抗凝与非抗凝血标本对ELISA检测血清乙肝表面抗原的影响

目的 探讨抗凝与非抗凝血液标本对乙肝表面抗原酶联免疫吸附试验(ELASA)检测结果是否存在差别.方法 留取160人份血标本各2管,分别经枸橼酸-枸橼酸钠抗凝及非抗凝,进行平行实验.结果 160人份标本的平行试验,部分项目结果差异有统计学意义(P＜0.05).结论 采用枸橼酸-枸橼酸钠抗凝血标本,对乙肝表面抗原检测结果存在着一定干扰,采用抗凝血标本进行ELASA检测对试验结果是否有影响已被同行广泛关注.     

2种方法检测乙型肝炎病毒标志物的比较

我国是乙型肝炎感染的高发区。据流行病学调查,我国一般人群的乙肝表面抗原(HBsAg)阳性率为7.18%,远高于美国的乙肝表面抗原(HB-sAg)阳性率(0.3%)。ELISA法是我国目前实验室检测HBsAg的常用方法,但由于干扰因素较多,一些弱阳性标本的结果不够稳定,给结果的判定带来一定的困扰,随着生物学技术的发展,核酸检测技术受到人们的重视,该法具有灵敏度高、特异性     

ELISA法检测胆汁200kD糖蛋白

目的：建立检测胆汁蛋白的ELISA方法，初步应用临床，开辟胆石症研究的新途径。方法：利用已提纯的具有强力促成核活性的200kD糖蛋白，免疫家兔获得特异性抗体，首次建立了该糖蛋白ELISA测定方法，并测定了15例患者．结果：胆石症患者血清中该糖蛋白的含量明显高于对照组。结论：该糖蛋白的ELISA检测法具有一定的临床价值。     

ELISA法、免疫印迹法与对流免疫电泳法检测抗ENA抗体的比较

目的分析比较目前常用的几种检测抗ＥＮＡ抗体方法的敏感性和特异性。方法用免疫印迹法（ＩＢＴ）、酶免法（ＥＬＩＳＡ）及对流免疫电泳法（ＣＩＥ）检测１３０例各种结缔组织病、非结缔组织病人及健康人血清中的抗ＥＮＡ抗体。结果２０例健康人的血清三种方法检测均为阴性;８０例结缔组织病患者,检测抗Ｓｍ抗体、抗ＲＮＰ抗体,ＩＢＴ法、ＥＬＩＳＡ法均较ＣＩＥ法敏感（Ｐ＜００５）。检测抗ＳＳＢ抗体,ＥＬＩＳＡ法较ＣＩＥ法、ＩＢＴ法敏感（Ｐ＜００５）。抗ＳＳＡ抗体的检测,ＩＢＴ法由于采用兔胸腺丙酮粉为抗原,ＳＳＡ抗原成分有缺失,造成检出率低。ＩＢＴ法与ＥＬＩＳＡ法检测的符合率较高。结论ＩＢＴ法、ＥＬＩＳＡ法检测抗Ｓｍ抗体、抗ＲＮＰ抗体时,敏感性优于ＣＩＥ法。ＣＩＥ法、ＥＬＩＳＡ法检测抗ＳＳＡ抗体优于ＩＢＴ法。ＥＬＩＳＡ法检测抗ＳＳＢ抗体敏感性较高。上述三种方法在临床抗ＥＮＡ抗体的检测中可互相验证和补充。     

ELISA法检测血清HBcAg的意义及临床关系的研究

本文报告用ＥＬＩＳＡ法检测６３１份乙肝患者血清中ＨＢｃＡｇ，此法可避免放射免疫法探针的放射污染，不受放射性物质半衰期时间长短的影响，可随时检测临床血清标本。其结果不仅能反映患者体内ＨＢＶ感染状况、ＨＢＶ复制情况、ＡＳＣ病情及有无传染性，还可以评估ＨＢＶ感染后肝脏病变程度、预后及抗病毒药物的治疗效果。     

被动凝集法和ELISA法检测成人肺炎支原体抗体的临床价值比较

目的比较被动凝集(PPA)法与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测成人肺炎支原体(MP)感染的临床价值。方法分别采用PPA、ELISA法检测90例成人CAP患者的MP抗体及MP-IgA、MP-IgM、MP-IgG抗体并进行分析。结果 PPA法检测MP抗体阳性率为72.2%(65/90),ELISA法检测总抗体阳性率为50.00%(45/90),差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法检测MP-IgA阳性率为26.7%(24/90),MP-IgM的阳性率为22.2%(20/90),差异无统计学意义(P>0.05),且存在一致性(Kappa=0.520);MP-IgG阳性率为37.8%(34/90),与MP-IgM、MP-IgA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。PPA滴度越高,ELISA法MP-IgA、MP-IgM阳性检出率越高。结论 ELISA检测MPIgA、IgM、IgG联合PPA检测MP抗体效价可以提高CAP诊断的准确性,对早期诊断成人MP感染有重要临床意义。     

DIA与ELISA和IFA诊断恶性疟的比较观察

对53份恶性疟病人血清同时用DIA、ELISA和IFA进行了检测比较,前者的阳性符合率最高,为96.2％,IFA和ELISA分别为83.0％和79.20％。在IFA和ELISA漏检的大多数血清样本,DIA可出现阳性,多数患者血清稀释度1:5120时DIA仍呈阳性。表明DIA检测恶性疟抗体的效果较ELISA和IFA的为高。     

ELISA双McAb夹心法检测鼠疫F1抗原

对应于同一F1抗原分子且不相互阻断的2株F1 McAb,分别制备酶标抗体并包被反应板,用于ELISA双McAb夹心法检测鼠疫F1抗原。以PcAb-RIHA和四步检查为对照,检测不含F1抗原的细菌8株,非鼠疫疫区8种动物的新鲜和腐败标本723份,检测结果全部阴性,和四步检查结果相同,PcAb-RIHA出现非特异反应45份。检测鼠疫强毒菌18株和感染鼠疫标本27份,GMT比PcAb-RIHA高2~4和2~3。本法特异性、敏感性、试剂稳定性均高于PcAb-RIHA。应用于鼠疫疫源地调查、疫情监测、人间疫情判定、细菌学研究效果良好。     

家用微波ELISA法检测日本血吸虫病的现场应用

目的观察家用微波ELISA法在日本血吸虫病流行区现场的应用价值。方法用家用微波ELISA和医用微波ELISA同步检测3个流行区血清554份。结果两种方法的血清抗体阳性检出率分别为14.08%(78/554)、14.80%(82/554)(x2=0.12,P>0.05),差异无显著性。结论家用微波ELISA具有医用微波ELISA类同的敏感性和特异性,但家用微波炉具有价格低廉,易于推广的优点。     

反向间接血凝法检测畜禽血清乙型肝炎表面抗原研究

近年来,我国各省(市)在畜禽血清中发现有携带人类乙型肝炎表面抗原(HB_sAg)者,我省刘士钧等在奶牛血清中也发现HB_sAg。为摸清我省其他畜禽血清中是否携带HB_sAg,笔者应用反向间接血凝(R-PHA)检测1393份畜禽血清,结果阳性率为23.7％。各种畜禽血清阳性率分别是:水牛23.2％,黄牛30.6％,山羊30.9％,猪21.3％,鸡20.5％,鸭20.0％,鹅18.3％。     

乙型肝炎表面抗原定性测定室内质控物浓度的选择方法

目的 建立定性酶联免疫吸附法(ELISA)测定室内质量控制质控物浓度选择和Levey-Jennings质控图在不同批试剂间连续作图的方法。 方法 以乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的ELISA测定为例,先按NCCLs EP5文件评价方法对系列质控血清(含量分别为0.2、0.5、1.0、2.0和5.0 ng/ml)的批内和批间测定精密度,并根据任一次测定值(S/CO)最好的线性相关确定回归直线方程(y=bx a),选择计算得到的S/CO值减去精密度测定中得到的3倍批间CV％与该S/CO值的乘积(意即3倍SD)仍大于1的质控物,作为室内质控使用。不同批试剂间质控图的连续,则在换用新批号试剂时,用新批号试剂测定上述系列质控血清,得到一新的直线方程(y2=b2x2 a2)。原批号试剂同样也可得一直线方程(y1=b1x1 a1)。根据两个直线方程即可得到y2/y1之间的换算因子,从而可以将新批号试剂对相同室内质控血清的测定值换算回去,在原质控图上继续作图。结果 所用的HBsAg ELISA测定方法测定含量分别为0.2、0.5、1.0、2.0和5.0ng/ml质控血清的批内变异分别为11.08％、9.49％、9.83％、9.18％和7.25％,批间变异分别为13.25％、14.03％、15.11％、13.29％和9.92％。任选一次测定的具有最好相关的回归直线方程y=3.509x 0.180,可选择的室内质控血清浓度可为0.5或1.0ng/ml。换用其它两批     

中老年乙型肝炎病毒DNA的动态变化

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）动态检测了中老年乙型肝炎病人不同时期的血清标志。结果表明，ＨＢｅＡｇ阳性的血清其ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ均阳性，两者呈平行关系，１～４ｗ后有２０％病人血清ＨＢＶＤＮＡ转阴，同时伴有部分病人ＨＢｅＡｇ消失或ＨＢｅＡｂ出现，其他ＨＢＶ血清学标志物阳性的病人血清ＨＢＶＤＮＡ阳性率明显低于ＨＢｅＡｇ阳性血清，且ＨＢＶＤＮＡ暂转阴率高于ＨＢｅＡｇ阳性血清，ＨＢＶＤＮＡ转阴的时间也短（１～４ｗ）。动态检测ＨＢＶＤＮＡ可以动态观察ＨＢＶＤＡＮ的复制，对指导临床治疗具有很大的意义。     

不同血样IHA和ELISA筛查血吸虫病比较

目的　评价采用末梢血滤纸干血样、末梢血浆和静脉血清筛查血吸虫病的效果。方法　采集上述 3种不同血样 ,作间接血凝试验 (IHA)和酶联免疫吸附试验 (EL ISA) ,对结果进行比较。对IHA各滴度同时显示阳性的 3种血样 ,6周后再作 IHA,观察保存后抗体效价的稳定性。结果　 3种血样 IHA各滴度结果间差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,EL ISA各组结果间差异亦无显著性 (P>0 .0 5 )。抗体效价稳定性观察 ,3种血样 1∶ 10、1∶ 2 0滴度阳性符合率均为 10 0 % ,1∶ 4 0 ,1∶ 80滴度阳性符合率 ,滤纸干血样均为 10 0 % ,末梢血浆均为 92 .3% ,血清分别为 96 .2 %、92 .3% ,结果间差异均无显著性 (P>0 .0 5 )。结论　采用滤纸干血样和末梢血浆检测效果与静脉血清相同 ,滤纸干血样易于保存 ,稳定性好 ,采用末梢血浆简便易行 ,便于现场检测。     

中和确证试验对ELISA两步法HBsAg阳性结果的风险评价

<正>我国采供血实验室将乙型肝炎表面抗原(HBsAg)作为HBV感染的常规检测指标,使用2种不同的酶联免疫吸附试剂进行筛查。但是由于不同厂家生产的试剂灵敏度和特异性存在差异,往往出现不同试剂对弱阳性标本检测结果不一致的情况,由此可导致不同程度的漏检或假阳性。血液安全至关重要,我们通过对85例HBsAg ELISA阳性标本的确证试验,分析ELISA阳性与确证阳性的符合性,评价国产HBsAg ELISA两步法试剂的检     

TRFIA与ELISA法检测乙型肝炎病毒前S1抗原对比分析

[目的]对比分析酶联免疫吸附试验(ELISA)与时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)法进行前S1(PreS1)抗原检测的特点。[方法]收集500例乙型肝炎患者血清标本,从阳性率、测量范围和灵敏度、精密度和特异性对2种方法进行比较。[结果]TRFIA法阳性率高于ELISA法(P<0.01),有17例标本ELISA法结果为阴性,而用TR-FIA法可检测到PreS1抗原。对这17例标本进行HBV DNA定量检测,其中11例标本HBV DNA拷贝数异常,另6例标本HBV DNA拷贝数正常;高、中、低3个浓度,TRFIA法批内和批间精密度测试,CV均<10%;TRFIA法从低值到高值,从批内至批间CV均优于ELISA法;对于强阳性标本,从原倍到1∶16倍稀释,ELISA法都无法区分阳性程度的强弱,而TRFIA法结果从高到低有显著性区别;TRFIA法与ELISA法相比灵敏度提高4倍。100份正常体检者血清标本TRFIA法结果均阴性,特异性100%。[结论]TRFIA与ELISA法相比,测量范围、精密度和灵敏度有较大提高。     

应用斑点免疫金渗滤法检测旋毛虫病患者血清IgG

目的　研究应用斑点免疫金渗滤法(DIGFA)快速检测旋毛虫病患者血清抗旋毛虫IgG抗体。　方法　采用旋毛虫肌肉期幼虫膜抗原,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体,以颜色深浅为判断阳性标准。　结果　纯化的旋毛虫肌肉期幼虫膜抗原与患者血清中特异性抗旋毛虫IgG抗体通过渗滤在硝酸纤维素膜上反应,10min内即可直接观察结果。在76份患者血清的检测中,阳性率为94.74%,与ELISA法的检出阳性率86.84%相比差异无显著性(χ2=2.83,P>0.05)。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。　结论　DIGFA法可快速检测旋毛虫病患者血清特异性旋毛虫IgG抗体     

塑料条ELISA检测日本血吸虫病抗体方法的建立及应用

塑料条ELISA(PS-ELISA)方法,以PVC塑料条代替微孔板,作为ELISA的固相载体,以达到简化操作、节约成本的目的.建立的PS-ELISA方法,在抗原、血清、酶结合物工作浓度选择时,与常规ELISA方法相比,两法OD值差异不大;检测73份血吸虫病人血清、95份健康人血清、18份肺吸虫病人血清和18份丝虫病人血清,PS-ELISA和ELISA检测阳性率分别为95.9%、1%、0%、0%和94.5%、1%、0%、0%,两法无显著差异;检测73份血吸虫病人血清,PS-ELISA和ELISA的平均P/N值分别为14.63和5.47,t检验有显著差异(t=12.28,P<0.01);检测95份健康人血清,PS-ELISA和ELISA的平均P/N值分别为1.01和1.16,(t=1.92,P>0.05).结果提示,PS-ELISA可应用于检测血吸虫病,且该法似能提高低感染度的检出率和降低假阳性率.     

血清旋毛虫P49抗原IgG抗体的斑点金免疫渗滤法检测

目的 建立一种快速诊断人体旋毛虫感染的新途径。方法 以基因工程表达的猪旋毛虫融合蛋白p49/GST为抗原,将其结合于硝酸纤维素膜上,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG作为标记抗体,建立斑点金免疫渗滤法(Dot-immunogoldfiltration assay,DIGFA),检测人血清抗旋毛虫p49抗原IgG抗体。共检测76份旋毛虫患者血清并与酶联免疫吸附试验(ELISA)作对比研究。结果 抗原抗体通过渗滤在膜上反应,10min肉眼即可观察到结果,在76份患者血清的检测中,阳性率为98.68％,显著高于ELISA法的检出阳性率86.84％,(X2=7.94,P<0.01)。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。结论 以纯化的融合蛋白p49/GST为抗原建立的DIGFA可快速准确检测旋毛虫病人血清特异性旋毛虫IgG抗体,具有推广应用的价值。     

应用ELISA检测囊虫病患者循环抗原的研究

应用ELISA双抗体夹心法检测囊虫病患者血清和脑脊液(CSF)中的循环抗原(CA),并对血清和CSF进行了预处理。CSF经沸浴处理后CA阳性率为92. 06％(58/63)。血清用3.5％聚乙二醇(PEG)浓集、1％木瓜酶消化,再作沸浴处理后,阳性率为91.26％(188/206)。血清CA与抗体的总阳性率为97.75％(97/89)。脑囊虫病患者CSF的CA阳性率为88.24％(15/17),血清CA阳性率为94.12％(16/17)。患者经药物治疗后临床症状的变化与血清CA含量的变化一致.虫体死亡后约30d患者血清CA含量明显减少或消失。