以骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs) 为基因治疗载体表达外源性IL-12对胶质瘤C6细胞增殖的影响.方法:分离培养大鼠MSCs, 腺病毒介导IL-12基因转染大鼠MSCs(AdIL-12-MSCs),RT-PCR 及Western Blotting检测AdIL-12-MSCs中IL-12基因mRNA及蛋白表达.MTT法检测AdIL-12-MSCs分泌的外源性IL-12对C6胶质瘤细胞增殖活性的影响,光镜下观察外源性IL-12对C6细胞形态的影响.结果:腺病毒介导IL-12基因成功转染MSCs形成AdIL-12-MSC,其IL-12基因在mRNA及蛋白水平均有明显表达.AdIL-12-MSC分泌的外源性IL-12显著抑制胶质瘤C6细胞的增殖(P<0.05).结论:转染IL-12的MSCs(AdIL-12-MSC)能够在mRNA及蛋白水平表达外源性IL-12基因,显著抑制胶质瘤C6细胞的增殖.     

冷冻联合rhTNF-α对C6大鼠脑胶质瘤细胞的凋亡诱导和增殖抑制作用

 目的探讨冷冻联合rhTNF-α对C6大鼠脑胶质瘤细胞凋亡的影响及对肿瘤生长的抑制作用。方法建立大鼠脑胶质瘤模型,待肿瘤长至第15天,随机将荷瘤鼠分为4组:G1、G2、G3、G4分别为盐水组、冷冻治疗组、rhTNF-α治疗照组及联合治疗组,同时分别行相应的治疗。于治疗后第15天取材,以TUNEL法与流式细胞仪联合检测肿瘤细胞的凋亡,采用免疫组化观察PCNA的表达,计算抑瘤率。结果联合治疗组肿瘤细胞凋亡情况与其他各组相比有显著差异(P<0.01),PCNA的表达明显减少(P<0.01),且该组对肿瘤生长的抑制率(60.38%)明显大于冷冻组(42.69%)和TNF-α组(21.68%),且大于理论抑瘤率(55.11%)。结论冷冻和rhTNF-α对C6大鼠脑胶质瘤细胞的生长均有抑制作用,同时可诱导其凋亡,两者联用抗肿瘤作用进一步加强,具有协同作用,可能成为胶质瘤治疗的一种新策略。     

塞来昔布对Lewis肺癌组织COX-2、VEGF、MVD、MMP-2表达的影响

目的探讨选择性环氧化酶(COX)-2抑制剂塞来昔布对Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及其对肿瘤组织V.EGF、MVD、MMP-2表达的影响.方法将C57BL/6小鼠随机分为药物组和对照组,药物组于接种Lewis肺癌细胞后第二天开始给予含1/1 000塞来昔布的食物,连续24 d,计算抑瘤率.采用免疫组化的方法研究COX-2、VEGF、MVD、MMP-2的表达.并采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术研究VEGF、MMP-2 mRNA的表达.结果含1/1 000塞来昔布食物饲养对Lewis肺癌移植瘤有明显抑制作用,抑瘤率为60.1%.免疫组化结果显示药物组肿瘤组织的COX-2积分平均值低于对照组,但无统计学差异(P＞0.05).药物组与对照组的VEGF积分为2.00±0.82和2.90±0.88(P＜0.05),MVD平均值为16.70±7.77和23.15±4.58(P＜0.05).但药物组与对照组比较,MMP-2的表达无显著性差异.RT-PCR结果表明药物组VEGF mRNA表达较对照组明显下调,而MMP-2 mRNA表达无明显改变.结论塞来昔布对Lewis肺癌移植瘤有明显抑制作用.其作用途径可能是通过抑制COX-2的活性,进而抑制VEGF的表达,减少新生血管形成,抑制肿瘤的生长.抑制肿瘤血管生长可能是塞来昔布肿瘤生长的又一机制.     

RI基因真核表达载体的构建及其对C6胶质瘤细胞生长的影响

目的通过构建核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor, RI)基因的真核表达载体——pLNCX-ri, 并转染C6神经胶质瘤细胞,探讨RI抑制肿瘤生长的作用机制.方法用Nde I / Xho从已构建的pET-ri上切下1.4 kb的RI基因片段,再构建到pLNCX上,获得真核表达载体(pLNCX-ri),采用Lipofect AMINE辅助转染大鼠C6神经胶质瘤细胞,经G418筛选获得稳定转染的细胞克隆,用Western blotting 检测RI基因的表达水平.将转染阳性的C6神经胶质瘤细胞接种于大鼠皮下,观察肿瘤的生长情况.结果在转染的C6神经胶质瘤细胞中,RI基因的表达量明显高于未转染的C6神经胶质瘤细胞,转染阳性的C6神经胶质瘤细胞在大鼠体内的成瘤潜伏期23±5.7天(对照组14±3.5天),瘤组织重量转染组1.35±0.43g比对照组2.40±0.61g(P＜0.01)明显下降,瘤组织的血管密度转染组27.2±4.31比对照组47±6.54(P＜0.01)明显减少.结论RI基因的转染对肿瘤的生长有明显抑制作用,其作用机制可能是抑制肿瘤组织血管的形成.     

蒿甲醚抗SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成的 实验

 目的探讨蒿甲醚（Artemether）抗SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度蒿甲醚对大鼠C6脑胶质瘤细胞株的生长抑制作用,计算半数抑制浓度(IC₅₀)。采用立体定位仪在SD大鼠大脑皮质层接种C6脑胶质瘤细胞（1×10⁶/μl）40只,雌、雄各半;随机分为5组,每组8只。在接种第3天后,各组采用灌胃给药法连续给药10天。于接种后的第20天解剖大鼠,经活体左心室灌注4%多聚甲醛,固定肿瘤的全脑标本。在大鼠脑部接种穿刺点做冠状切口,按垂直和水平方向测量肿瘤大小。肿瘤体积=a²bπ∕6(a为肿瘤的短径,b为肿瘤的长径)。全脑标本用4%多聚甲醛固定,肿瘤组织做病理观察,免疫组化方法检测移植瘤组织微血管密度。结果各实验组血管计数分别为Ⅰ组（39±4）,Ⅱ组（29±6）,Ⅲ组（12±8）,Ⅳ组（10±5）,生理盐水组为（52±7）。各实验组血管计数均明显少于生理盐水对照组,差异有统计学意义(分别P<0.05, P<0.01)。各实验组SD大鼠原位脑胶质瘤体积较对照组显著减小。结论在一定剂量范围内,蒿甲醚具有明显抑制SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成作用;蒿甲醚抑制原位脑胶质瘤生长和转移的机制之一是透过血脑屏障抑制脑胶质瘤血管生成。     

贝伐单抗动脉介入超选化疗对大鼠脑胶质瘤的影响

目的：探讨贝伐单抗动脉介入超选化疗对大鼠脑胶质瘤的影响。方法：移植脑胶质瘤大鼠模型建立成功后,随机分成对照组（经尾静脉注射等量生理盐水）、静脉注射顺铂组（V+CDDP）、静脉注射贝伐单抗组（V+BVZ）、动脉注射顺铂组（A+CDDP）、动脉注射贝伐单抗组（A+BVZ）,给药（均为5 mg/kg）7 d后测量胶质瘤体积,并采用Real time-PCR和Western blot检测脑胶质瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）、P21、Bcl-2和金属基质蛋白2（MMP-2）的mRNA和蛋白表达情况。结果：A+CDDP组肿瘤体积[（5.58±0.37）mm³]较V+CDDP组小[（7.67±0.70）mm³],A+BVZ组肿瘤体积[（4.81±0.20）mm³]较V+BVZ组小[（6.57±0.69）mm³],差异均具有统计学意义（P均 < 0.01）。同时,V+BVZ组肿瘤体积显著小于V+CDDP组（P < 0.01）,A+BVZ组肿瘤体积显著小于A+CDDP组（P < 0.05）,与静脉注射相比,动脉注射组VEGF、Bcl-2和MMP-2 mRNA和蛋白的表达均显著降低（P < 0.05）,P21 mRNA和蛋白的表达显著升高（P < 0.05）。与注射CDDP相比,注射BVZ组VEGF、Bcl-2和MMP-2 mRNA和蛋白含量均显著降低（P < 0.05）,P21 mRNA和蛋白表达均显著升高（P < 0.05）。结论：应用BVZ动脉介入超选化疗,能有效控制脑胶质瘤的大小,从而达到较好的治疗效果。     

125IUdR偶联c-myb反义寡核苷酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞增殖的影响及其相关机制

目的:探讨125IUdR偶联c-myb反义寡核苷酸对C6脑胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:60只大鼠随机余数法分成对照组、c-myb-ASODN处理组和125IUdR-ASODN处理组。MTT和TUNEL法检测各组大鼠肿瘤细胞增殖抑制率和凋亡率;免疫组化法检测Bax和Bcl-xl蛋白表达;RT-PCR法检测BaxmRNA和Bcl-xlmRNA含量;Western-blot法检测c-myb蛋白表达。结果:125IUdR-ASODN处理组C6胶质瘤细胞的增殖抑制率和细胞凋亡率(69·81%和11·03%)增高均较c-myb-ASODN处理组(40·37%和6·48%)增高,P均<0·01;与对照组凋亡率(0·95%)比较,差异有统计学意义,P均<0·01。c-myb-ASODN处理组和125IUdR-ASODN处理组C6胶质瘤细胞的Bax蛋白194·6±6·25增高及Bcl-xl蛋白59·0±3·56下降较ASODN组Bax蛋白147·4±5·23增高及Bcl-xl蛋白83·9±3·93下降,P均<0·01;125IUdR-ASODN和ASODN处理组BaxmRNA表达随着时间延长而显著升高,Bcl-xlmRNA及c-myb蛋白表达随着时间延长而显著下降,P均<0·01;且125IUdR-ASODN的作用明显强于c-myb-ASODN,P<0·01。结论:c-myb-ASODN和125IUdR-ASODN均具有促进C6胶质瘤细胞凋亡和抑制其增殖的作用,且125IUdR-ASODN的作用更为显著;c-myb-ASODN和125IUdR-ASODN可能通过Bax/Bcl-xl途径诱导C6胶质瘤细胞凋亡,其对Bax和Bcl-xl的调节发生在转录水平前的某一环节。     

重组肿瘤抑素血管生成抑制相关肽对裸鼠移植性卵巢癌的抑制作用

目的 观察肿瘤抑素改造后所得血管生成抑制相关肽(21肽)的抗血管生成活性及对裸鼠移植卵巢癌的抑制作用.方法 用亲和层析法纯化21肽.观察接种SKOV3细胞系的裸鼠经21肽治疗后的肿瘤生长情况,检测21肽对肿瘤组织的微血管密度和免疫组织化学指标的影响.结果 经21 d的治疗后,21肽组平均抑瘤率可达53.17%.21肽组肿瘤组织微血管密度(CD34表达)为6.324±1.643,与对照组(16.127±2.535)比较明显降低(P＜0.05).21肽组肿瘤组织的增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)呈低表达(P＜0.01),而基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)呈高表达(P＜0.01).结论 21肽具有显著的抗血管生成活性,对卵巢癌具有较好的抑制作用,其抑制卵巢癌的作用机制可能与其降低新生血管形成和调解血管生成相关因子的表达有关.     

沉默PCAF基因抑制人肾上腺皮质癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的实验研究

目的 探讨靶向沉默肾上腺皮质癌SW13细胞PCAF基因表达对裸鼠移植瘤生长以及血管生成的抑制作用及其机制。方法 pLenti6.3-MiRNA-PCAF重组慢病毒及pLenti6.3-MiRNA-NC重组慢病毒分别感染SW13细胞,将感染后的两组细胞及未处理的SW13细胞分别接种于15只裸鼠腋下,构建裸鼠移植瘤模型,分为实验组、阴性对照组、空白对照组,并观察各组肿瘤生长情况。Western blot、荧光定量PCR检测移植瘤组织PCAF蛋白、mRNA表达水平,HE染色法观察各组移植瘤组织形态学变化,免疫组织化学法检测VEGF表达及微血管密度。结果 实验组小鼠的肿瘤体积较阴性对照组和空白对照组显著缩小,肿瘤抑制率分别为49.2%和52.9%;PCAF蛋白相对表达水平较阴性对照组下降58.4%,mRNA相对表达水平较阴性对照组下降74.3%;实验组与阴性对照组和空白对照组相比,瘤内VEGF蛋白表达明显下调;实验组微血管密度（19.4±4.2）与阴性对照组（42.7±6.5）和空白对照组（51.3±8.6）相比明显下降。结论 慢病毒介导的pLenti6.3-MiRNAPCAF能有效抑制肾上腺皮质癌细胞裸鼠移植瘤的生长及血管生成。     

Survivin expression and its relation with proliferation, apoptosis, and angiogenesis in brain gliomas

BACKGROUND: An unbalance of cell proliferation and cell apoptosis is an important mechanism in carcinogenesis, and angiogenesis also plays a crucial role in tumorigenesis. Recently, survivin has been identified as an important member of the inhibitor of apoptosis protein (IAP) family. Although it has been shown that survivin is highly expressed in gliomas, and is associated with tumorigenesis, progression, and poor prognosis of gliomas, as yet the relation of survivin expression with proliferation, apoptosis, and angiogenesis of gliomas it is still unclear. METHODS: Eighty-three cases of brain glioma were chosen and protein expressions of survivin and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in glioma cells and Factor VIII-related antigen (FVIII-RAg) in vascular endothelial cells were investigated by immunohistochemistry. Apoptotic cells of brain glioma were screened by TdT-mediated dUTP nick end-labeling (TUNEL), and survivin immunoreactivity score (IRS), proliferative index (PI), apoptotic index (AI), overall daily growth (ODG), and microvessel density (MVD) in brain gliomas were measured. RESULTS: The survivin IRS, PI, AI, ODG, and MVD of brain gliomas were 3.75 +/- 3.89, 28.39 +/- 19.49%, 1.00 +/- 0.80%, 12.19 +/- 10.21%, and 62.75 +/- 31.50, respectively, and all of them increased markedly with an increase in the pathologic grade of brain gliomas (P < 0.001 for all). PI, ODG, and MVD in the survivin-positive group were significantly higher than those in the survivin-negative group (P < 0.001 for all). PI, ODG, and MVD were positively correlated with survivin IRS (P < 0.001 for all). Although there was no significant difference between AI in the survivin-positive group or in the survivin-negative group (P = 0.108), AI was inversely correlated with survivin IRS (P = 0.005). CONCLUSIONS: Survivin is overexpressed in brain gliomas, which may play an important role in malignant proliferation, antiapoptosis, and angiogenesis of brain gliomas.     

替莫唑胺通过调控miR-216a/PRKCA抑制胶质瘤细胞U251增殖和侵袭作用的研究

目的:探讨替莫唑胺抑制胶质瘤细胞U251增殖和侵袭的作用,推测其作用机制是通过微小RNA-216a（microRNA-216a,miR-216a）/蛋白激酶Cα(protein kinase C-alpha,PRKCA)进行调控。方法:体外培养胶质瘤细胞U251,用不同剂量替莫唑胺染毒48 h后,构建野生型PRKCA 3' UTR-荧光素酶报告载体及检测荧光素酶活性,检测替莫唑胺对胶质瘤细胞U251增殖和侵袭的影响及miR-216a和PRKCA表达的影响。结果:miR-216a mimics使野生型PRKCA 3' UTR-荧光素酶报告载体的活性下降了47.52%,差异具有统计学意义（P＜0.05）;miR-216a mimics使突变型PRKCA 3' UTR-荧光素酶报告载体的活性下降不显著,差异无统计学意义（P＞0.05）。与空白对照组比较,低、中、高剂量组胶质瘤细胞U251增殖率、侵袭细胞数、PRKCA mRNA相对表达量和PRKCA蛋白表达量均降低,miR-216a mRNA相对表达量均增高,差异具有统计学意义（P＜0.05）;随着替莫唑胺剂量的增加,胶质瘤细胞U251增殖率、侵袭细胞数、PRKCA mRNA相对表达量和PRKCA蛋白表达量随之降低,miR-216a mRNA相对表达量随之增高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论:替莫唑胺可以通过促进miR-216a的表达而抑制PRKCA的表达,降低胶质瘤细胞U251增殖和侵袭。     

膀胱移行细胞癌增殖细胞核抗原与肿瘤间质微血管密度的表达与临床及预后的意义

目的：探讨膀胱移行细胞癌组织中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）与肿瘤间质微血管密度（ＭＶＤ）的表达及其临床与预后的意义。方法：对７２例膀胱移行细胞癌进行ＰＣＮＡ及第Ⅷ因子相关抗原（ＶＷＦＬ：Ａｇ）单克隆抗体免疫组化染色。结果：ＰＣＮＡ增殖指数与肿瘤间质微血管密度之间存在正相关性,二者的表达皆与膀胱移行细胞癌的病理分级显著相关,１级与２级、２级与３级之间存在显著性差异（Ｐ〈０．０１）,侵袭性肿瘤明显高于线     

Galectin-3调控Wnt信号通路对脑胶质瘤细胞凋亡的影响

目的:半乳糖凝集素-3（Galectin-3）调控Wnt信号通路对人脑胶质瘤细胞凋亡的影响。方法:RT-PCR及Western blot检测人脑胶质瘤组织中Galectin-3的mRNA和蛋白表达;Western blot检测人脑胶质瘤U251、U87、SHG-44细胞中Galectin-3的蛋白表达;将Galectin-3的特异性siRNA(Galectin-siRNA)转染人脑胶质瘤U87细胞,Western blot、流式细胞术分别检测转染48 h后Galectin-3、Wnt5a、β-catenin和Cleaved caspase3蛋白表达及细胞凋亡率。结果:Galectin-3在人脑胶质瘤组织mRNA和蛋白表达均显著高于瘤旁组织（P＜0.01）;U251、U87、SHG-44细胞中Galectin-3蛋白表达从高到低为U87>U251>SHG-44,选择U87细胞作为后续研究;Galectin-3-siRNA1的Galectin-3蛋白表达最低,选择作为后续研究;NC-siRNA组细胞凋亡率、Cleaved caspase3、Wnt5a、β-catenin蛋白表达与对照组差异不显著（P＞0.05）,与对照组比较,Galectin-3-siRNA组细胞凋亡率明显升高,Cleaved caspase3蛋白表达明显升高,Wnt5a和β-catenin蛋白表达明显降低（P＜0.01）。结论:沉默Galectin-3表达可诱导人脑胶质瘤细胞凋亡,机制可能与Wnt信号通路的下调有关。