维甲酸诱导HL-60细胞分化中对细胞周期素依赖性激酶活性的影响

目的探讨维甲酸（ＲＡ）对ＨＬ６０细胞的增殖抑制和诱导分化作用与细胞周期素依赖性激酶（ＣＤＫ）活性变化的相关性。方法用５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）或芳维甲（ＡＥ）处理ＨＬ６０细胞１～４天,在观察细胞生长、四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原实验以及细胞周期分析的基础上,用组蛋白Ｈ１激酶活性分析技术检测ＣＤＫ２的活性,免疫沉淀法分析结合于ＣＤＫ２和ＣＤＫ４上的相应的细胞周期素（ｃｙｃｌｉｎ）Ｅ和Ｄ的量。结果ＨＬ６０细胞在ＡＴＲＡ或ＡＥ作用下,细胞增殖减慢,对ＮＢＴ的还原能力明显增强,９０％左右的细胞被阻滞在Ｇ１／Ｇ０期;在Ｇ１到Ｓ期转换过程中起关键作用的ｃｙｃｌｉｎＥ／ＣＤＫ２的活性显著下降,结合于ＣＤＫ４上的ｃｙｃｌｉｎＤ１的量减少。结论ＲＡ抑制ＨＬ６０细胞增殖并诱导其分化可能与ＣＤＫ２和ＣＤＫ４的活性下降有密切关系     

非霍奇金淋巴瘤p27kip1、p57kip2及细胞周期蛋白D1的表达及其临床意义

ｐ2 7ｋｉｐ1ｐ5 7ｋｉｐ2 均为细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(ＣＤＫＩ)Ｋｉｐ家族成员 ,它们的过度表达可使细胞停止在Ｇ1期 ,防止细胞过度增殖 ,是两个新的抑癌基因 ,参与人体多种恶性肿瘤细胞增殖和分化调控。细胞周期蛋白Ｄ1(ｃｙｃｌｉｎＤ1)是Ｇ1期相关的细胞周期蛋白之一 ,它促进Ｇ1→Ｓ期的转变而使细胞持续增殖 ,被认为是一种原癌基因[1] 。我们通过观察ｐ2 7ｋｉｐ1、ｐ5 7ｋｉｐ2 及ｃｙｃｌｉｎＤ1在非霍奇金淋巴瘤 (ＮＨＬ)中的表达情况 ,分析其与临床病理的关系和对治疗与预后的影响。材料和方法1　病例　收集 1990～ 2 0 0 …     

细胞周期蛋白E与白血病

白血病细胞的细胞周期存在异常调节。细胞周期蛋白(ｃｙｃｌｉｎ)与细胞周期蛋白依赖激酶 (ｃｙｃｌｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅ,ＣＤＫ)结合 ,形成细胞周期调节复合物 (ｃｙｃｌｉｎ ＣＤＫ) ,激活ＣＤＫ ,使ｃｙｃｌｉｎ ＣＤＫ具酶活性 ,催化相应底物磷酸化是细胞周期进展所必需。ｃｙｃｌｉｎＥ属于Ｇ1期细胞周期的正调节因子 ,参与Ｇ1/Ｓ转换点功能的调控 ,与其他参与Ｇ1/Ｓ转换点功能调控的因子ｃｙｃｌｉｎＤＳ、抑癌基因视网膜神经胶质细胞瘤蛋白(ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａｐｒｏｔｅｉｎ ,ｐＲｂ)、转录因子Ｅ2Ｆ、抑…     

外套细胞淋巴瘤细胞周期蛋白D1基因原位检测及病理形态学研究

外套细胞淋巴瘤 (ｍａｎｔｌｅｃｅｌｌｌｙｍｐｈｏｍａ,ＭＣＬ)是一种具有特殊病理形态学、特异免疫表型及特征性分子遗传学改变[ｔ(11;14) ]的Ｂ细胞淋巴瘤。 1994年 ,国际淋巴瘤研究组制定的淋巴组织肿瘤欧美修订分类方案已将ＭＣＬ作为一种独立的淋巴瘤亚型列出[1] 。 90年代初 ,有作者注意到ＭＣＬ存在细胞周期蛋白Ｄ1(ＣｙｃｌｉｎＤ1)的过度表达 ,并认为是ＭＣＬ特征性的分子遗传学改变[2 ] 。我们用ＦＩＴＣ标记的ＣｙｃｌｉｎＤ1基因组探针 ,检测来自于一例ＭＣＬ患者的肿瘤组织切片中Ｃｙ ｃｌｉｎＤ1基因拷贝 ,并对ＭＣＬ的组织…     

p16、CyclinD1及nm23在非小细胞肺癌中的表达

目的 研究非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）组织中ｐ１６、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及ｎｍ２３基因蛋白的表达和意义。方法 应用免疫组化ＳＰ方法检测６４例ＮＳＣＬＣ中ｐ１６、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及ｎｍ２３蛋白的表达。结果 ｐ１６、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及ｎｍ２３在ＮＳＣＬＣ中的表达率分别为４２．２％、６５．６％、５３．１％;ｐ１６蛋白阳性表达率与ＮＳＣＬＣ的分化程度和患者术后生存期呈正相关（Ｐ〈０．０５）;ｐ１６、ｎｍ２     

再生障碍性贫血患者细胞免疫功能与造血细胞因子的研究

目的：进一步探讨再生障碍性贫血（再障）的免疫发病机制，阐明细胞免疫、造血细胞因子在再障患者中发生变化的基础与临床意义。方法：用单抗试剂盒，采用改良ＡＰＡＡＰ法及酶联免疫试剂盒，采用ＥＬＩＳＡ法对３８例再障患者及２０名正常人外周血Ｔ细胞亚群，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达以及外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）培养上清诱生Ｇ－ＣＳＦ、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平进行测定。结果：再障患者外周血ＣＤ４细胞减低、ＣＤ８细胞增高、ＣＤ４／ＣＤ８降低或倒置，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达率增高。再障患者ＰＢＭＮＣ培养上清中Ｇ－ＣＳＦ阳性率减低，ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平增高。相关分析发现Ｇ－ＣＳＦ与ＣＤ４细胞及ＣＤ４／ＣＤ８呈正相关，而与ＩＦＮα呈负相关；ＩＬ－６与白细胞数及ＣＤ４细胞呈负相关；ＴＮＦα与ＣＤ８细胞呈正相关而与ＣＤ４／ＣＤ８呈负相关；ＩＬ－８与ＣＤ８细胞及ＨＬＡ－ＤＲ呈正相关。结论：细胞免疫功能异常及细胞因子网络失调在再障发病中起一定的作用。     

肺癌组织中细胞周期蛋白D1的检测及其意义

检测细胞周期蛋白Ｄ１（ＣｙｃｌｉｎＤ１）在肺癌及癌前病变和正常肺组织的表达,探讨它在肺癌诊断中的作用及其与生物学行为的关系。方法收集肺癌及癌前病变和正常肺组织,采用免疫组化ＳＰ法检测ＣｙｃｈｎＤ１的表达。结果正常肺组织和鳞状化生的支气管上皮未见ＣｙｃｌｉｎＤ１表达,在轻－中－重度不典型增生、原位癌、浸润癌,ＣｙｃｌｉｎＤ１表达的阳性率逐渐升高,阳性细胞数也增多,肺癌组织中ＣｙｃｌｉｎＤ１表达的总阳性率为５６．４％。低分化癌的阳性率高于中高分化癌（Ｐ＜０．０５）：无论鳞癌还是腺癌,ＣｙｃｌｉｎＤ１阳性组的增殖活性高于阴性组（Ｐ＜０．０５）。肺鳞癌有淋巴结转移组ＣｙｃｌｉｎＤ１的阳性率高于无转移组（Ｐ＜０．０５）。结论ＣｙｃｌｉｎＤ１表达与肺癌的发生和增殖有关,而且ＣｙｃｌｉｎＤ１表达是支气管粘膜上皮癌变的早期事件,提示ＣｙＣｌｉｎＤ１可作为判断肿瘤发生可能性的标记物,在肺癌的早期诊断中可能具有重要意义。ＣｙＣｌｉｎＤ１表达与肺鳞癌分化不良及淋巴结转移有关,可能是预后不良的标志。     

造血干细胞移植后移植物抗宿主病患者CD158的表达

杀伤细胞抑制物受体 (Ｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒｓ,ＫＩＲ)主要表达于ＮＫ和Ｔ细胞表面 ,可与靶细胞ＭＨＣⅠ类分子特异性识别并产生负性信号 ,抑制对靶细胞的细胞毒活性[1 ,2 ] 。已在小鼠和人同种造血干细胞移植 (ＨＳＣＴ)中观察到ＮＫ细胞、Ｔ细胞表达ＫＩＲ与移植物抗宿主病 (ＧＶＨＤ)有关[3 ,4] 。外周血造血干细胞移植 (ＰＢＳＣＴ)和脐血移植 (ＵＢＣＴ)中 ,尽管是供受者间ＨＬＡ全相合 ( Ａ、 Ｂ、 ＤＲ、 ＤＱ) ,ＧＶＨＤ仍是同种ＨＳＣＴ的主要障碍。因此 ,探讨ＨＬＡ Ｃ位点特异性识别分子ＣＤ1…     

新维甲类化合物联合γ干扰素对U937细胞增殖分化作用及其机制 …

目的：了解新维甲类化合物联合γ干扰素（ＩＦＮ－γ）对Ｕ９３７细胞的增殖分化作用及其机制。方法：检测Ｕ９３７细胞ＮＢＴ阳性率、细胞表面ＣＤ１４和ＣＤ６８表达、ｃ－ｍｙｃ和细胞周期变化，研究新维甲类化合物Ｒ９１５８和ＹＳ９０４０１２分别联合ＩＦＮ－γ对Ｕ９３７细胞增殖分化的作用。结果：先用维甲类化合物作用２４一换用ＩＦＮ－γ诱导Ｕ９３７细胞分化，有明显的协同作用，若用相反顺序处理，它们的协同作用明显降     

临床免疫学检验的进展

1　淋巴细胞亚群1 1　Ｔ淋巴细胞与Ｂ淋巴细胞表 1　人成熟Ｔ、Ｂ淋巴细胞表面标志的区别标　　志　ＴＢ标　　志　ＴＢ抗原受体其他受体　ＴＣＲ + -　组织胺受体 (Ｈ1 、Ｈ2 ) + -　ＢＣＲ - +　ＡＦＰ受体 (+ ) -Ｆｃ受体细胞表面抗原　ＦｃγＲⅡ - +ＣＤ2 + -　ＦｃγＲⅢ (+ )Ｔγ -ＣＤ3 + -　ＦｃμＲ (+ )Ｔμ +ＣＤ4 (+ ) -　ＦｃαＲ - +ＣＤ5+ (+ )　ＦｃεＲ - +ＣＤ6 + -补体受体ＣＤ7 + -　ＣＲ1(+ ) (+ )ＣＤ8(+ ) -　ＣＲ2 - +ＣＤ19- +　ＣＲ3 (+ ) -ＣＤ2 0 - +　Ｈ Ｒ(β1 Ｈ Ｒ) - +ＣＤ2 1- +　Ｃ1ｑ Ｒ - +ＣＤ2 2 -…     

新维甲类联合γ干扰素对急性单核细胞白血病细胞增殖分化作用的体外研究

目的探讨新研制的维甲类查尔酮酸Ｒ９１５８和ＹＳ９０４０１２联合γ干扰素（ＩＦＮγ）在急性单核细胞白血病分化疗法中的应用价值。方法应用细胞形态学、四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原反应和非特异酯酶乙酸萘酚（ＤＣＥ）、细胞分化免疫表型ＣＤ１４和ＣＤ６８、ＣＦＵＬ集落形成抑制率等变化，体外研究其对６例急性单核细胞白血病患者白血病细胞的增殖分化作用。结果经ＹＳ９０４０１２联合ＩＦＮγ处理后，单核细胞由原始阶段变成较成熟的单核细胞，ＮＢＴ还原反应阳性率和ＤＣＥ分别由２３．４％和２５０％上升到６１．５％和５２．０％，ＣＤ１４和ＣＤ６８表达增强，ＣＦＵＬ集落增殖明显受抑。通过比较，ＹＳ９０４０１２联合ＩＦＮγ诱导细胞分化和抑制集落形成活性优于Ｒ９１５８和全反式维甲酸联合用药组（Ｐ＜０．０１）。结论ＹＳ９０４０１２联合ＩＦＮγ诱导分化治疗单核细胞白血病可能有一定临床实用价值。     

rhTNF—a对HL—60细胞分化诱导与c—myc基因转录变化的研究

应用细胞总ＲＮＡ点杂交技术，以３２Ｐ标记ｖ－ｍｙｃ ＤＮＡ为探针，研究了小剂量ｒｈＴＮＦ－ａ诱导ＨＬ－６０白血病细胞分化过程中对其ｃ－ｍｙｃ癌基因转录水平的影响。结果发现：１－１００Ｕ／ｍｌ的ＴＮＦ可明显抑制ＨＬ－６０细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ水平。ｃ－ｍｙｃ 转录降低与ＴＮＦ作用的剂量和时间具有依赖关系。采用ＨＬ－６０细胞低ＦＣＳ培养法，比较低浓度ＦＣＳ，ＦＮＦ对－６０细胞分化诱导和增殖抑制作用与     

新维甲类化合物联合γ干扰素对U937细胞增殖分化作用及其机制的研究

目的：了解新维甲类化合物联合γ干扰素（ＩＦＮ－γ）对Ｕ９３７细胞的增殖分化作用及其机制。方法：检测Ｕ９３７细胞ＮＢＴ阳性率、细胞表面ＣＤ１４和ＣＤ６８表达、ｃ－ｍｙｃ和细胞周期变化，研究新维甲类化合物Ｒ９１５８和ＹＳ９０４０１２分别联合ＩＦＮ－γ对Ｕ９３７细胞增殖分化的作用。结果：先用维甲类化合物作用２４小时后换用ＩＦＮ－γ诱导Ｕ９３７细胞分化，有明显的协同作用；若用相反顺序处理，它们的协同作用明显降低。新维甲类化合物２４小时内能使细胞积聚于Ｇ０／Ｇ１期，下调ｃ－ｍｙｃ基因。ＹＳ９０４０１２活性稍强。结论：新维甲类联合ＩＦＮ－γ有协同诱导Ｕ９３７细胞分化的作用。维甲类化合物主要作用于细胞的早期阶段；ＩＦＮ－γ主要在后期起作用。早期应用维甲类化合物在促进细胞分化中具有重要的作用。     

肿瘤标志物Cyclin D1与肿瘤预后相关性

Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１是一种重要的细胞增殖因子，是近几年才被确定的原癌基因，它通过促进Ｇ１－Ｓ期的转变而促进细胞周期。多种研究表明Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因扩增和（或）过表达与肿瘤发生、进展及预后有关。本文就Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１与肿瘤预后相关性作一文献回顾。     

细胞因子对白血病细胞B7-1基因表达及诱导外周血T细胞活化的影响

目的：观察γ干扰素（ＩＦＮγ）、白细胞介素（ＩＬ）１０、ＩＬ１２对转染Ｂ７１白血病细胞Ｂ７１基因表达及其诱导健康人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）产生ＩＦＮγ、ＩＬ２的影响。方法：用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）和酶联免疫吸附反应（ＥＬＩＳＡ）方法检测ＩＦＮγ、ＩＬ２基因表达和蛋白质合成。结果：发现ＩＦＮγ、ＩＬ１２增强ＰＢＭＣ产生ＩＬ２、ＩＦＮγ，ＩＬ１０抑制其产生，同时发现ＩＦＮγ、ＩＬ１２增强转染Ｂ７１白血病细胞Ｂ７１基因表达，ＩＬ１０抑制其表达。结论：细胞因子ＩＦＮγ、ＩＬ１０、ＩＬ１２影响转染Ｂ７１白血病细胞诱导ＰＢＭＣ产生ＩＦＮγ、ＩＬ２，其可能是通过影响Ｂ７１基因表达实现的     

维甲酸、砷剂及柔红霉素对NB4细胞组织因子表达的影响

目的　探讨全反式维甲酸（ Ａ Ｔ Ｒ Ａ） 、三氧化二砷（ Ａｓ２ Ｏ３） 及柔红霉素（ Ｄ Ｎ Ｒ） 对急性早幼粒细胞白血病（ Ａ Ｐ Ｌ） 细胞株 Ｎ Ｂ４ 细胞组织因子（ Ｔ Ｆ） 表达的影响。方法　用复钙时间检测 Ｎ Ｂ４ 细胞的促凝活性（ Ｐ Ｃ Ａ） ;用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方法检测其 Ｔ Ｆ 抗原;用逆转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ） 检测 Ｔ Ｆｍ Ｒ Ｎ Ａ的转录水平。结果　 Ａ Ｔ Ｒ Ａ 和 Ａｓ２ Ｏ３ 均呈时间依赖的方式下调 Ｎ Ｂ４ 细胞的 Ｐ Ｃ Ａ、 Ｔ Ｆ 抗原水平以及 Ｔ Ｆ ｍ Ｒ Ｎ Ａ的转录;而 Ｄ Ｎ Ｒ 处理 Ｎ Ｂ４ 细胞的 Ｐ Ｃ Ａ及 Ｔ Ｆ 抗原在早期上调,至２４ ～４８ 小时达到最大值。对 Ｐ Ｃ Ｒ 产物测序,发现 Ａ Ｐ Ｌ 细胞 Ｔ Ｆ 第５ 个外显子缺失的转录本。结论　 Ａ Ｔ Ｒ Ａ 和 Ａｓ２ Ｏ３ 均可下调 Ａ Ｐ Ｌ 细胞 Ｔ Ｆ的表达并降低其 Ｐ Ｃ Ａ,改善 Ａ Ｐ Ｌ患者的弥散性血管内凝血（ Ｄ Ｉ Ｃ） 出血症状; Ａｓ２ Ｏ３ 和 Ｄ Ｎ Ｒ 对 Ａ Ｐ Ｌ凝血障碍不同效应的作用机制至少部分与药物对 Ａ Ｐ Ｌ细胞 Ｔ Ｆ 表达和 Ｐ Ｃ Ａ 的不同调节作用有关。     

紫外线照射自血回输对脑梗塞患者外周血淋巴细胞亚群和血浆纤维连接蛋白的影响

对２４例脑梗塞患者紫外线照射自血回输（ＵＢＩＯ）治疗前、后外周血淋巴细胞亚群及血浆纤维连接蛋白（Ｆｎ）含量变化进行了观察．结果ＵＢＩＯ治疗前脑梗塞患者外周血中总Ｔ细胞（ＣＤ）、Ｔ抑制细胞（ＣＤ）数均较正常人明显减少，ＣＤ４／ＣＤ８比值上升；Ｂ＋和人类白细胞抗原（ＨＬＡ－ＤＲ＋）细胞数增多；白细胞介素Ⅱ受体（ＩＬ－２Ｒ＋）和Ｔ辅助（ＣＤ＋）细胞数则与正常人无差异。血浆Ｆｎ含量低于正常人。提示脑梗塞患者存在免疫功能紊乱．ＵＢＩＯ治疗后，外周血中ＣＤ、ＣＤ细胞和Ｆｎ水平上升，ＣＤ４／ＣＤ８比值下降，Ｂ细胞数下降，ＨＬＡ－ＤＲ＋细胞数无明显变化．提示ＵＢＩＯ具有免疫调节作用．     

α干扰素联合GM-CSF体外培养多发性骨髓瘤患者外周血树突状细胞

树突状细胞 (ＤＣ)是目前公认的体内功能最强的抗原提呈细胞 (ＡＰＣ) ,它能显著地刺激初始Ｔ细胞 (ｎａｉｖｅＴｃｅｌｌｓ)的增殖 ,启动机体免疫反应 ,在激发以抗原特异性细胞毒性Ｔ细胞过继性免疫治疗肿瘤中起着重要的作用。ＤＣ经典的培养方法是用ＧＭ ＣＳＦ ＩＬ 4从外周血ＣＤ1 4+细胞或用ＧＭ ＣＳＦ和ＴＮＦα从ＣＤ3 4 +造血干细胞中制备生成[1 3 ] 。 1998年Ｐａｑｕｅ ｔｔｅ等[4] 发现ＩＦＮα能诱导正常人外周血单核细胞向ＤＣ分化。但ＩＦＮα是否也能诱导多发性骨瘤 (ＭＭ)患者ＤＣ的生成尚不清楚。我们在体外应用ＩＦＮα…     

胸腺单核细胞肉瘤转变为急性单核细胞白血病一例

患者 ,女 ,31岁。 2 0 0 0年 12月在外院体检摄胸片发现纵隔增宽 ,行ＣＴ检查提示胸腺瘤可能 ,于 2 0 0 1年 2月行胸腺肿块切除术。术后病理诊断为“粘膜相关淋巴瘤”。患者胸腺肿瘤的病理切片送上海会诊 ,免疫酶标ＬＣＡ(+) ,Ｌ2 6 (+) ,ＣＤ99(+) ,ＴｄＴ(+) ,ＣＤ79α(- ) ,ＡＥ1/ＡＥ3(- ) ,ＣＤ3 (- ) ,ＵＣＨＬ 1(- ) ,ｃｙｃｌｉｎＤ1(- ) ,ＣＤ5(- ) ,ＣＤ10 (- ) ,κ(+) ,λ(- ) ,结合ＨＥ染色考虑为“纵隔淋巴母细胞性恶性肿瘤 ,Ｂ细胞性” ;北京会诊考虑“非霍奇金淋巴瘤 ,Ｂ细胞来源”。 3月 12日行骨髓细胞学检查正常 ,血常规…     

INK4及其基因与血液系统恶性肿瘤研究进展

自从 1994年发现ｐ16基因 (ＩＮＫ4基因家族成员 )在众多肿瘤中缺失后 ,ＩＮＫ4基因已成为对抑癌基因研究的热点。我们对近几年来ＩＮＫ4、ＩＮＫ4基因失活及其与血液系统恶性肿瘤关系的研究进展综述如下。1　ＩＮＫ4概述1.1　ＩＮＫ4概念、结构及生理功能 :ＩＮＫ4(ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆＣＤＫ4)是细胞周期素依赖性激酶抑制物 (ＣＤＩ)的一类。ＣＤＩ与细胞周期素 细胞周期素依赖性激酶复合物 (ＣＤＫ ｃｙｃｌｉｎ)结合而抑制细胞通过细胞周期监测点 ,导致周期阻抑。据氨基酸序列同源性将ＣＤＩ分为两类 :①ｐ2 1ＷＡＦ ＣＩＰ1 类 ,包…