吡那地尔预处理对缺氧/复氧成后年大鼠心肌细胞内钙离子浓度的影响

目的观察吡那地尔(Pinacidil)预处理对缺氧/复氧后成年大鼠心肌细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响,以探讨吡那地尔在缺氧/复氧中抑制钙超载作用的机制。方法通过Langen-dorff离体心脏灌注装置,用Ⅱ型胶原酶对心脏逆行灌注,进行成年大鼠心肌细胞的分离与培养,建立心肌细胞缺氧/复氧模型。实验分组及处理:(1)正常组(NOR组):细胞正常培养;(2)缺氧/复氧组(CON组):细胞在95%N2+5%CO2培养箱中缺氧45 min,复氧1 h;(3)吡那地尔组(Pina组):先加入吡那地尔(30μmol/L)预处理15 min,再缺氧45 min,复氧1h;(4)格列苯脲拮抗Pina组(Gi+Pina组):先用格列苯脲(50μmol/L)处理5 min后,余处理同Pina组。通过Fluo-3/AM荧光指示剂负载,用激光共聚焦显微镜检测心肌细胞Ca2+浓度变化。结果 NOR组心肌细胞内钙离子荧光强度值较低;细胞缺氧45 min,复氧1 h后其荧光强度值与NOR组相比显著增高(P<0.01);而Pina组细胞内荧光强度值较CON组及Gi+Pina组低(P<0.01)。结论心肌细胞缺氧/复氧后...     

吡那地尔缺血后处理对大鼠心脏的保护作用

目的研究吡那地尔缺血后处理对离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤的影响。方法应用Langendorff离体心脏灌流技术建立大鼠全心缺血/再灌注模型和膜片钳细胞贴附式记录技术。结果①与对照组比较,缺氧/复灌组表现出明显的心脏损伤效应,复灌过程中各项心功能指标(LVDP、±LVdp/dtmax)的恢复均低于对照组(P<0.05);与缺氧/复灌组比较,经吡那地尔缺血后处理组的顿抑心肌收缩功能恢复明显提前(P<0.01),心功能(LVDP、±LVdp/dtmax)恢复增强(P<0.05);②吡那地尔在缺血/再灌注条件下提高KATP通道的电流幅度,增加通道的开放概率,各组之间比较差异有显著性(P<0.01)。结论短暂低氧方式同时经吡那地尔缺血后处理,可增强大鼠顿抑心脏对缺血/再灌注损伤的抵抗能力,表现出明显的心脏保护作用。     

吡那地尔超极化停搏对大鼠离体心脏p38MAPK的影响

目的 探讨吡那地尔超极化停搏对大鼠离体心脏p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的影响.方法 成年雄性SD大鼠随机分为四组:自然停搏组(A组)、St.Thoma液停搏组(B组)、吡那地尔超极化液停搏组(C组)和SB203580液停搏组(D组),每组8只.采用Langendorff离体心脏灌注模型,检测冠脉流量(CF)、心率(HR)、左室发展压(LVDP)、左室收缩峰压(LVSP)和左室压力瞬时最大变化率(dp/dtmax)、心肌磷酸化p38MAPK和非磷酸化p38MAPK的表达.结果 与K-H液平衡灌注15 rnin时比较,再灌注20 min时,A组、B组、D组CF、HR、LVSP、LVDP及dp/dtmax降低(P＜0.05).与C组比较,A组、B组、D组再灌注20 min时CF、HR、LVSP、LVDP及dp/dtm降低,再灌注30 min时磷酸化p38MAPK表达下调(P＜0.05),非磷酸化p38MAPK表达上调(P＜0.05).结论 磷酸化p38MAPK介导了吡那地尔超极化停搏对大鼠离体心脏的保护,促进大鼠心肌缺血-再灌注时心功能恢复.     

吡那地尔对压力负荷性心力衰竭大鼠心肌重塑的影响

目的 探讨吡那地尔对压力负荷性心力衰竭大鼠心功能及心肌重塑的影响.方法 腹主动脉缩窄法建立大鼠压力负荷性心力衰竭模型,40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(11=10)、手术组(n=20)和吡那地尔组(n-10).吡那地尔组大鼠从术后4周开始应用KATP开放剂吡那地尔2mg·kg-1·d-1治疗.术后第12周行血流动力学检测动脉收缩压、舒张压,左室内压上升下降最大速率(±dp/dtmax)和左室舒张末压(LVDEP).酶联免疫吸附法(EUSA)测定血清B型脑钠肽(BNP)、I型胶原和Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)浓度.处死大鼠后称量心脏质量,计算心脏重量指数(心脏质量/体质量).HE染色计算心肌纤维直径.结果 ①手术组大鼠心脏重量指数和心肌纤维直径均明显升高,吡那地尔组均显著降低;②手术组收缩压、舒张压、LVEDP明显升高,吡那地尔组明显降低;±dp/dtmax在手术组明显降低(P<0.01).手术组血清BNP水平明显升高,吡那地尔组虽然也降低,但仍高于假手术组(P<0.01);③手术组I型胶原和PⅢNP的血清浓度明显大于假手术组.吡那地尔组均明显降低(P<0.01).结论 吡那地尔可改善大鼠腹主动脉缩窄术后的心脏肥厚和心肌纤维化,延缓心力衰竭的进展.     

吡那地尔对培养大鼠交感神经元烟碱电流的影响

目的　研究ATP敏感性K+ 通道 (KATP)开放剂吡那地尔对大鼠颈上交感神经元烟碱诱发电流的影响。方法　采用培养的交感神经元的全细胞膜片钳技术。结果　吡那地尔在较高浓度时 (10 0 μmol·L-1)对烟碱电流具有一定的抑制作用 ,但并不影响烟碱受体的失敏 ;KATP阻断剂格列苯脲不能对抗吡那地尔对烟碱电流的抑制效应。结论　吡那地尔对大鼠交感神经元烟碱电流具有一定的抑制作用 ,其作用并不通过KATP介导。     

吡那地尔对心肌保护作用机制的研究进展

近年来研究发现 ,吡那地尔对心肌产生保护作用的靶点是心肌线粒体内膜K(ATP)通道〔mitoK(ATP)〕 ,但是这种缺血预适应的保护作用的机制仍然没有清楚。该文对吡那地尔作用于心肌mitoK(ATP)通道的特征和机制作了进一步的阐述。     

吡那地尔对慢性心力衰竭大鼠心功能影响的研究

目的 评价ATP的感性钾通道(KATP)开放剂吡那地尔对大鼠慢性压力超负荷性左心室肥厚/心力衰竭模型动物心功能的影响.方法 将成年Wistar大鼠60只随机分为3组:手术药物组(A组)、手术对照组(B组)和假手术对照组(C组),A组大鼠从术后4周开始应用吡那地尔,比较术后第12周和16周B型钠尿肽(BNP)及血流动...     

黄连素与吡那地尔豚鼠心房的影响

黄连素在临床上主要用于治疗肠道感染性疾病 ,也可用于治疗心衰和心律失常 ,动物实验亦证实它有明显的抗心律失常作用[1] 。吡那地尔 (Ｐｉｎ)为一钾通道开放剂 ,具有明显的舒血管效应而用于高血压和心绞痛的治疗[2 ] ,但黄连素(Ｂｅｒ)与Ｐｉｎ是否有对抗作用 ,以及其作用是否与阻钾有关 ,未见报道。本文主要研究两药对豚鼠心房的作用及其相互作用。1　方法与结果1.1　药品　黄连素 (ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ,Ｂｅｒ) ,广西玉林制药厂 ;吡那地尔 (ｐｉｎａｃｉｄｉｌ,Ｐｉｎ) ,同济医科大学药理室赠送 ;氨甲酰胆碱(ｃａｒｂａｃｈｏｌ,Ｃａｒ) ,…     

吡那地尔和硝苯地平对大鼠离体血管的作用

吡那地尔和硝苯地平对大鼠离体血管的作用１汪海路新强张雁芳龙超良王家惠（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）吡那地尔（ｐｉｎａｃｉｄｉｌ，Ｐｉｎ）属ＡＴＰ敏感性钾通道激活剂类抗高血压药物，其抗高血压作用的强度，持续时间和反射性加快心率作用等...     

吡那地尔血液超极化停跳对缺血心肌保护的研究

目的：观察含吡那尔的血液超极化停跳液对体外循环下缺血心肌的保护效果。方法：18条10－15kg健康犬随机分为对照组（A组）、常温血液超极化组（B组）、低温血液超极化组（C组），每组6条。对照组以4℃标准St.Thomas液（K^ 16mmol/L)为心脏停跳液，常温血液超极化组和低温血液超级化组分别以37℃／4℃吡那地尔50μmol/L的含血St.Thomas液（K^ 5mmol/L,含血比例1：1）为心脏停跳液。体外循环期间，A组和C组血液温度保持在26℃－28℃，B组保持在35℃－37℃。体外循环（CPB）期间，全心缺血60min，恢复灌注30min。对比观察心脏停复跳情况及心肌超微结构变化。结果：1、低温血液超极化组心脏复跳较快；2、低温血液超极化组电镜摄片观察未见严重的心肌损害，而对照组和常温超级化组均恢复较差。结论：含ATP敏感性钾通道开放剂（KCOs)吡那地尔的低温血液停跳液诱导的超极化停跳，其心肌保护效果明显优于传统的高钾去极化停跳，也优于常温血液超极化停跳。     

脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮质NR2A及NR2B受体表达变化

目的探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体亚单位NR2A/2B表达与缺血再灌注损伤的关系。方法建立局灶性大脑中动脉阻塞大鼠模型观察缺血2 h再灌6～96 h的组织病理学改变,实时荧光定量PCR及Western印迹法测定大脑皮质NR2A/2B mRNA及蛋白表达。结果大鼠缺血再灌注后6 h,皮质开始出现明显病理学改变,12 h可见血管内有淤血,24 h梗死区锥体细胞出现严重的核固缩、核溶解,几乎看不到正常神经元,48 h出现大面积角质化,96 h可见炎症细胞浸润。与假手术组相比,再灌组NR2A/2B mRNA于再灌注6 h即开始一直持续明显下降(P<0.01),再灌12和24 hNR2A/2B mRNA比值均为1∶2,偏离正常的1∶1,48 h两者的表达开始上调,至96 h NR2A/2B mRNA比值达到1∶1;再灌24 h后NR2A蛋白表达显著降低(P<0.05);NR2B蛋白于再灌6 h开始明显降低,一直持续到24 h(P<0.01),48 h开始上调,96 h后蛋白表达接近假手术组水平。结论缺血2 h再灌注24 h后神经元损伤最严重,并与NR2A/2B表达改变存在时间一致性和受体亚型选择性。     

Effects of ischemia-reperfusion and pretreatment with mildronate on rat liver mitochondrial function

Mildronate (3-(2,2,2-trimethylhydrazinium) propionate), which is mostly used in cardiological practice and is considered an anti-ischemic drug, was designed to inhibit carnitine biosynthesis in order to prevent accumulation of cytotoxic intermediate products of fatty acid beta-oxidation. Recently it was shown that the mitochondrial respiratory chain may also be a target for mildronate action. In this study, we aimed to investigate whether mildronate can protect the liver against a 90-min normothermic ischemia/30-min reperfusion-induced mitochondrial dysfunction. Rats were pre-treated for one or two weeks with mildronate (100 mg/kg/day or 200 mg/kg/day) or Ringer solution and subjected to ischemia/reperfusion. We found that ischemia/reperfusion caused a decrease in mitochondrial State 3 respiration rate and in the respiratory control index (RCI), and an increase in State 2 respiration rate with succinate, glutamate + malate and palmitoyl-L-carnitine + malate. One or two weeks of pre-treatment of rats with different doses of mildronate did not reduce the ischemia/reperffusion-induced decrease in the State 3 respiration rate or RCI; however, a one week pre-treatment slightly diminished the increase in the State 2 respiration rate with glutamate + malate substrates. The leakage of the liver enzymes, aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase and lactate dehydrogenase, was similar in both the untreated and pre-treated with mildronate groups. No steatotic livers were observed in any experimental groups after mildronate pre-treatment. In conclusion, 90 min of liver ischemia followed by a 30 min reperfusion has a deleterious effect on rat liver mitochondrial function. Mildronate pre-treatment of rats at doses of 100 or 200 mg/kg/day for one or two weeks did not prevent ischemia/reperfusion-induced mitochondrial dysfunction and liver injury.     

丙泊酚对自由基引起的大鼠脑皮质线粒体损伤的保护作用

目的：在大鼠脑皮质线粒体自由基损伤的体外实验中，观察丙泊酚的保护作用，为治疗脑缺血再灌注损伤提供实验依据。方法：采用抗坏血酸-Fe^2＋体系诱导产生氧自由基，对分离的大鼠脑线粒体进行体外损伤实验，与丙泊酚温育后测定线粒体膜流动性、肿胀度和丙二醛（MDA）含量的变化。结果：脂质过氧化可降低线粒体膜流动性、增加线粒体肿胀和MDA含量，30μmol／L的丙泊酚均可减轻上述损伤。结论：脂质过氧化使大鼠脑皮质线粒体结构和功能显著量损．丙泊酚对此有明显保护作用。     

银杏内酯B对缺血/再灌脑损伤大鼠的保护作用

目的探讨银杏内酯B对缺血/再灌注脑损伤大鼠的保护作用及其可能的作用机制。方法通过颈总动脉栓线造成大脑中动脉缺血,缺血3h后将线拔出以实现大脑中动脉血流再灌注,同时观察银杏内酯B对大鼠神经症状,脑梗死范围以及银杏内酯B对缺血侧脑组织匀浆SOD活力,MDA含量,LDH活力及LD含量的影响。并且进行了病理组织切片检查。结果银杏内酯B对缺血3h大鼠神经症状无影响,对再灌21h大鼠神经症状有明显的改善作用。银杏内酯B10、5mg·kg-1能明显降低脑梗死范围,同时银杏内酯B能升高SOD活力,减少MDA含量及LDH活力,但对LD含量无明显作用。病理切片检查结果表明,银杏内酯B能减轻缺血侧大脑的水肿及空泡现象。结论银杏内酯B对缺血/再灌注脑损伤有保护作用,该作用可能与其升高SOD活力,降低MDA含量及LDH活力有关。     

罗格列酮对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨罗格列酮对局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用及其机制。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉局灶性脑栓塞模型,缺血2h,再灌注24h。评价神经功能状态,测定脑梗死体积;分光光度法测定组织丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量以及一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性。免疫组化法测定细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达,HE染色观察组织病理学改变。结果罗格列酮能降低缺血再灌注后脑梗死体积,改善神经功能状态,降低脑组织MDA、NO含量,升高SOD活性并降低NOS、MPO活性以及组织ICAM-1表达,同时能减轻脑组织病理学损害。结论罗格列酮对大鼠脑缺血/再灌注损伤具有明显保护作用,其机制与其清除氧自由基和抗炎有关。     

辛伐他汀对大鼠骨骼肌线粒体膜流动性及ATP酶活性的影响

目的：观察辛伐他汀（Sim）对大鼠骨骼肌线粒体膜流动性及ATP酶活性的影响.方法：大鼠口服给予3种不同剂量Sim,酶法测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）及肌酸激酶（CK）活性.以1-苯氨基萘-8-磺酸（ANS）、1,6-二苯基-1,3,5-己三烯（DPH）为荧光探针标记骨骼肌线粒体膜浅层及深层,测定骨骼肌线粒体膜荧光强度（F）,荧光偏振度（P）及平均微黏度（^-η）.比色法测定Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性.结果：给予Sim 3.6,7.2 mg·kg^-1·d^-1组,血清ALT、AST、CK和骨骼肌线粒体膜Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的活性均无显著变化.而给予Sim 14.4mg·kg^-1·d^-1,血清CK活性显著增高,骨骼肌线粒体膜Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性则明显降低.给予Sim3.6,7.2,14.4 mg·kg-1·d-1组,ANS标记的线粒体膜浅层和DPH标记的线粒体膜深层F、P、^-η均明显降低,表明Sim可增加线粒体膜浅层及深层流动性.结论：Sim在高剂量时可导致骨骼肌细胞损伤,其机制可能与Sim能增加骨骼肌线粒体膜流动性,降低骨骼肌线粒体膜Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶及Na^＋-K^＋-ATP酶活性有关.     

灯盏生脉胶囊对大鼠脑缺血及再灌注损伤的影响

目的:观察灯盏生脉胶囊对大鼠脑缺血及再灌注损伤的作用并探讨其作用机制。方法:将80只大鼠随机分为假手术1组、假手术2组、生理盐水对照组、灯盏生脉胶囊低剂量组、灯盏生脉胶囊高剂量组,每组16只。采用改良的ZeaLonga线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞模型,缺血前后口服灯盏生脉胶囊,进行神经病学评分,检测凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fg)、血小板最大聚集率等血液学指标以及血浆内皮素(ET)、血清一氧化氮(NO)水平,并测量脑梗死体积、脑水肿体积、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:灯盏生脉胶囊低剂量组和高剂量组大鼠脑缺血再灌注2h及24h,神经病学评分均低于生理盐水对照组(1.75±0.68、1.71±0.77对2.35±0.86;1.88±0.81、1.71±0.69对2.65±1.17,P<0.05);灯盏生脉胶囊高剂量组大鼠PT较生理盐水对照组延长(18.0±0.8s对17.0±0.6s,P<0.05),ET含量则低于生理盐水对照组(13.9±4.9pg/ml对26.3±13.2pg/ml,P<0.05);灯盏生脉胶囊低剂量组和高剂量组大鼠脑梗死体积比及脑水肿体积比均低于生理盐水对照组(10.3±3.8%、9.7±5.7%对11.9±3.0%,7.7±3.0%、6.9±3.9%对18.3±7.0%,P<0.05);灯盏生脉胶囊低剂量组和高剂量组大鼠脑组织SOD活性均高于生理盐水对照组(291±78U/mg、301±92U/mg对213±40U/mg,P<0.05),MDA含量则明显低于生理盐水对照组(1.41±0.47nmol/mg、1.36±0.61nmol/mg对2.09±0.32nmol/mg,P<0.05,P<0.01);其余指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:灯盏生脉胶囊具有防治大鼠脑缺血及缺血再灌注损伤的作用,其作用机制可能为提高抗氧化酶活性,抑制脂质过氧化反应、减少自由基对脑组织的损害,以及抑制凝血、降低血管阻力等。