组蛋白去乙酰化酶2的表达在烟草烟雾暴露后哮喘大鼠气道Th1/Th2平衡中的作用研究

目的 通过研究烟草烟雾暴露对哮喘大鼠气道组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,HDAC）2以及血浆、支气管肺泡灌洗液（BALF）中干扰素（interferon,IFN）-γ、白细胞介素（interleukin,IL）-4表达的影响,探讨HDAC2在辅助性T淋巴细胞（T helper cell）Th1/Th2平衡中的作用。方法 50只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、烟雾暴露+哮喘组、布地奈德+哮喘组、布地奈德+烟雾暴露+哮喘组,建立哮喘大鼠模型、哮喘大鼠烟雾暴露模型以及布地奈德干预模型。免疫组织化学法检测各组大鼠气道HDAC2蛋白的表达,酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测血浆和BALF中Th1型特征性细胞因子IFN-γ以及Th2型特征性细胞因子IL-4水平。结果 与对照组相比,烟雾暴露+哮喘组、哮喘组大鼠气道HDAC2蛋白表达降低,与哮喘组相比,烟雾暴露+哮喘组大鼠气道HDAC2蛋白表达降低,差异均有统计学意义（P均<0.05）。与布地奈德+哮喘组相比,布地奈德+烟雾暴露+哮喘组大鼠气道HDAC2蛋白表达降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组相比,哮喘组大鼠和烟雾暴露+哮喘组大鼠血浆、BALF中IFN-γ表达减少,IL-4表达增加,差异均有统计学意义（P均<0.01）;与哮喘组相比,烟雾暴露+哮喘组大鼠血浆、BALF中IFN-γ表达减少,IL-4表达增加,差异均有统计学意义（P均<0.01）;与布地奈德+哮喘组相比,布地奈德+烟雾暴露+哮喘组大鼠血浆、BALF中IFN-γ表达减少,IL-4表达增加,差异均有统计学意义（P均<0.01）;肺组织HDAC2蛋白的表达与血浆中IFN-γ表达呈正相关（r=0.533,P<0.01）,与IL-4表达呈负相关（r=-0.642,P<0.01）。结论 烟草烟雾暴露可以下调哮喘大鼠模型肺组织HDAC2蛋白的表达,从而影响气道炎症,IFN-γ、IL-4的表达以及布地奈德的治疗效果,这可能是烟草烟雾恶化哮喘气道Th 1/Th2平衡的一个免疫学机制。     

红参水提物对哮喘气道炎症小鼠的治疗作用及其机制研究

目的 探讨红参水提物对哮喘气道炎症小鼠模型的治疗作用及其机制。方法 选取BABL/c小鼠75只,采用随机数字表法分为正常组（等量生理盐水）、模型对照组（等量生理盐水）、低剂量组（红参水提物100mg/kg）、高剂量组（红参水提物200mg/kg）、阳性对照组（地塞米松0.5mg/kg）各15只,除正常组外均成功制作哮喘气道炎症小鼠模型,给予对应的处理措施,对比各组小鼠末次激发后24h的肺泡灌洗液（BALF）中的各种炎性细胞因子、血清免疫球蛋白E （IgE）、肺组织中羟脯氨酸含量,并采用HE染色观察各组大鼠肺组织病理变化。结果 模型对照组BALF中白细胞介素-4（IL-4）、IL-5、IL-14、转化生长因子β1（TGF-β1）、血管内皮生长因子（VEGF）、血清免疫球蛋白E （IgE）、肺组织羟脯氨酸均高于正常组（P<0.01）;低剂量组、高剂量组及阳性对照组的BALF中IL-4、IL-5、IL-14、TGF-β1、VEGF水平、血清IgE、肺组织羟脯氨酸均低于模型对照组（P<0.01）;高剂量组BALF中IL-4、IL-5、IL-14、TGF-β1、VEGF水平、血清IgE、肺组织羟脯氨酸均低于低剂量组（P<0.05）。结论 红参水提物主要通过减轻哮喘小鼠模型的气道炎性反应程度达到治疗作用。     

流感嗜血杆菌下气道定植对哮喘小鼠肺组织TH17细胞表达及气道重塑的影响

目的 检测下呼吸道流感嗜血杆菌定植对哮喘小鼠TH17细胞的表达、气道炎症及对气道重塑的影响。方法 用卵清蛋白（ovalbumin,OVA）致敏和激发制备慢性哮喘小鼠模型,同时制作流感嗜血杆菌琼脂糖菌珠,在气道注菌之后的第1、7、21天处理小鼠,观察肺组织病理变化,流式细胞仪检测肺组织TH17细胞表达、测定CD4⁺T细胞TLR4的表达,并进行气道细菌培养和肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）细胞计数。结果 与正常组和哮喘非注菌组相比,哮喘注菌组有明显的哮喘症状和感染症状;病理学结果显示哮喘组气道黏膜水肿,管壁增厚,大量的炎性细胞浸润,注菌后炎症加重。哮喘小鼠气道注菌之后,随着时间的延长,气管壁厚度（WAt/Pbm）和平滑肌厚度（WAm/Pbm）均显著高于哮喘非注菌组。细菌学培养结果显示正常组第1、7天气管流感嗜血杆菌培养阳性,第21天阴性;哮喘组注菌后1、7、21天气管流感嗜血杆菌检测均阳性。流式细胞仪检测小鼠肺组织TLR4和TH17在CD4⁺T细胞的表达,哮喘组的TLR4和TH17表达均显著高于正常组,注菌之后二者表达显著增加,观察指标在哮喘注菌组变化更明显,差异有统计学意义（P<0.05）。BALF细胞计数结果显示,哮喘组BALF中细胞数明显高于正常组,注菌后细胞数进一步增多。相关性分析发现,哮喘组小鼠肺组织中CD4⁺T细胞TLR4的表达与BALF细胞总数呈正相关（r=0.746,P<0.05）,TH17表达与CD4⁺T细胞TLR4的表达、气道WAt/Pbm、WAm/Pbm和BALF细胞总数呈正相关（分别r=0.612、0.611、0.537、0.752,P<0.05）。结论 流感嗜血杆菌下呼吸道定植可以通过激活TLR4,增加哮喘小鼠肺组织TH17细胞表达,加重哮喘气道炎症和气道重塑,可能是难治性哮喘预后的重要机制之一。     

止喘汤对哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响

[目的]观察早期应用中药复方对哮喘气道炎症和气道重塑的治疗作用。[方法]40只SD大鼠随机分为4组:正常组、哮喘组、布地奈德(BUD)组及止喘汤组,采用卵蛋白(OVA)致敏加激发法复制慢性哮喘模型,观察各组大鼠外周血(PB)、支气管肺泡灌洗液(BAL)中嗜酸性粒细胞(EOS)计数的变化情况,同时对肺组织切片行苏木精-伊红(HE)染色测定支气管壁周围EOS个数及气道壁厚度。[结果]哮喘组与正常组比较:PB、BAL和气道壁周围EOS的计数水平明显升高,气道壁明显增厚(P<0.01)。药物干预后,干预组与哮喘组比较:PB、BAL和气道壁周围EOS的计数水平明显降低,气道壁明显变薄(P<0.01);且药物干预组之间相比较无统计学差异(P>0.05)。[结论]止喘汤不但能抑制哮喘气道炎症,而且还具有干预气道重塑的作用。     

基于TWEAK/Fn14信号通路探讨大黄酚对OVA诱导哮喘小鼠的保护作用

[目的] 观察大黄酚对卵清蛋白（OVA）诱导哮喘小鼠模型的保护作用,并探讨肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子（TWEAK）/成纤维细胞生长诱导因子14（Fn14）信号通路与其保护作用的关系。[方法] 60只C57BL/6小鼠按体质量随机分为正常对照组（CON组）、模型组（OVA组）、地塞米松阳性对照组（DEX组）、大黄酚低剂量组（RHU-L组）、大黄酚中剂量组（RHU-M组）和大黄酚高剂量组（RHU-H组）,每组10只。实验结束后,对各组小鼠的哮喘症状进行评分;Diff-Quick染色法计量各组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞数。苏木精-伊红（HE）染色法观察肺组织病理学变化;酶联免疫吸附法检测各组小鼠BALF中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的含量;免疫组化法检测各组小鼠肺组织中TWEAK蛋白的表达水平。蛋白免疫印迹法检测各组小鼠肺组织TWEAK/Fn14信号通路蛋白TWEAK和Fn14的表达水平。[结果] 大黄酚可明显降低哮喘症状评分（P<0.05）,减少哮喘小鼠BALF中总细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞的数量（P<0.05）,改善肺组织的病理学变化,降低BALF中IL-4、IL-5、TNF-α和IL-1β炎症因子的水平（P<0.05）,减少肺组织中TWEAK和Fn14蛋白表达（P<0.05）。[结论] 大黄酚对OVA致哮喘小鼠模型具有较好的保护作用,其可能与调节TWEAK/Fn14信号通路有关。     

布地奈德对哮喘气道重塑大鼠骨桥蛋白和mRNA表达的影响

目的探讨布地奈德对气道重塑模型大鼠肺组织骨桥蛋白(OPN)表达的影响及其在哮喘气道重塑中的作用。方法大鼠于第1天和第8天腹腔注射卵清蛋白(OVA)/AI(OH)3,第15天起雾化吸入OVA激发,隔天1次,制备哮喘气道重塑幼年大鼠模型。布地奈德组在雾化吸入OVA前30 min,给予雾化布地奈德混悬液(2ml:1mg)。正常对照组以生理盐水代替OVA。运用彩色医学图像分析系统测量大鼠支气管壁总面积和平滑肌面积,计算平滑肌厚度(Wam)和支气管壁厚度(Wat),通过反转录-聚合酶链(RT-PCR)测定各组大鼠肺组织中OPN的mRNA,运用免疫组化法测定各组大鼠OPN蛋白的表达,并对Wat、Wam与OPN的蛋白和mRNA表达进行相关性分析。结果哮喘组Wat及Wam显著高于对照组,布地奈德组较哮喘组显著降低(P均<0.01)。免疫组化检测结果提示,布地奈德组OPN蛋白的表达高于正常对照组,但显著低于哮喘组,差异具有统计学意义(P均<0.01)。RT-PCR检测结果显示,哮喘组OPN mRNA表达均高于正常对照组,布地奈德组组较哮喘组显著减弱,差异具有统计学意义(P均<0.01)。肺组织中Wat、Wam与OPN的蛋白、mRNA表达均呈正相关。结论布地奈德能显著抑制哮喘大鼠OPN的表达,缓解气道重塑。     

葛根素抑制支气管哮喘小鼠气道炎症和TSLP介导的Th2免疫作用的研究

目的：研究葛根素对慢性哮喘小鼠模型气道炎症和Th2免疫的影响及其机制。方法：将BALB/c小鼠32只随机均分为正常组、哮喘组、葛根素组和布地奈德组,每组8只。除正常组外,其余各组采用卵白蛋白(ovabumin,OVA)致敏和激发,连续12周,建立慢性哮喘小鼠模型。末次激发24 h后,使用小鼠肺功能仪进行气道反应性测定,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织炎性细胞浸润情况,过碘酸雪夫(PAS)染色观察杯状细胞增生情况,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测4组小鼠血清总 IgE和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中Th2细胞因子(白介素-4、白介素-13)水平。Western blot观察肺组织胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)的蛋白表达。结果：与正常组比较,葛根素组、布地奈德组、 哮喘组气道阻力、气道炎症,血清总IgE,BALF中白介素-4、白介素-13以及肺组织TSLP蛋白表达明显增高(P ＜ 0.05)。与哮喘组比较,葛根素组、布地奈德组各项观测指标均明显降低(P ＜ 0.05)。葛根素组和布地奈德组气道PAS阳性上皮细胞数/支气管较哮喘组下降(P ＜ 0.05)。结论：葛根素抑制慢性哮喘小鼠气道炎症、气道高反应性和Th2免疫,这可能与抑制TSLP的表达有关。     

芒柄花素磺酸钠通过MAPKS信号通路缓解OVA诱导哮喘小鼠肺部炎症

[目的] 观察芒柄花素磺酸钠对卵清蛋白（OVA）诱导哮喘小鼠的保护作用及其机制。[方法] 购买SPF级C57BL/6小鼠60只,并随机分6组,每组10只,具体组别如下：空白对照组（CON组）、模型组（OVA组）、芒柄花素磺酸钠低剂量（MBHS-L组）、芒柄花素磺酸钠中剂量（MBHS-M组）、芒柄花素磺酸钠高剂量（MBHS-H组）和地塞米松组（DEX组）,使用OVA诱导建立小鼠哮喘模型。实验主要评价小鼠哮喘症状并进行评分、计量支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞数量（Diff-Quick染色法）、镜下观察肺组织的病理学变化[苏木精-伊红（HE）染色法]、分析BALF中超氧化物歧化酶（SOD）活性和肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）和丙二醛（MDA）水平（ELISA法和化学发光法）、分析肺组织p-ERK1/2,p-JNK和p-p38MAPK蛋白表达水平（免疫荧光法和Western blot法）。[结果] 与OVA组比较,哮喘症状评分、BALF炎症细胞数量、TNF-α、IL-1β和MDA水平以及p-ERK1/2,p-JNK和p-p38MAPK蛋白表达水平在MBHS组和DEX组均明显降低（P＜0.05）,而SOD的活性明显升高（P＜0.05）,肺组织病理学变化明显改善。[结论] 芒柄花素磺酸钠可能通过MAPKS信号通路缓解OVA诱导哮喘小鼠的肺部炎症。     

长链非编码RNA INK4位点反义非编码RNA与微RNA-125a在支气管哮喘患儿血浆中的表达及临床意义

目的 探讨lncRNA INK4位点反义非编码RNA （ANRIL）在支气管哮喘患儿血浆中的表达及其与患病风险、疾病严重程度和miRNA-125a的关系。方法 连续纳入急性发作期支气管哮喘患儿、缓解期支气管哮喘患儿和匹配的健康儿童各70例,收集受试者实验室检查及肺通气功能检测结果。采用qRT-PCR检测受试者血浆中lncRNA ANRIL和miRNA-125a表达水平,并用ELISA法检测受试者血浆中炎性因子（TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-17）水平。结果 LncRNA ANRIL在急性发作期支气管哮喘患儿血浆中的表达水平高于缓解期支气管哮喘患儿和健康儿童（P均<0.001）,在缓解期支气管哮喘患儿血浆中的表达水平高于健康儿童（P=0.002）。ROC曲线表明lncRNA ANRIL能很好地区分3组受试者。LncRNA ANRIL表达水平与急性发作期支气管哮喘患儿疾病严重程度有关（P=0.001）,与TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17表达水平均呈正相关（P均<0.05）,而与第1秒用力呼气容积（FEV₁）/用力肺活量（FVC）、FEV₁占预计值的百分比（FEV₁% Pred）均呈负相关（P均<0.05）。LncRNA ANRIL表达水平与缓解期支气管哮喘患儿TNF-α、IL-1β和IL-17表达水平及健康儿童IL-6表达水平均呈正相关（P均<0.05）。同时,lncRNA ANRIL表达水平还与3组受试者miRNA-125a表达水平均呈负相关（P均<0.05）,并且miRNA-125a表达水平与急性发作期支气管哮喘患儿FEV₁/FVC、FEV₁% Pred均呈正相关（P均<0.001）。结论 LncRNA ANRIL对儿童支气管哮喘及急性发作有诊断价值,对哮喘严重程度和患儿炎症水平有潜在的预测价值;lncRNA ANRIL可能通过靶向调控miRNA-125a参与儿童支气管哮喘的发生、发展。     

神经生长因子及其受体在哮喘大鼠肺组织的变化以及对气道炎症的影响

目的：探讨神经生长因子（NGF）和其受体酪氨酸激酶受体A (trkA)和总神经营养因子受体( p75)变化对哮喘大鼠气道炎症的影响。方法：通过鸡卵蛋白致敏激发建立哮喘模型,并将32只SD大鼠随机分为4组：正常对照组、哮喘组、外源性NGF干预组（NGF组）及抗NGF抗体干预组（抗NGF组）。各组测定支气管肺泡灌洗液(BALF)总细胞及细胞分类计数,并行支气管肺组织切片HE染色观察病理改变;通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量检测哮喘组和对照组肺组织NGF mRNA,4组肺组织trkA和p75 mRNA表达变化。结果：哮喘组与对照组比较,BALF总细胞计数、嗜酸性粒细胞（Eos）计数及淋巴细胞（Lym）计数显著增多（均P<0.001）,支气管肺组织炎症表现显著;肺组织NGF mRNA及trkA和p75 mRNA表达明显增强（均P<0.01）;哮喘组NGF mRNA与BALF细胞总数、Lym数呈正相关（均P<0.001）。NGF组与哮喘组比较,BALF总细胞、Eos及Lym计数均显著增多（均P<0.01）,支气管肺组织炎症表现更为显著,p75和trkA mRNA表达明显增强（均P<0.05）。抗NGF组与哮喘组比较,BALF总细胞、Eos及Lym计数显著减少（均P<0.001）,支气管肺组织炎症表现显著减轻,p75和trkA mRNA表达明显减弱（均P<0.01）。结论：致敏哮喘大鼠肺组织内NGF mRNA表达水平显著增高,并与气道炎症密切相关;NGF上调trkA和p75 mRNA表达,从而增强NGF的功能效应,共同参与哮喘的气道神经源性炎症。     

组蛋白乙酰化修饰在哮喘小鼠气道内黏蛋白5AC表达中的作用研究

目的 探讨哮喘小鼠体内组蛋白乙酰基转移酶（HAT）活性对气道内黏蛋白5AC（MUC5AC）表达的重要性。方法 复制哮喘小鼠模型,行外周血常规分析,肺泡灌洗液常规瑞氏染色并计数,肺组织HE染色,免疫组织化学法检测肺组织内MUC5AC蛋白表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）测定HAT、组蛋白去乙酰基酶（HDAC）活性、MUC5AC水平,进行统计学分析。结果 哮喘组小鼠外周血嗜酸性粒细胞计数（EOS）较曲古抑菌素A（TSA）治疗组、对照组均升高（P <0.05）;哮喘组肺泡灌洗液总细胞计数及EOS均较TSA治疗组、对照组升高（P <0.05）;TSA治疗组与哮喘组比较,可同时降低小鼠体内HAT、HDAC活性,差异有统计学意义（P <0.05）,但以HAT为主;TSA治疗组MUC5AC水平较哮喘组降低（P <0.05）;肺组织HE染色可见哮喘组小鼠气道炎症细胞增多,而TSA治疗后明显改善;免疫组织化学结果示,TSA治疗组较哮喘组能明显减少MUC5AC蛋白含量（P <0.05）。结论 组蛋白乙酰化修饰在哮喘小鼠气道黏液分泌中起重要的调控作用。     

曲美他嗪对重症肺炎大鼠的肺保护作用及其机制研究

目的 观察曲美他嗪（TMZ）对重症肺炎大鼠的肺保护作用，并探讨其可能机制。方法 45只SD雄性大鼠中，取35只大鼠复制重症肺炎模型，死亡5只，30只模型大鼠随机分为重症肺炎（SP）组、TMZ组、TMZ联合磷脂酸（PA）［哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）激活剂］组，每组10只；余10只仅注射无菌生理盐水，设为对照组。TMZ组灌胃TMZ生理盐水溶液5 mL，剂量20 mg/kg，尾静脉注射生理盐水1 mL；TMZ联合PA组灌胃TMZ生理盐水溶液5 mL，剂量20 mg/kg，尾静脉注射PA生理盐水溶液1 mL，剂量1 mg/kg；对照组、SP组分别灌胃、尾静脉注射等体积生理盐水。4组大鼠均1次/d，连续干预6 d。检测外周血辅助性T细胞17（Th17）和调节性T细胞（Treg）细胞、肺功能指标、肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素-1β（IL-1β）水平；采用Western blotting检测肺组织蛋白激酶B（Akt）、p-Akt、mTOR、p-mTOR蛋白的表达。结果 对照组、SP组、TMZ组、TMZ联合PA组Th17/Treg、BALF中IL-1β水平、肺容积变换量、静息通气量、肺组织p-Akt/Akt比较，经方差分析，差异有统计学意义（P <0.05）；与对照组比较，SP组外周血Th17/Treg、BALF中IL-1β水平、肺组织p-Akt/Akt升高（P <0.05），肺容积变换量、静息通气量减少（P <0.05）；与SP组比较，TMZ组外周血Th17/Treg、BALF中IL-1β水平、肺组织p-Akt/Akt降低（P <0.05），肺容积变换量、静息通气量增加（P <0.05）；与TMZ组比较，TMZ联合PA组外周血Th17/Treg降低（P <0.05），BALF中IL-1β水平、肺组织p-Akt/Akt升高（P <0.05），肺容积变换量、静息通气量减少（P <0.05）。结论 TMZ可改善重症肺炎大鼠肺功能及Th17/Treg平衡，减轻肺部炎症反应及病理变化，其作用可能通过抑制PI3K/Akt信号通路来实现。     

阳和平喘颗粒通过TGF-β1/Smad信号通路影响慢性哮喘大鼠气道重塑的机制

目的 观察阳和平喘颗粒对慢性哮喘气道重塑的影响,并探究其作用机制。方法 将50只大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、阳和平喘颗粒低剂量组和阳和平喘颗粒高剂量组,每组10只;采用卵清蛋白致敏激发复制哮喘大鼠模型。苏木素-伊红染色观察支气管肺组织病理变化;ELISA法检测肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）中白细胞介素4（interleukin 4, IL-4）、白细胞介素6（interleulin 6, IL-6 ）水平;Western blot法检测支气管肺组织中转化生长因子β1（transforming growth factor-beta 1, TGF-β1）、Smad2与Smad3蛋白相对表达水平。结果 与正常组比较,模型组支气管管腔变窄,平滑肌层及基底膜层增厚,周围可见炎症细胞浸润,BALF中IL-4、IL-6水平升高（P＜0.05）,支气管肺组织中TGF-β1、Smad2与Smad3蛋白相对表达水平升高（P＜0.05）;与模型组比较,阳和平喘颗粒高、低剂量组和地塞米松组大鼠支气管肺组织病理学改变较轻, BALF中IL-4、IL-6水平下降（P＜0.05）,支气管肺组织中TGF-β1、Smad2与Smad3蛋白相对表达水平降低（P＜0.05）,与阳和平喘颗粒低剂量组比较,阳和平喘颗粒高剂量组和地塞米松组差异显著（P＜0.05）。结论 阳和平喘颗粒可以改善慢性哮喘大鼠的气道重塑,减轻气道炎症,其机制可能与调节TGF-β1/Smad信号通路有关。     

雷公藤红素对肥胖型哮喘气道高反应的影响

目的 探讨雷公藤红素（celastrol）对肥胖型哮喘小鼠气道高反应的影响。方法 雄性C57BL/6小鼠30只,随机分为正常对照组、哮喘组、肥胖组、肥胖型哮喘组和雷公藤红素干预的肥胖型哮喘组（简称干预组）共5组。肥胖型哮喘组和干预组予以高脂饲料（HFD）喂养16周,于第13周起第1天和第13天腹腔注射卵清蛋白/氢氧化铝[OVA/AL（OH）₃]致敏,第25~31天连续7天雾化吸入OVA激发,干预组在每次雾化吸入前30min口服celastrol（10mg/kg）。哮喘组进行普通饲料喂养+OVA致敏激发。肥胖组进行高脂饲料喂养+生理盐水致敏激发。正常组进行普通饲料喂养+生理盐水致敏激发。运用小鼠肺功能仪检测小鼠气道高反应性（AHR）的指标呼吸气道阻力（Rn）,进行相关分析。结果 哮喘组和肥胖组Rn值显著高于正常对照组,肥胖型哮喘组Rn值高于其余各组,干预组Rn显著低于哮喘组和肥胖型哮喘组（P均<0.01）,而干预组Rn与正常组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。经乙酰甲胆碱激发后,哮喘组和肥胖组小鼠Rn 值上升幅度显著高于正常对照组（P < 0.01）,肥胖型哮喘组Rn值上升幅度高于其余各组,干预组小鼠较哮喘组、肥胖组和肥胖型哮喘组小鼠比较,Rn值上升幅度显著降低（P均<0.01）;而干预组小鼠Rn 值的上升幅度与正常对照组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 雷公藤红素显著减轻肥胖型哮喘小鼠呼吸气道阻力,改善了其AHR。     

佛手挥发油对支气管哮喘小鼠外周血、肺泡灌洗液及肺组织中嗜酸性粒细胞的影响

目的 观察支气管哮喘模型小鼠外周血、支气管肺泡灌洗液 (BALF) 及肺组织中嗜酸性粒细胞 (EOS) 的改变以及佛手挥发油对以上指标的影响。方法 C_5７ 小鼠以卵白蛋白 (OVA) 致敏造成哮喘模型,分为模型组,对照药物组,佛手挥发油高、中、低3个剂量组,另外10只为健康对照组。分别检测各组小鼠外周血、BALF 中 EOS 的水平并观察肺组织病理切片中 EOS 的浸润情况。结果 模型组外周血、BALF 与对照组比较,EOS 均明显增加 (P＜0.01);肺组织病理切片显示支气管及血管周围大量 EOS 浸润。各佛手挥发油组与模型组相比外周血BALF 中 EOS 均有不同程度下降,高剂量组差异尤为显著 (P＜0.01)。各组肺组织病理切片中 EOS 浸润较模型组减少,剂量越大此作用越明显。结论 佛手挥发油可抑制哮喘小鼠外周血、BALF 中 EOS 水平,减少肺组织 EOS 浸润,拮抗气道炎症而发挥平喘作用,作用强度与剂量有关。     

TRβ1、β-catenin及Cyclin A2在甲状腺乳头状癌的表达及临床意义

目的 探讨甲状腺激素受体β1（thyroid hormone receptor β1,TRβ1）、β-链蛋白（β-catenin）及细胞周期蛋白A2（Cyclin A2）在甲状腺乳头状癌（thyroid papillary carcinoma,TPC）组织中的表达及意义。方法 应用免疫组化（SP）法分别检测30例正常甲状腺组织、30例结节性甲状腺肿伴乳头状增生（nodular goiter with papillary hyperplasia,NGWPH）及116例TPC组织中TRβ1、β-catenin及Cyclin A2的表达,同时检测肿瘤淋巴管密度（lymphtic vessel density,LVD）,分析它们与临床病理指标的关系。结果 与正常甲状腺组织和NGWPH组织比较,TPC组织中TRβ1的表达阳性率降低,β-catenin在细胞膜表达显著减弱,而胞质表达明显增强,Cyclin A2的表达阳性率升高,差异有统计学意义（P<0.01）。相关性分析结果显示,TRβ1与β-catenin和Cyclin A2的表达呈负相关（r=-0.656和-0.525,均P<0.01）,β-catenin和Cyclin A2呈正相关（r=0.384,P<0.01）;淋巴结转移组的LVD显著高于无淋巴结转移组（P<0.05）;TRβ1低表达、β-catenin胞质异常表达及Cyclin A2过表达与TPC包膜外侵、LVD及淋巴结转移有关（P<0.05）,而与患者年龄、性别、组织类型、肿瘤直径、是否为多病灶无相关性（P>0.05）。结论 TRβ1通过使β-catenin在细胞内大量蓄积,继而诱导下游靶基因Cyclin A2表达途径参与TPC的发生和进展。     

人脐带间充质干细胞外泌体对大鼠骨折愈合的影响及其作用机制研究

目的 观察人脐带间充质干细胞外泌体（hucMSC-Exos）对大鼠骨折愈合的影响,并探讨可能的作用机制。方法 取40只大鼠,成功复制股骨干骨折大鼠模型30只,随机分为对照组（注射PBS缓冲液50 μL、水凝胶100 μL至骨髓腔）、外泌体组（注射hucMSC-Exos 100μg、水凝胶100 μL至骨髓腔）、复合组（注射hucMSC-Exos 100 μg、水凝胶100 μL至骨髓腔,腹腔注射XAV939 1 mg/只）,每组10只。干预后2周、4周行Micro-computed tomography活体扫描、生物力学测试最大载荷,Western blotting检测骨痂组织β-连环蛋白（β-catenin）、p-β-catenin、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）、Runx2蛋白的表达。结果 对照组、外泌体组、复合组大鼠干预后2周、4周骨小梁数量（Tb.N）、骨体积分数（BV/TV）比较,采用重复测量设计的方差分析,结果 ①不同时间点Tb.N、BV/TV有差异（F =23.584和31.267,均P =0.000）;②3组大鼠Tb.N、BV/TV有差异（F =85.512和54.796,均P =0.000）,与对照组、复合组比较,外泌体组Tb.N较多,BV/TV较高,促进骨折愈合效果相对较好;③3组大鼠Tb.N、BV/TV变化趋势有差异（F =19.417和25.461,均P =0.000）。外泌体组最大载荷、最大载荷恢复率高于对照组和复合组（P <0.05）。与外泌体组比较,对照组组织学评分降低（P <0.05）,复合组组织学评分升高（P <0.05）。与对照组比较,外泌体组p-β-catenin/β-catenin、Runx2蛋白相对表达量升高（P <0.05）,GSK-3β蛋白相对表达量降低（P <0.05）;与外泌体组比较,复合组p-β-catenin/β-catenin、Runx2蛋白相对表达量降低（P <0.05）,GSK-3β蛋白相对表达量升高（P <0.05）。结论 hucMSC-Exos可促进大鼠股骨干骨折愈合,其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。     

淫羊藿女贞子合布地奈德对哮喘大鼠肺组织JAKs/STAT4-5的影响

目的 研究中药淫羊藿女贞子煎剂及提取物配伍对布地奈德气道雾化的哮喘大鼠肺组织JAKs/STAT4-5蛋白磷酸化表达的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠,采用数字表法随机分为7组,分别是正常组、模型组、布地奈德组、煎剂组、布地奈德合煎剂组、提取物组、布地奈德合提取物组。卵蛋白致敏、激发建立大鼠哮喘模型,雾化吸入布地奈德和（或）灌胃淫羊藿女贞子煎剂或提取物,免疫荧光法检测肺组织JAKs （包括JAK1、JAK2、JAK3、TYK2）及STAT4、STAT5蛋白的磷酸化表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠肺组织pJAK1、pJAK3、pTYK2和pSTAT5蛋白表达均显著上调（P均<0.01）,pJAK2和pSTAT4显著下调（P均<0.01）。与模型组比较,5个给药组均能显著影响pJAKs各蛋白的表达（P<0.01或P<0.05）,上调pSTAT4蛋白表达的阳性面积,下调pSTAT5蛋白的阳性面积及积分光密度（IOD）（P<0.01或P<0.05）。与单用布地奈德比较,布地奈德合煎剂组或合提取物组对pJAKs蛋白表达和pSTAT4、pSTAT5蛋白表达的Area作用更优（P均<0.01）。结论 在布地奈德治疗哮喘的同时合用中药淫羊藿女贞子,可通过调节JAK/STAT4-5蛋白的磷酸化表达产生协同增效作用。     

硫化氢对大鼠内毒性急性肺损伤炎性反应及单免疫球蛋白白介素-1相关蛋白表达的影响

目的 探讨吸入硫化氢（hydrogen sulfide,H₂S）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导人肺泡上皮A549细胞炎性反应及单免疫球蛋白白介素-1受体相关蛋白（single immunoglobin IL-1 receptor related protein,SIGIRR）表达的影响。方法 雄性SD大鼠40只分4组,每组10只。正常小鼠组;H₂S吸入组：仅吸入H₂S 80mg/m³ 6h;ALI模型组：腹腔注射15mg/kg LPS;ALI+H₂S吸入组：腹腔注射15mg/kg LPS 1h后即吸入H₂S 80mg/m³ 6h,实验结束处死大鼠,观察肺组织病理学改变;ELISA法测肺组织匀浆及血浆中TNF-α及IL-1β水平;Western blot法检测肺组织SIGIRR蛋白表达水平。结果 与正常大鼠及吸入H₂S组比较,ALI模型组大鼠出现典型急性肺损伤病理改变,肺损伤评分升高（P<0.05）,肺组织匀浆及血浆中TNF-α及IL-1β水平增加（P <0.05）;而给予吸入H₂S后,可减轻大鼠肺损伤程度（P<0.05）,肺组织匀浆及血浆中TNF-α及IL-1β水平下降（P<0.05）,且与ALI模型组相比,给予吸入H₂S后可上调肺损伤大鼠肺组织内SIGIRR的表达。结论 吸入H₂S对内毒素性急性肺损伤大鼠具有保护作用,抑制肺组织匀浆及血浆中炎性因子产生,促进负调控分子SIGIRR表达是可能的分子机制。     

Rho/ROCK信号转导通路在哮喘大鼠气道重塑中的作用及干预

目的 观察法舒地尔对慢性哮喘大鼠镜下气道重塑改变及肺组织RhoA和ROCKⅠ表达的影响,探讨Rho/ROCK信号转导通路在哮喘气道重塑中的作用。方法 雄性SD大鼠分为3组,建立慢性哮喘大鼠型,统计支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞计数,观察肺组织病理及超微结构的变化,测定肺内支气管壁厚度（WTt）和支气管平滑肌厚度（WTm）,免疫组化法和real-timePCR法分别检测肺组织中RhoA及ROCKⅠ表达情况。结果（1）哮喘组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞占细胞总数百分比均明显高于正常对照组（均P＜0.01）;法舒地尔干预后明显抑制炎症细胞浸润,该组BALF中细胞总数较哮喘组不同程度降低（P＜0.01）。（2）哮喘组肺组织镜下可见明显炎症性和结构性病理变化,法舒地尔组肺组织炎症反应及重塑改变较哮喘组改善。（3）哮喘组WTt和WTm较正常对照组明显增加（均P＜0.01）,法舒地尔组WTt和WTm较哮喘组明显降低（均P＜0.01）。（4）哮喘组大鼠肺组织RhoA和ROCKⅠ蛋白和mRNA的表达水平明显高于正常对照组（均P＜0.01）,法舒地尔组明显低于哮喘组（均P＜0.01）。（5）WTt、WTm均与大鼠肺组织中ROCKⅠ蛋白水平呈明显正相关（r=0.743、0.974,均P＜0.01）。结论哮喘大鼠RhoA和ROCKⅠ表达增高,法舒地尔可能通过影响RhoA和ROCKⅠ的表达,减轻气道炎症及改善气道重塑,表明Rho/ROCK信号转导通路参与哮喘气道重塑的形成。