千佛菌对哮喘模型大鼠Th细胞因子网络的调节作用

目的 探讨千佛菌对哮喘模型大鼠Th细胞因子网络的调节作用.方法 给各组大鼠分别灌服生理盐水和不同浓度的千佛菌液14d,用ELISA法检测肺泡灌洗液中Th1标志性细胞因子IFN-γ和Th2标志性细胞因子IL-4.结果 千佛菌大剂量用药组大鼠低下的IFN-γ水平明显升高,过高的IL-4水平明显降低,两组比较差异显著(P＜0.01).结论 千佛菌大剂量组能调节哮喘模型大鼠Th细胞因子网络的失衡,改善哮喘症状.     

穴位埋线对哮喘大鼠Th1/Th2的影响

目的:通过观察哮喘大鼠穴位埋线对外周血IFN-γ和IL—4的影响,探讨穴位埋线对哮喘患者Thl/Th2细胞失衡的影响。方法:将32只wista大鼠分为4组,每组8只。哮喘模型组大鼠采用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏加雾化吸入激发的方法制成哮喘模型;穴位埋线组大鼠采用和模型组大鼠相同的致敏激发方法,实验第一天同时进行取肺俞、肾俞、定喘三穴进行穴位埋线,氢化可的松组于实验第15天起腹腔注射氢化可的松20mg/kg,每天一次,连续2周;正常对照组小鼠用生理盐水腹腔注射加雾化吸入。治疗结束后采血离心血清,采用ELISA法测定血清中IFN-γ和IL4水平。结果:哮喘组大鼠外周血清中IFN—γ水平降低,IL4水平增高;穴位埋线大鼠与模型组大鼠相比血清中IFN-γ水平增高,IL4水平降低,有显著差异,与正常对照组大鼠相比IFN—γ水平降低,IL4水平增高。氢化可的松组与正常组大鼠相比IFN-γ水平降低,IL-4水平增高,与穴位埋线组大鼠相比IFN-γ水平降低,IL-4水平升高。结论:穴位埋线可在一定程度上控制哮喘大鼠的气道炎症和纠正失衡的Th亚群。     

参麦对哮喘大鼠肺组织糖皮质激素受体的影响

目的 观察参麦对哮喘大鼠的治疗作用以及对肺组织中糖皮质激素受体(GR)表达的影响.方法 30只SD大鼠随机分为对照组、哮喘组、激素组、参麦低剂量组、参麦高剂量组,每组6只.除对照组外,各组大鼠以卵蛋白致敏并诱发哮喘.哮喘组注射0.9%生理盐水2 mL激素组注射地塞米松0.5 mg/kg,参麦组注射地塞米松0.5 mg/kg加参麦注射液(低剂量组1 mL,高剂量组2 mL),用药14 d.比较各组肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞比例(Eos%)和细胞因子水平[白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)],用qRT-PCR检测肺组织中的GR mRNA,用Western blot印迹法检测肺组织中GR蛋白的表达.结果 哮喘组BALF中Eos%显著高于对照组、激素组、参麦高、低剂量组(P<0.001).参麦高剂量组BALF中Eos%显著低于激素组(P<0.05).哮喘组BALF中IFN-γ低于对照组、激素组、参麦高、低剂量组(P<0.01),IL-4高于对照组、激素组、参麦高、低剂量组(P<0.05).参麦高剂量组BALF中IFN-γ高于激素组(P<0.05),IL-4低于激素组(P<0.05).激素组肺组织GR mRNA表达低于对照组(P<0.05),参麦高剂量组肺组织中GR mRNA表达高于激素组(P<0.05).参麦高剂量组肺组织中GR蛋白表达显著高于哮喘组和激素组(P<0.05).结论 参麦能上调哮喘大鼠肺组织中的GR mRNA和GR蛋白的水平,这可能是参麦治疗哮喘的主要机制.     

重组IL-4R蛋白对SD大鼠过敏性哮喘干预作用的研究

目的探索重组IL-4R蛋白对过敏性哮喘动物模型的干预作用。方法选择6周龄SD大鼠60只,采用安全随机分组法分成哮喘模型组、IL-4R组、布地奈德组和对照组,每组15只。哮喘模型组在腹部选取3处于皮下注射10%鸡卵清白蛋白（OVA）混合液1ml（OVA100mg、氢氧化铝100mg及灭活的百日咳杆菌5×109个）进行致敏,1周后用上述同样药物再进行致敏,第2次致敏1周后将大鼠分别放入不完全封闭的箱中,用5%OVA与0.9%氯化钠混合溶液,连续10d超声雾化激发30min。IL-4R组和布地奈德组同法造模,但每次雾化激发前30min,IL-4R组腹腔注射重组IL-4R蛋白稀释液（400滋g/d）。布地奈德组腹腔注射布地奈德稀释液（400滋g/d）,对照组用0.9%氯化钠溶液连续10d超声雾化激发30min。取4组大鼠肺组织作HE染色的光镜病理切片,观察肺组织病理变化。建立间接ELISA方法,检测实验中4组大鼠肺泡灌洗液中的IL-4和IFN-γ的含量。结果哮喘模型组大鼠肺组织有大量嗜酸性粒细胞浸润,对照组大鼠肺组织几乎无嗜酸性粒细胞浸润,IL-4R组和布地奈德组大鼠肺组织嗜酸性粒细胞浸润明显少于哮喘模型组。IL-4R组和布地奈德组肺泡灌洗液中IL-4和IFN-γ的含量明显高于哮喘模型组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论研究结果提示IL-4R蛋白对过敏性哮喘有良好的干预作用。     

千佛菌对哮喘模型大鼠IFN-γ和IL-5的调节作用

目的探讨千佛菌对哮喘模型大鼠血清Th1／Th2细胞因子IFN-γ和IL-5的调节作用。方法给各组大鼠分别灌服生理盐水和不同浓度的千佛菌液14d,用ELISA法检测血清Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-5。结果千佛菌用药组哮喘大鼠血清低下的IFN-1明显升高,而过高的IL-5水平较模型组明显降低,两组比较差异显著（P〈0．01）。结论千佛菌能干预哮喘模型大鼠的IFN-γ和IL一5失衡。     

肝素对哮喘大鼠气道炎症影响的研究

目的:探讨肝素对哮喘大鼠气道炎症的影响。方法:Wistar大鼠24只,随机分为健康对照组(A组)、哮喘组(B组)、哮喘治疗组(C组),每组8只,哮喘组和哮喘治疗组大鼠均采用5%卵蛋白2ml腹腔注射致敏,于第15d时,用1%卵蛋白激发,共7d。哮喘治疗组在激发前30min予以肝素雾化吸入。哮喘组则在激发前予等量生理盐水雾化吸入。通过powerlab数据记录分析系统测定各组大鼠肺功能;对各组大鼠支气管肺泡灌洗液进行细胞计数及分类并对大鼠气道病理组织学改变进行观察。结果:①与健康对照组比较,哮喘组呼气风流速(PEF)明显降低,差异有统计学意义(P<0.001),哮喘组和哮喘治疗组气道内压上升斜率(IPSlope)则增高,差异有统计学意义(P<0.001,P<0.01);哮喘治疗组PEF较哮喘组增高,差异有统计学意义(P<0.01),而IPSlope则降低,差异有统计学意义(P<0.05)。②哮喘组和哮喘治疗组支气管肺泡灌洗液细胞总数及中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞、上皮细胞所占百分数均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);而哮喘治疗组支气管肺泡灌洗液中细胞总数及淋巴细胞、嗜酸粒细胞所占百分数均低于哮喘组,差异有统计学意义(P<0.05)。③哮喘组和哮喘治疗组的气道腔内炎性细胞渗出、气道壁炎性细胞浸润和气道壁平滑肌增厚均明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.001,P<0.01);而哮喘治疗组气道腔内炎性细胞渗出和气道壁炎性细胞浸润,又明显低于哮喘组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:雾化吸入肝素可以减轻哮喘大鼠的气道炎症。     

姜黄素对哮喘大鼠肺内转录因子T-bet和IFN-γ表达及气道炎症的影响

[摘要] 目的　通过观察姜黄素对哮喘大鼠肺泡灌洗液总细胞数及嗜酸性粒细胞计数、肺组织转录因子T-bet、IFN-γ表达的影响,探讨姜黄素对哮喘的治疗作用。方法　36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、姜黄素治疗组(C组)各12只,采用卵蛋白(OVA)致敏大鼠哮喘模型,观察3组动物哮喘发作症状、肺泡灌洗液总细胞数及嗜酸性粒细胞计数情况及免疫印迹法(Western blot)测定肺组织中T-bet蛋白表达,ELISA法测定IFN-γ含量变化。结果 B组大鼠哮喘发作症状最明显,C组大鼠症状轻,A组无症状。B组肺泡灌洗液总细胞数及嗜酸性粒细胞计数均明显高于其余两组; C组明显少于B组; A组最少。肺组织中T-bet蛋白表达B组微弱表达, C组较强, A组表达最强。IFN-γ表达B组较弱, C组表达较强,A组最强。结论 姜黄素可抑制哮喘大鼠的气道炎症,其作用机制可能是通过增强转录因子T-bet的表达而导致IFN-γ表达增加来实现。 　　[关键词] 姜黄素 哮喘 转录因子T-bet IFN-γ 气道炎症     

不同配比麻杏甘石汤对哮喘大鼠Th1／Th2类细胞因子分泌的影响

目的：观察不同配比麻杏甘石汤对哮喘大鼠Th1/Th2类细胞因子分泌的影响。方法：选取Wistar大鼠,随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、麻杏甘石汤1高剂量组（简称麻1组）、麻杏甘石汤2高剂量组（简称麻2组）。观察不同配比麻杏甘石汤对哮喘大鼠BALF中IL-4、IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比值比较、外周血中IL-4、IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比值比较、肺组织中IFN-γ、IL-4和内参照激动蛋白cDNA扩增后半定量和电泳结果的影响。结果：与哮喘模型组比较,不同配比的麻杏甘石汤组大鼠BAIF和外周血中IL-4水平下降（P〈0.05,P〈0.01）,效果与地塞米松组相似（P〉0.05）、IL-4/IFN-γ比值也相应降低,IFN-γ水平升高。麻杏甘石汤组大鼠RT-PCR结果显示,IFN-γmRNA表达水平明显高于地塞米松组的IFN-γmRNA（P〈0.05）,而地塞米松组IL-4 mRNA与正常组相比表达减少（P〈0.05）,与哮喘组相比IL-4 mRNA的表达明显减少（P〈0.01）。IFN-γmRNA的表达与正常组相比表达无明显差异（P〉0.05）,与麻杏甘石汤组相比IFN-γmRNA的表达明显减少（P〈0.01）。麻1、2高剂量组间比较无显著差异（P〉0.05）。结论：不同配比麻杏甘石汤可能通过抑制IL-4水平及提高IFN-γ水平,使Thl/Th2失衡得到一定程度的纠正,从而控制气道炎症,减缓哮喘发作。不同配比比较无显著差异（P〉0.05）。     

支气管哮喘症状长期缓解患者肺功能与气道炎症的关系

目的:探讨支气管哮喘临床症状长期缓解患者肺功能与气道炎症的关系。方法:20例成年支气管哮喘临床缓解期患者行肺功能测定,酶联免疫吸附法(ELISA)测定外周血干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平,并与47例健康体检者进行比较。结果:哮喘缓解期患者(FEV1/FVC)%<70%者13例,FEV1<80%预计值者14例,FEV1、PEF、FEF25、FEF50、FEF75显著低于对照组(P<0.01)。哮喘患者血浆IL-4水平显著高于对照组(P<0.01),IFN-γ/IL-4显著降低(P<0.05)。IFN-γ/IL-4与FEV1、PEF呈显著负相关(P<0.01)。结论:临床症状长期缓解的哮喘患者仍可能存在肺功能损害,气道炎症和Th1/Th2平衡紊乱持续存在。     

辛苍汤鼻腔灌洗对哮喘儿童缓解期细胞因子的调控作用

[目的]研究辛苍汤鼻腔灌洗对哮喘儿童细胞因子干扰素(IFN-γ)和白细胞介素(IL-4)的作用。[方法]将2011年7月至2011年12月期间至上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院哮喘专科门诊就诊的136例有鼻部症状的哮喘患儿随机分为治疗组和对照组,分别给予"辛苍汤"和生理盐水鼻腔灌洗,隔日1次,疗程2月。在治疗前、治疗间和治疗后检测两组鼻腔灌洗液及血清中IFN-γ和IL-4,比较其差异。[结果]两组间在治疗前各项指标无差异(P>0.05);在治疗中和治疗后,治疗组外周血及鼻腔灌洗液中IFN-γ水平升高(P<0.05)、IL-4降低(P<0.05)。[结论]辛苍汤鼻腔灌洗能明显改善哮喘患儿外周血及鼻腔灌洗液细胞因子IFN-γ及IL-4水平,具有抑制气道内慢性炎症、降低气道高反应性,疗效优于生理盐水灌洗对照组。     

黄芩提取物亚微乳中磷含量的测定

目的:建立黄芩提取物亚微乳中磷含量的测定方法。方法:以磷酸二氢钾为对照品,采用紫外分光光度法,在620 nm波长处测定亚微乳中磷含量。结果:磷酸二氢钾在0.0396～0.0277 mg/mL范围内浓度与吸光度线性关系良好,精密度RSD为0.51%,稳定性0.33%,重复性RSD为0.38%,平均回收率为98.98%、RSD为1.59%。结论:该方法准确、快速、重复性好,可用于黄芩提取物亚微乳中磷含量的测定。     

黄体酮亚微乳注射剂的处方和制备工艺研究及其性质考察

目的 确定黄体酮亚微乳注射剂的处方及制备工艺,并对其性质进行考察.方法 采用高压均质法制备黄体酮亚微乳,通过正交试验设计优选了黄体酮亚微乳的最佳处方及制备工艺,并通过粒径测定、Zeta电位测定、粘度测定考察了黄体酮亚微乳的性质.结果 在优化处方和工艺条件下,所制备的黄体酮亚微乳稳定性良好,平均粒径为218nm,Zeta电位为-38.5mV,粘度为2.5mPa·s.结论 该处方及制备工艺可行,制得的黄体酮亚微乳可达到静脉注射使用的目的.     

阳和汤对哮喘大鼠肺功能及炎症的影响

目的:观察阳和汤对哮喘大鼠肺功能、外周血、肺泡灌洗液及肺组织炎症的影响,为进一步探明该方防治哮喘的有效机理打下基础。方法:用卵蛋白激发制造哮喘模型大鼠,检测大鼠肺功能、外周血、肺泡灌洗液及肺组织中炎性细胞总数及分类计数、肺组织切片形态变化及肺组织细胞结构病理变化。结果:阳和汤能减轻哮喘大鼠肺呼吸阻力,提高肺部顺应性、最大呼气量,能抑制外周血、肺泡灌洗液及肺组织中炎性反应。     

芩荑合剂对哮喘大鼠STAT6表达的影响

目的：观察芩荑合剂对哮喘大鼠肺组织模型信号转导子和转录激活子（STAT6）蛋白含量及其mRNA表达影响,探讨芩荑合剂对支气管哮喘的作用机理。方法：用卵清蛋白建立大鼠哮喘模型,将48只SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、芩荑合剂低剂量组、芩荑合剂中剂量组、芩荑合剂高剂量组,其中正常对照组、哮喘模型组给予生理盐水灌胃,芩荑合剂高、中、低剂量分别按生药量5.4、2.70、1.35 g/（kg·d）灌胃,地塞米松按1.4 mg/（kg·d）灌胃,采集肺组织标本,分别采用实时荧光定量PCR（Realtime PCR）法和免疫组化法检测哮喘大鼠模型STAT6m RNA及其蛋白表达。结果：中、高剂量组STAT6 mRNA及蛋白表达较哮喘组显著减弱,有显著差异（P〈0.01）,与地塞米松组比较无统计学意义。结论：芩荑合剂通过降低哮喘大鼠STAT6蛋白含量以及减弱STAT6 mRNA在气道上皮细胞的表达,来干预气道炎症,从而达到治疗支气管哮喘的目的。     

金水宝对哮喘大鼠气道重塑、气道炎症及氧化应激水平影响的研究

目的探讨金水宝对支气管哮喘大鼠气道重塑、气道炎症及氧化应激水平的影响。方法以卵蛋白为过敏原致敏和激发,建立大鼠慢性哮喘气道重塑的模型。将40只实验大鼠随机分为5组：对照组（A组）、哮喘组（B组）、布地奈德组（C组）、金水宝正常剂量组[D组,310mg/（kg.d）]、金水宝高剂量组[E组,620mg/（kg.d）],每组8只。造模5周后行药物干预。造模12周时观察指标：肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）的细胞计数与分类,②肺组织转化生长因子-β1（TGF-β1）含量、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力测定,③肺组织病理观察：进行支气管周围炎细胞浸润及杯状细胞增殖评分,测定支气管壁的平滑肌面积、胶原沉积面积,及肺组织TGF-β1的积分光密度值（IOD值）。结果A、C、D、E组的气道重塑指标与B组比较差异均有显著性（均P〈0.01或P〈0.05）,以E组改善最明显,且E组降低氧化应激水平、气道炎症指标亦最明显。相关性分析表明：SOD活性与MDA含量呈负相关（r=-0.869,P〈0.01）,支气管壁的胶原沉积面积与MDA含量、BALF的中性粒细胞计数均呈正相关（r=0.594,P〈0.01或r=0.414,P〈0.01）。结论氧化应激是哮喘气道重塑产生的机制之一。金水宝可能通过清除氧自由基,减少气道炎症（特别是中性粒细胞）及氧化应激水平,而改善或延缓气道重塑的发生。金水宝高剂量比布地奈德能更好地延缓哮喘气道重塑的发生。     

缺锌对哮喘大鼠气道炎症的影响

目的 探讨缺锌对哮喘大鼠气道炎症的影响。方法 SD大鼠32只，根据体重按随机区组设计分为4组，每组8只。A组为缺锌饲料＋卵清蛋白（OVA）激发组；B组为正常锌饲料＋OVA激发组；C组为正常锌饲料配对饲养＋OVA激发组；D组为正常锌饲料＋生理盐水激发组。建立缺锌及哮喘模型，诱喘后24h取支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞分类及右肺中叶HE染色，镜下观察支气管肺组织形态学改变并计数气道壁及BALF中嗜酸粒细胞、中性粒细胞及巨噬细胞数。结果：A、B、C组BALF及支气管管壁中嗜酸粒细胞、中性粒细胞和巨噬细胞数较D组明显增加（P〈0．05）。与B组大鼠相比，A组大鼠＆地F及支气管管壁中嗜酸粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞数明显增加（P〈0．05），气道炎症反应增加。B组与C组相比，气道炎症反应无明显差异（P〉0．05）。结论 缺锌时哮喘大鼠气道炎症反应增加，这可能是饮食锌的摄入减少导致哮喘发作增加及症状加重的原因。     

射麻止喘液对哮喘大鼠气道平滑肌细胞作用研究

目的：探讨哮喘大鼠模型建立及其气道平滑肌细胞培养方法,了解其生长特性,通过研究射麻止喘液中药血清对气道平滑肌细胞增殖效应,为研究哮喘病预防及治疗提供理论及实验支持。方法：制作慢性哮喘大鼠模型,用酶联法培养哮喘大鼠气道平滑肌细胞,倒置相差显微镜观察其生长情况,MTT检测生长曲线。结果：以酶联法培养7天可见细胞贴壁,14天左右融合90%左右。传代后细胞＂谷峰＂生长明显。结论：本实验提供了一种常见简单的哮喘模型,培养的细胞为平滑肌细胞,射麻止喘液血清具有抑制哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖作用,低剂量药物血清组相对于中高剂量组抑制作用更强。     

椒枝软胶囊对哮喘大鼠血清IL-4表达的影响

目的:探讨椒枝软胶囊对哮喘大鼠血清IL-4水平的影响。方法:将48只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、强的松组和椒枝软胶囊低、中、高剂量组,每组8只。除空白对照组外,以卵蛋白氢氧化铝混悬液腹腔+多点皮下注射,卵蛋白雾化攻击制作哮喘大鼠模型,从第13天起空白对照组和模型组大鼠给予生理盐水10mL/kg灌胃,强的松组大鼠给予强的松溶液10mg/kg灌胃,椒枝软胶囊低、中、高剂量组分别给予椒枝软胶囊溶液315、787.5和1575mg/kg灌胃,共5天,末次给药后48h处死大鼠,留取血清,ELISA法测定各组大鼠血清IL-4水平。结果:强的松组、椒枝软胶囊高、中剂量组血清IL-4水平均低于哮喘模型组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);结论:椒枝软胶囊可能通过降低血清IL-4水平减轻哮喘气道炎症,进而减少气道黏液分泌。     

射麻止喘液对哮喘大鼠气道平滑肌细胞作用研究

目的:探讨哮喘大鼠模型建立及其气道平滑肌细胞培养方法,了解其生长特性,通过研究射麻止喘液中药血清对气道平滑肌细胞增殖效应,为研究哮喘病预防及治疗提供理论及实验支持。方法:制作慢性哮喘大鼠模型,用酶联法培养哮喘大鼠气道平滑肌细胞,倒置相差显微镜观察其生长情况,MTT检测生长曲线。结果:以酶联法培养7天可见细胞贴壁,14天左右融合90%左右。传代后细胞"谷峰"生长明显。结论:本实验提供了一种常见简单的哮喘模型,培养的细胞为平滑肌细胞,射麻止喘液血清具有抑制哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖作用,低剂量药物血清组相对于中高剂量组抑制作用更强。     

平喘宁调节PI3K/Akt信号通路干预寒性哮喘大鼠气道重塑的机制*

目的观察平喘宁对PI3K-Akt/PKB信号通路中的相关蛋白的干预探讨哮喘气道重塑的机制。方法 将105只雄性SD大鼠按随机数法分成正常组、模型组、平喘宁高剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁低剂量组、桂龙咳喘宁组以及地塞米松组,每组15只。采用HE染色法观察大鼠肺组织的病理改变;采用RT-qPCR检测ASK1、TSC1的表达量。结果 HE染色后,相比于正常组,模型组大鼠支气管结构发生改变,可见多种炎性细胞浸润、粘液栓及气管平滑肌增生,而药物组均有不同程度的改善。RT-qPCR检测：相较于正常组,模型组ASK1上调的幅度最为显著（P＜0.01）;对比于模型组,平喘宁高剂量组对ASK1的表达量下调最为显著并且优于其余药物组（P＜0.01）。相较于正常组,模型组下调TSC1的幅度最为显著（P＜0.01）;与模型组相比,平喘宁高剂量组对TSC1的表达量的上调最为显著,（P＜0.01）,而此组对TSC1表达量上调又高于其余药物治疗组（P＜0.01）。结论 平喘宁可以通过对寒哮大鼠PI3K-Akt/PKB信号传导通路中的ASK1、TSC1调节进而减缓寒哮大鼠的气道炎症反应,减低气道的高反应性,并能够缓解气道重塑达到哮喘治疗的效果。