补肾益气化瘀解毒汤抗肝纤维化的临床观察

目的?观察补肾益气化瘀解毒汤抗肝纤维化作用。方法?临床选择98例肝纤维化患者,随机分为2组各49例,对照组口服鳖甲软肝片,治疗组服用补肾益气化瘀解毒汤,治疗6月后观测其临床疗效、中医证候积分、肝肾功能、肝纤维化指标、肝脾B超等指标的变化。结果?治疗后,治疗组总有效率明显高于对照组（P<0.01）;2组中医证候积分,均明显下降（P<0.05~0.01）,治疗组优于对照组（P<0.01）。治疗组谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）含量明显下降（P<0.01）,明显优于对照组（P<0.01）;治疗组透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)水平明显下降（P<0.01）,明显优于对照组（P<0.01）。治疗组门静脉、脾静脉内径及脾脏厚度明显缩小（P<0.05~0.01）,明显优于对照组（P<0.01）;治疗组肝脏硬度值明显下降,优于对照组（P<0.01）。结论?补肾益气化瘀解毒汤抗肝纤维化效果确切。      

补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织纤维化的影响及机制研究

目的:观察补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织中TβRⅠ、TβRⅡ及α-SMA的mRNA和蛋白表达的影响,探讨补肾柔肝方抗肝纤维化的作用机制。方法:Wistar大鼠53只,随机分为4组,空白对照组、模型组、秋水仙碱组、补肾柔肝方组。除空白对照组外,其余均造模,造模组首次于背部皮下注射纯CCl45 ml/kg,3 d后皮下注射40%(V/V)CCl4花生油3 ml/kg,每周2次,造膜8周制备肝纤维化模型。造模后秋水仙碱组用秋水仙碱水溶液灌胃(5 ml·kg-1·d-1),补肾柔肝方组给予补肾柔肝方流浸膏灌胃(5 ml·kg-1·d-1),连续8周。取各组大鼠肝组织,分别采用PT-PCR法和Western blot法检测肝组织TβRⅠ、TβRⅡ、α-SMA mRNA表达和蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠的TβRⅠ、TβRⅡ、α-SMA蛋白表达升高;TβRⅠ、TβRⅡmRNA、α-SMA mRNA表达明显升高(P0.01);与模型组大鼠相比,秋水仙碱组及补肾柔肝方组TβRⅠa、TβRⅡ、α-SMA蛋白表达水平有所降低;TβRⅠ、TβRⅡmRNA、α-SMAmRNA表达水平明显降低(P0.05)。结论:补肾柔肝方能够降低大鼠肝脏内TβRⅠ、TβRⅡ、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平,减轻大鼠肝脏的纤维化程度。     

大鼠肝纤维化模型细胞凋亡及肝细胞坏死的动态分析

1　材料与方法雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 32只 ,随机分为四组 ,每组 8只。Ａ ,Ｂ ,Ｃ为实验组 ,Ｄ为对照组。实验组大鼠腹腔注射 0 .0 2 5ｍｌＣＣｌ4 0 .15ｍｌ花生油 ,每周 3次 ;对照组代之以ＮＳ。Ａ ,Ｂ ,Ｃ三组大鼠分别于 2、4、6周末处死 ;Ｄ组同期处理。肝组织甲醛固定 ,石蜡包埋切片。ＨＥ染色 ;观察肝细胞坏死情况 ,分级参照文献 ,记为 0～ 4分 ;肝细胞凋亡原位检测 (ＴＵＮＥＬ法 ) ,分级参照文献 ,记为 0～ 4分 ;测定血清ＡＬＴ。数据以ｘ±ｓ表示 ,做方差分析、方差齐性检验 ,Ｐ <0 .0 5为差异有显著性。2　结果四组病理学变化分…     

柔肝抑纤饮对实验性肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的影响

目的:观察柔肝抑纤饮对实验性肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的影响,探讨其抗肝纤维化机制。方法:用CCl4制备实验性肝纤维化大鼠模型,采用DNA片断琼脂糖凝胶电泳结合透射电镜观察检测肝细胞凋亡情况,并检测血清纤维化指标水平和半定量肝组织胶原增生情况。结果:柔肝抑纤饮可明显抑制肝细胞凋亡,降低血清纤维化指标水平和肝组织胶原增生程度。结论:柔肝抑纤饮抗肝纤维化的作用途径之一是抑制肝细胞的凋亡。     

肝细胞生长因子与肝再生增强因子融合基因对大鼠肝纤维化的影响

目的研究肝细胞生长因子（HGF）与肝再生增强因子（ALR）融合基因对大鼠实验性肝纤维化的治疗作用,并探讨其可能作用机制。方法采用80只SD大鼠建立肝纤维化模型,将成模大鼠随机分为模型组、单纯HGF组、单纯ALR组和HGF／ALR融合基因组,并取10只同批次大鼠作正常组,分别检测各组血清透明质酸（HA）、层粘蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）和Ⅳ型胶原（CIV）水平,同时留取肝组织标本用于病理学观察和增殖细胞核抗原（PCNA）、原癌基因（c-jun）测定。结果各治疗组大鼠肝纤维化和肝细胞再生程度均较模型组改善,但以HGF／ALR组尤为明显。HGF／ALR组血清HA、LN、PCⅢ和CⅣ水平均较单纯HGF组和ALR组显著下降（均P〈001）,PCNA表达水平较单纯HGF组和ALR组显著增强（P〈0．01）,而c-jun表达水平则较单纯HGF组和ALR组减弱（P〈001）。结论HGF与ALR的融合基因具有较好改善大鼠实验性肝纤维化的作用,并可能通过促进肝细胞增殖和抑制c-jun的表达,从而发挥其抗肝纤维化作用。     

益气解毒法与补肾解毒法对艾滋病患者TLRs通路及下游炎症因子的影响

目的:利用益气解毒方及补肾解毒方含药血清,干预艾滋病患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),研究其对Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)信号转导通路及下游炎症因子的影响。方法:应用益气解毒方、补肾解毒方的大鼠含药血清及空白对照组血清干预艾滋病患者PBMCs后,收集各组细胞。Real Time PCR检测细胞TLR1～TLR10、干扰素-α(interferon-α,IFN-α)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α) mRNA表达。结果:与空白对照组比较,补肾解毒方含药血清能显著上调艾滋病患者PBMCs的TLR3 mRNA表达,其余各组对TLRs mRNA的表达无显著影响;益气解毒方和补肾解毒方含药血清均能显著上调艾滋病患者PBMCs的IFN-αmRNA表达,对TNF-αmRNA的表达无显著影响。结论:补肾解毒法能够调节TLRs信号转导通路,调节艾滋病患者的免疫功能,可能与上调TLR3表达,促进IFN-α分泌有关。     

益气化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎伴异型增生大鼠DNMT1的影响

目的:观察益气化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎伴异型增生模型大鼠DNMT1蛋白的影响。方法:将Wistar大鼠60只随机分为造模组50只、空白组10只。造模成功后将造模后剩余的33只大鼠随机分为模型组11只,维酶素组11只,消痞颗粒组11只。空白组、模型组给予生理盐水,维酶素组给予维酶素悬浊液,消痞颗粒组给予消痞颗粒中药制备药液,1次·d-1。连续治疗12周后用Western blot法对各组大鼠DNMT1蛋白进行检测。结果:模型组DNMT1蛋白表达量(0.293±0.036)较空白组(0.133±0.025)显著升高(P<0.01);消痞颗粒组(0.173±0.044)较模型组(0.293±0.036)及维酶素组(0.229±0.032)降低(P<0.05);消痞颗粒组蛋白表达量(0.173±0.044)与空白组(0.133±0.025)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:中医益气化瘀解毒法可以逆转胃黏膜异型增生,这种作用可能是通过下调DNMT1而实现的。     

加减三甲散及其拆方对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的影响

目的 通过观察加减三甲散及其拆方对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的影响,部分阐明本方及拆方治疗肝纤维化的机理. 方法使用四氯化碳诱导复制大鼠肝纤维化模型,观察各组对大鼠肝细胞凋亡的影响. 结果 各治疗组均能显著降低凋亡细胞数,与模型组比较,差异有非常统计学意义(P＜0.01). 结论 加减三甲散及其拆方能够通过降低细胞凋亡对实验性肝纤维化起到一定的治疗作用.     

健脾益气化瘀解毒方含药血清对结肠癌 HCT116细胞增殖、周期、凋亡的影响

目的探讨健脾益气化瘀解毒方含药血清对人结肠癌HCT116细胞增殖、周期、凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),凋亡相关蛋白Bcl-x L和Bax蛋白表达的影响。方法 10%、15%、20%健脾益气化瘀解毒方含药血清处理HCT116细胞12、24、48、72 h后,MTT法检测细胞增殖;不同浓度含药血清处理24、48 h后,碘化丙啶染色法检测细胞周期及凋亡率。蛋白质印迹法(Western blot)检测HCT116细胞内Caspase-3,Bcl-x L和Bax蛋白的表达;对照组均予以相同浓度空白鼠血清及10%胎牛血清(FBS)。结果细胞增殖:12 h后15%、20%含药血清与相同浓度鼠空白组比较,对HC116细胞的抑制作用具有统计学意义(P0.05),72 h对HCT116细胞的抑制作用最强(P0.05),健脾益气化瘀解毒方含药血清对HCT116细胞增殖具有良好的抑制作用,并与时间、浓度呈正相关。细胞周期:10%及15%含药血清组G2期细胞减少,而G1期与S期细胞增多,20%含药血清组G1期与S期细胞减少,而G2期细胞增加,48 h作用明显,而空白鼠血清细胞周期则无明显变化,说明含药血清能阻滞细胞周期,与时间呈正相关。细胞凋亡:与相应浓度对照组比较,含药血清处理24、48 h后,HCT116细胞晚期凋亡率增加,并且随浓度、时间增加凋亡率增加(P0.05),说明含药血清能促使HCT116细胞凋亡,与时间、浓度呈正相关。Western blot检测显示,与空白鼠血清组相比,15%含药血清可上调Bax蛋白表达,下调Caspase-3、Bcl-x L的蛋白表达(P0.05)。结论健脾益气化瘀解毒方可能通过将结肠癌HCT116细胞周期阻滞,从而抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,通过上调凋亡相关蛋白Bax,下调Caspase-3、Bcl-x L蛋白的表达诱导细胞凋亡。     

益气化瘀化痰养阴剂对肝纤维化大鼠FSP1、PAR-2表达的影响

目的：观察益气化瘀化痰养阴剂对四氯化碳（CCl4）诱导的肝纤维化大鼠成纤维细胞特异性蛋白1（fibroblast-specific protein 1,FSP1）和蛋白酶激活受体-2（protease activated receptor,PAR-2）表达的影响。方法：将大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、益气化瘀化痰养阴剂低、中、高剂量组（分别简称为中药低、中、高剂量组）。正常对照组、模型组灌服生理盐水;秋水仙碱组灌服秋水仙碱0.1 mg/（kg?d）;中药低、中、高剂量组分别灌服益气化瘀化痰养阴剂[相当于生药30、60、120 g/（kg?d）]。连续给药12周后,观察各组动物的肝组织病理学变化,并检测血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、透明质酸（hyaluronan,HA）及Ⅳ型胶原（collagen Ⅳ,CⅣ）含量,用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠肝组织FSP1和PAR-2的基因和蛋白表达。结果：（1）模型组大鼠与正常组大鼠相比,前者肝组织纤维化程度明显,血清中ALT、AST、HA、CⅣ含量明显增高（P<0.05）,肝组织中FSP1和PAR-2的mRNA和蛋白表达亦明显增高（P<0.05）。（2）各治疗组与模型组相比,前者肝组织炎性细胞浸润少,肝纤维化程度轻,血清中ALT、AST、HA、CⅣ含量仅轻度升高（P<0.05）,肝组织中FSP1和PAR-2的mRNA和蛋白表达亦轻度升高（P<0.05）。结论：益气化瘀化痰养阴剂能保护肝脏,延缓大鼠肝组织纤维化进程,其机制可能与调控大鼠肝组织FSP1和PAR-2的基因和蛋白表达有关。     

肝纤愈对免疫性肝纤维化大鼠肝功能及组织病理学改变的影响

目的:建立大鼠免疫损伤性肝纤维化的实验模型,研究中药复方肝纤愈(GXY)对肝纤维化模型动物肝功能指标及肝组织病理学的影响。方法:在以人血白蛋白(HSA)诱导的免疫损伤性肝纤维化大鼠模型基础上,GXY小剂量(6.1g/kg)、大剂量(12.2g/kg)灌胃给药,连续8周,以鳖甲软肝片和秋水仙碱为阳性对照药。测定大鼠血清中ALT、AST、TP、Alb含量;光镜、电镜观察肝组织病理学改变。结果:GXY(大)组可明显降低HSA诱导免疫性肝纤维化大鼠模型血清中ALT、AST的含量,升高Alb的含量,同时可改善实验大鼠生存质量,且可显著改善肝组织病理学。结论:GXY具有明显的抗肝纤维化作用。     

祛痰散瘀软坚中药对肺纤维化大鼠肺组织病理形态学及HYP含量的影响

[目的]观察祛痰散瘀软坚中药对肺纤维化大鼠肺组织病理形态学及HYP（羟脯氨酸）含量的影响。[方法]大鼠气管内注入博莱霉素建立肺纤维化模型。随机分为正常对照组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组和强的松组。造模次日每天按剂量给药,分别在第7、28天分批次处死动物,制作病理标本,观察肺组织病理形态学变化及计算肺组织HYP含量。[结果]模型组7d时肺泡腔内大量炎性细胞浸润,可见少量成纤维细胞,Ⅰ型细胞受损,Ⅱ型细胞明显增生;28d时肺泡炎减轻,肺间质和胸膜层胶原纤维明显增多。各治疗组7d时炎性细胞浸润较模型组少,肺组织结构较模型组完整,28d时肺泡间隔增厚及间质内成纤维细胞增殖较模型组减轻,电镜下观察亦如此。28d时各治疗组的肺组织HYP含量均低于模型组（P〈0．01或P〈0．05）。[结论]除痰散瘀软坚中药能有效抑制博莱霉素引起的肺纤维化形成。     

益气润肺化瘀解毒法治疗特发性肺纤维化临床研究

运用具有益气润肺化瘀解毒功效的中药肺痿方加减,对３２例特发性肺纤维化患者进行临床治疗研究;结果临床总有效率达７５％,特别是在改善患者临床症状方面疗效尤为突出。并有不同程度地调整和改善患者的肺功能和血液流变学等作用。认为益气润肺化瘀解毒法治疗特发性肺纤维化是一种符合中西医理论的安全有效的方法     

卡托普利对大鼠肺纤维化及肺上皮细胞凋亡的影响

目的:探讨卡托普利对实验大鼠肺纤维化的干预作用及可能的作用机制。方法:60只SD大鼠经气管内灌注博来霉素诱导肺纤维化,随机分为博莱霉素(BLM)组、卡托普利(CAP1)和CAP2组,分别给予生理盐水、卡托普利50mg·kg-1·d-1和60mg·kg-1·d-1灌胃,并于1,7,14,28d各处死5只,取肺组织行嗜伊红染色组织学观察及羟脯氨酸测定,评价肺泡炎和肺纤维化程度、免疫组织化学及电镜检查评价肺上皮细胞凋亡程度。结果:与BLM组比较CAP1组和CAP2组肺泡炎及肺纤维化程度明显减轻(P<0.05),气道上皮细胞和肺泡上皮细胞凋亡程度显著改善(P<0.01),CAP1和CAP2两组间无显著性差异。结论:卡托普利能有效抑制博来霉素诱导的肺纤维化,其可能的抗纤维化机制之一是抑制肺上皮细胞凋亡。     

益气化瘀补肾法延缓椎间盘衰老的机理探讨

衰老是生物界的普遍规律,无血供组织的椎间盘同样存在衰老。随着人口日益老龄化,使人们对传统中医认识椎间盘衰老的病因病机、延缓衰老的临床疗效探讨更加重视。肾虚是椎间盘衰老的根本,气虚血瘀加速椎间盘衰老的进程。益气化瘀补肾法延缓椎间盘衰老的机制可能是通过调控椎间盘细胞衰老和椎间盘退变相关基因、蛋白,调控椎间盘组织细胞的内环境,平衡和调节细胞外基质网络的合成与降解,维护椎间盘正常的细胞生物活性和营养代谢,达到延缓椎间盘衰老的目的。     

病毒性肝炎后肝纤维化的遗传易患性研究进展

肝纤维化主要由慢性肝脏损伤所致,其中部分患者可进展为肝硬化、肝衰竭或肝癌。肝纤维化的进展表现为明显的个体差异,即使将感染年龄、性别、外界因素等调整后,这种差异仍然存在。因此,宿主的遗传因素在疾病的进展中起重要作用。肝纤维化是受多基因控制的复杂过程。肝纤维化遗传的关联研究分为单核苷酸标记、单体型分析、全基因组相关研究等,这些研究结果为肝纤维化的病因及个性化治疗提供了依据。然而,这些相关研究的结果却不尽相同,主要是由于研究样本小、设计不合理等原因导致。这需要多中心合作,用良好分型的大样本来增加结果的可靠性和稳定性。     

锁阳对大鼠肝纤维化干预作用的实验研究

目的：观察锁阳对四氯化碳（CCl4）诱导的大鼠肝纤维化模型的预防及逆转作用。方法将SD大鼠按照随机数字表法分为正常对照组、模型组、锁阳干预Ⅰ组、锁阳干预Ⅱ组和锁阳对照组5组,每组各10只。CCl4与花生油混合液造模,根据分组在不同时间给予锁阳灌胃。实验结束后,取血清和肝组织,检测血清肝功能,HE染色和M asson染色,观察肝组织病理改变,流式细胞仪测大鼠血浆 CD3＋、CD4＋和CD8＋水平。结果模型组大鼠肝组织纤维化分级主要以＋＋＋＋级为主,锁阳干预Ⅰ组分级主要以＋＋、＋＋＋级为主,锁阳干预Ⅱ组分级主要以＋、＋＋为主。与正常对照组比较,模型组大鼠血清AST、ALT活性明显升高,CD3＋、CD4＋水平降低,CD8＋水平升高,肝脏指数升高。与模型组相比,锁阳干预Ⅰ组大鼠血清中ALT活性降低,CD3＋、CD4＋水平升高,CD8＋水平降低;锁阳干预Ⅱ组中大鼠血清中AST、ALT活性明显降低,CD3＋水平升高,CD8＋水平降低;两组大鼠肝脏指数均降低,差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论锁阳对肝纤维化有一定的预防和逆转作用,同时能影响肝纤维化大鼠外周血T淋巴细胞亚群,在一定程度上拮抗免疫功能低下。     

肝细胞生长因子与肝纤维化关系研究进展

肝细胞生长因子是一种多效性的细胞因子,具有促细胞分裂、增殖、运动、抗纤维化等多种生物学活性。它可以通过抑制减少转化生长因子β1合成和信号转导、减少肝星形细胞活化和增殖、抑制胶原纤维合成、促进细胞外基质降解、抑制上皮-间质转化等多种机制来发挥抗肝纤维化效应,具有开发成为一种有效的抗纤维化临床药物的巨大潜能。     

益气活血法对AA大鼠滑膜细胞凋亡及血清细胞因子的影响

目的选用黄芪注射液与川芎嗪注射液配伍,观察益气活血法对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞凋亡及血清细胞因子的影响。方法建立AA大鼠模型,设正常对照组、模型对照组、黄芪组、川芎嗪组、黄芪与川芎嗪配伍组和甲氨喋呤组进行对比观察,用药3周后检测各组大鼠足跖肿胀程度,滑膜细胞凋亡及血清细胞因子浓度。结果黄芪与川芎嗪配伍组能显著抑制注射足跖肿胀程度(P0.05),显著提高滑膜细胞的凋亡率(P0.01),并降低大鼠血清中IL-1、TNF-α、IL-6的水平(均P0.01),上调IL-4的浓度(P0.01),与甲氨喋呤组效果相当,甚至优于甲氨喋呤组。结论益气活血法可能通过促进AA大鼠滑膜细胞的凋亡,抑制某些炎性因子的释放,起到治疗类风湿性关节炎(RA)的作用。     

王自平应用补肾化瘀法治疗子宫内膜异位症

子宫内膜异位症发生的基础是肾气亏虚,发病的关键因素是胞宫瘀血内阻。瘀血既是发病之因,又是病理产物,肾虚和血瘀互为因果,致使本病迁延难愈。王自平教授认为,补肾化瘀法是治疗本病的常用方法。临证时,将补肾类与活血类中药联合应用,活血化瘀以治标,补益肾气以治本;结合中药灌肠、中药热敷、针灸以补益肾气、活血化瘀;同时顾护脾胃,常用健运脾胃类中药培补后天脾胃以生血,佐以活血调经补冲任。如此可有效地改善患者激素水平,增加子宫内膜的局部血液循环,提高子宫内膜异位症患者的临床妊娠率。