6—羟基多巴胺帕金森病大鼠模型的建立与评价

目的：探讨提高6－羟基多巴胺帕金森病大鼠模型成功率的方法，并从行为学、黑质多巴胺神经元形态学角度对模型进行评价。方法：取SD大鼠90只，将6－羟基多巴胺立体定向微量注射于左侧黑质区及黑质纹状体通路，观察大鼠的行为及黑质细胞形态学变化。结果：①90只大鼠中经阿朴吗啡诱导后有64只（占71．1％）恒定转向右侧脯结果稳定，旋转圈 ＞210r /30min，被认为是成功的帕金森病大鼠模型；②除旋转行为外，部分大鼠还出现震颤、活动迟缓、嗅探、觅食、竖尾等异常表现；③随机选取10只不同时期的成功帕金森病大鼠模型，免疫组化下观察发现注射侧黑质区多巴胺能神经元较对侧明显减少（P＜0．001），电镜观察发现大鼠中脑黑质神经细胞普遍存在变性坏死及不同阶段的凋亡改变。结论：用6－羟基多巴胺选择性损毁黑质多巴胺能神经元可较快建立稳定的成功率较高的类似于人类中晚期帕金 森病行为和病理的大鼠模型，但在病理和行为学等方面向帕金森病人仍有许多差异。     

6-羟基多巴胺帕金森病大鼠模型的建立与评价

目的 探讨提高6-羟基多巴胺帕金森病大鼠模型成功率的方法 ,并从行为学、黑质多巴胺神经元形态学角度对模型进行评价.方法 取SD大鼠90只,将6-羟基多巴胺立体定向微量注射于左侧黑质区及黑质纹状体通路,观察大鼠的行为及黑质细胞形态学变化.结果 ①90只大鼠中经阿朴吗啡诱导后有64只(占71.1%)恒定转向右侧且结果 稳定,旋转圈数>210r/30min,被认为是成功的帕金森病大鼠模型;②除旋转行为外,部分大鼠还出现震颤、活动迟缓、嗅探、觅食、竖尾等异常表现;③随机选取10只不同时期的成功帕金森病大鼠模型,免疫组化下观察发现注射侧黑质区多巴胺能神经元较对侧明显减少(P＜0.001),电镜观察发现大鼠中脑黑质神经细胞普遍存在变性坏死及不同阶段的凋亡样改变.结论 用6-羟基多巴胺选择性损毁黑质多巴胺能神经元可较快建立稳定的成功率较高的类似于人类中晚期帕金森病行为和病理的大鼠模型,但在病程和行为学等方面同帕金森病人仍有许多差异.     

建立类似于绝经期妇女帕金森病大鼠模型的实验研究

目的探讨利用6-羟基多巴(6-OHDA)制备模拟绝经期妇女帕金森病的大鼠模型。方法应用6-OHDA制备OVX PD模型大鼠,应用免疫组织化学染色、高效液相色谱法等技术对大鼠黑质(SN)的酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数目、纹状体多巴胺(DA)及其代谢物二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)含量进行考察并评价。结果阿朴吗啡可诱导出明显的PD大鼠旋转行为;大鼠损伤侧黑质TH阳性神经元数量较健侧显著减少(P<0.01),纹状体DA及其代谢物DOPAC和HVA含量也较健侧明显减少(P<0.01)。结论本模型具有绝经期妇女帕金森病的基本的病理特点。     

α-Synuclein在帕金森病中的作用

帕金森病(Parkinson disease PD)是一种缓慢发生的选择性中脑黑质多巴胺能神经元丧失和纹状体多巴胺含量显著减少的老年神经系统退行性疾病.其病因未明,多数学者认为其发病为遗传易感性与环境有害因子协同作用的结果.     

6-羟基多巴对C17．2神经干细胞毒性及NURR1基因对其保护作用

[目的]初步鉴定C17．2神经干细胞的特性并研究不同浓度6-羟基多巴对C17．2神经干细胞毒性及NURR1基因对C17．2神经干细胞的保护作用。[方法]免疫组化检测神经干细胞特异性抗原nestin，X—gal染色检测LacZ基因的表达，流式细胞仪检测剂量为0．02、0．04、0．06g／L6-羟基多巴在添加含有NURR1基因的重组复制缺陷性病毒前后诱发神经干细胞的坏死和凋亡。[结果]C17．2神经干细胞nestin抗原染色阳性，绝大部分细胞呈X-gal染色阳性，0.02g／L时6-羟基多巴以诱导神经干细胞凋亡为主，随着剂量增加，细胞坏死增多，0．06g／L时则以神经干细胞的坏死为主，NURR1基因过表达能明显减少神经干细胞的坏死和凋亡。[结论]C17．2神经干细胞具有明显的特性，6-羟基多巴诱发的C17．2神经干细胞凋亡或坏死与其剂量有关，NURR1基因对神经干细胞有保护作用。     

浅谈胶质细胞在帕金森病中的双重作用

帕金森病是中老年人常见的中枢神经系统变性疾病.胶质细胞与帕金森病相关,一方面,它能促进神经元的存活;另一方面,它又参与多巴胺能神经元的变性,促进帕金森病的发生和发展.该文就胶质细胞在帕金森病中可能发生的保护和毒性作用及其机制作一综述.     

TNF-α、IL-6在6-OHDA诱导帕金森病大鼠脑中的改变

目的 探讨6-羟多巴胺(6-Hydroxydopamine,6-OHDA)诱导帕金森病大鼠模型脑中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平的改变.方法 取SD大鼠80只,随机分成模型组与对照组,每组又分1,7,14,21 d亚...     

帕金森病的治疗现状

帕金森病(Parkinson’s disease，PD)又称振颤麻痹(paralysis agitans，shaking palsy)，是一种以投射到纹状体的中脑黑质致密部的多巴胺能神经元变性死亡及残留的黑质神经元中出现Lewy小体为典型病理改变的主要出现于老年人群的神经系统退行性疾病。临床上以椎体外运动系统障碍为特征，     

丙戊酸体外对小鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的:观察丙戊酸(VPA)对6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病体外细胞模型中的多巴胺能神经元的保护作用.方法:体外原代培养孕14 d大鼠胚胎中脑神经元,6-OHDA(50 μmol/L)在体外建立多巴胺能神经元损伤细胞模型.实验分成6组:正常对照组,6-OHDA组,6-OHDA+VPA(0.3、0.6、0.9和1.2 mmol/L)组.应用酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学染色方法检测多巴胺神经元,观察不同浓度VPA对6-OHDA诱导多巴胺能神经元损伤的形态及数量的影响.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力.结果:6组TH阳性细胞数及细胞活力比较,差异有统计学意义(F=303.907和138.524,P均<0.001).与正常对照组比较,6-OHDA组TH阳性细胞数少(P<0.05),活力低(P<0.05).与6-OHDA组比较,6-OHDA+VPA组TH阳性数增多(P<0.05),突起变长,活力增加(P<0.05).结论:VPA可能是通过减少细胞凋亡,增加细胞活力,对体外培养的多巴胺能神经元发挥保护作用.     

绿茶多酚对帕金森病小鼠多巴胺能神经元保护作用研究

目的探索绿茶多酚(GTPs)对神经毒素1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠黑质多巴胺能神经元预防性保护作用及机制。方法采用C57BL/6J小鼠共60只,分为空白对照组、预防组、MPTP组和治疗组(n=15)。MPTP组以MPTP腹腔注射7d(30mg.kg-1.d-1);预防组同以上述剂量注射MPTP前3个月开始GTPs干预至MPTP处理后3个月;治疗组以相同MPTP处理后开始GTPs干预3个月;空白对照组:腹腔注射同体积的生理盐水,连续7d,饮水中未加入GTPs,余处理方法及时长同治疗组。免疫组织化学法观察黑质多巴胺能神经元计数,比色法观察中脑超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)反映氧化应激水平。结果预防组、MPTP组和治疗组黑质多巴胺能神经元数量显著减少(P<0.05),氧化应激水平明显升高(P<0.05)。结论预防性使用GTPs对PD小鼠的多巴胺能神经元具有高于治疗的保护作用,其机制可能为预先增强抗氧化应激能力,提高发生病理改变的阈值。     

α-synuclein在帕金森病发病机制中的作用

帕金森病(parkinson disease,PD)是一种常见的神经变性疾病,以黑质多巴胺能神经元慢性进行性缺失和胞浆内嗜酸性包涵体(Lewy体)形成为病理特征。一直以来认为PD是环境因素引起的,随着家族性PD致病基因α-synuclein的发现,对PD的认识不断地加深,目前认为环境和遗传因素在PD的发生、发展中共同起作用。聚集的α-synuclein是PD和Lewy体痴呆以及其他神经系统变性疾病共有的特征,但是其致病作用还不     

外源性超氧化物歧化酶保护6-羟基多巴所致大鼠中脑多巴胺能神经元凋亡的实验研究

OBJECTIVE: To observe the changes of total antioxidant ability of rat midbrain and T-superoxide dismutase (T-SOD) activity, and define the relation between oxidative stress and dopaminergic neuron apoptosis induced by 6-hydroxydopamine (6-OHDA), observing also the protection of the exogenous SOD against the neuron apoptosis. METHODS: A total of 144 SD rats was randomized into normal control, model control, model, treatment control and treatment groups according to different treatments the rats received. The treatment group was subdivided into A, B, C, D and E groups with different treating times after model establishment. The midbrain total antioxidant ability, T-SOD activity, and active oxygen were measured by using corresponding detection kits, and the behavioral changes and the changes of tyrosine hydroxylase(TH) immunoreactivity and apoptotic cells in the substantia nigra compact part (SNcp) were assessed and measured in each group. RESULTS: After injection of 6-OHDA in SNcp of rats, the total antioxidant ability did not undergo obvious changes. Active oxygen in the midbrain increased remarkably to 130+/-17 U/mg prot and T-SOD activity was reduced. Injection of exogenous SOD caused the rotational speed of the rats to decrease from 166.7+/-31.0 to 87.6+/-25.0 circle/30 min following intraperitoneal injection of apomorphine (0.5 mg/kg b.w.), with obviously decreased active oxygen (P<0.05) and enhanced T-SOD activity. TH immunoreactivity and cell apoptosis in the SNcp presented corresponding changes. In the treatment groups, different time schedules for exogenous SOD injection into the SNcp produced different effects accordingly. CONCLUSION: Oxidative stress plays an important role in doparminergic neuron apoptosis induced by 6-OHDA injection. Exogenous SOD in the SNcp effectively reduces active oxygen, promotes the antineurotoxic ability of doparminergic neurons, reduces doparminergic neuron apoptosis and ameliorated the rat rotating behavior. Exogenous SOD has short-term antioxidant effect, which weakens progressively over extended time.     

ATP敏感性钾通道在帕金森病中的研究进展

ATP敏感性钾(KATP)通道作为内向整流钾通道的一员,在大脑皮质、海马和黑质等区域广泛分布.KATP通道同时存在于细胞膜表面和线粒体内膜上,主要受细胞内ATP水平的调节,并在细胞能量代谢和电活动之间建立独特的联系.KATP通道的选择性激活参与了帕金森病(PD)的发生发展,同时发现激活KATP通道能抑制黑质多巴胺能神经...     

大鼠脑内儿茶酚胺系统在高血压形成中的作用

为探讨脑内儿茶酚胺在高血压形成中的作用,对自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠(WKY)测定了不同脑区NE、E和血管紧张素Ⅱ(AⅡ)的含量。结果表明,SHR在12周龄时,动脉血压明显高于WKY(30.7±1.2 kPa、18.2±0.8kPa)。同时延脑、下丘脑和尾核内的NE与AⅡ含量亦明显比WKY高,NE分别高40.3％、51.2％和75.0％;AⅡ高125.0％、25.2％和46.9％;而E含量明显低于WKY,延脑低25.2％,下丘脑低29.0％。从8周龄SHR侧脑室注射6-OHDA,4 周后上述3个脑区的NE、E和AⅡ含量均显著减少(减少范围在26％～41％),血压上升值亦降低42.9％。提示脑内NE和AⅡ含量异常增加,可能与自发性高血压的形成有关。     

白藜芦醇对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用：基于抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路

目的 探讨白藜芦醇（RES）对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱导的帕金森病模型小鼠肠道屏障的保护作用及其调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的分子机制。方法 将52只小鼠随机分为对照组（n=12）,MPTP组（n=14）,RES低剂量（MPTP+RES30）组（n=13）及高剂量（MPTP+RES90）组（n=13）。利用30 mg/kg MPTP腹腔注射7 d诱导帕金森病小鼠模型,对照组腹腔注射等剂量PBS,治疗组分别利用30 mg/kg和90 mg/kg RES干预3周。小鼠行为学测试分析RES对帕金森模型小鼠运动功能的影响。Western blotting检测RES在TLR4/MyD88/Nf-κB信号通路中发挥的作用。免疫组织化学、免疫荧光、酶联免疫吸附试验和透射电镜检测验证RES抑制炎症和保护肠屏障的作用。结果 与对照组相比,MPTP组小鼠在运动功能、多巴胺能神经元数量、神经炎症、LPS和LBP水平以及肠屏障紧密连接蛋白表达水平等方面的差异具有统计学意义（P<0.05）;RES治疗组与MPTP组相比,运动功能改善(P<0.01),...     

激活和阻断内侧前额叶皮质PrL区5-HTR4对帕金森病大鼠焦虑行为的改善作用

目的:探讨内侧前额叶皮质(mPFC)的边缘前皮质(PrL)区5-羟色胺受体4(5-HTR4)在帕金森病(PD)大鼠焦虑样行为中的作用,阐明PD大鼠相关焦虑行为的可能神经机制.方法:320只雄性SD大鼠随机分为假手术组和盐酸6-羟基多巴(6-OHDA)毁损组[内侧前脑束(MFB)注射6-OHDA制备大鼠PD模型],每组1...     

神经营养因子对帕金森病的治疗作用

帕金森病(Parkinson’sdisease,PD)是一种中枢神经系统变性疾病,其病理基础是中脑黑质多巴胺(dopamine,DA)能神经元慢性进行性退变、坏死,从而导致纹状体递质系统功能紊乱,以及皮质-基底节-丘脑-皮质环路的异常活动。目前临床上药物治疗以纠正递质代谢紊乱为主,手术治疗则旨在改变神经环路的异常活动。这些治疗措施虽然可在一定程度上缓解患者的症状,但由于不能阻止DA能神经元的进行性丢失,因而无法控制疾病的进行性发展。为此,近年来国内外学者开展了不少针对DA能神经元的神经保护治疗方面的研究,其中神经营养因子被认为具有较好的发展…     

应用斜面汉密顿微量注射器针头脑内注射6-羟基多巴胺制作大鼠帕金森病模型

目的：探讨应用斜面汉密顿微量注射器针头代替平面汉密顿微量注射器针头,6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）中脑黑质单侧单点立体定向注射法制作单侧帕金森病（Parkinson＇sdisease,PD）模型的可行性。方法：采用雌性SD大鼠,在脑立体定位技术下,应用斜面汉密顿微量注射器针头将6-OHDA注入大鼠右侧的中脑黑质部位,用动物旋转行为监测仪记录阿扑吗啡（Apomorphine,Ap0）诱发的大鼠异常旋转行为,并测定脑组织液生化改变,并与平面汉密顿微量注射器针头注射组相比较。结果：实验组和对照组的PD动物模型成功率分别为73．33％（11／15）和80．00％（12／15）,两者比较差异无统计学意义（P〉O．05）。两种针头制作的PD鼠损毁侧脑组织液中多巴胺（Dopamine,DA）代谢产物3,4-二羟基乙酸（dihydroxyphenylaceticacid,DOPAC）和高香草酸（homovanillicacid,HVA）明显低于未损毁侧（P〈0．05）。而空白对照组的旋转行为、两侧脑组织液中多巴胺代谢产物均没有明显改变。结论：应用斜面汉密顿微量注射器针头代替平面汉密顿微量注射器针头可以制作可靠而稳定的PD大鼠模型。     

菖蒲郁金汤对帕金森病小鼠的神经保护作用及机制探讨

[目的] 观察菖蒲郁金汤对帕金森病(Parkinson‘s disease,PD)小鼠的治疗作用以及对多巴胺(dopamine,DA)能神经元的保护作用,并探讨其可能的作用机制。[方法] 将36只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常对照组、MPTP模型组、菖蒲郁金汤组,每组12只。MPTP模型组和菖蒲郁金汤组采用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)腹腔注射,30 mg/(kg·d),连续7 d,建立PD小鼠模型,正常对照组给予等量0.9%氯化钠溶液腹腔注射,连续7 d。菖蒲郁金汤组在MPTP注射的同时开始给予20 g/(kg·d)菖蒲郁金汤灌胃21 d,MPTP模型组和正常对照组分别在MPTP、0.9%氯化钠溶液注射的同时给予20 g/(kg·d)的0.9%氯化钠溶液灌胃21 d。最后给药结束后1、7和14 d时对各组小鼠分别进行行为学评价。14 d时处死小鼠,取小鼠中脑黑质部位脑组织,应用酪氨酸羟化酶免疫组化染色检测DA能神经元存活数目,免疫印迹法检测α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)和自噬特异性蛋白微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3 Beta,LC3B)的蛋白表达;取纹状体脑组织,电镜观察神经元超微结构变化及自噬小体。[结果] 与MPTP模型组比较,菖蒲郁金汤组小鼠1、7、14 d时爬杆时间缩短(均P＜0.05),旷场试验的总距离和旷场平均速度均增加(均P＜0.01),7、14 d时悬挂实验分值增加(均P＜0.05);菖蒲郁金汤组小鼠中脑黑质DA神经元存活数目增加(P＜0.01),而且染色浓度增加,α-Syn蛋白表达下调(P＜0.01),微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3 Beta-Ⅱ,LC3B-Ⅱ)/微管相关蛋白1轻链3B-Ⅰ(microtubule-associated protein 1 light chain 3 Beta-Ⅰ,LC3B-Ⅰ)比值增加(P＜0.01)。电镜显示,与MPTP模型组比较,菖蒲郁金汤组纹状体神经元胞质水肿、空泡变性现象减轻,线粒体膜结构相对完整,可见自噬溶酶体。 [结论] 菖蒲郁金汤可有效减轻PD小鼠行为症状,对DA能神经元具有保护作用,通过增强神经元细胞的自噬活性从而促进异常聚集α-Syn的自噬性清除可能是其主要作用机制。