T依赖性B细胞活化机理的重新评价

辅助T 细胞(T_H)在大多数蛋白抗原的抗体应答中起着关键作用,传统观点包括抗原结合于SmIg 和T_H 活化、增殖、分化两个阶段;在淋巴细胞活化中还盛行“双信号”学说,第一信号为“抗原桥”,第二信号为释放抗原特异因子和淋巴因子(如IL_2、IFNγ);最近将BCGF、BCDF 也归入此列。近年来,一些新的实验资料,包括B 细胞的“抗原提呈能力”、淋巴因子的效应、     

哺乳动物T淋巴细胞抗原受体基因:导致变异性的遗传和非遗传因素

随着动物的进化,免疫系统逐渐发育完善。脊椎动物特异性免疫反应是直接对抗细菌、寄生虫及病毒感染。B细胞和免疫球蛋白主要担负宿主防御功能;辅助T淋巴细胞(T_H)通过产生其抗原特异性受体而起重要的辅助作用,杀伤T细胞(T_K)及其抗原受体则在对细胞内病毒的特异毒素性反应中起作用。因此,B细胞和可溶性抗原起反应,而T细胞则仅仅识别细胞的表面相关抗原。有关免疫球蛋白的性质早已弄清,但T     

人淋巴毒素基因5′侧翼顺序功能分析(摘要)

人淋巴毒素(Lymphotoxin, LT)是T淋巴细胞受抗原及有丝分裂原等刺激活化后产生分泌的一种具有免疫调节活性的细胞因子。LT基因的表达呈现出明显的组织细胞特异性,迄今为止发现LT仅在某些活化的T细胞亚群及某些非T淋巴细胞肿瘤中表达而在非淋巴细胞中一般不表达。为了研究LT基因表达调控的机制,我们首先自人LT基因组DNA上分离到距转录起始位点-573～+     

肾病综合征患者淋巴细胞IL-2生成及应答能力降低

肾病综合征(NS)患者(尤在微小变化性肾病综合征MCNS)常伴一系列免疫学异常,如血清IgG 降低、IgM 及IgE 增高、产生循环免疫复合物、Ts 细胞活化,有报道病人血清对淋巴细胞增殖有抑制作用以及杀伤细胞介导免疫活性等。T 细胞对有丝分裂原—特异抗原或自源性非T 细胞的应答,包括一系列细胞和淋巴因子介导变化,为研究肾病综合征的细胞介导免疫作用,作者评价了NS 患者经自源性非T 细胞刺激后,T 淋巴细胞生成IL-2及对IL-2应答能力。     

氢化考地松抑制AMLR中的T细胞的增殖作用

作者近来证实,应答T细胞在AMLR中由于与刺激细胞的HLA-DR抗原相互作用,可获得对IL-2的反应性;能产生IL-2的OKT4~ T细胞在与自身非T刺激细胞的HLA-DR抗原相互作用之后,对IL-1敏感,而IL-1促进了对IL-1反应的OKT4~ 的淋巴细胞合成IL-2;T细胞一旦获得对IL-2的反应性并产生这种生长因子,就不再需要HLA-DR抗原;IL-2的活性决定了对IL-2反应T细胞的增殖和生长的程度。     

在流感病毒刺激的PBL培养中IL-2和IFN对天然细胞毒活性产生的作用:应用强地松龙的分析

用抗原或同种异体细胞刺激人末梢血淋巴细胞(PBL)可引起抗原特异性杀伤性T细胞(CTL)的产生及天然细胞毒(NC)细胞的活化,同时有许多淋巴因子如IL-2、IFN-γ等释放。在病毒刺激的培养液中还有IFN-α产生。有些研究表明,IL-2在产生特异性CTL 时起着关键作用。IL-2、IFN-γ及IFN-α单独或联合应用均可增强未被刺激的PBL 中的NC 活性。然而,在被刺激的培养中这些因子对CTL 产生和NC 细胞活化的作用了解得仍很少,并且还不能确定究竟是哪一类细胞—NK 细胞还是LAK 细胞是产生     

同种特异T细胞疫苗诱导移植物存活期延长的研究——Ⅰ.同种特异T细胞疫苗诱导的细胞免疫水平低下

在体外实验中观察了同种特异T细胞疫苗（TCV）免疫鼠T淋巴细胞对同种抗原和有丝分裂原（ConA）的反应能力。B6同种抗原特异TCV免疫的BALB/c小鼠对B6同种抗原的反应（MLR）能力明显变抑制,对无关第三者同种抗原AKR的反应能力也显著下降,表明存在抗原非特异性的抑制作用。在BALB/c同种抗原特异TCV免疫的B6小鼠中,获得一致的结果。在观察两组TCV免疫动物T细胞对Cond诱导的淋巴细胞增殖实验中,与正常小鼠 T细胞反应性比较,TCV免疫动物 T细胞的增殖能力显著下降,表现为抗原非特异作用。此与MLR中ConA-T细胞免疫动物的结果相一致。在CML实验里,同种抗原特异TCV免疫小鼠的脾细胞体外诱导同种CTL活性明显受到抑制,CTL 活性十分低下。体外实验结果表明:同种特异TCV免疫小鼠可诱发同种抗原反应和对ConA诱发的增殖反应能力显著低下,表现为抗原非特异性作用。     

EB病毒转化B淋巴母细胞在汉滩病毒CTL表位研究中的应用

目的:建立EB病毒转化B淋巴母细胞系(B-LCL),作为抗原提呈细胞(APC)提呈抗原肽,刺激短期培养的特异性T细胞活化并分泌IFN-γ,从而应用于T细胞表位鉴定中.方法:用B95-8细胞培养上清中的EB病毒转化肾综合征出血热(HFRS)患者PBMC,建立HFRS患者的B-LCL,以自身BLCL为APC,加载抗原肽后,刺激短期培养的G9L特异的HFRS患者CD8+ T细胞系,应用ELISPOT测定CD8+ T细胞受到抗原肽刺激后产生IFN-γ的能力.结果:加载过抗原肽G9L或V15R的B-LCL可刺激G9L特异的CD8+ T细胞活化并产生IFN-γ,而与G9L无同源序列的115P则不能刺激G9L特异的CD8+ T细胞活化.结论:B-LCL可作为非专职APC有效地将抗原肽提呈给特异性T细胞.     

免疫活性细胞的分离纯化

免疫活性细胞是指能特异地识别抗原、随后分化增殖、产生抗体或淋巴因子、从而发挥特异性免疫反应的一类细胞群。按此定义,只有T及B细胞才属于免疫活性细胞。然而,近年来发现的其他几类淋巴细胞也参     

大肠癌浸润淋巴细胞的免疫活性及表型特征

为明确大肠癌患者的细胞免疫活性状态及大肠癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)活性,分析比较了 TIL 区域淋巴结淋巴细胞(RNL)、外周血淋巴细胞(PBL)对 rIL—2刺激的增殖反应、表型特征、细胞毒活性及 IL—2产生能力.TIL 在 rIL—2培养早期呈现延迟的增殖反应和较高的总扩增能力.流式细胞仪分析表明肿瘤局部 T 细胞为主,各组淋巴细胞 T 亚群中 CD4~ 细胞减少,CD8~ 增加,Tac 抗原表达增加.乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测结果显示大肠癌患者淋巴细胞 NK 活性、ADCC 普遍降低,同位素掺入法显示 IL—2产生能力亦降低.IL—2培养后淋巴细胞的 NK 活性、ADCC 提高,并获得得 LAK 活性.     

抗原加工和提呈的研究进展

抗原加工和提呈是指抗原提呈细胞（APC）摄取抗原并加工成肽分子，以MHC-肽分子复合体表达于细胞表面，由T细胞上TCR识别，与APC产生共刺激因子，表达共刺激分子与T细胞上相应受体结合，激活特异的T细胞反应这一复杂的多步骤过程。本文综述了该过程中抗原分子的加工过程，MHC分子与肽分子的组装等方面的最新进展。     

人树突状细胞体外经HBsAg刺激后的抗病毒作用

目的观察人树突状细胞(DCs)经表面抗原(HBsAg)刺激、体外诱导自身特异性T淋巴细胞增殖后,对2.2.15细胞中HBeAg和HBsAg的特异性免疫抑制作用。方法 用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)和肿瘤坏死因子(TNF-a)分化、诱导人外周血PBMC中的DCs,在DCs成熟前加入纯的HBsAg刺激,将成熟后的DCs体外与自身T淋巴细胞共培养,同时不加HBsAg刺激的DCs与T细胞共培养、T细胞加纯的HBsAg共培养以及单纯T细胞作对照,5 d后收集T细胞,分组加入2.2.15细胞培养液中,分别收集第1天、3天、5天和7天的培养上清液,检测其HBeAg和HBsAg的分泌情况。结果经抗原刺激后的DCs可以有效提呈病毒抗原,正常人与慢性乙肝患者负载抗原后的DCs刺激T淋巴细胞增殖的能力[cpm分别为(46 700±7 850)和(38 628±5 427)]明显高于未负载抗原的DCs[cpm分别为(40 450±4 645和33 924±4 498)]及对照组PBMC[cpm分别为(5 947±476)和(5 089±233)],P<0.01。负载抗原的DCs有强烈的免疫应答活性,并且其免疫刺激能力似乎与负载的抗原量成正比;经抗原刺激激活的T细胞可以有效地抑制HBeAg的表达,但对HBsAg未发现有明显的抑制作用。结论体外经HBsAg刺激后的DCs可有效地提呈病毒抗原,并可进一步激活T细胞产生,同时能显著地抑制2.2.15细胞上清     

淋巴细胞趋化因子:一种代表新一类趋化因子的细胞因子

作者在筛选由活化小鼠原T细胞产生的cDNA文库过程中,发现一种命名为淋巴细胞趋化因子的细胞因子,该因子类似于 Cys-Cys和 Cys-X-Cys趋化因子家族成员,但缺乏这些趋化因子特征性4个半胱氨酸残基中的两个Cys残基。除活化原T细胞产生该因子外,活化CD_8~+T细胞和CD_4~-CD_8~-T细胞受体αβ~+胸腺细胞也表达淋巴细胞趋化因子,此趋化因子对淋巴细胞有特异的趋化活性,但对单核     

不同大鼠胶质瘤抗原致敏的DC体外诱导CTL活性的研究

目的: 比较大鼠骨髓来源的树突状细胞(dendritic cells, DC)体外经由大鼠C6胶质瘤细胞由不同方式制备的不同抗原致敏后,对特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte, CTL)的诱导作用。方法: 自大鼠骨髓分离DC前体细胞,经重组大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rrGM-CSF)+白细胞介素4(rrIL-4)诱导培养、扩增;由C6胶质瘤细胞经由反复冻融、煮沸灭活及超声破碎细胞抽提其总蛋白的方法制备各种不同抗原致敏DC,致敏的DC与T淋巴细胞进行共培养诱导CTL;以ELISA法检测CTL诱导过程中淋巴细胞趋化因子(lymphocyte chemoattractant factor)及细胞因子IFN-γ分泌水平:以 -TdR掺入法检测DC诱导T细胞增殖及其特异性CTL杀伤活性。 结果: 体外应用煮沸灭活瘤细胞制备的肿瘤抗原致敏DC,能诱导更强的刺激T细胞增殖的能力、并且可以诱导杀伤活性更强的CTL。结论: 应用煮沸灭活的瘤细胞制备瘤抗原负载DC获得瘤苗可获得更强的抗肿瘤保护作用。     

在体外诱发抗原特异性人抑制性T细胞时T-T的相互作用

现已确证,抑制性T细胞(Ts细胞)参与免疫反应的调节。对人Ts细胞的多数研究表明,多克隆激活剂可以诱发对抗体反应的非抗原特异性抑制。最近,作者报导,还可以在体外诱导人外周淋巴细胞产生抗原特异     

冻融抗原负载树突状细胞诱导细胞毒性T淋巴细胞特异性杀伤急性白血病细胞的实验研究

我们应用基因重组人白介素 4 (rhIL 4 ) ,基因重组人粒 /单细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)联合培养体系自健康志愿者骨髓单个核细胞诱导产生DC ,使其负载急性髓系白血病 (AML)细胞冻融抗原 ,体外诱导细胞毒性T细胞 (CTL) ,观察负载AML细胞冻融抗原后DC的状态对所激发的T淋巴细胞表型及功能的影响及CTL对AML细胞特异性杀伤活性。我们发现负载AML冻融抗原后DC的CD1a、CD83、CD86、CD11C、HLA DR表达率为较培养前明显增高 (P <0 .0 1) ,且负载AML冻融抗原的DC诱导的CTL中CD3 CD8 T细胞比例 ,较诱导前明显增高 (P <0 .0 1) ,而负载AML细胞冻融抗原的DC诱导CTL对AML细胞有较强的杀伤作用 ,明显强于加或不加IL 2培养的T细胞对照组 (P <0 .0 1) ,而对K5 6 2细胞无明显的杀伤活性。通过以上实验我们认为经rhGM CSF ,rhIL 4培养产生的DC为CD14CD1a DC ,能诱导CTL对AML细胞产生明显的特异性杀伤作用 ,另外 ,负载AML细胞冻融抗原DC诱导的CTL中CD3 CD8 T细胞比例明显增高 ,提示CD8 T细胞在抗肿瘤免疫中具有极其重要的作用。     

模拟微重力对肺T淋巴细胞激活功能的影响

目的 探讨模拟微重力对肺T淋巴细胞活化功能的影响及机理.方法分离肺T淋巴细胞,利用的旋转式细胞组织培养系统(RCCS,即旋转生物反应器)模拟微重力条件.培养T淋巴细胞后,采用PepTag非放射性PKC检测试剂盒测定PKC活性;采用免疫组织化学染色观察表达核因子-cB(NF-κB);酶联免疫吸附技术(双抗体夹心ELISA法)测定白介素-2(IL-2)生成;采用流式细胞技术检测表面抗原CD25.结果普通细胞培养容器组培养的T淋巴细胞,刀豆素蛋白A(ConA)组与对照组比较,T淋巴细胞PKC活性增强,NF-κB的免疫组化染色阳性细胞的百分比增加,IL-2生成增加,表面表达CD25的细胞增多(P＜0.01);模拟微重力条件下,与普通细胞培养容器培养的T淋巴细胞相比较,ConA刺激后,PKC活性降低,NF-κB免疫组化染色阳性细胞百分比减低,IL-2生成下降,表面表达CD25细胞减少(P＜0.01);模拟微重力条件下,加入PKC特异的激动剂PMA,和ConA共同培养的T淋巴细胞组,与同样条件下ConA组相比,PKC活性略增强、NF-κB的免疫组化染色阳性细胞百分比、IL-2生成的量、表面表达CD25增加(P＜0.01).结论 模拟微重力条件下,T淋巴细胞的激活受到抑制;PKC的活性降低,表达NF-κB细胞数减少,表面表达CD25的细胞数降低,T淋巴细胞分泌的IL-2降低;同样条件下,PMA对T淋巴细胞的上述指标有部分恢复作用.     

体外构建的HSP70-肝癌抗原肽诱导抗原肽特异性免疫反应1

目的研究体外构建的HSP70-肝癌抗原肽复合物诱导针对肝癌的特异性免疫反应能力,为该复合物的临床应用奠定基础.方法在体外构建HSP70-肝癌抗原肽复合物,联合应用粒/巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)及白介素-4(IL-4)直接从志愿者外周血中培养出DC;以HSP70、HSP70-肝癌抗原肽、抗原肽分别刺激DC,DC激活同源的T淋巴细胞产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL),检测其杀伤T2细胞和肝癌细胞系的能力.结果HSP70-抗原肽、抗原肽均可诱导CD8+的抗原肽特异性CTL,而前者的诱导效果更强.结论体外构建的HSP70-抗原肽复合物具有免疫原性,HSP70可以增强抗原肽诱导特异性免疫反应的能力,HSP70-抗原肽复合物有可能作为肽疫苗用于临床肿瘤免疫治疗.     

非特异性T细胞替代因子在体内的活力

Kindred和Corley曾证明,在长期混合淋巴细胞反应(MLR)中激活的淋巴细胞,当再次培养时,可释放出一种因子(NSF),它在对同种异体抗原起初次应答反应中,替代特异性T细胞。MLR的上清液和刀豆素A刺激的脾细胞培养上清液在体外具有NSF的活力,能促进T细胞缺陷鼠或裸鼠脾细胞的应答反应。本文探讨这种上清液在体内能否促进裸鼠对T依赖性抗原的反     

IgE介导反应的调节

IgE产生异常可能是控制抗体合成的同型特异性T细胞数目和功能异常所致。To-ronto等从选择性IgE产生增多的特发症患者淋巴细胞群中克隆出T_H细胞。最近DeL-espesse等建立了一种检测可溶性介质的方法,并且证明这种介质对培养的特发症病人淋巴细胞产生IgE具有调节作用。经骨髓瘤IgE预处理的脐带血淋巴细胞的上清液可增强病人的B细胞产生IgE,其增强活性与IgE结合因子(IgE—BFs)有关。在其它表达IgE Fc表面受体的细胞系上清中也发现类似的因子。Ig E—BF_s 可结合到IgE—琼脂糖凝胶上,为10—15和30—50KD_a的糖蛋白。抗IgE Fc受体的单克隆抗体可与IgE—BF_s结合.Ishizaka等证明衣霉素不能增加IgE—BF_s的释放,但可抑制IgE的分泌,说明对这些淋巴因子的糖基化起重要作