白细胞介素6受体的β亚单位基因和蛋白人白血病细胞中的表达

胞因子-受体系统介导的靶向杀伤作为新一代导向治疗策略的创立已经引起临床血液学及肿瘤治疗学研究者的极大关注[1].我们先前的动物实验结果业已证明,重组白细胞介素6(IL-6)-PE40外毒素融合蛋白能高度特异性地杀伤高表达人IL-6受体(IL-6R)的BNML大鼠急性早幼粒细胞白血病细胞,明显延长白血病大鼠的生存期,而对正常造血细胞无不良反应[2,3].新近我们的研究结果则显示,粒、单、红白血病细胞不但高表达IL-6Rα亚单位的基因和蛋白,而且还高表达高亲和力IL-6R.鉴于IL-6R的β亚单位在高亲和力IL-6R形成中所发挥的关键性作用[4,5],因此从理论上讲,白血病细胞表面高亲和力IL-6R的多寡与重组IL-6-PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病的生物学效应密切相关[6].所以,全面系统地阐明人类白血病细胞是否表达IL-6R的β亚单位基因和蛋白具有十分重要的临床指导意义.我们首次采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术并结合流式细胞术(FACS)对IL-6R的β亚单位mRNA和蛋白在8种极具代表性的人类白血病细胞系U937、HL-60、KG1、TF1、K562、HuT 28、CEM及Raji中的表达进行了深入的探索.     

脑脊液可溶性白细胞介素2受体在中枢神经系统白血病中的检测与意

可溶性白细胞介素 2受体 (ＳＩＬ 2Ｒ)是白细胞介素 2 (ＩＬ 2 )介导的免疫反应的调节拮抗蛋白[1] ,在多种恶性血液病中均有异常表达 ,且其血清水平与病情严重程度及预后有关[2 ] 。作者动态检测了 2 5例急性白血病与 10例中枢神经系统白血病 (ＣＮＳＬ)患者的脑脊液 (ＣＳＦ)ＳＩＬ 2Ｒ水平 ,以探讨其相关关系与临床意义。1　临床资料1.1　对象　急性白血病 2 5例 ,男 15例 ,女 10例 ,年龄 15～ 5 6岁 ,中位数 33岁 ,其中急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ) 14例 ,急性非淋巴细胞白血病 (ＡＮＬＬ)11例。急性白血病合并ＣＮＳＬ 10例 ,其中ＡＬＬ…     

急性淋巴细胞白血病患者脑脊液中sI-2R、IL-6水平测定的临床意义

可溶性白细胞介素2受体(ｓＩＬ2Ｒ)在造血系统肿瘤患者血清中水平的变化与病变活动、治疗效果及预后相关[13]。ＩＬ6是一个具有广泛生物学活性的细胞因子。急性淋巴细胞白血病(ＡＬＬ)患者脑脊液(ＣＳＦ)中ｓＩＬ2Ｒ的变化,国内外已有报道,但同时检测ＣＳＦ中ｓＩＬ2Ｒ和ＩＬ6含量变化少见报道。我们观察了30例ＡＬＬ患者上述指标,同时也检测了Ｃ反应蛋白(ＣＲＰ)及乳酸脱氢酶(ＬＤＨ)水平,以探讨ｓＩＬ2Ｒ和ＩＬ6在判断病情及预后中的意义。材料和方法1　研究对象1.1　病例选择:ＡＬＬ组30例,为本院1998年1月～1999年8月血液科住院患者。男…     

IL-6受体α亚单位mRNA和蛋白在人白血病细胞中的表达

为了探讨IL－6R的α亚单位基因与蛋白在人白血病细胞中的表达，为临床利用IL－6／IL－6R系统介导重组IL－6－PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞提供可靠依据，采用RT－PCR半定量技术、直接免疫荧光标记及流式细胞术检测了IL－6R的α亚单位基因及蛋白在多种人白血病细胞细胞系中的表达。结果表明，粒系、单核系、红白血病细胞系HL－60，KG－1，U937和TF－1均高表达IL－6R的α亚单位基因和蛋白；淋巴系白血病细胞系Raji亦有一定量的基因表达；而淋巴系细胞等CEM和HuT28以及慢性粒细胞白血病细胞系K562无论是IL－6Rα亚单位的基因还是蛋白均为阴性。相对表达丰度依次为KG－1＞TF－1＞U266＞U937＞HL－60＞Raji。鉴于粒系、单核系、红白血病细胞高表达IL－6Rα亚单位的基因和蛋白，而IL－6Rα亚单位蛋白在正常人外周血细胞均为阴性表达这一事实，提示可以利用IL－6／IL－6R系统介导重组IL－6－PE40外毒素融合蛋白进行靶向杀伤和治疗这些白血病，而且不会对正常血细胞产生毒副作用。     

供者淋巴细胞输注治疗慢性髓系白血病中移植物抗白血病效应相关的克隆性增殖T细胞的研究

供者淋巴细胞输注 (ＤＬＩ)治疗异基因骨髓移植 (ａｌｌｏ ＢＭＴ)后复发的慢性髓系白血病 (ＣＭＬ)已取得肯定的疗效。6 0 %～ 80 %的ＣＭＬ患者经ＤＬＩ后又可以达到血液学完全缓解 (ＣＲ)。其作用是新输入的供者Ｔ细胞某些亚群具有抗ＣＭＬ细胞的作用[1 ] 。有研究提示这些产生移植物抗白血病(ＧＶＬ)作用的可能是某些Ｔ细胞受体 (ＴＣＲ)Ｖβ亚家族克隆性增殖的Ｔ细胞[2 ] 。利用ＴＣＲＶβ 2 4个亚家族的特异性引物进行ＲＴ ＰＣＲ和基因扫描分析患者外周血中ＴＣＲＶβ亚家族Ｔ细胞的技术 ,已成功地应用于肿瘤免疫等检测中[3 ] 。我们…     

地塞米松、干扰素α及γ对骨髓瘤细胞系SKO-007IL-6及其受体表达的影响

近年来的研究表明 ,细胞因子网络的异常与骨髓瘤发病密切相关 ,其中ＩＬ 6及其受体的表达异常更为引人注目。我们选用骨髓瘤细胞系ＳＫＯ 0 0 7为研究对象 ,观察临床治疗多发性骨髓瘤常用药物地塞米松 (ＤＥＸ)、ＩＦＮ α、ＩＦＮ γ对骨髓瘤细胞系ＳＫＯ 0 0 7的ＩＬ 6及其受体 [ＩＬ 6Ｒ ,包括膜表面受体 (ＩＬ 6Ｒα)和可溶性受体 (ｓＩＬ 6Ｒ) ]表达的影响。为解释ＩＬ 6及其受体在多发性骨髓瘤发病机制中的作用提供线索。材料和方法1　材料和试剂　骨髓瘤细胞系ＳＫＯ 0 0 7,特淋巴瘤细胞系Ｒａｊｉ,ＤＥＸ磷酸钠 (相对分子质量为 5 1…     

六亚甲基二乙酰胺对人多药耐药白血病K562/ADM细胞的诱导分化作用

六亚甲基二乙酰胺 (ＨＭＢＡ)是一种杂合极性化合物类强效分化诱导剂 ,对小鼠及人红白血病ＭＥＬ细胞、Ｋ5 6 2细胞有很强的分化诱导作用[1 ,2 ] ,亦可诱导其它白血病 (肿瘤 )细胞成熟分化和凋亡[3 ,4] ,在大剂量时对Ｐ 糖蛋白 (Ｐ ｇｐ ,Ｐ170 )阳性的多药耐药 (ＭＤＲ)肿瘤细胞和Ｐ ｇｐ阴性的肿瘤细胞的增殖均有抑制作用[5] 。Ｋ5 6 2 ＡＤＭ细胞是经阿霉素诱导的ｍｄｒ1基因超表达的白血病多药耐药细胞[6] 。我们选用ＨＭＢＡ作为分化诱导剂 ,通过观察其对Ｋ5 6 2 ＡＤＭ细胞增殖活性、形态学、细胞功能、细胞周期和Ｐ ｇｐ表达的作用…     

电转人IL－6受体基因在大鼠急性髓细胞白血病模型中的表达

应用平方波脉冲电转法将编码人ＩＬ－６受体的ｃＤＮＡ转入不表达ＩＬ－６Ｒ的ＢＮＭＬ大鼠急性早幼粒细胞白血病ＬＴ１２细胞中，转染细胞经含６００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８半固体。液体二步法培养，筛出Ｇ４１８抗性细胞；ＦＡＣＳ检测显示该细胞与ＦＩＴＣ标记的抗ＩＬ－６Ｒ单抗呈显著的荧光强度；￣（１２５）Ｉ－ＩＬ－６受体结合实验表明，ｋｄ＝４．７ｎｍ，每个细胞ＩＬ－６Ｒ数为４０００左右；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－Ｂｌｏｔ发现该细胞的ＲＮＡ与￣（３２）Ｐ标记的１．５ｋｂ的ＩＬ－６ＲｃＤＮＡ探针呈明显的杂交信号，证明我们已成功地建立了高表达人ＩＬ－６Ｒ的ＬＴ１２－ＩＬ－６Ｒ￣＋的大鼠急性白血病细胞模型。     

35例急性白血病细胞IL—2受体α的基因表达的检测分析

为研究ＩＬ－２受体α链基因在急性白血病（ＡＬ）细胞的表达，对１９例ＡＬＬ和１６例ＡＭＬ患者治前白血病细胞用逆转录＝聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及芝光素标记单抗ＩＬ－２Ｒ１流式细胞分析，分别进行了ＩＬ－２Ｒα基因ｍＲＮＡ和蛋白质水平表达的检测。３５例ＡＬ患者白血病细胞ＩＬ－２ＲαｍＲＮＡ和Ｐ阳性表达者分别为５例和１４例，前者阳性表达明显高于后者，１４例ＡＬ患者白血病细胞ＩＬ－２ＲαｍＲＮＡ表达阳性，     

IL—2在白血病中的应用

免疫治疗在白血病的治疗中已占据一定地位。白细胞介素-2是一分子量为15.5Kda的蛋白,高亲和力白细胞介素-2受体主要存在于活化的T、B淋巴细胞及NK细胞。静止状态NK细胞及巨噬细胞表达中等亲和力受体。其作用在很大程度上依赖于细胞毒效应细胞识别并杀伤白血病细胞。高剂量重组白细胞介素-2治疗AML或CML可能产生疗效,尤其是在移植后存在微小残余病变时。常见副作用的发生主要与毛细血管渗漏综合征和血小板减少有关。     

IL-2在白血病中的应用

免疫治疗在白血病的治疗中已占据一定地位.白细胞介素-2是一分子量为15.5Kda的蛋白,高亲和力白细胞介素-2受体主要存在于活化的T、B淋巴细胞及NK细胞.静止状态NK细胞及巨噬细胞表达中等亲和力受体.其作用在很大程度上依赖于细胞毒效应细胞识别并杀伤白血病细胞.高剂量重组白细胞介素-2治疗AML或CML可能产生疗效,尤其是在移植后存在微小残余病变时.常见副作用的发生主要与毛细血管渗漏综合征和血小板减少有关.     

35例急性白血病细胞IL-2受体α基因表达的检测分析

为研究ＩＬ２受体α链（ＩＬ２Ｒα，Ｐ５５）基因在急性白血病（ＡＬ）细胞的表达，对１９例ＡＬＬ和１６例ＡＭＬ患者治前白血病细胞用逆转录—聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）及荧光素标记单抗ＩＬ２Ｒ１流式细胞分析，分别进行了ＩＬ２Ｒα基因ｍＲＮＡ和蛋白质水平表达的检测。３５例ＡＬ患者白血病细胞ＩＬ２ＲαｍＲＮＡ和Ｐ５５阳性表达者分别为２５例（２５／３５，７１４％）和１４例（１４／３５，４０％），前者阳性表达明显高于后者（ｐ＜００２５）。１４例ＡＬ患者白血病细胞ＩＬ２ＲαｍＲＮＡ表达阳性，而Ｐ５５水平无表达；３例ＡＭＬ细胞表面Ｐ５５阳性却无ｍＲＮＡ表达。本研究显示，ＡＬ患者白血病细胞ＩＬ２Ｒα基因阳性表达十分常见，ｍＲＮＡ和蛋白质水平表达并非一致，ｍＲＮＡ水平表达率明显高于蛋白质水平表达率。     

一种新的细胞因子——白细胞介素—15

白细胞介素１５（ＩＬ－１５）是新发现并克隆的细胞因子，已在酵母菌中表达成功。ＩＬ－１５含１１４个氨基酸，由非淋巴细胞分泌。尽管ＩＬ－１５与ＩＬ－２氨基酸序列上无同源性，但二者蛋白三级结构和功能相似。ＩＬ－１５能引起ＰＨＡ活化的Ｔ细胞、Ｂ细胞、ＮＫ细胞及ＣＴＬＬ细胞的增殖，也能诱导ＬＡＫ细胞。ＩＬ－１５通过与ＩＬ－２Ｒ的β、γ亚单位及另一未知亚单位组成的ＩＬ－１５Ｒ结合而引起靶细胞被激活，实现其免疫     

电转入IL—6受体基因在大鼠急性髓细胞白血病模型中的表达

应用平方波脉冲电转法将编码人ＩＬ－６受体的ｃＤＮＡ转入不表达ＩＬ－６Ｒ的ＢＮＭＬ大鼠急性早幼粒细胞白血病ＩＬ１２细胞中，转染细胞经含６００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８半固体－液体二步法培养，筛出Ｇ４１８抗性细胞；ＦＡＣＳ检测显示该细胞与ＦＩＴＣ标记的抗ＩＬ－６Ｒ单抗呈显的荧光强度，＾１２５Ｉ－ＩＬ－６受体结合实验表明，ｋｄ＝４．７ｎｍ，每个细胞ＩＬ－６Ｒ数为４０００左右，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－Ｂｌｏｔ发现该     

LHRH-PE40识别结肠癌细胞膜表面蛋白的研究

目的探讨人结肠癌细胞系Lovo及人白血病细胞系Jurket细胞膜表面蛋白能否识别LHRH-PE40及是否存在竞争性抑制。方法将结肠癌细胞系Lovo及白血病细胞系Jurket制备成细胞膜,利用125I标记的LHRH-PE40与两种细胞膜进行放射性配基分析,与LHRH进行竞争结合分析。结果人结肠癌细胞系Lovo的结合竞争符合特异性配基-受体结合、竞争;而白血病细胞系Jurket未见配基-受体特异性结合。其中LHRH-PE40与Lovo细胞的亲和力:Kd=10·6±2·33nmol/L,容量Bmax=345±7·59pmol/mg。结论LHRH是结肠癌免疫治疗的有效靶点,LHRH-PE40对过度表达LHRH受体的结肠癌具有特异性杀伤作用,而对无LHRH表达的肿瘤无杀伤作用,对于药物的临床应用有着指导意义。     

白血病患者脑脊液中可溶性白细胞介素2受体的检测及临床意义

白血病患者脑脊液中可溶性白细胞介素２受体的检测及临床意义邓艳春，粟秀初，杨毅宁白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）不仅存在于激活的Ｔ细胞、３细胞、单核细胞、ＮＫ细胞及ＬＡＫ细胞表面，多种类型的白血病和淋巴瘤细胞亦可表达ＩＬ－２ＲＦ国外医学·肿瘤分册，１９９...     

逆转录病毒IL-6/IL-2融合蛋白载体构建及其对K562细胞诱导分化作用

我们在构建的人重组ＩＬ 6 /ＩＬ 2融合蛋白 (ＣＨ92 5 ) [1,2 ] 基础上 ,构建了逆转录ＬｈＩＬ 6 /ＩＬ 2ＳＮ融合基因载体 ,并转染Ｋ5 6 2细胞 ,进行ＩＬ 6 /ＩＬ 2融合基因对Ｋ5 6 2细胞系增殖、分化调控作用的研究 ,探讨其在慢性粒细胞白血病诱导分化治疗中的应用前景和意义 ,现将有关实验研究结果报告如下。材料和方法1　逆转录病毒载体ＬｈＩＬ 6 /ＩＬ 2ＳＮ构建　逆转录病毒载体ＬｈＩＬ 6 /ＩＬ 2ＳＮ包含ＩＬ 6 /ＩＬ 2融合基因和一个新霉素抗性(Ｎｅｏ)基因。使用限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＢａｍＨⅠ从ｐｆＩＬ 6 /ＩＬ 2质粒消…     

c-kit基因在急性非淋巴细胞白血病患者的表达及临床意义

白血病是造血系统的主要恶性肿瘤 ,治疗困难 ,复发率高 ,有效的早期预测白血病化疗疗效及监测其复发对提高白血病的缓解率和延长患者的生命具有重要的意义 ,目前国内外尚无理想的前瞻性指标。ｃ ｋｉｔ原癌基因是酪氨酸激酶受体家族Ⅲ类的一个重要成员[1 ] 。最近研究发现 ,ｃ ｋｉｔ基因在急性粒细胞白血病持续表达 ,完全缓解 (ＣＲ)后 ,ｃ ｋｉｔ ＳＣＦＲ则恢复正常 ,提示ｃ ｋｉｔ ＳＣＦＲ的动态变化 ,可能是预测和监测白血病疗效的一个良好指标。我们检测 5 8例急性非淋巴细胞白血病 (ＡＮＬＬ)ｃ ｋｉｔ基因的表达 ,探讨ｃ ｋｉｔ与…     

CD109在初发急性髓系白血病患者中的表达特征及临床意义

膜蛋白CD109属于GPI联结糖蛋白, 参与多种重要信号通路, 如TGF-β/Smads信号通路[1,2]、JAK-STAT信号通路[3,4]和表皮生长因子受体通路[5,6]。CD109最初是在急性髓系白血病(AML)细胞系KG-1a鉴定的细胞表面抗原[7], 主要表达于胎儿和成人CD34阳性的骨髓单个核细胞亚群、激活的T淋巴细胞、激活的血小板、白血病原巨核细胞、内皮细胞、间充质干细胞亚群和一些人类肿瘤细胞系中[8], 但不表达于人类静止的T细胞、血小板或外周血白细胞[9]。本研究探索了CD109在初发AML(M3除外)患者中的表达特征以及与CD34表达的相关性。     

CD158b基因转染的淋巴细胞对正常和HL-60细胞杀伤活性的实验研究

移植物抗宿主病 (GVHD)是异基因骨髓移植的严重并发症之一。杀伤细胞抑制性受体 (KIR)是目前发现表达于NK、T细胞膜上的一类受体 ,CD15 8分子是KIR家族重要成员 ,主要包括CD15 8a和CD15 8b。当它们与相应的HLA C分子结合后能传导抑制性信号 ,抑制NK、T细胞对靶细胞的杀伤作用[1] 。我们以 3对进行异基因骨髓移植的供、受者为对象 ,通过逆转录病毒的介导 ,将受者淋巴细胞的CD15 8b基因导入供者淋巴细胞 ,观察其对受者淋巴细胞及HL 6 0细胞的杀伤作用是否有影响 ,为解决GVHD提供理论和实验依据。对象和方法1　研究对象白血病患…