补肾方药对老年大鼠下丘脑-垂体-肾上腙皮质所属组织结构形态变化的影响

目的：观察左归丸、右归丸对老年大鼠HPA轴所属组织形态结构变化的影响。方法：以自然衰老大鼠为肾虚证动物模型，HE染色，光镜观察HPA轴所属组织结构的增龄性变化，以及补肾方药（左、右归丸）的改善作用。结果：老年大鼠垂体、下丘脑、肾上腺皮质组织形态结构呈现明显的老年性退化，左归丸、右归丸能不同程度改善这些组织结构。结论：左归丸、右归丸能从组织结构形态方面延缓下丘脑-垂体-肾上腺皮质（HPA）轴的老年性变化。     

腺嘌呤对大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴的影响

目的 通过研究腺嘌呤对下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的影响,阐明其导致"肾虚多尿"的机制.方法 利用酶联免疫分析法分别检测正常组及腺嘌呤组血中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、醛固酮(ALD)的含量;采用RT-PCR与免疫组化的方法检测垂体ACTH mRNA及蛋白的表达.结果 与正常组比较,腺嘌呤可显著减少大鼠血中CRH、ACTH、ALD含量;并可下调垂体ACTH mRNA及蛋白的表达.结论 腺嘌呤可影响HPA轴的功能导致水液代谢的功能障碍,研究结果从内分泌系统调节的角度阐明了腺嘌呤导致"肾虚多尿"的机制.     

右归丸对衰老大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴功能变化的影响

目的:观察自然衰老大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能变化,并通过右归丸干预,探索补肾方延缓衰老的机理。方法:以自然衰老SD雄性大鼠(24月龄)为肾虚衰老模型,大鼠随机分为老年对照组和右归丸组,每组35只,另设青年对照组(5月龄)35只,共3组。老年对照组大鼠常规喂养至24月龄。右归丸组大鼠自20月龄始,按相当于右归丸生药量7.5g/kg自由饮用稀释药液,每周停药2天,连续4个月;采用放射性配体结合分析法观察大鼠血中促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(CORT)含量;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western Blot)技术观察大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA及其多肽表达。结果:与青年组比较,老年组大鼠下丘脑CRHmRNA和CRH表达、血浆ACTH及血清CORT含量升高;与老年组比较,右归丸组大鼠下丘脑CRHmRNA和CRH表达、血浆ACTH及血清CORT含量显著下降(P0.05)。结论:自然衰老大鼠神经内分泌调控紊乱,HPA轴功能亢进;右归丸可调节HPA轴,使亢进的HPA轴功能得以改善,减轻对机体的危害而延缓衰老。     

艾灸关元穴对老年大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴和IL-2的影响

老年大鼠大脑皮层 NE、下丘脑 TRH、血清 T_3、T_4、FT_3、FT_4和脾脏 IL-2均明显低于青年组,血清 TRH、TSH 和 rT_3则高于青年组;而艾灸可明显提高老年大鼠降低的大脑皮层 NE、下丘脑 TRH,血清 T_4和脾脏 IL-2活性,降低老年大鼠升高的血清 TRH,提示艾灸关元穴可不同程度调整神经内分泌和免疫系统功能从而达到补肾固本,延缓衰老作用。     

右归丸对肾阳虚模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的:探讨右归丸对肾阳虚模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响。方法:将60只健康雄性SD大鼠随机分为右归丸组、模型组和空白组,每组20只。右归丸组大鼠接受肾阳虚模型制备后予右归丸灌胃给药干预;模型组大鼠接受肾阳虚模型制备后接受右归丸组同体积的0.9%NaCl灌胃,连续灌胃20 d;空白组大鼠不接受造模制备,第16日起同右归丸组同体积的0.9%Nacl灌胃,连续灌胃20日。造模结束后每隔4日常规记录大鼠体质量、肛温、饮水量、尿量、以及抓取激惹反应。比较3组大鼠促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、大鼠皮质醇(CORT)、促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)的含量变化。结果:1)造模后发现接受模型制备的大鼠表现为肛温降低,饮水量及摄食量减少,体质量下降,大便溏薄,尿量增多,抓取激惹反应减弱。进行药物干预后,右归丸组大鼠的肛温、饮水量、摄食量、抓取激惹反应、体质量均高于模型组比较,差异有统计学意义(P0.05),尿量减少,且大便干湿趋于正常;2)与空白组比较模型组及右归丸组肾上腺、下丘脑、垂体的脏器指数均下降(P0.05),其中模型组下降的趋势更为明显,右归丸组较模型组肾上腺、下丘脑、垂体的脏器指数有所上升(P0.05);3)与空白组比较,模型组及右归丸组大鼠接受造模后血清CRF、ACTH、CORT以及肾上腺、下丘脑、垂体的CRHR1含量均明显下降,经过右归丸干预后,该组别的大鼠CRF、ACTH、CORT、CRHR1含量均得到提升,其中CRF、ACTH含量接近空白组水平。4)与空白组比较,模型组及右归丸组大鼠接受造模后肾上腺、下丘脑、垂体的CRF、ACTH、CORT及CRHR1 mRNA水平均明显下降,经过右归丸干预后,该组别的大鼠CRF、ACTH、CORT、CRHR1mRNA水平均得到提升。结论:右归丸可能是通过调节下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的功能发挥温肾补阳的作用。     

艾灸对类风湿性关节炎大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的影响

目的：探讨艾灸对类风湿性关节炎（RA）大鼠下丘脑－垂体－肾上腺皮质轴（HPAA)的影响。方法：福氏安全佐剂塑造大鼠实验性RA病理模型，手术摘除大鼠双侧肾上腺，测定大鼠足容积，放免法检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）和血清皮质酮（CS）含量，观察艾灸对实验性RA大鼠足肿胀度、血浆ACTH及血清CS含量的影响。结果：艾灸能显著降低实验性RA大鼠足肿胀度（P＜0．05－0．01），明显降低RA大鼠血浆ACTH含量（P＜0．01）和升高血清CS含量（P＜0．05），但对去肾上腺的实验性RA大鼠的足肿胀度、血浆ACTH及血清CS含量无明显影响（P＞0．05）。结论：HPAA在艾灸治疗实验性RA中具有重要作用。     

补肾方药对下丘脑-垂体-卵巢轴作用的研究概述

中医学认为肾藏精,主生长发育与生殖,在机体的整个生命活动中起着主导作用,决定着人的生长衰老的全过程.对妇女来说,肾对生殖功能的调节是通过肾-天癸-冲任-胞宫轴而进行的,肾主宰着"肾-天癸-冲任-胞宫"之间的协调.     

基于下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴探讨维生素D与肾虚证的关系

肾虚证的现代机制可能为下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能变化,而维生素D已经被证实与下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴具有较大关联,并且维生素D与肾上腺皮质的类固醇化合物合成相关,维生素D可能通过对下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴产生作用来对肾虚证产生影响。     

缩泉丸对肾虚多尿大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的影响

目的:通过研究缩泉丸对下丘脑-垂体-肾上腺皮质系统的调节作用,阐明其补肾缩尿的机制。方法:采用腺嘌呤(150 mg.kg-1,ig 4周)造成肾虚多尿大鼠模型。造模第2周起开始按组ig缩泉丸(1.170,0.585,0.293 g.kg-1)、金锁固精丸(0.968 g.kg-1)连续4周,另设正常对照组、模型对照组。利用ELISA法、放射免疫法检测血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、环磷酸腺苷(cAMP)的含量,并取垂体、肾上腺称质量计算脏器系数。结果:与模型组比较,缩泉丸可显著提高肾虚多尿大鼠血中CRH,ACTH,cAMP含量,并可提高其垂体、肾上腺系数。结论:缩泉丸可通过上调下丘脑-垂体-肾上腺皮质系统(HPA)系统的功能发挥调节人体水液代谢的作用,从调节内分泌系统角度阐明了缩泉丸补肾缩尿的作用机制。     

肾阳虚大鼠垂体-肾上腺皮质轴与垂体-性腺轴相关性研究

目的了解肾阳虚大鼠垂体-肾上腺皮质轴及垂体-性腺轴功能之间的相互关系。方法肌肉注射氢化可的松复制肾阳虚大鼠模型,采用分批宰杀的方法观察早期、中期和晚期肾阳虚大鼠垂体-肾上腺皮质轴及垂体-性腺轴功能指标,对测试数据进行相关性分析,探讨垂体-肾上腺皮质轴及垂体-性腺轴之间的变化规律和特征。结果正常组垂体-性腺轴激素中早期T与FSH有相关性且为负相关,晚期CORT与ACTH有正相关,模型组早期ACTH与LH有显著负相关,模型组中期FSH与LH有显著正相关性,CORT与T有正相关性。结论肾阳虚早期时垂体-肾上腺皮质轴与垂体-性腺轴的垂体激素有负相关性,即二轴存在相互抑制作用;但中期时靶腺的激素有正相关性,表现为平行关系,二轴同时受损;证实肾阳虚是一种综合的动态且可转化的功能态。     

补肾中药对老年神经－内分泌和免疫系统作用机理的研究

在观察补肾中药对老年人肾上腺皮质储备机能，淋巴细胞皮质激素受体作用的基础上，从各内分泌轴不同层次的机能和下丘脑神经递质的变化，探讨了补肾中药的作用机理，认为衰老时机体神经－内分泌和免疫机能的下降系下丘脑在其中起到主导作用，补肾中药对衰老机体神经－内分泌和免疫系统的广泛作用，其关键在一调整了下丘脑的机能失调；补肾中药的作用方式可能是多成份，多环节，多途径，多层次的综合协调作用。     

补肾中药对老年神经－内分泌和免疫系统作用机理的研究

在观察补肾中药对老年人肾上腺皮质储备机能、淋巴细胞糖皮质激素受体作用的基础上，从各内分泌轴不同层次的机能和下丘脑神经递质的变化，探讨了补肾中药的作用机理。认为衰老时机体神经－内分泌和免疫机能的下降系下丘脑在其中起到主导作用。补肾中药对衰老机体神经－内分泌和免疫系统的广泛作用，其关键在于调整了下丘脑的机能失调；补肾中药的作用方式可能是多成份、多环节、多途径、多层次的综合协调作用。     

补肾中药对雄激素致不孕大鼠肾上腺皮质形态学观察

本实验选用ＳＤ雌性大鼠幼仔，出生第９日龄注射丙酸睾丸酮制作雄激素致不孕大鼠，第８０日龄灌服补肾中药水溶液２周，第１００日龄心脏灌注处死，采用光镜，透射电镜、银交染色法和新生物素－生物复合法，分别测量核体组成区嗜银蛋白，增殖前期细胞核仁抗原，观察肾上腺皮质的形态学变化。结果显示：在调节性腺轴动能过程中，包括了肾上腺的调整。补肾中药水溶液能够使增生的肾上腺网状带恢复正常；细胞内增多的脂滴数和核仁组成区     

右归丸对合并亚临床甲状腺功能减退老年慢性心力衰竭患者的影响

目的：研究右归丸对合并亚临床甲减老年慢性心力衰竭患者心功能、甲状腺功能的影响。方法：将合并亚临床甲状腺功能减退的老年慢性心力衰竭患者67例随机分为治疗组和对照组,两组均接受常规西医治疗,前者再予右归丸治疗,比较两组治疗前后心功能改善情况以及各项心脏指标和甲状腺激素的变化。结果治疗组心功能改善明显高于对照组（P〈0.05）。两组治疗后LVEF、LVED、LED、LVPWT、WST较治疗前均有明显改善,而治疗组改善更明显。治疗组治疗后TSH水平明显低于较对照组（P〈0.01）,其余各项指标无统计学差异。结论：对于合并亚临床甲减早期（TSH水平≤101μIU/mL）老年慢性心力衰竭患者,右归丸可以显著改善心功能,减轻甲状腺激素代谢的紊乱,且具有治疗风险较小的特点。     

补肾中药对雄激素致不孕大鼠垂体、卵巢及肾上腺作用的实验研究

目的：探讨雄激素致不孕大鼠发病机理和中药治疗作用。方法：采用光镜、电镜、细胞培养、免疫组化、放免测定等方法，对补肾药治疗前后的ＡＳＲ的垂体，卵巢、肾上腺的形态学及内分泌功能进行同步观察。结果：ＡＳＲ的腺垂体细胞浆内有“脂滴”、“粒溶”、“空泡”、“自嗜”、卵巢呈无排卵；肾上腺皮质网状带增生，同时促卵泡激素、促黄体激素明显低下（Ｐ〈０．０５￣０．００５）；睾酮、脱氰表雄酮明显升高（Ｐ〈０．０１￣０．     

补肾中药对老年大鼠脑和脾脏中乙酰胆碱酯酶、胆碱乙酰化转移酶活性及胆碱能M-受体功能的影响

目的:通过测定脑和脾脏中乙酰胆碱酯酶(AchE)、胆碱乙酰化转移酶(ChAT)活性和 M-受体结合容量(Rt)等指标,探讨补肾中药延缓脑功能衰老的机理。方法:用微量酶底物比色法测定 AchE 活性,放射酶分析法测定 ChAT 活性以及用放射性标记配基受体结合方法测定 M 受体结合容量。结果:老年大鼠脑和脾脏中 AchE 活性比青年对照组显著升高,ChAT 活性明显降低,M-受体 Rt值也显著降低。SRBC 免疫后,脑和脾脏中 AchE 活性较未免疫的老年大鼠更高,ChAT 活性降低,表明外来抗原产生的免疫应答可通过增加 AchE 活性及降低 ChAT 活性而降低 Ach 含量。补肾中药可抑制未免疫和 SRBC 免疫后老年大鼠脑和脾脏中 AchE 活性,增加 ChAT 活性,增加 M-受体 Rt 值,改善脑的记忆功能。结论:补肾中药可以通过调节 Ach 的合成和分解酶活性以增加脑和脾脏组织中 Ach 含量,提高 M 受体 Rt 值,从而提高老年大鼠脑记忆功能。     

中医“补肾法”治疗老年骨质疏松症临床研究

目的：观察补肾中药治疗老年骨质疏松症（OP）的,晦床疗效。方法：将符合纳入标准的400例患者分为观察组（200例）和对照组（200例）。两组均予适当体力运动和西药碳酸钙D3咀嚼片、鲑降钙素注射液治疗。观察组加用补肾中药治疗,根据阴阳虚损不同分别选用左归丸或右归丸加减。结果：观察组、对照组总有效率分别为91．50％、62．50％;组间比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗后观察组中医证候积分低于对照组,骨密度和血钙、血磷水平均高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。两组治疗后各项临床症状均有所改善。组间比较,骨痛、腰酸腿软、疲乏无力和自汗盗汗差异均有统计学意义（P〈0．05）;抽筋差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：补肾中药左归丸或右归丸加减联合西药用于治疗OP,临床疗效良好,在改善临床症状、提升骨密度和血钙、血磷水平方面优于单纯西药。     

左归丸和右归丸对自身免疫性脑脊髓炎大鼠中枢神经系统淋巴细胞亚群免疫组化表达的影响

目的通过观察左归丸与右归丸对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型大鼠脑、脊髓组织淋巴细胞亚群免疫组化表达的影响,探讨滋阴补肾法与温阳补肾法治疗EAE作用机制。方法应用髓鞘碱性蛋白与完全福氏佐剂,按体积比1：1制成抗原并于Lewis大鼠双后足垫下注射,建立EAE模型。120只Lewis大鼠随机分为正常组、模型组、激素组、左归丸组及右归丸组,每组24只,正常组和模型组给予生理盐水灌胃,3mL／（只·d）;激素组免疫后给予生理盐水灌胃,3mL／（只·d）,发病后改为醋酸泼尼松混悬液灌胃,5mg／（kg·d）;左归丸组免疫后给予左归丸混悬液,2g／（kg·d）;右归丸组免疫后给予右归丸混悬液,3g／（kg·d）。直至处死。分别于急性期（免疫后15d）和缓解期（免疫后27d）随机选取各组大鼠,取脑和脊髓组织切片进行CD4^＋、CD8^＋、CD3^＋、CD19^＋免疫组化染色。结果造模后第15日及第27日,模型组脑和脊髓组织中CD4^＋免疫组化表达均较正常组升高（P〈0．01）,CD8^＋表达降低（P〈0．05）,CD4^＋／CD8^＋比值升高（P〈0．01）;同模型组比较,左归丸组、右归丸组、激素组CD4^＋免疫组化表达均降低（P〈0．01）,且在造模后第27日,左归丸组和右归丸组脊髓组织CD4^＋表达较激素组显著降低（P〈0．01）;造模后第15日,右归丸组和激素组CD8^＋表达较模型组升高（P〈0．01）,造模后第27日,左归丸组和激素组CD8^＋表达较模型组升高（P〈0．01）;不同时点激素组、左归丸组及右归丸组CD4^＋／CD8^＋比值均显著低于模型组（P〈0．05）;造模后第15日及第27日,模型组中枢神经系统CD19^＋免疫组化表达均较正常组升高（P〈0．01）,急性期左归丸组、右归丸组、激素组脊髓组织CD19^＋表达较模型组降低（P〈0．01）,缓解期则见左归丸组和右归丸组CD19^＋表达减少（P〈0．01）。结论EAE大鼠CD4^＋／CO8^＋比值升高,这在EAE发病中发挥重要作用。滋阴补肾法和温阳补肾法可下调CD4^＋表达,下调CD4^＋／CD8^＋比值来治疗EAE。     

补肾益气方药左归丸和益气聪明汤对老年大鼠学习记忆能力及相关基因表达的影响

目的:观察补肾方药(左归丸)、益气方药(益气聪明汤)及两方合用(合剂)对老年大鼠空间学习能力及学习记忆相关基因表达变化的影响,并探索相关表观遗传酶的变化。方法:以自然衰老(24月龄) SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年组,左归丸组(12. 12 g·kg~(-1)),益气聪明汤组(10. 18 g·kg~(-1)),合剂组(11. 15 g·kg~(-1))和老年皮质酮(glucocorticoid,GC)拮抗组(5×10-3g·kg~(-1)),另设青年组(同品系5月龄)。采用Morris水迷宫法观察各组大鼠空间记忆能力,激光共聚焦法观察各组大鼠大脑海马区乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)与甲基化Cp G岛结合蛋白2(methyl Cp G binding protein 2,MeCP2)的共定位情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织HDAC2,组蛋白乙酰转移酶1(histone acetyltransferase 1,HAT1),糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR),突触蛋白I(synapsin,Syn-1)表达变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测HDAC2 mRNA的表达及各药物对上述指标异常变化的改善作用。结果:与青年组(正常组)比较,老年组(模型组)大鼠潜伏期显著延长(P 0. 05),穿越平台次数显著减少(P 0. 05);与老年组(模型组)比较,左归丸组、益气聪明汤组大鼠潜伏期显著缩短(P 0. 05),穿越平台次数有所增加。与青年组比较,老年组大鼠HDAC2蛋白与mRNA表达显著增多(P 0. 05,P 0. 01),且在细胞核内与MeCP2的共表达明显增多; HAT1,GR和Syn-I表达显著降低(P 0. 05,P 0. 01)。各给药组均能不同程度改善上述指标的异常变化,但益气方药以及两方合剂对HAT1无改善作用。结论:补肾方药左归丸、益气方药益气聪明汤可通过增加老年大鼠学习记忆相关蛋白GR,Syn-1与表观遗传修饰酶HAT1的表达,降低HDAC2的表达,并同时减少HDAC2蛋白与MeCP2的细胞核内共定位,以改善老年大鼠空间学习记忆能力。