神经营养因子及其受体在神经母细胞瘤中的作用

神经母细胞瘤（ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ,ＮＢ）是起源于胚胎期神经嵴细胞的小儿常见恶性肿瘤。近来发现神经营养因子（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ　ｆａｃｔｏｒ,ＮＴＦ）及其受体在 ＮＢ细胞生长、分化及凋亡中有重要作用。本文综述了包括神经营养蛋白（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎｓ,ＮＴｓ）和其它ＮＴＦ及其受体在ＮＢ中的特异性表达。ＮＴＦ及其受体信号转导途径的激活,在ＮＢ细胞存活、分化与侵袭力方面起着独特的生物学效应,从而影响ＮＢ的临床特点和预后。     

神经营养因子及其受体在神经母细胞瘤中的作用

神经母细胞瘤是起源于胚胎期神经嵴细胞的小儿常见恶性肿瘤。近来发现神经营养因子及其受体在ＮＢ细胞生长,分化及凋亡中有重要作用。本文综述了包括神经营养蛋白和其它ＮＴＦ及其受体在ＮＢ中的特异性表达。ＮＴＦ及其受体信号转导途径的活,在ＮＢ细胞存活,分化与侵袭力方面起着独特的生物学效应,从而影响ＮＢ的临床特点和预后。     

血管内皮生长因子及其受体在神经母细胞瘤中的表达

神经母细胞瘤很多临床症状与原发灶或转移灶血管形成有关 ,常出现肿瘤内出血或血栓形成。组织病理学研究提示血管增殖是神经母细胞瘤的特征。ＶＥＧＦ是一种可促进胚胎发育中血管的建立或肿瘤组织中血管形成的细胞因子。ＦＬＫ 1(ＶＥＧＦ受体 2 )与内皮细胞内ＶＥＧＦ增殖有关。ＦＬＴ 1(ＶＥＧＦ受体 1)调节细胞功能 ,但不参与有丝分裂。本文分析了 6种人神经母细胞瘤细胞株和 5例未经治疗的原发神经母细胞瘤或节神经母细胞瘤组织中ＶＥＧＦ的表达。结果 6种人神经母细胞瘤细胞株及 5例神经母细胞瘤或节神经母细胞瘤患儿肿瘤组织中均出现…     

γ-IFN诱导神经母细胞瘤细胞分化及TrKA表达的实验研究

本实验观察不同浓度的γ IFN对NB细胞产生增殖抑制及诱导分化作用时 ,TrkAmRNA表达的变化 ,及其与增殖抑制、分化程度的关系。首先应用 ,常规培养SMS KCNR细胞 ;然后用三种不同浓度的γ IFN处理这些细胞 ;在不同的作用时间 ,通过台盼蓝拒染实验判定γ IFN对NB细胞的的增殖抑制作用及相差显微镜观察NB细胞形态学变化 ;用RNA PCR及SouthernBlot杂交法检测γ IFN对NB细胞的Tr kAmRNA表达的影响。结果表明 :( 1 ) 1 0 0 0IU/ml、2 0 0 0IU/mlγ IFN对人NB细胞的体外增殖有抑制作用。 ( 2 )γ IFN可诱导NB细胞分化成熟及TrkAmRNA表达水平增高 ,其作用随时间延长 ,浓度增加而增强。结论 :( 1 )γ IFN能够抑制NB细胞增殖并诱导其分化 ,同时TrkAmRNA表达增加 ,其作用效应 ,呈量效依赖关系。 ( 2 )TrkAmRNA表达水平的增高可能是γ IFN体外诱导NB细胞分化逆转的分子生物学机制之一     

神经母细胞瘤中酪氨酸激酶受体表达的研究

目的　探讨神经母细胞瘤(NB)中酪氨酸激酶受体(TRKs)的表达及其意义。方法　采用SABC免疫组化技术半定量检测40例NB及其相关肿瘤中TrkA、TrkB及TrkC受体的表达水平。结果　TrkA受体只在肿瘤组织的NB细胞中表达,而该受体的表达水平与NB肿瘤的较低分期及良好性预后呈现正向性相关(P<0.01)。TrkB受体主要在高分期NB肿瘤的纤维血管基质的梭形细胞中表达,但该受体的表达水平与NB肿瘤的分期和预后之间则无明显的相关性(P>0.05)。TrkC受体主要在肿瘤组织的NB细胞中表达,而在分化成熟性NB细胞中通常伴有TrkA受体的共同性表达,但该受体的表达水平与NB肿瘤的分期和预后之间亦无明显的相关性(P>0.05)。结论　采用免疫组化技术可以半定量检测酪氨酸激酶受体的表达水平,而这些受体的表达状况对神经母细胞瘤患儿的肿瘤分期和预后评估具有重要的临床意义。     

γ—IFN诱导神经母细胞瘤细胞分化及TrKA表达的实验研究

本实验观察不同浓度的γ－IFN对NB细胞产生增殖抑制及诱导分化作用时,TrkA MRNA表达的变化,及其与增殖抑制,分化程度的关系。首先应用,常规培养SMS－KCNR细胞;然后用三种不同浓度的γ－IFN处理这些细胞,在不同的作用时间,通过台盼蓝拒染实验判定γ－INF对NB细胞的增殖抑制作用及相差显微镜观察NB细胞形态学变化;用RNA－PCR及Southern Blot杂交法检测γ－IFN对NB细胞的Tr-kA mRNA表达的影响。结果表明：（1）1000IU／ml,2000IU/ml,γ-INF对人NB细胞的体外增殖有抑制作用。（2）γ－IFN可诱导NB细胞分化成熟及TrkA mRNA表达水平增高,其作用随时间延长,浓度增加而增强。结论：（1）γ－IFN能够抑制NB细胞增殖并诱导其分化,同时TrkA mRNA表达增加,其作用效应,呈量效依赖关系。（2）TrkA mRNA表达水平的增高可能γ－IFN体外诱导NB细胞分化逆转的分子生物学机制之一。是     

神经母细胞瘤的血管形成和内皮细胞生长因子及其受体的表达

目的：观察神经母细胞瘤的血管形成及影响因素，探讨化疗对神经母细胞瘤瘤血管形成的作用。方法：35例小儿实体肿瘤年龄7月－12岁，分神经母细胞瘤组、其他恶性肿瘤组和良性肿瘤组，分别用免疫组化法观察第Ⅷ因子相关抗原（VWF）、内皮细胞生长因子（VEGF）及其受体FLT－1的表达情况，并行图象分析。结果：神经母细胞瘤血管密度较良性肿瘤组明显增高（P＜0．05）；VEGF和FLT－1在神经母细胞瘤中有高表达，二者均与临床分期和分类有关；并可受化疗的抑制（P＜0．05）。结论：神经母细胞瘤生长具有血管依赖性，化疗可抑制血管形成，控制肿瘤血管形成对抑制肿瘤的生长和转移有积极意义。     

神经生长因子受体对神经母细胞瘤血管生成作用的研究(英文)

目的　神经生长因子受体 (TrkA)基因是神经母细胞瘤 (NB)良好预后的标识之一 ,其高表达不仅可以抑制NB增殖和诱导良性分化 ,对NB的血管生长可能有一定的影响。该实验探讨TrkA基因对NB血管生成的作用。方法　 1 5只裸鼠随机分为对照组、空载体组和实验组 (每组 5只 )。利用脂质体转染法将TrkA基因和pBPSTR1空载体转入NBSY5Y细胞 ,分别命名为SY5Y TrkA及SY5Y Vec细胞 ,未转染细胞为SY5Y细胞。将SY5Y ,SY5Y Vec ,SY5Y TrkA细胞分别接种在对照组、空载体组和实验组裸鼠皮下 ,接种 5 0d后处死动物 ,切除肿瘤 ,测量肿瘤体积 ;用RT PCR及免疫组织化学技术检测肿瘤内血管内皮生长因子 (VEGF)的表达 ;计算微血管密度 (MVD)。结果　SY5Y TrkA细胞TrkA表达明显高于SY5Y Vec及SY5Y细胞组 (P <0 .0 1 ) ;实验组肿瘤终体积小于对照组及空载体组 (0 .39± 0 .0 2cm3 vs 1 .74± 0 .4 9cm3 ) ;(0 .39± 0 .0 2cm3 vs 1 .80± 0 .75cm3 ) ,差异有显著性 (均P <0 .0 1 ) ;实验组VEGFmRNA表达低于对照组及空载体组 (0 .1 6± 0 .0 9vs 1 .4 5± 0 .77) ;(0 .1 6± 0 .0 9vs 1 .35± 0 .71 ) ,差异有显著性 (均P <0 .0 1 ) ;实验组VEGF蛋白表达低于对照组及空载体组 (2 .0 0± 0 .6 0vs 5 .6 7± 0 .4 9) ;(2 .0 0± 0 .6 0v     

生长抑素受体在神经母细胞瘤中的表达及其临床意义

目的探讨生长抑素受体(SSTR)亚型SSTR1、SSTR2和SSTR5在神经母细胞瘤组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测SSTR1、SSTR2和SSTR5在60例神经母细胞瘤组织中的表达情况。结果在60例中,SSTR1表达阳性14例(23%);SSTR2表达阳性23例(38%);SSTR5表达阳性40例(67%)。SSTR1、SSTR2和SSTR5的表达在不同性别、临床分期及有无淋巴结转移患儿之间差异均无显著性(P>0.05)。SSTR5在低分化和高分化神经母细胞瘤中的表达差异有显著性(P<0.05)。结论 SSTR5在低分化神经母细胞瘤中的表达显著高于高分化者,提示SSTR5可作为低分化神经母细胞瘤潜在的治疗靶点。     

神经营养因子3及其受体在先天性巨结肠中的表达

目的比较NT-3及其受体TrkC在先天性巨结肠（HD）中不同节段的表达情况，以探讨HD的发病机制。方法收集我院20例经巨结肠根治术治疗的HD标本。以正常段肠管组织为对照组，以痉挛段和移行段肠管组织为实验组，应用Western blot方法，对标本内的NT-3及TrkC蛋白表达进行半定量分析比较。结果NT-3及TrkC在正常段肠壁表达明显，在狭窄段肠壁无表达，两者之间的差异具有统计学意义（P〈0．05）。在移行段肠壁内，NT-3没有表达，TrkC表达明显减弱，与正常段比较，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论HD痉挛段肠壁内NT-3和TrkC的异常表达，可能与HD的发生有关。     

神经母细胞瘤的血管生成与抗血管治疗研究进展

本文介绍了恶性肿瘤的生长、转移与新生血管的关系，着重阐述了常见的血管生成因子在神经母细胞瘤发展中的作用以及相关的调控机制；并探讨了神经母细胞瘤的几种抗血管生成疗法的应用现状及前景．     

神经母细胞瘤的血管生成与抗血管治疗研究进展

本文介绍了恶性肿瘤的生长、转移与新生血管的关系，着重阐述了常见的血管生成因子在神经母细胞瘤发展中的作用以及相关的调控机制；并探讨了神经母细胞瘤的几种抗血管生成疗法的应用现状及前景。     

凋亡抑制因子及血管内皮生长因子在儿童肾母细胞瘤中的表达及意义

目的研究凋亡抑制因子（survivin）及血管内皮生长因子（VEGF）在肾母细胞瘤中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SABC法及RT-PCR方法研究Survivin及VEGF在52例肾母细胞瘤组织，47例瘤旁组织及8例肾组织在蛋白水平及mRNA水平的表达情况。结果52例肾母细胞瘤组织中Survivin免疫组织化学显示阳性表达率为61．5％（32／52），RT-PCR阳性率为67．3％（35／52）；47例瘤旁组织中免疫组织化学显示阳性表达率为4．3％（2／47），RT-PCR阳性率为6．4％（3／47）；肾组织中未见表达。52例肾母细胞瘤组织中VEGF免疫组织化学显示阳性表达率为75．0％（39／52），RT-PCR阳性率为71．2％（37／52）；47例瘤旁组织中免疫组织化学显示阳性表达率为19．1％（9／47），RT-PCR阳性率为23．4％（11／47）；肾组织中免疫组织化学显示阳性表达率为12．5％（1／8），RT-PCR阳性率为25．0％（2／8）。另外，Survivin及VEGF在不良组织型肾母细胞瘤组织及瘤旁组织中表达均明显增高。Survivin及VEGF阳性者2年存活率均低于其表达阴性者。结论Survivin，VEGF表达与肾母细胞瘤的临床病理学特点有关，其与肿瘤血管的生成，血管内皮细胞的凋亡，稳定性密切相关，进而影响肿瘤的侵袭力。其检测有利于肾母细胞瘤的诊断及其预后情况的评价。     

Circ0075829在神经母细胞瘤组织中表达并抑制细胞增殖和迁移

目的探讨circ0075829对人神经母细胞瘤(NB)细胞生物学行为的影响。方法通过Sanger测序和RNase R消化实验检测circ0075829环化位点序列及环化情况;应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测NB组织样本和细胞系中circ0075829表达水平;应用si RNA和慢病毒分别敲减和过表达circ0075829;采用细胞克隆形成技术和实时无标记细胞分析技术(RTCA)观察NB细胞增殖和迁移情况。全自动蛋白质印迹定量(Wes)法验证circ0075829对MAPK通路(ERK、JNK、p38)的作用。结果在NB细胞系SH-SY5Y和SK-N-BE2中可鉴定到circ0075829表达;敲减circ0075829后SH-SY5Y和SK-N-BE2细胞系增殖和迁移能力增强;反之,过表达circ0075829使细胞增殖和迁移能力减弱。MAPK通路中,敲减circ0075829激活ERK磷酸化活性,对p38和JNK磷酸化活性无明显影响。Circ0075829表达量与INSS分期(P 0.05)和危险度分期(P 0.01)呈负相关,与患者总生存期(OS)呈正相关(P=0.002)。结论本研究表明,circ0075829可抑制NB细胞增殖和迁移;其高表达与临床表型良好相关;可能通过激活ERK MAPK通路起作用,是NB潜在的生物学标志物和治疗靶点。     

神经生长因子受体与神经母细胞瘤

神经母细胞瘤 (ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ,ＮＢ)是小儿常见的恶性肿瘤之一 ,Ⅰ、Ⅱ期的ＮＢ预后较好 ,而进展期ＮＢ虽经手术、化疗、放疗甚至骨髓移植等综合治疗 ,仍有很高的复发率 ( 60 .0 %左右 ) ,但ＮＢ却有特殊的肿瘤生物学特性 ,可在出生几个月内自然消退或转变为良性神经节细胞瘤 ,ＩＶ Ｓ期的ＮＢ虽然已经发生远处转移 (肝、骨髓等 ) ,却预后良好 ,且有较高的自消率[1] 。近年的研究表明 ,神经生长因子(ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒＮＧＦ)可以诱导ＮＢ的分化 ,神经生长因子高亲和力受体(ＴｒＫＡ)、低亲和力受体 (Ｐ75Ｎ…     

血管内皮生长因子和血管生成与儿童神经母细胞瘤关系的研究

大量研究表明 ,血管内皮生长因子(ＶＥＧＦ)与肿瘤的微血管密度 (ＭＶＤ)及肿瘤的生物学行为密切相关。因此认为 ,ＶＥＧＦ和ＭＶＤ是潜在新型肿瘤标志。本文应用免疫组化方法 ,检测和分析 36例神经母细胞瘤 (ＮＢ )中ＶＥＧＦ表达和ＭＶＤ ,及其与ＮＢ各临床病理指标和预后的关系。资料与方法　标本 :1985～ 2 0 0 0年我院儿科手术切除、病理诊断明确的标本 36例 ,其中男性 2 5例 ,女性 11例 ,平均年龄 6 2岁。免疫组化试剂与方法 :ＶＥＧＦ及Ⅷ因子多克隆抗体由北京中山公司提供 ,用ＡＢＣ法 ,染色步骤按试剂说明进行。以ＰＢＳ代替一抗…     

酪氨酸激酶受体B及其配体脑源性神经营养因子水平对神经母细胞瘤耐药的影响

目的 研究酪氨酸激酶受体B（tyrosine kinase receptor,TrkB）及其配体脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）的表达水平对神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）细胞化疗敏感性的影响。方法 Western-blot技术检测不同纳摩尔浓度全反式维甲酸（all trans-retinoic acid,ATRA）诱导后TrkB蛋白水平变化;四甲基偶氮蓝比色（MTT）法检测细胞存活率;流式细胞仪（flow cytometer,FCM）检测细胞凋亡率;透射电镜检测凋亡细胞的形态。结果 （1）不同浓度ATRA（1、10、100nmol／L）处理神经母细胞瘤细胞SY5Y5d,TrkB蛋白水平随ATRA浓度增加而增加;（2）BDNF10ng／ml＋ATRA 10nmol／L＋顺铂（Cisplatin,CP）5μg／ml作用组细胞存活率、凋亡率同单用CP组比较均无显著差异,BDNF（50、100ng／m1）加相同浓度ATRA及CP组细胞存活率均明显高于单用CP组,凋亡率均明显低于单用CP组,BDNF 100ng／ml组存活率高于BDNF 50ng／ml组,凋亡率低于BDNF 50ng／ml组。ATRA 1nmol／L＋BDNF 50ng／ml＋CP 5μg／ml组细胞存活率、凋亡率同单用CP组比较无显著差异,ATRA 10、100 nmol／L加相同浓度BDNF及CP组细胞存活率均明显高于单用CP组,凋亡率均明显低于单用CP组,ATRA 100 1nmol／L组细胞存活率高于ATRA 10nmol／L组,凋亡率低于ATRA 10nmol／L组。（3）透射电镜技术观察到CP作用组可见到较多细胞呈凋亡改变,而ATRA 10nmol／L＋BDNF 50ng／ml＋CP 5μg／ml组细胞形态多数正常。结论 SY5Y对化疗药顺铂的敏感性受TrkB及BDNF水平的影响,二者水平越高越容易产生化疗耐药。     

血管内皮细胞生长抑制因子单核苷酸多态与儿童神经母细胞瘤恶性程度发展的关系

目的 探讨血管内皮细胞生长抑制因子(VEGI)基因启动子区的单核苷酸多态(SNP)与儿童神经母细胞瘤恶性程度发展的关系.方法 采用病例对照研究方法,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测126例神经母细胞瘤患儿和196例健康儿童VEGI基因启动子区域-358T＞C、-638A＞G多态,Logistic回归模型比较比值比(OR)及95％可信区间(CI)分析上述多态与儿童神经母细胞瘤发展、转移的风险关系.结果 相较于神经母细胞瘤Ⅰ期-358TT野生型,携带VEGI-358CC基因型患儿容易发生肿瘤转移(Ⅱ期,OR=10.667,95％ CI1.387 ～ 82.033,P =0.023;Ⅲ期,OR=5.333,95％ CI0.968 ～ 29.393,P=0.055;Ⅳ期,OR =4.606,95％ CI1.007 ～ 21.072,P=0.049),VEGI-358C等位基因在肿瘤转移过程可能发挥重要作用.携带VEGI-638 GG基因型的患儿相较于野生型AA基因型更易发生肿瘤转移,与VEGI-358位点结果一致,-638G碱基在肿瘤转移过程中发挥重要作用.结论 VEGI-358 T＞C和-638 A＞G多态与儿童神经母细胞瘤发展及转移相关.携带VEGI-358 CC基因型及-638 GG基因型患儿肿瘤侵袭力更强,更易发生转移.     

TAZ在神经母细胞瘤组织中表达及临床意义

目的分析转录共激活因子(TAZ)在神经母细胞瘤(NB)患儿肿瘤组织中的表达及与患儿临床特征和预后的相关性。方法收集我院普外科58例NB患儿肿瘤组织标本,免疫组化(IHC法)检测TAZ在NB肿瘤组织中的表达,结合临床资料分析TAZ与临床病理学特征的关系,采用Kaplan-Meier和Cox回归分析分析TAZ表达对NB生存的影响。结果 IHC结果显示TAZ主要在细胞核内表达,且发现TAZ在NB的表达高于节细胞神经母细胞瘤(GNB),进一步分析发现TAZ在肿瘤临床分期(Ⅲ、Ⅳ期)、MYCN扩增、高危状态、Shimada病理(u FH)、肿瘤骨髓浸润、肿瘤复发、NSE升高、LDH≥500 U/L表达升高时,与相对应的上述各因素比较差异有显著性(P 0.01)。Kaplan-Meier生存分析提示NB患儿3年存活率TAZ高表达组低于TAZ低表达组(46.2%vs. 85.4%),差异有显著性(P=0.002);单因素Cox回归分析发现TAZ高表达、临床分期(Ⅲ和Ⅳ期)、高危状态、Shimada病理(u FH)、肿瘤复发是NB患儿预后危险因素,但多因素Cox回归分析发现仅TAZ表达增高是预后危险因素,差异有显著性(P 0.001)。结论 TAZ的表达和已知的患儿预后危险因素、不良病理类型、肿瘤复发及肿瘤标志物升高呈正相关性,TAZ表达阳性提示NB患儿预后不良,因此TAZ可作为NB患儿潜在判断预后的分子标志物和治疗新靶点。