NF-κB抑制剂对内毒素休克大鼠高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的观察NF-κB抑制剂--二硫氨基甲酸酞吡咯烷(PDTC)对内毒素休克大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表达的影响.方法采用内毒素休克模型,47只大鼠随机分为正常对照组(n=8)、内毒素休克组(n=24)和PDTC拮抗组(n=15),留取肝、肺、肾组织检测HMGB1 mRNA表达及相应器官功能指标的变化.结果内毒素攻击可导致动物肝、肺、肾组织HMGB1 mRNA表达广泛上调,分别于2～6h显著增高(P＜0.05),12h呈现进一步升高趋势.PDTC处理后12h肝、肺、肾组织HMGB1 mRNA表达均显著下调,其中肾组织于2～12h趋于伤前范围;同时,血清ALT、AST、BUN、Cr水平于6h明显降低(P＜0.05),肺组织髓过氧化物酶活性各时相点均显著低于内毒素休克组(P＜0.05).结论NF-κB抑制剂能显著抑制内毒素休克动物组织HMGB1 mRNA的表达;NF-κB信号转导通路参与了内毒素介导HMGB1基因表达的调控过程,并与脓毒症时的多器官功能损害密切相关.     

高压氧对大鼠脊髓损伤后脊髓组织高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的 探讨高压氧对大鼠脊髓损伤组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)变化的影响及其对减轻脊髓损伤炎性反应的作用.方法 160只成年健康SD大鼠,按数字表法随机平分为脊髓损伤组、脊髓损伤+高压氧组、假手术对照组、假手术对照+高压氧组4组,每组再随机平分为1、3、7、14d4个亚组,每亚组10只.在大鼠脊髓损伤后不同时间点,使用脊髓损伤大鼠功能恢复评分(BBB评分)评价后肢功能恢复情况,采用荧光定量PCR、Western blot、免疫组化法,测定HMGB1、核因子κB(NF-κB)的表达.结果 脊髓损伤后损伤组织HMGB1和NF-κB的mRNA及蛋白表达明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.01);高压氧干预后,脊髓损伤组织HMGB1 mRNA及蛋白表达降低,1d和3d时差异无统学意义(P＞0.05),7d和14 d时差异具有统计学意义(P＜0.05);高压氧干预后,脊髓损伤组织NF-κBmRNA及蛋白表达降低,1d时差异无统计学意义(P＞0.05),3、7、14 d时差异具有统计学意义(P＜0.05);高压氧干预后,7、14 d BBB评分明显改善,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 高压氧可降低HMGB1表达,减轻脊髓损伤继发炎性反应,促进大鼠神经功能的修复.     

高迁移率族蛋白B1对大鼠脾脏树突状细胞表面共刺激分子表达的影响

目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对树突状细胞(dendritic cells,DC)表面共刺激分子表达的影响,并对其机制进行初步探讨。方法分离正常Wistar大鼠脾脏DC后置于96孔培养板(1×10~5/孔),采用HMGB1刺激,观察HMGB1刺激与DC表面共刺激分子CD80、CD86和主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ表达的时间-效应关系及剂量-效应关系。结果HMGB1刺激后,DC表面共刺激分子CD80、CD86和MHCⅡ表达分别于24～72 h明显上调(P＜0．05,0．01),其中以作用48 h后DC表面共刺激分子表达上调尤为显著(P＜0．01)；0．1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml的HMGB1刺激均可诱导DC表面共刺激分子CD80、CD86和MHCⅡ表达增强(P＜0．05,0．01),其中HMGB1的浓度在1μg/ml时,大鼠DC表面共刺激分子CD80、CD86和MHCⅡ的表达增强最明显(P＜0．01)。结论HMGB1能诱导DC表面共刺激分子表达增强,HMGB1可能是诱导DC成熟的免疫刺激信号。     

脓毒症大鼠内毒素增敏系统改变与高迁移率族蛋白-1表达的关系

目的　探讨脓毒症时组织脂多糖结合蛋白 (LBP)和脂多糖受体CD14的改变及其与高迁移率族蛋白 - 1(HMG - 1)诱生的关系。　方法　采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CLP)致脓毒症模型 ,大鼠随机分成正常对照组、假手术组、CLP组及杀菌 通透性增加蛋白治疗组 (rBPI2 1治疗组 )。检测肝、肺、肾和小肠组织LBP、CD14及HMG - 1基因表达的变化。　结果　CLP组术后 2h ,肝、肺、肾和小肠组织LBP CD14mRNA表达均有不同程度增高 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。与CLP组比较 ,rB PI2 1治疗组CLP后 12h和 2 4h肝、肺组织LBPmRNA表达明显受抑制 (P <0 .0 1) ,12h各组织及2 4h小肠CD14mRNA表达亦明显降低 (P <0 .0 5 )。同时 ,CLP组术后 6h肝、肺、小肠HMG - 1mR NA表达显著增高 (P <0 .0 5 ) ,2 4h达峰值 (P <0 .0 1) ,并持续至 72h。rBPI2 1早期治疗可显著降低12h各组织和 2 4h肝、小肠HMG - 1mRNA的表达。相关分析表明 ,CLP后肝、肺、肾及小肠组织LBP CD14mRNA表达与相应组织的HMG - 1mRNA表达均呈显著正相关。　结论　脓毒症时LBP CD14增敏系统可能参与了晚期炎症介质HMG - 1的诱生过程。     

金葡菌肠毒素B对哮喘豚鼠高迁移率族蛋白B1表达的影响及意义

目的：探讨金葡菌肠毒素B（staphylococcal enterotoxin B,SEB）对支气管哮喘豚鼠模型支气管肺泡液高迁移率族蛋白B1（high mobility group protein B1,HMGB1）及Th1／Th2细胞因子水平的影响。方法：18只豚鼠随机分为对照组6只、支气管哮喘豚鼠模型组6只和SEB组6只,模型组用卵白蛋白（ovalbumin,OVA）建立豚鼠哮喘模型,SEB组在OVA致敏前10d于腹腔注射SEB1 ml（10mg／L）,对照组注射等量生理盐水。支气管哮喘诱发后2d,收集支气管肺泡灌洗液进行自细胞和嗜酸性粒细胞计数,WB法测定HMGB1水平,ELISA法检测细胞因子IFN-γ和IL-4水平。结果：模型组肺泡灌洗液白细胞数、嗜酸性粒细胞数及比例、HMGB1水平和IL-4浓度显著升高,IFN-γ浓度显著降低。SEB组白细胞数、嗜酸性粒细胞数量及比例、HMGB1水平和IL-4浓度屁著低于模型组,IFN-γ浓度高于模型组。结论：SEB能减少哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中HMGB1水平及嗜酸性粒细胞数量及比例,其机制可能与Th1／Th2细胞因子比值调节有关。     

烫伤后金葡菌脓毒症大鼠高迁移率族蛋白-1表达及其信号调节机制

采用大鼠 2 0 %III度烫伤合并金黄色葡萄球菌 (简称金葡菌 )攻击所致脓毒症模型 ,观察高迁移率族蛋白 1(HMG 1)在烫伤脓毒症中的变化特点及意义 ,并探讨细胞因子信号转导途径抑制剂早期干预对其诱生的影响。 6 1只动物随机分为正常对照组 (n =6 )、烫伤对照组 (n=9)、烫伤后金葡菌脓毒症组(n=36 )和雷帕霉素 (RPM)拮抗组 (n =10 ) ,检测动物肝、肾组织中TNF α和HMG 1基因表达的改变。结果显示 ,烫伤合并金葡菌攻击后 ,大鼠肝、肾组织中TNF α基因表达迅速增高 ,并于 2h达峰值 (P <0 0 1) ,此后则迅速降低 ;而HMG 1mRNA表达升高较缓慢 ,但持续时间较长 ,其中伤后 2 4h肾脏HMG 1mRNA表达显著高于正常和烫伤对照组 (P <0 0 5 ) ;以RPM干预后 ,大鼠肝、肾组织中TNF α基因表达均显著低于未拮抗组 (P <0 0 5 ) ,同时HMG 1基因表达亦呈降低趋势。该结果提示 ,烫伤后金葡菌感染可导致动物体内HMG 1基因表达上调 ,其机制可能与JAK/STAT信号转导途径的活化有关 ;HMG 1作为“晚期炎症介质”可能参与了脓毒症的发病过程。     

高迁移率族蛋白1在大鼠动脉粥样硬化斑块中表达的研究

目的 观察动脉粥样硬化大鼠高迁移率族蛋白1（HMGB-1）的蛋白及基因表达变化,以揭示与炎症相关的动脉粥样硬化发病机制.方法 免疫组织化学染色法观察大鼠主动脉血管动脉粥样硬化斑块内HMGB-1的蛋白表达情况,RT-PCR法检测大鼠主动脉血管HMGB-1的基因表达变化.结果 正常血管壁内存在HMGB-1表达,位于血管内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞的细胞核内 动脉粥样硬化斑块内HMGB-1分布不均匀,炎症细胞浸润区和坏死区周边基质内表达明显增高,炎症细胞浸润区内以单核-巨噬细胞胞核、胞浆和间质内表达为主,后者成条带状分布于坏死区边缘.动脉粥样硬化斑块内HMGB-1水平均明显升高,与正常血管壁比较差异有显著性（P〈0.01）.结论 动脉粥样硬化大鼠主动脉血管HMGB-1的蛋白及基因表达均明显增强.     

高迁移率族蛋白-1在脓毒症发病中的作用与意义

既往普遍认为，“早期”致炎细胞因子是引起机体失控性炎症反应与组织损害的关键介质。新近的研究发现，高迁移率族蛋白-1(HMG-1)可能作为新的“晚期”炎症因子参与了内毒素的致病过程。本文扼要介绍了HMG-1在严重创（烧）伤后脓毒症发生、发展中的作用及其诱生机制，并对其潜在应用价值进行了分析。深入了解和研究HMG-1，可能有助于从全新的角度认识脓毒症和多器官损害的发病机制与临床意义，并为探索其防治方法提供新的思路。     

高迁移率族蛋白B1cDNA的克隆与表达

目的克隆人高迁移率族蛋白B1（HMGB1）cDNA,构建重组原核表达载体,对其诱导表达并鉴定,为设计HMGB1 cDNA突变体及诱导表达可竞争性抑制HMGB1炎症效应的突变体蛋白奠定基础。方法提取人新鲜扁桃体组织总RNA,经RT-PCR扩增出人HMGB1 cDNA序列,并克隆至载体pUC18进行序列测定,随后构建于原核表达载体pQE-80L中,经IPTG诱导4小时后,可表达Mr约30 000的蛋白。Western Blotting鉴定所表达的目的蛋白。结果经RT—PCR扩增得到了648bp的cDNA,经序列分析与GenBank中报道的已知序列完全一致,构建了HMGB1蛋白的重组表达质粒,诱导表达了目的蛋白,经Western Blotting证实,在Mr约为30000处有一条清楚的蛋白带。结论获得了HMGB1 cDNA的克隆与原核表达载体。     

大鼠腹腔巨噬细胞高迁移率族蛋白B1诱生机制的初步探讨

目的　探讨腹腔巨噬细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱生的分子机制。方法　取正常Wistar大鼠腹腔巨噬细胞置 2 4孔培养板中 (1× 10 6/孔 ) ,培养 3天后用内毒素 (LPS)刺激 ,观察LPS刺激与巨噬细胞HMGB1mRNA表达的时效关系及量效关系 ,同时观察氟达拉滨 (fludarabine,STAT1抑制剂 )及雷帕霉素 (rapamycin,STAT3抑制剂 )对HMGB1mRNA表达的影响。结果　LPS刺激可使大鼠腹腔巨噬细胞HMGB1mRNA表达明显上调 ,于攻击后 2 4～36h达峰值 ,至 4 8h减弱。LPS的刺激剂量为 75～10 0ng/ml时 ,HMGB1基因表达明显增强。经氟达拉滨和雷帕霉素处理均可明显下调HMGB1基因表达。结论　LPS可诱导大鼠腹腔巨噬细胞HMGB1mRNA表达 ,其诱生机制与Janus激酶 /信号转导子和转录激活因子 (JAK/STAT )途径密切相关。     

脓毒症大鼠肾组织高迁移率族蛋白-1对肿瘤坏死因子-α表达的影响

采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CLP)造成脓毒症模型 ,探讨脓毒症时肾组织高迁移率族蛋白 1(HMG 1)的改变及其对TNF α表达的调节作用。动物分为正常对照组 (10只)、CLP组 (2 0只 )及正丁酸钠治疗组 (2 0只 ) ,CLP后 12h和 2 4h处死动物 ,留取肾组织和血标本分别检测HMG 1和TNF αmRNA表达、组织TNF α蛋白水平和血清肌酐含量。结果显示 ,CLP组 12h及 2 4h肾组织HMG 1和TNF αmRNA表达均显著增强 (P <0 0 5或 0 0 1)。正丁酸钠处理可显著抑制CLP后 12h及 2 4h肾组织HMG 1mRNA表达 (P <0 0 5 ) ,并明显下调 2 4h组织TNF αmRNA表达 (P <0 0 5 )及TNF α水平(P <0 0 1) ,同时血清肌酐含量比未治疗组亦显著降低(P <0 0 5或 0 0 1)。提示脓毒症时肾组织HMG 1表达可促进局部TNF α的合成与释放 ,从而诱导脓毒症动物急性肾功能损害。     

烫伤大鼠高迁移率族蛋白B1的变化及其对脾淋巴细胞免疫反应的影响

目的观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在大鼠烫伤延迟复苏模型中的变化规律及其对淋巴细胞免疫功能的影响。方法96只大鼠随机分为假伤组（n=32）、烫伤组（n=32）和丙酮酸乙酯（EP）治疗组（n=32）,分别于伤后1、3、5、7天活杀动物。应用Western blot方法检测血浆中HMGB1含量,采用噻唑蓝法和ELISA检测脾淋巴细胞增殖能力及培养上清中白介素-4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）浓度。结果与假伤组相比,烫伤后1、3、5天大鼠血浆HMGB1含量显著升高（P〈0．05或P〈0．01）。同时,脾淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应在伤后1～7天明显受抑制（P〈0．05）;伤后1、3天脾淋巴细胞培养上清中IL-4水平明显增加（P〈0．05）,而伤后7天IFN-γ含量显著降低（P〈0．05）。给予丙酮酸乙酯（EP）治疗组1、3、5天血浆HMGB1含量均明显下降（P〈0．05）,并明显减轻伤后1～7天脾淋巴细胞的增殖抑制状态,同时提高IFN-γ水平（P〈0．05）,而IL4水平在伤后1、3天显著降低（P〈0．05）。结论HMGB1对烫伤大鼠脾淋巴细胞免疫功能具有显著影响,它参与了烫伤延迟复苏后机体细胞免疫功能紊乱的发病过程。     

高迁移率族蛋白1对失血性休克大鼠缺血再灌注后肠屏障功能影响

目的 探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)对失血性休克大鼠缺血再灌注后肠屏障功能的影响。方法 Wistar大鼠32只,随机分为常温复苏(N)组和低温复苏(H)组,每组各16只。放血20 ml/kg,构筑失血性休克模型,90 min后,N组采用加热设备控制大鼠体温在38℃,H组采用酒精擦浴等方式控制大鼠体温在32℃。复苏后3 h,每组各处死8只大鼠,采集血液、肠系膜淋巴结及小肠标本,剩余鼠用于72 h生存分析。采用定量聚合酶链反应及蛋白印迹分别检测两组大鼠肠黏膜中HMGB1 mRNA及蛋白的表达。采用酶联免疫吸附试剂盒检测大鼠血清炎性因子表达情况,且进行小肠细菌移位检测,分析复苏后大鼠肠屏障功能改变情况。结果 H组大鼠小肠组织中HMGB1 mRNA表达水平明显低于N组,差异有统计学意义(P<0.05)。H组大鼠小肠组织中HMGB1、白细胞介素(IL)-4、神经丝蛋白-M、肾连蛋白、酰基辅酶A氧化酶2、IL-17、胰岛素样生长因子-1受体、淀粉样蛋白前体蛋白结合家族A2、肌醇需求酶1α、Bax、CLP和白细胞共同抗原蛋白表达明显低于N组,而Coronin 1A和IL-10蛋白表达明显高...     

高迁移率族蛋白B1及晚期糖基化终产物受体在卵巢癌组织中表达及临床相关性研究

目的分析高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及晚期糖基化终产物受体(RAGE)蛋白在卵巢癌组织中的表达及其与临床病理相关因素的关系。方法选取2010—2015年齐齐哈尔市第一医院和齐齐哈尔医学院附属医院卵巢癌标本存档蜡块45例为A组,卵巢良性肿瘤标本存档蜡块37例为B组。采用免疫组织化学技术检测两组HMGB1和RAGE的表达情况,分析其表达与卵巢癌组织的病理分级、临床分期、淋巴结转移等临床病理因素的关系。结果 HMGB1及RAGE在A组中的阳性表达率分别为77.8%(35/45)和71.1%(32/45);在B组中的阳性表达率分别为10.8%(4/37)和16.2%(6/37);组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。卵巢癌病理分级、淋巴结转移与HMGB1及RAGE高表达有密切关系(P<0.05);HMGB1与RAGE基因表达呈正相关(P<0.05)。结论 HMGB1和RAGE基因表达与卵巢癌临床病理学特征密切相关,HMGB1/RAGE信号通路可能参与卵巢癌的转移,可作为临床卵巢癌药物治疗的重要候选靶点。     

热打击单核细胞外泌体高迁移率族蛋白B1对内皮细胞炎症的作用

目的 观察热打击单核细胞外泌体高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对内皮细胞炎症的作用。方法 制备中暑大鼠模型,将大鼠分为对照组(n=6)与中暑组(n=6),分离单核细胞提取外泌体并进行鉴定;对外泌体蛋白进行质谱分析并采用注释数据库进行功能描述;采用Western blotting及酶联免疫吸附法(ELISA)分别验证中暑大鼠及患者单核细胞来源外泌体HMGB1的表达变化;将脐静脉内皮细胞(HUVECs)分为对照组、中暑组以及中暑+丙酮酸乙酯(ethylpyruvate,EP)组,分别添加来自对照组、中暑组大鼠外周血单核细胞上清中提取的外泌体及EP,采用RT-qPCR及Western blotting检测内皮细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)及白细胞介素-1β(IL-1β)的表达水平;采用ELISA检测健康志愿者及中暑患者外泌体NLRP3及IL-1β的表达水平。结果 与对照组比较,中暑组大鼠单核细胞来源外泌体数量(×10⁴/单核细胞)明显增多(11.24±2.66vs.1.52±0.21,P<0.001)。蛋白质组学分析表明中暑组外泌体HMGB1...     

高迁移率族蛋白B1沉默对人端粒酶逆转录酶抑制作用及其与肺癌放疗敏感性关系研究

目的 探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)沉默对人端粒酶逆转录酶(hTERT)的抑制作用,以及其与肺癌放疗敏感性的关系.方法 建立稳定转染细胞系(H-1299)和HMGB1沉默(H-1299-shHMGB1)细胞系,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测HMGB1 mRNA的表达.根据处理方式不同将细胞分为对照组(无X射线照...     

正丁酸钠对脓毒症大鼠高迁移率族蛋白B1表达的拮抗作用

目的观察正丁酸钠对严重脓毒症时多器官高迁移率族蛋白B1（HMGB1）基因表达的影响及意义。方法采用大鼠盲肠结扎穿孔（CLP）造成脓毒症模型。动物分为正常对照组（n=10）、假手术组（n=10）、盲肠结扎穿孔组（n=20）及正丁酸钠治疗组（n=20）。留取肝、肺、肾及小肠组织和血标本,分别检测HMGB1 mRNA表达及各器官功能指标;同时观察正丁酸钠对脓毒症大鼠的治疗效果（n=57）。结果正丁酸钠处理可显著降低腹腔感染后12及24h大鼠肝、肺、肾及小肠等组织HMGB1 mRNA表达,感染后12h血清丙氨酸转氨酶、肌酐水平比未治疗组显著降低（P〈0．01）,24h肺组织髓过氧化物酶活性亦明显下降（P〈0．01）。早期给予正丁酸钠治疗,大鼠1～6天存活率显著高于未治疗组（P〈0．05或0．01）。结论正丁酸钠对晚期致炎因子HMGB1介导的炎症反应具有潜在的治疗作用。     

血清高迁移率族蛋白B1与脓毒症小鼠心肌细胞凋亡的相关性研究

 目的 探讨血清高迁移率族蛋白B1(high mobility group box -1,HMGB1)水平与心肌细胞凋亡率及血清脑钠肽( brain natriupeptide,BNP)的相关性;评价正丁酸钠(sodium butyrate,SB)对脓毒症小鼠心肌凋亡的影响及心功能不全的保护效应.方法 采用小鼠盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)建立脓毒症模型.120只小鼠随机分为假手术组(Sham 组)、CLP组及SB组,每组40只.用ELISA法检测各组0、12、24、48、72 h血清HMGBl与BNP浓度,用流式细胞仪测定各组0、12、24、48、72 h心肌细胞凋亡率,分别对HMGB1与心肌细胞凋亡率、HMGB1与BNP进行相关性分析.另外,研究正丁酸钠对脓毒症小鼠心肌细胞凋亡率、血清BNP以及120 h生存率的影响.结果 血清HMGB1浓度在CLP术后12h开始升高,并与心肌细胞凋亡率及血清BNP浓度在12、24、48、72h各时间点均呈显著相关性(P＜0.05);正丁酸钠能明显降低心肌细胞凋亡率及血清BNP浓度,并显著改善脓毒症小鼠生存率(P＜0.05).结论 HMGB1可能参与脓毒症小鼠心肌凋亡的过程,并导致心功能不全;应用正丁酸钠干预能减轻心肌凋亡,改善心功能.     

高迁移率族蛋白1对系统性红斑狼疮肾损伤肾小球内皮细胞通透性影响

目的 分析高迁移率族蛋白1(HMGB1)对系统性红斑狼疮(SLE)肾损伤肾小球内皮细胞(HRGEC)通透性的影响。方法 选取自2020年1月至2022年3月于河北医科大学第二医院行血浆置换术治疗的50例SLE患者为研究对象。根据有无蛋白尿将患者分为A组(无蛋白尿,n=27)和B组(有蛋白尿,n=23)。另选取同期于我院体检的50例健康者纳入健康组。采用酶联免疫吸附法检测各组血浆HMGB1、内皮素-1、溶性血管细胞黏附分子(sVCAM-1)水平。将HRGEC分为control组与狼疮性肾炎(LN)组,control组以健康者血浆刺激细胞,LN组以SLE肾损伤血浆刺激细胞。CCK8检测细胞活力,跨膜电阻法和FITC-BSA法检测HRGEC单层的通透性,免疫荧光方法检测血管内皮细胞钙黏蛋白(VE-cadherin)的表达。将HRGEC细胞分为control组、LN组、LN+HMGB1中和抗体(LN+H ab)组、LN+对照IgG抗体(LN+IgG ab)组,比较各组HRGEC单层的通透性,细胞间VE-cadherin表达。结果 A组和B组血浆中HMGB1、内皮素-1、sVCAM-1水平均明显...     

高迁移率族蛋白B1对激素难治性前列腺癌冷冻免疫反应的影响

目的探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)对激素难治性前列腺癌冷冻免疫反应的影响。方法复制RM-1细胞激素非依赖性前列腺癌模型,将50只小鼠随机分为对照组(n=25)和冷冻消融治疗组(n=25)。利用氩氦冷冻系统针式冷冻器行皮下移植瘤冷冻消融治疗。分别于冷冻消融治疗前、治疗后1、7、14、21 d应用Western印迹技术检测HMGB1蛋白在肿瘤局部的表达情况,应用流式细胞术检测肿瘤局部树突状细胞(DC)的数量及活化比例。结果治疗组肿瘤局部HMGB1表达水平及DC数量及活化比例均于术后第7天达最高值,与术前相比差异有统计学意义(P<0.05);对照组HMGB1表达水平及DC数量及活化比例无明显改变,组内比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组术后1、7、14 d,肿瘤局部HMGB1表达水平及DC数量及活化比例均高于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,治疗组肿瘤局部HMGB1表达量与DC数量、DC活化比例均呈高度正相关(r=0.883,r=0.997,P<0.05)。结论冷冻消融治疗导致肿瘤细胞坏死的同时可释放大量HMGB1,这些释放至细胞外的HMGB1在冷冻消融治疗后刺激机体产生特异性抗肿瘤冷冻免疫反应中发挥重要作用。