供者淋巴细胞输注的研究进展

供者淋巴细胞输注(DLI)是治疗异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后复发的恶性血液病患者的有效方法之一。DLI主要通过移植物抗肿瘤效应(GVT)来诱导和维持缓解。在有些病例,DLI诱导的缓解非常持久,并能治愈一些其他治疗方法无效的患者。作者综述了DLI的细胞成分、剂量、疗效、并发症及应用展望。     

造血干细胞移植治疗恶性血液病13例疗效观察

目的:探讨造血干细胞移植(HSCT)治疗恶性血液病的疗效和并发症。方法:对13例恶性血液病患者施行造血干细胞移植(HSCT),其中自体HSCT(auto-HSCT)9例,异基因HSCT(allo-HSCT)4例。结果:所有患者均成功造血重建。auto-HSCT和allo-HSCT后中性粒细胞恢复≥0.5×109/L,中位时间为16(9~29)d,PLT恢复≥20×109/L,中位时间为62(12~298)d;发生急性、慢性移植物抗宿主病分别为4、3例;auto-HSCT复发2例,死亡1例,alloHSCT死亡1例。结论:HSCT可以延长生存期,提高生活质量,是治疗恶性血液病的有效方法。     

异基因外周造血干细胞移植治疗造血系统恶性肿瘤的临床研究

目的:探讨异基因外周造血干细胞移植(A llo-PBSCT)治疗恶性血液病的疗效、造血重建及并发症情况。方法:对5例恶性血液病患者进行A llo-PBSCT治疗,包括急性中幼粒细胞性白血病(AML)3例、急性淋巴细胞性白血病(ALL)1例、非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)1例,均为供受者HLA配型完全相合,其中同胞间移植4例、无关供者移植1例;4例采用清髓性预处理方案,1例为非清髓性预处理方案。结果:5例患者均获得造血重建,经血型、性染色体和短串联重复序列-聚合酶链反应检测证实均为供者型造血,中性粒细胞≥0.5×109/L的中位时间为移植后+12天,血小板≥20×109/L的中位时间为移植后+8天;5例患者均未发生肝静脉闭塞病;4例患者发生急性移植物抗宿主病(aGVHD);1例患者发生移植后单纯红细胞性再生障碍性贫血(PRCA),其余4例患者仍持续缓解(移植后145~470天)。结论:A llo-PBSCT是治疗恶性血液病的有效手段,尤其是对于复发难治性患者具有较好疗效。     

异基因造血干细胞移植研究进展

异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）是治疗血液系统恶性肿瘤的重要手段,为恶性血液病患者的根治带来了希望。近年来,随着allo-HSCT研究不断推进,allo-HSCT的临床结局取得了长足的进步。allo-HSCT需根据患者个体差异选择适当的预处理方案和移植供者,防治allo-HSCT移植物抗宿主病（GVHD）和降低移植后疾病复发,将allo-HSCT与靶向治疗及免疫疗法相结合,可提高血液系统恶性肿瘤患者的临床疗效。本文就血液系统恶性肿瘤患者allo-HSCT预处理方案、供者选择、GVHD预防和移植后复发等问题作一述评。     

非血缘造血干细胞移植的临床研究

目的探讨非血缘性(无关供者)异基因造血干细胞移植治疗白血病。方法HLA配型不相合非血缘脐血移植治疗儿童白血病3例(ALL,CR2),无关供者异基因外周血造血干细胞移植治疗成人白血病1例(M6,NR),输入的脐血有核细胞(4.98～6.68)×107.kg-1,CD34+(2.24～4.93)×105.kg-1。输入的外周血的单个核细胞7.04×108.kg-1,CD34+1.08×106.kg-l。预处理主要为:阿糖胞苷,马利兰,环磷酰胺,甲基环已亚硝脲,抗胸腺细胞球蛋白。结果4例患者完全植入,+15～+25天白细胞(WBC)>1.0×109L-1,+35天～+51天血小板(PLT)>20×109L-1。例1移植后+12及+51天出现可疑为急性GVHDI度,例4于+16天出现肝静脉闭塞综合征(轻型)(VOD),+17天出现急性消化道GVHDI度,+30天出现出血性膀胱炎(HC),例2于移植后六个月复发,放弃治疗而死亡。余3例正常生活或工作。结论无关供者或对于HLA不相合的异基因造血干细胞移植是治疗白血病的有效方法,且可以是安全、可行的。     

造血干细胞移植治疗血液病及实体瘤的疗效分析

目的评价造血干细胞移植(HSCT)治疗血液病和实体瘤的临床疗效及并发症。方法回顾性分析61例行HSCT的患者,其中19例为自体造血干细胞移植(auto-HSCT),37例为异基因造血干细胞移植(allo-HSCT),5例非血缘脐血移植(UCBT)。结果除2例成人UCBT病例外,59例均获造血重建。在auto-HSCT、allo-HSCT(不包括UCBT病例)和UCBT后中性粒细胞绝对计数(ANC)≥0.5×109/L和血小板≥20×109/L所需的时间3组分别为(11.7±3.8)d和(12.7±5.4)d、(12.5±2.6)d和(13.8±4.3)d、(14.2±3.5)d和(30.4±10.5)d。auto-HSCT与allo-HSCT比较造血重建时间差异无显著性意义(P>0.05),但与UCBT组相比差异有极显著性意义(P<0.01)。allo-HSCT组急性移植物抗宿主病(aGVHD)发生率为24.3%,慢性移植物抗宿主病(cGVHD)发生率为35.1%,UCBT组未发生GVHD。auto-HSCT组、allo-HSCT组和UCBT组总生存率(OS),无病生存率(DFS)和累积复发率的Kaplan-Meier曲线无显著差异。auto-HSCT组中移植后免疫治疗组和非免疫治疗组的DFS及累积复发率的Kaplan-Meier曲线有显著差异。结论auto-HSCT与allo-HSCT的3年OS、DFS和复发率相当。auto-HSCT后的免疫治疗能有效降低复发率。非清髓造血干细胞移植(NST)对于有脏器功能受损或年龄大的患者是安全有效的,术后嵌合体的监测指导免疫抑制剂的调节和供者淋巴细胞输注(DLI)能有效预防复发。     

移植前肺部感染对造血干细胞移植疗效的影响

目的观察移植前肺部感染对血液病造血干细胞移植疗效的影响。方法回顾性分析1999年8月-2012年3月我院21例血液病患者造血干细胞移植前出现肺部感染经治疗后接受造血干细胞移植的疗效,其中急性淋巴细胞白血病7例、急性非淋巴细胞白血病10例、骨髓增生异常综合征2例、急性再生障碍性贫血2例。接受异基因造血干细胞移植20例,1例接受自体造血干细胞移植。移植前肺部感染均为深部真菌感染或混合感染,抗真菌治疗后病灶消失或缩小至稳定时进行移植,肺部还有残存病症移植期间持续抗真菌治疗,病灶消失的预处理后给予抗真菌次级预防。结果 21例移植后28 d骨髓均增生活跃,骨髓像完全缓解,其中异基因造血干细胞移植嵌合体均为100%供者型。移植后14例未出现新的肺部感染,其中1例因白血病复发死亡;7例肺部感染加重,考虑为侵袭性深部真菌感染,经抗真菌治疗1~2个月后痊愈2例,显效3例;肺部感染恶化死亡2例,其中1例白血病复发。结论肺部感染的血液病患者经有效抗感染治疗,依然可以行造血干细胞移植;肺部真菌感染对造血干细胞移植成功率无明显影响。     

异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病104例临床分析

目的:评价异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病的疗效.方法:对1999年12月至2010年1月间在湘雅医院接受异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的104例恶性血液病患者进行回顾性分析.采用Kaplan-Meier法计算移植后患者移植相关死亡率(TRM)、复发率(RR)、5年总生存率(OS)及5年无病生存率(DFS...     

异基因造血干细胞移植后肺部并发症的临床观察

目的 观察血液病异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后肺部并发症.方法 对本科2007年1月至2009年12月134例异基因造血干细胞移植患者进行回顾性分析.结果 134例患者中37例出现肺部并发症,发生率为27.6%,死亡14例.结论 肺部并发症是异基因造血干细胞移植的常见并发症,其中感染性肺部并发症占主要,死亡率高.肺部并发症的发生率与预后是与患者和供者的人类白细胞抗原(HLA)配型相合程度、患者的年龄相关.     

G—CSF动员的供者淋巴细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后慢性髓细胞白血病复发

目的探索G-CSF动员的供者淋巴细胞输注治疗异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后白血病复发的方法。方法慢性髓细胞白血病慢性期（CML-CP）患者1例,白消安／环磷酰胺（Bu／Cy）方案预处理,供受者为同胞间HLA6／6相合,回输外周血干细胞,单个核细胞8．69×108／kg,CD34叶。细胞6．69×106／kg。急性移植物抗宿主病（GVHD）的预防采用骁悉（MMF）、环胞素A（CsA）联合短疗程甲氨蝶呤（MTX）方案。移植后125天,分子生物学复发。先后给予3次未经动员的供者淋巴细胞输注（DLI）,细胞剂量分别为1×107／kg、1．5×107／kg和1．5×107／kg。移植后307天,给予G-CSF动员的DLI,MNC8．69×108／kg。结果ANC≥O．5×109／L的时间是移植后16天,PLT≥20×109／L的时间是移植后19天。移植后41天,FISH结果示Bcr／Abl融合基因阴性,XX染色体占59％,移植后125天分子生物学复发。3次DLI后患者Bcr／Abl融合基因逐渐下降,XX染色体的比例逐渐上升,但出现严重的全血细胞减少。在G-CSF动员的DLI联合CsA治疗后,患者造血恢复,完全供者型植入,没有出现GVHD的临床表现,并且达到了分子生物学完全缓解。结论GCSF动员的DLI和传统的较未经G-CSF刺激的DLI安全性高,且有较好的GvL效应。     

AM L行异基因造血干细胞移植后复发应用 FLAG方案联合G-DLI的疗效研究

目的：观察急性髓系白血病（AML）行异基因造血干细胞移植（allo‐HSCT）后血液学复发,应用FLAG方案联合粒细胞集落刺激因子动员的供者淋巴细胞输注（G‐DLI）治疗的临床疗效。方法对于接受异基因外周血造血干细胞移植（allo‐PB‐SCT）后复发的患者,给予FLAG方案化疗后在白细胞降至最低点时给予G‐DLI ,观察白血病缓解及生存情况,并通过 PubMed等检索进行文献复习。结果3例移植术后复发接受FLAG方案联合G‐DLI治疗者均再次获得完全缓解（CR）。1例G‐DLI后无病存活（DFS）13个月,后出现中枢复发,但骨髓一直处于缓解状态,23个月后因多脏器功能衰竭死亡,总生存（OS）为23个月。G‐DLI后发生皮肤Ⅱ度急性高移植物抗宿主病（GVHD）及肝脏Ⅰ度急性GVHD ,经处理后控制,未发生慢性GVHD。1例G‐DLI后12个月再次骨髓复发,放弃治疗于1个月后死亡,DFS及OS分别为12、13个月。G‐DLI后发生局限性皮肤慢性GVHD ,给予小剂量免疫抑制剂后得到控制。1例G‐DLI后无病存活至今,DFS为16个月。G‐DLI后发生局限性皮肤慢性GVHD ,给予小剂量免疫抑制剂后得到控制。结论 FLAG方案联合G‐DLI可能是AML行allo‐HSCT术后复发的有效治疗方式之一。     

异基因造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病的疗效观察

目的:分析异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗慢性粒细胞白血病(CML)的疗效。方法:回顾性分析2001年1月至2011年12月110例CML患者,慢性期93例、加速期8例、急变期9例,97例接受亲缘移植,13例接受非亲缘移植。接受改良Bu/Cy、全身照射联合Bu/Cy预处理方案分别为96、14例。接受环孢素(CsA)联合甲氨蝶呤(MTX)和CsA、MTX、麦考酚酯或抗胸腺细胞球蛋白预防移植物抗宿主病分别有86例和24例。结果:移植后5年感染率37.3%,巨细胞病毒血症发生率30.9%。急性移植物抗宿主病26例,慢性移植物抗宿主病46例。移植相关死亡(TRM)18例,10例死于GVHD,8例死于严重感染。结论:allo-HSCT是治疗CML有效手段,慢性期治疗效果好。     

造血干细胞移植后硬皮病样慢性移植物抗宿主病的临床表现

目的探讨异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后硬皮病样慢性移植物抗宿主病（ScGVHD）的发病率、危险因素。方法 对我院2012 年1 月~2014 年12 月之间进行allo-HSCT 的259 例患者发生ScGVHD 的情况进行回顾性分析。结果134 例 （51.7%）发生慢性移植物抗宿主病（cGVHD）,其中22例为硬皮病型,即ScGVHD在移植患者中的发病率为8.49%（22/259）、在 cGVHD患者中的发病率为16.4%（22/134）。ScGVHD出现的中位时间为移植后12.5（4~28）月。单因素分析结果提示预处理方 案是否含全身照射（TBI）（P=0.031）、GVHD预防方案是否含霉酚酸酯（MMF）（P=0.046）、cGVHD（P=0.008）的发生、供者淋巴 细胞回输（DLI）（P=0.001）均与ScGVHD的发生具有相关性。多因素分析确定cGVHD[相对危险度（RR）=3.512,95%可信区间 （CI）=1.235~9.987,P=0.018]和DLI（RR=5.217,95% CI=1.698~16.029,P=0.004）为ScGVHD 发病的独立危险因素。结论 ScGVHD是移植后一种较为少见的并发症,移植物抗宿主病（GVHD）和DLI是其发病的独立危险因素。     

Graft-versus-leukemia effects from donor lymphocyte infusion after nonmyeloablative allogeneic bone marrow transplantation in mice

Background Nonmyeloablative allogeneic bone marrow transplantation has been used since the 1990s as a new hematological stem cell transplantation strategy for treating hematological diseases. The purpose of this study was to explore the graft-versus-leukemia (GVL) effects of donor lymphocyte infusions (DLIs) after nonmyeloablative allogeneic bone marrow transplantations, while assessing the declines in treatment-associated morbidity, mortality, and graft-versus-host disease (GVHD).Methods A total of 615 (H-2k) mice were injected with L615 tumor cells and received 500 cGy (60Coγ-ray) irradiation three days later, followed by an allogeneic bone marrow transplantation (allo-BMT). The allo-grafts consisted of 3×10（7） bone marrow cells and 1×10（7） spleen cells from BALB/C (H-2d) donor mice. Two days after the allo-BMT, the recipient mice were given 200 mg/kg of cyclophosphamide. Subsequently, recipient mice were infused with either donor spleen cells ［2×10（7）］ on day 14 or 21, or donor spleen cells ［5×10（7）］ pretreated with hydrocortisone and cyclosporin A (CsA) in vitro on day 14 post-BMT.Results The median survival time of mice that received DLI on day 21 and pretreated DLI on day 14 post-BMT was longer than that of controls and the day 14 DLI group (P&lt;0.01). No evidence of severe GVHD was observed in the day 21 DLI group nor in the day 14 treated DLI group. Mixed chimerism was confirmed in the day 14 DLI group, the day 14 treated DLI group, and the day 21 DLI group on the thirteenth day post-transplantation; full donor chimerism was observed two weeks after DLI.Conclusion Donor lymphocyte infusion after nonmyeloablative bone marrow transplantation may reduce transplantation-associated morbidity and mortality while strengthening graft-versus-leukemia effects.     

定量监测Janus激酶3基因变化在移植物抗宿主病中的初步研究

目的 观察异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后外周血单个核细胞Janus激酶3（JAK3）mRNA表达水平的变化,探讨其与移植物抗宿主病（GVHD）之间的关系。方法 采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ—RT—PCR）技术连续监测26例allo—HSCT后不同时问83份外周血单个核细胞JAK3 mRNA表达水平。结果 26例进行allo—HSCT的患者,14例患者移植后未发生GVHD,JAK3／ABL mRNA表达水平中位数为8．71;1例发生急性GVHD（aGVHD）,JAK3／ABL为31．94;11例发生慢性GVHD（cGVHD）,JAK3／ABL为19．23。连续观察4例患者,移植后1个月的JAK3／ABL表达水平与移植前比较无变化,但随着GVHD的出现,JAK3／ABL表达水平又很快升高,并且随着GVHD治疗好转,JAK3／ABL表达水平又很快下降。结论 GVHD患者JAK3 mRNA表达水平与GVHD的病情演变相关。     

造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病疗效分析

目的 评价自体(auto-)造血干细胞移植(HSCT)或异体(allo-)HSCT治疗慢性粒细胞白血病(CML)的临床疗效。方法 57例CML接受HSCT治疗,其中8例采用净化auto-HSCT、39例相关allo-HSCT、10例无关allo-HSCT。预处理方案:32例接受全身放疗+环磷酰胺(TBI+CY)、24例改良BuCY(羟基脲、马利兰、阿糖胞苷、环磷酰胺)、1例MACC(马法兰、阿糖胞苷、环磷酰胺、环已亚硝脲)。移植物抗宿主病(GVHD)预防:相关移植环孢素A+甲氨蝶呤(CsA+MTX)、无关移植CsA+MTX+霉酚酸酯(MMF)+抗胸腺细胞球蛋白(ATG)方案.Kaplan-Meier生存模型评估移植后无病生存期。结果 8例接受激活骨髓联合反义寡核苷酸或联合STI571体内外净化自体移植后,除1例死于移植中相关并发症外,其余均获得部分或完全细胞或分子遗传学缓解。49例allo-HSCT患者除1例死于肝静脉闭塞综合征(VOD)和1例移植前急变患者移植后无效,其余患者均获完全缓解。移植中感染发生率为33.3%,VOD发生率7.0%,出血性膀胱炎发生率22.8%,巨细胞病毒间质性肺炎8.8%,VOD、出血性膀胱炎和巨细胞病毒间质性肺炎均发生在异体移植患者。急性和慢性GVHD在相关与无关移植分别为41.0%和48.6%与40.0%和42.9%。移植后白血病复发率自体移植57.1%、异体移植12.8%。移植后5年无病生存率在自体与异体移植分别为25.0%和61.7%。移植前慢性期与加速期和急变期患者allo-HSCT后5年无病生存率分别为70.7%和34.1%,相关与无关allo-HSCT后无病生存期存在差异(P<0.05)。结论 allo-HSCT对CML患者,尤其是移植前慢性期患者具有较高的临床治愈率;CsA+MTX+MMF+ATG四联预防无关allo-HSCT中GVHD能降低移植后GVHD的发生率及程度;采用净化骨髓自体移植能延长CML患者生存期,甚至少部分患者可获得临床治愈。     

造血干细胞移植后巨细胞病毒感染临床分析

目的观察各种类型的造血干细胞移植（HSCT）后巨细胞病毒（CMV）感染的发生情况及疗效。方法选择我院59例异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）和自体造血干细胞移植（auto—HSCT）患者移植后不同时期血和尿标本，检测CMV—pp65抗原及（或）CMV—DNA（荧光定量PCR法）进行动态观察分析。CMV感染的预防采用更昔洛书（DHPC）5～10mg／kg，1次／12h，分别在移植前第8天至移植当天及当CMV血清学检测阳性或发生CMV病时应用2-4周，并可同时应用大剂量丙种球蛋白。结果CMV感染在allo—HSCT后好发，非亲缘性移植CMV感染率高，9例allo—HSCT出现CMV感染发生在移植后＋42-＋68天，其中5例均存在不同程度的移植物抗宿主病（GVHD），尤其是Ⅱ～Ⅳ度急性GVHD，2例进展为巨细胞间质性肺炎（CMV-1P）；多为既往CMV感染被激活，对CMV—DNA阳性而无症状者进行预防治疗可使CMV—DNA阴转，可降低CMV病的发生。结论CMV病是allo—HSCT的常见并发症及主要致死原因之一；因此积极防治GVHD的发生及发展、定期监测CMV血清学阳性患者、早期干预性治疗可以提高移植的成功率。     

造血干细胞移植后出血性膀胱炎的观察

目的:探讨常规预防方案干预下,造血干细胞移植后出血性膀胱炎(hemorrhagiccystitis,HC)的发病情况、危险因素和有效的防治方法。方法:62例恶性血液病患者(自体移植32例,异基因移植30例),移植过程中均进行常规的HC和移植物抗宿主病(graftversushostdisease,GVHD)预防。分析移植后HC发生的特点及与移植类型、其他临床特征的关系和防治效果。结果:共6例发生HC(9.68%),均为异基因移植患者。平均发病时间为46.50天,平均病程为42.50天。4例发生巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染,其中3例合并GVHD,另有1例仅出现GVHD。经治疗后3例完全缓解,2例部分缓解,1例行膀胱切除术。结论:在采取充分的预防措施后,HC多为晚期发生,可能与异基因移植、GVHD和CMV感染有关,病程迁延、部分难治。     

Idiopathic inflammatory demyelinating diseases of the central nervous system in patients following allogeneic hematopoietic stem cell transplantation: a retrospective analysis of incidence， risk factors and survival

Background Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT) is a curative therapy for many hematological diseases,but there are many complications following allo-HSCT,among which neurolog...     

Changes in the T-cell receptor Vβ gene repertoire after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation

Background We distinguished graft-versus-host disease (GVHD) from graft-versus-leukemia (GVL) effects and to investigate the distribution of T-cell receptor (TCR) Vβ gene repertoire in individuals with leukemia before and after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT). Methods Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were obtained from 10 normal individuals, 8 donors and 11 patients with leukemia before and after transplantation. Polymerase chain reaction (PCR) amplification of complementarity-determining region 3 (CDR3) of 24 TCR Vβ genes was used to examine serial samples of PBMC. The PCR products were further analyzed by genescan to evaluate clonality of T cells. Results The 24 TCR Vβ gene repertoire displayed highly diverse and polyclonal spectratypes in all normal individuals and 4 of 8 donors. Another 4 donors expressed part of the 24 TCR V~ subfamily and 1 donor had oligoclonality. The expressions of the 24 TCR V~ subfamilies were skewed and restricted in 11 leukemia patients before and after transplantation. Some absences of 24 TCR Vβ subfamily expression were quite similar between the recipients pro-transplantation and related donors. The number of subfamilies expressed increased over time post-transplantation, but the restricted expressions of the subfamily could last 6-30 months after transplantation. All patients with GVHD and some without GVHD exhibited T cell clonal expansion. The expansive T cell clone was distributed in Vβ 2-3, 16-17, 18-19, 21 and Vβ 23 in patients with GVHD and in Vβ 7, 9, 16 and 19 in patients without GVHD. One patient with syngeneic-HSCT (syn-HSCT) had Vβ 15 and 16 T cell expansion after transplantation. One patient displayed Vβ 18 T cell expansion after donor lymphocyte infusion (DLI). Conclusions Normal individuals express the entire 24 TCR Vβ gene repertoire and have polyclonal distribution. However, the TCR Vβ gene repertoire is only partially expressed in some donors. The TCR Vβ gene repertoire is restrictedly expressed in a skew fashion in patients with leukemia before and after transplantation. The number of TCR Vβ gene subfamilies increases over time posttransplantation. GVHD and GVL effects may induce the proliferation of T cell clones. Clinical GVL response may be distinguished from GVHD alloreactivity through the host MHC antigen.