天然抗氧化剂TA9901抑制β-淀粉样肽1～40聚集和纤维形成

为寻找治疗老年性痴呆(AD)的有效药物,运用透射电镜和硫磺素T荧光分析,通过体外孵育方式研究天然抗氧化剂TA9901对β-淀粉样蛋白(Aβ)1～40的聚集及纤维化的影响.电镜观察显示,Aβ1～40在PBS(pH 7.4)中室温孵育7d,其纤维呈晶状聚集,直径约8～10 nm.TA9901的存在使Aβ聚集减少,无明显Aβ纤维形成,主要表现为无定形结构.Aβ1～40与维生素E(VE)共同孵育,Aβ纤维聚集密度明显下降.TA9901和VE联用使Aβ纤维的形态主要表现为网状分布的Aβ原纤维,直径约3～5 rim.荧光分析揭示,TA9901,VE和二者联用对Aβ纤维形成的抑制率分别为95.0%,38.6%和67.6%.结果表明,TA9901,VE和二者联用均可以不同程度地抑制Aβ聚集及纤维形成,以TA9901的抑制作用最强.提示TA9901有望发展成为以Aβ为靶治疗AD的候选药物.     

脂质筏在阿尔茨海默病发病机制中的作用

β淀粉样蛋白(Aβ)是阿尔茨海默病(AD)的特征病理改变之一,Aβ的产生和聚集是AD发生和进展的重要因素之一.脂质筏为膜脂双层内含有特殊脂质和蛋白质的微区,具有低流动性,呈现有序液相,富含胆固醇,鞘脂和神经节苷酯GM1.细胞膜的脂质筏参与Aβ的产生及Aβ聚集形成低聚体,脂质筏及其组成成份的异常影响Aβ的产生及Ap聚集形成低聚体.以脂质筏为靶点可能为AD患者的治疗提供一种新的途径,选择性干预APP在脂质筏内的加工过程以调节Aβ的生成可能为一种有效的治疗方法.     

树突状细胞来源的小胶质细胞在Alzheimer病中的作用

Alzheimer病(AD)是以进行性认知功能下降为临床特点的中枢神经系统退行性疾病,其主要病理特征为老年斑和神经纤维原缠结.针对老年斑的主要成分β淀粉样蛋白(Aβ)     

青少年交往焦虑绘画特征的研究

目的 探索青少年交往焦虑的房树人测验绘画特征,为青少年交往焦虑研究提供新思路.方法 对956名青少年进行交往焦虑评定和房树人测验.结果 青少年交往焦虑的总体评分为(41.44±8.208),男女生之间差异没有统计学意义.青少年交往焦虑的相关的绘画特征有云朵(β=0.106)、人物双手(β=0.107)、月亮(β=0.166)、地平线(β=-0.147)、下雨雪花(β=-0.096)、人物张口(β=-0.091)、鸟儿(β=0.081)、门大小(β=-0.074).结论 房树人测验对青少年交往焦虑评定具有一定的辅助参考价值.     

雌激素对海人藻酸致癎大鼠皮层和海马雌激素β受体表达的影响

目的观察添加雌激素后海人藻酸(Kainic acid,KA)致癎大鼠皮层和海马的雌激素β受体(ER-β)的变化.方法用荧光免疫组化法.结果ER-β免疫阳性细胞广泛分布于大鼠的皮层、海马、下丘脑以及杏仁核区域,主要位于细胞核.单纯添加雌激素(17-βestradiol,E2)组、海人藻酸致癎(KA)组、添加雌激素后海人藻酸致癎(E2加KA)组海马的ER-β免疫阳性细胞数较对照组(OIL组)明显减少(P＜0.05),以DG(齿状回,Dentate Gyrus)区的变化最明显;皮层(Cortex)的ER-β免疫阳性细胞表达变化不显著.E2+KA组的ER-β免疫阳性细胞与KA组相比减少,(P＜0 05).结论大剂量雌激素下调ER-β免疫阳性细胞的表达,且此作用有区域性.添加雌激素后致癎,ER-β免疫阳性细胞下调更显著,雌激素可能是通过下调DG区ER-β的表达加重癫癎的发作.     

自身抗Aβ抗体的自然发生规律及其对阿尔茨海默病发病机制的启示

目的 探讨在自然衰老过程中血浆自身抗Aβ抗体的发生规律和对AD发病机制的启示.方法 采用一种特殊的组织淀粉样蛋白免疫活性测定方法(TAPIR)检测205例年龄为1～91岁的健康人群血浆免疫染色Tg2576转基因小鼠大脑组织切片中的老年斑核心,随后血浆与人工合成的Aβ多肽(sAβ)、蚁酸可溶性淀粉样Aβ颗粒(FAβ)进行免疫沉降和免疫印迹,以探查血浆自身抗Aβ抗体的免疫特性.结果 自然发生的自身抗Aβ抗体存在于各个年龄段,甚至于儿童和青少年,总发生率为35.6%,其变化规律呈现一种特殊的"U"型年龄相关性曲线.结论 血浆自身抗Aβ抗体的出现先于脑内淀粉样斑块的形成,且与脑内Aβ负荷无关.     

免疫治疗阿尔茨海默病的研究及其意义

阿尔茨海默病(AD)是一种神经退行性疾病,其显著病理特征之一为患者脑内产生由42个氨基酸构成的β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ42),目前认为Aβ42的纤维化和沉积是AD发生和发展的一个主要因素.该文就以减轻脑内Aβ42的负荷、阻止和逆转Aβ42的纤维化和沉积为最终目标的免疫治疗AD的主要方法、效果以及其研究意义进行综述,为相关领域的研究者提供参考.     

β-分泌酶2在散发性阿尔茨海默病发病机制中的作用

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种病因不明的、以认知功能障碍为主要特征的神经系统变性病,通常认为是遗传因素和环境因素共同作用的结果.AD作为老年期痴呆中最常见的类型,其发病机制并未完全阐明,有遗传易感性、淀粉样β蛋白(β-amyloid,Aβ)毒性、氧化应激、炎症反应等多种学说.但是学者们普遍认为老年斑是AD特征性病理改变之一,它的主要成分是β淀粉样蛋白(Amyloid β protein,Aβ).     

中国多发性硬化患者肿瘤坏死因子β基因多态性的Meta分析

目的 探讨肿瘤坏死因子β(TNF-β)基因多态性与中国多发性硬化(MS)患者遗传易感性的关系.方法 通过PubMed、Elseiver、Ovid、中国期刊全文数据库(CNKI)和万方数据库,检索有关TNF-β基因多态性与中国MS患者的病例对照研究文献,并采用RVEMAN 4.3统计软件对其结果进行分析.结果 共纳入5篇以中国人群为研究对象的MS病例对照研究文献.各研究的基因型和等位基因频数结果末见明显发表偏倚.5项研究合并后,GG/(GA+AA)、AA/(GG+GA)和GA/(GG+AA)合并的OR值分别为1.63(95%CI为0.78～3.43)、0.85(95%CI为0.41～1.76)和0.81(95%CI为0.60～1.10).等位基因频数G/A的OR=1.21(95%CI为0.74～1.99,P=0.45).结论 TNF-β基因多态性与中国MS患者的遗传易感性无相关性.     

脑老化糖基化终末产物上调BACE1活性促进Aβ生成

目的 探讨糖基化终末产物(AGEs)在β-淀粉样蛋白(Aβ)产生中分子机制.方法 以APPsw-N2a细胞为AD细胞模型,将细胞随机分为3组,空白对照组、AGEs组、AGEs+抗RAG抗体组.采用ELISA方法检测各组Aβ40和Aβ42的表达水平,并用荧光检测法检测BACE1的活性.结果 与对照组相比,AGEs组Aβ40、Aβ42表达水平及BACE1活性明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01);预先用抗RAG中和抗体(1∶100)1 h后,Aβ40,Aβ42表达水平及BACE1活性与AGEs组相比较明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 AGEs可能通过上调BACE1的活性促使APPsw-N2a细胞Aβ生成增加,提示AGEs可能在AD发生、发展中起重要作用.     

β淀粉样肽25-35对原代培养的海马神经元电压门控钙通道电流的影响

目的 探讨β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)对海马神经元电压门控的钙通道电流(VGCC)的作用.方法 应用全细胞膜片钳技术记录海马神经元上的VGCC,通过设定不同的钳制电压分别记录高电压激活的钙电流(HVA-ICa)和低电压激活的钙电流(LVA-ICa),并观察Aβ25-35对其的影响.结果 分别对原代培养的海马神经元急性胞外给予2μmol/L和10 μmol/L的凝聚态Aβ25-35,在最大激活电压下加药后ICa幅度分别是加药前的99.80%±0.02%及100.00%±1.58%,差异没有统计学意义.10 μmol/L凝聚态Aβ25-35预孵育24 h可增大ICa,对照组(未给Aβ25-35)为(24.49±4.35)pA/pF,Aβ25-35组(预孵育24 h)为(46.59±7.15)pA/pF,两组差异有统计学意义(P＜0.05);但Aβ25-35组的膜电容[(14.34±1.74)pF]与对照组[(14.44±0.97)pF]相比差异没有统计学意义.结论 急性给予凝聚态Aβ25-35对VGCC没有影响,24 h预孵育凝聚态Aβ25-35增大了VGCC,而膜电容没有改变,提示凝聚态Aβ25-35可通过对细胞膜上钙通道进行分子调控以增大VGCC.     

TGF-β1表达与垂体腺瘤纤维化

目的探讨垂体腺瘤纤维化与转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的关系.方法 38例垂体腺瘤标本分为质地韧(纤维化)组6例与质地软(非纤维化)组32例,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法检测TGF-β1的表达并以天狼猩红染色法检测其胶原含量. 结果纤维化与非纤维化组胶原含量为(20.95±8.42)%、(7.98±5.18)%,两者差异显著(P<0.01);TGF-β1 mRNA表达量为0.79±0.15、0.42±0.20;蛋白表达量为0.64±0.20、0.32±0.40,两者差异显著(P<0.01);且TGF-β1的表达与胶原含量呈正相关(P<0.01). 结论垂体腺瘤纤维化的显著病理特征是胶原过度沉积,TGF-β1可能在垂体腺瘤纤维化中起重要作用.     

矢状轴位胼胝体面积测量与脑脊液p-tau蛋白和Aβ1-42含量对阿尔茨海默病早期诊断的价值

目的 评价矢状轴位磁共振成像(MRI)胼胝体面积测量和脑脊液p-tau蛋白及Aβ1-42含量对阿尔茨海默病(AD)早期诊断的价值.方法 根据NINCDS-ADRDA标准诊断的25例可能AD,按MMSE评分分为2组:平均MMSE评分AD1组为20.5±2.5;AD2组均为14.7±3.8.另设健康对照组,平均MMSE评分27.8±1.7.自动测量软件在MRI正中矢状位上对胼胝体面积直接测量.酶标记免疫吸附测定(ELISA)法对各组脑脊液中199位点磷酸化微管相关蛋白(p-tau199)和β-淀粉样蛋白1-42片段(Aβ1-42)含量测定.结果 AD1组的脑脊液中p-tau199(pg/ml)为25.8±3.1,较对照组(17.7±1.5)增高,Aβ1-42(pg/ml)为329.3±15.2,较对照组(522.5±15.1)降低,胼胝体面积较对照组缩小,但程度不显著.AD2组的胼胝体总面积较对照组明显缩小,以整个胼胝体缩小为特点,但尾部改变相对较轻;AD2组与AD1组比较,p-tau蛋白含量升高和Aβ1-42含量(pg/ml)降低的程度更明显,分别为31.3±4.8和318.5±30.8.结论 胼胝体面积测量同时配合脑脊液p-tau蛋白和Aβ1-42含量的测定,不仅对确诊早期AD有帮助,而且能反映AD的病程变化.     

耐药性癫痫脑脊液P-糖蛋白、转化生长因子β1水平变化的临床意义研究

目的探讨分析耐药性癫痫脑脊液P-糖蛋白(P-gp)、转化生长因子β1(TGFβ1)水平变化的临床意义。方法选取治疗有效的癫痫患者30例为敏感组,耐药性癫痫患者30例为耐药组,同期经我院体检健康者20例为对照组。酶联免疫吸附测定法检测所有受试者脑脊液中P-gp、TGFβ1水平,并进行组间比较。同时,比较耐药组中不同发作类型患者P-gp、TGFβ1水平差异。结果耐药组脑脊液中P-gp、TGFβ1分别为(21. 5±3. 1) ng/ml、(217. 3±49. 6) pg/ml,显著高于敏感组和对照组,差异有统计学意义(P 0. 05)。敏感组和对照组脑脊液中P-gp、TGFβ1水平差异无统计学意义(P 0. 05)。不同发作类型的耐药性癫痫患者脑脊液中P-gp、TGFβ1水平差异无统计学意义(P 0. 05)。结论脑脊液中P-gp、TGFβ1水平可以作为不同发作类型耐药癫痫的一项重要检测指标。     

Aβ1-40海马注射对大鼠神经胶质细胞S100β和iNOS表达的影响

目的在体条件下观察β-淀粉样蛋白(Aβ)对S100β和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,探讨三者之间的相互关系.方法以不同浓度Aβ1-40溶液及生理盐水做海马立体定向注射后,采用刚果红染色、尼氏染色及免疫组织化学方法,显示胶质细胞反应、神经元损伤情况及S100β、iNOS表达变化.结果胶质细胞增生与神经元缺失程度以及S100β与iNOS的表达水平均随Aβ1-40浓度增大而增加,4μg/μl Aβ溶液注射组S100β阳性细胞数(个/视野)为42.39±3.46,显著多于盐水对照组(34.50±3.57),P<0.01;iNOS阳性染色面积与S100β阳性细胞数存在较强的相关性(r=0.873).结论在体条件下高含量Aβ强烈诱导胶质细胞S100β和iNOS的表达,结果提示三者之间的相互作用在Alzheimer病发病机制中有重要作用.     

Nasal mucosal inhalation of amyloid-beta peptide 3–10 defective adenovirus attenuates cytotoxicity induced by beta-amyloid(1–42)

Three-month-old Alzheimer's disease model transgenic mice were immunized with Aβ1–42, Plp-Adenovirus [Ad]-X-CMV-(Aβ3–10)10-CpG [AdCpG-(Aβ3–10)10] or AdCpG virus fluid via nasal mucosal inhalation, respectively. ELISA analysis of serum showed Aβ42 antibody titers were significantly increased in mice immunized with Aβ1–42 and AdCpG-(Aβ3–10)10. Concanavalin A and AdCpG-(Aβ3–10)10 stimulation significantly increased the number of proliferating spleen cells cultured from AdCpG(Aβ3–10)10 and Aβ42 groups compared with the control group. In the AdCpG(Aβ3–10)10 group, levels of interleukin(IL)-4 and IL-10 were increased, while those of IL-2 and interferon-γ were decreased. In the Aβ42 group, levels of IL-4, IL-10, IL-2 and interferon-γ were all increased. Experimental findings indicate that AdCpG-(Aβ3–10)10 vaccine can produce strong T helper 2(Th2) humoral immune responses in addition to the production of Aβ42 antibody. The cellular immunologic response was weak and avoided Aβ1–42-mediated cytotoxicity.     

阿尔茨海默病患者血小板淀粉样前体蛋白代谢的改变

目的 通过观察血小板活化后β淀粉样蛋白(Aβ)水平变化,探讨阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)患者血小板β-淀粉样前体蛋白(APP)代谢特点.方法 分离36例AD患者和30名健康对照的血小板,用免疫印迹检测凝血酶作用后的可溶性APP水平;同时用放射免疫法测定Aβ含量.结果 凝血酶作用后,血小板上清中可以检测到可溶性APP和Aβ.活化后AD患者血小板上清中可溶性APP水平较对照组水平下降31.0%(P＜0.05).凝血酶活化后,AD组血小板上清Aβ水平从(3.1±2.7)ng/L增加至(5.8±3.2)ng/L(P＜0.01),对照组Aβ水平由(6.1±4.4)ng/L增加为(11.5±5.9)ng/L(P＜0.01).AD组Aβ平均增加(2.8±2.1)ng/L,低于对照组增加水平(5.5±3.6)ng/L(P＜0.01).结论 血小板中含有APP的代谢产物可溶性APP和Aβ.AD血小板可能存在APP代谢异常.     

Aβ免疫治疗在阿尔茨海默病中的应用

阿尔茨海默病(AD)是最常见的变性性痴呆,严重影响患者的生活质量,也为家庭和社会带来沉重负担.目前,尚缺乏有效治疗AD的方法,而β淀粉样蛋白(Aβ)免疫治疗为AD患者带来了希望.此文就Aβ免疫治疗的机制、方法和尚待解决的问题做一简要综述.     

Akt对IL-1β诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经元的作用

目的探讨蛋白激酶B/Akt信号途径对IL-1β诱导神经干细胞(neutral stem cells,NSCs)分化多为巴胺能神经元(dopaminergic neurons,DNs)的作用。方法原代取材培养中脑来源大鼠NSCs,用IL-1β诱导NSCs分化;免疫荧光染色法检测βIII-tubulin和酪氨酸羟化酶(TH)表达; Motic Digital Class 1. 1/Motic Images Advanced3. 1图像分析软件测量多巴胺能神经元突起长度; Western blot分析法检测分化细胞Akt磷酸化程度。结果培养细胞表达nestin蛋白,分化为神经元和神经胶质细胞;βIII-tubulin阳性细胞分化率分别为13. 4%±0. 8%(A组)、16. 8%±1. 5%(B组)、28. 8%±2. 4%(C组)、29. 2%±1. 5%(D组)、12. 5%±0. 6%(对照组),βⅢ-tubulin阳性细胞百分率随着IL-1β剂量增加而增加(P 0. 05); TH细胞阳性率分别为1. 6%±0. 5%(A组)、9. 5%±0. 6%(B组)、16. 8%±1. 5%(C组)、16. 6%±1. 2%(D组)、1. 3%±0. 5%(对照组),TH阳性分化细胞随着IL-1β剂量增加而增加(P 0. 01);多巴胺能神经元突起长度分别为(48. 6±8. 3)μm(A组)、(56. 4±5. 2)μm(B组)、(80. 0±12. 8)μm(C组)、(88. 2±10. 5)μm(D组)、(45. 5±6. 5)μm(对照组),多巴胺能神经元突起长度随着IL-1β剂量增加而增加(P 0. 05);经IL-1β诱导后分化细胞Akt的磷酸化水平升高(P 0. 01)。结论 IL-1β作为一种重要的信号分子参与诱导NSCs向DNs分化,分化过程中Akt磷酸化水平升高,蛋白激酶B/Akt信号途径通过磷酸化修饰激活后可能参与NSCs向多巴胺能神经元分化的调节过程。     

脑淀粉样血管病研究进展

正脑淀粉样血管病(cerebral amyloid angiopathy,CAA)是以β-淀粉样蛋白(amyloidβ,Aβ)在大脑皮质及软脑膜的中小血管上沉积为主要病理特征的脑血管病,临床主要表现为复发性和(或)多发性脑叶出血、痴呆、认知和神经功能减退、